食品工业科技

2019年第40卷第2期

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生物工程
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分析检测
贮运保鲜
营养与保健
专题综述

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食品工业科技 2019年第40卷第2期封面及目次

2019, 40(2): 0-0.

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生物工程

市售鲜肉中奇异变形杆菌的ERIC-PCR分型与耐药性分析

孙冷宁 , 陈善娇 , 王观杏 , 毕水莲

2019, 40(2): 131-135. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.023

摘要(14)

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摘要:
目的:研究中山市市售生鲜肉中分离的奇异变形杆菌的同源性和耐药性,分析其基因型与耐药表型之间的关系。方法:采用肠杆菌基因间重复序列(Entrobacter repetive intergenic consensus,ERIC)-PCR分型方法对71株奇异变形杆菌进行分型,所得分型指纹图谱使用Quantity One软件进行处理分析。耐药性检测采用K-B纸片扩散法,参照CLSI制定的标准判读药敏结果。结果:71株奇异变形杆菌的相似性系数为0.64~1.00,以75%为界可分为9个簇。测试的18种抗生素中,对链霉素和红霉素的耐药率最高,均为100%;对青霉素和头孢曲松耐药率最低,分别为16.90%、11.27%。所有菌株均为多重耐药菌,且至少耐6种药物。结论:市售生鲜肉中分离的71株奇异变形杆菌相似性高,耐药情况严重,其基因型与耐药表型之间没有明显的相关性。

腌鱼中耐盐酵母菌的分离鉴定及其生理生化特性

陶森 , 王雅玲 , 叶林 , 孙力军 , 房志家 , 黄文妍 , 毕思远 , 钟礼培 , 励建荣

2019, 40(2): 136-141,147. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.024

摘要(11)

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摘要:
为了获得生产性能优良的菌株,采用PDA固体培养基平板涂布法从腌鱼中分离、纯化酵母菌,研究优势耐盐酵母菌株的生长温度、耐酸能力、耐亚硝酸盐能力等生理生化特性及ITS rDNA分子生物学鉴定。结果表明,15种不同种类腌制海鱼中共分离出436株酵母菌,经纯化后获得9株不同种属的酵母菌,通过不同NaCl含量的YPD液体培养基对9株酵母菌进行筛选,最终筛选出7^#季也蒙毕赤酵母和9^#奥默柯达酵母两株耐盐性较好的优势耐盐酵母菌菌株,耐盐能力分别达到9%和12%,最适生长温度均在28~32 ℃之间,最适pH在5~6之间,耐亚硝酸盐含量可达100 mg/kg。腌鱼中获得优势菌株具有良好的生长性能,可为腌鱼制品发酵剂的开发奠定基础。

西藏曲拉和发酵乳中抗氧化和益生特性乳酸菌的筛选及鉴定

刘亚东 , 张悦 , 贺银凤 , 李畅 , 吴荣 , 贺敏 , 李博

2019, 40(2): 142-147. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.025

摘要(13)

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摘要:
以抗过氧化氢、清除自由基为抗氧化指标,耐酸、耐胆盐为益生特性指标,对采集自西藏的自然发酵曲拉和发酵乳中乳酸菌进行了分离、筛选和鉴定。结果表明:从9份样品中分得的62株菌有23株对0.3%过氧化氢具备耐受性,其中4-C、5-D、5-E、9-E对DPPH·和·OH清除率最高分别为86.97%±0.11%、27.62%±0.28%;经鉴定5-D、5-E、9-E、4-C分别为Lactobacillus delbrueckii subsp. Jakobsenii、Lactobacillus delbrueckii subsp. Jakobsenii、Lactobacillus gasseri、Pediococcus pentosaceus;此外,菌株5-D、5-E对酸碱和0.3%胆盐均有较好的耐受能力,具备抗氧化和益生特性,有较大潜力应用于天然抗氧化剂的研究与开发,同时也丰富了西藏地区传统牦牛乳制品中乳酸菌资源库的挖掘工作。

自然发酵酸菜化学成分含量和微生物数量的动态变化及其相关性分析

韩宏娇 , 丛敏 , 李欣蔚 , 孔繁华 , 李玮轩 , 梁肖娜 , 曹雪妍 , 岳喜庆

2019, 40(2): 148-153. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.026

摘要(9)

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摘要:
为探究东北地区自然发酵酸菜不同发酵时间的化学成分含量和微生物数量的动态变化及其相关性,本文以纯培养法追踪微生物数量变化,同时监测发酵体系中化学成分变化,并进行相关性分析。结果表明,随发酵时间的延长,pH和可溶性蛋白的含量下降,总酸含量上升,还原糖、亚硝酸盐和氨基酸态氮含量均先增加后减小。细菌菌落总数、大肠菌群数和乳酸菌数量先增加后减少,大肠菌群数最后为零。酵母菌数量先增加后降低,最后略上升。相关性分析表明,乳酸菌数与pH、大肠菌群数及可溶性蛋白含量极显著负相关(p<0.01),酵母菌数与亚硝酸盐、还原糖及氨基酸态氮含量极显著正相关(p<0.01)。大肠菌群数与pH、还原糖、可溶性蛋白及氨基酸态氮含量极显著正相关(p<0.01),细菌菌落总数与氨基酸态氮含量显著正相关(p<0.05)。本研究表明,酸菜发酵体系中多种化学成分与微生物数量相关性显著,为提高酸菜发酵环境中微生物与化学成分之间的协调性提供了理论基础。

孜然精油抑菌机制

甘芝霖 , 倪元颖

2019, 40(2): 154-159,164. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.027

摘要(8)

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摘要:
为了探究孜然精油的抑菌作用,本文以大肠杆菌等常见致病菌为研究对象,通过牛津杯实验、最小抑制浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)的测定、微生物生长曲线和杀菌曲线的绘制等对其抑菌活性进行定性分析,然后采用电子显微镜法和相对电导率测定法对其抑菌机理进行探讨。结果表明:孜然精油对大肠杆菌和福氏志贺氏菌作用最为明显(MIC均为25 μg/mL,MBC均为50 μg/mL),推测其作用机理是改变了微生物细胞膜的渗透性,从而使细胞形态发生收缩、局部变形、细胞壁和细胞膜的破坏、细胞质的损耗等异常改变,进而导致细胞死亡。以上研究结果表明,孜然精油对细菌生长具有一定的抑制作用。

甜樱桃采后腐烂病原菌的分离与鉴定

王楚 , 张倩 , 李阳 , 牛宇 , 杨埔 , 牛伟 , 张丽珍

2019, 40(2): 160-164. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.028

摘要(10)

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摘要:
为了研究山西省甜樱桃果实采后贮藏过程中的病原菌,本文对低温贮藏过程中发生腐烂的甜樱桃果实的病原菌进行分离纯化。在形态学基础上,结合基因序列分析,对分离获得的2株病原真菌YTA、YTB进行鉴定。YTA和YTB利用真菌通用引物ITS序列进行PCR扩增,将测序所得的基因序列与NCBI的GenBank进行同源序列比对,确定甜樱桃病原菌的生物学分类。结果表明:病原菌YTA为草酸青霉(Penicillium oxalicum),YTB为葡萄孢属(Botrytis sp.),将其重新回接到甜樱桃上,均能引起甜樱桃腐烂。草酸青霉(Penicillium oxalicum),葡萄孢属(Botrytis sp.)均是造成山西省甜樱桃采后腐烂的病原菌。

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分析检测

甘草甜味素的化学成分研究

张航航 , 葛振红 , 李国柱 , 贾旭 , 孟庆艳 , 刘文杰

2019, 40(2): 229-232. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.039

摘要(6)

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摘要:
目的:研究提取甘草中甘草酸后剩余的副产品甘草甜味素中的化学成分,旨在探明甘草甜味素中的化学成分,拓宽其应用范围,为评价化学成分的生物活性提供科学依据。方法:采用溶剂提取、中压制备色谱和循环制备液相色谱等手段对甘草甜味素中的化学成分进行分离纯化,通过核磁共振对化合物结构进行鉴定。结果:从甘草甜味素中分离鉴定出10个化合物,分别为对羟基苯甲酸(p-hydroxybenic acid,I)、甘草素-7,4'-二葡萄糖苷(Liquiritigenin-7,4-diglucoside,II)、甘草素-4'-O-芹糖基-(1→2)葡萄糖苷(Liquiritigenin-apiosyl(1→2)glucoside),III)、异甘草素葡萄糖芹菜苷(Licuraside,IV)、异甘草苷(Isoliquiritin,V)、甘草素(Liquiritigenin,VI)、异甘草素(Isoliquiritigenin,VII)、芒柄花素(Formononetin,VIII)、甘草苷(Liquiritin,IX)、刺甘草查尔酮(Echinatin,X)。结论:该方法能分离得到10种成分,能拓宽副产品的应用范围。

冷浸渍过程中真核微生物与小芒森干白葡萄酒香气成分的变化

杨沫 , 刘文 , 赵新节

2019, 40(2): 233-238,244. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.040

摘要(10)

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摘要:
对不同冷浸渍时间果浆中真核微生物丰度以及葡萄酒中的挥发性成分分别进行测定,以酿酒葡萄小芒森(Petit Manseng)为试验材料,采用1、3、5 d冷浸渍时间处理后酿造干白葡萄酒。采用生物学信息分析、高通量测序方法以及顶空固相微萃取(HS-SPME)与气质联用技术(GC/MS)进行分析。结果表明,冷浸渍过程中shannon指数增加、simpson指数减小,真核微生物丰度呈逐渐增加的变化趋势。另外香气物质总含量呈增加趋势,由348.74增加至402.5 mg/L。酯类化合物呈增加趋势表现最为明显,其中己酸乙酯、2-己烯酸乙酯、5-己烯酸乙酯、辛酸乙酯、癸酸乙酯、棕榈酸乙酯等脂肪酸乙酯类化合物均呈明显上升趋势,脂肪酸乙酯含量呈增长趋势,在冷浸渍1、3、5 d中分别为187.87、199.29、222.07 mg/L。

不同方法提取的花生油对煎炸三文鱼风味成分的影响

李鹏飞 , 刘媛媛 , 韩昕 , 艾娜丝 , 张文斌 , 杨瑞金

2019, 40(2): 239-244. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.041

摘要(16)

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摘要:
本实验目的是研究花生油对煎炸三文鱼风味的影响,采用顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用(HS-SPME-GC-MS)技术,比较用水媒法和压榨法得到的6种花生油煎炸三文鱼后对其挥发性风味组分的影响。结果表明:经6种花生油煎炸后,三文鱼中的挥发性风味物质均明显增多,共检测出87种挥发性物质,主要为醛类、醇类和烃类(烷烃、烯烃、芳香烃),以及含氮杂环吡嗪类等。其中醛类数量增加最为明显,其次是醇类物质。而烃类物质种类数量变化不大,但6种样品中烃类物质的相对含量平均下降了60.41%。6种花生油煎炸后的挥发性成分中均检测到吡嗪类化合物。利用富含吡嗪类化合物的花生油煎炸三文鱼时,由于其本身带有的吡嗪类化合物易挥发,大部分在高温煎炸过程中损失,并不能赋予煎炸三文鱼特殊的烤花生风味。两种提取方法得到的6种花生油,煎炸三文鱼时得到的主体挥发性物质种类及其相对含量相似,差别较小。

高效液相色谱-电喷雾电离串联质谱法测定植物性食品中氟虫腈及其代谢物的残留

李敏青 , 徐娟 , 王岚 , 安文佳 , 庄嘉 , 孙灵慧

2019, 40(2): 245-250,256. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.042

摘要(13)

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摘要:
建立了高效液相色谱-串联质谱测定植物源食品(菠菜、苹果、香蕉、大米、大豆、茶叶)中的氟虫腈及其代谢物(氟虫腈砜,氟虫腈硫醚,氟甲腈)残留量的检测方法。以QuEChERS(Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe)提取盐包(CEN EN-15662)提取目标化合物,借助分散固相萃取或固相萃取(GCB/PSA)作为净化手段,经Thermo Accucore aQ(2.6 μm,2.1×150 mm)进行高效液相色谱分离,以电喷雾电离串联质谱多反应监测负离子模式进行检测,外标法定量。结果表明:4种分析物在0.1~5.0 μg/L范围内线性关系良好,相关系数(R²)均大于0.999。6种样品基质在3个添加水平(1、2、4 μg/kg)下的回收率为91.5%~101.5%,相对标准偏差为0.47%~3.88%;定量限(LOQ)均为0.1 μg/kg。该方法步骤简便、可靠、稳定,能满足于目前我国主要贸易国和地区的限量要求。

食品过敏原牡蛎成分PCR检测方法的初步研究

张懿翔 , 曲勤凤 , 余顺吉 , 胡雪莲 , 熊薇 , 葛宇

2019, 40(2): 251-256. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.043

摘要(5)

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摘要:
目的:建立基于PCR技术的过敏原牡蛎成分快速检测方法,结合溶解曲线及特异的Tm值与Ct值,用于不同产品的牡蛎成分检测。方法:根据NCBI上的牡蛎线粒体序列,通过DNA Star等软件设计引物,分别采用普通PCR和SYBR Green I实时荧光PCR的方法建立食品过敏原牡蛎成分的检测方法,对十种牡蛎阳性样品和二十余种阴性样品进行实验,并且对几种牡蛎相关食品进行检测。结果:研究建立的检测方法可以检测出含牡蛎成分0.1%的样品,其中荧光PCR的灵敏度达到0.01 ng/μL,特征峰的Tm温度为80.08 ℃,能够检测出牡蛎相关食品中的牡蛎成分。结论:该方法是一种操作安全方便、成本较低、特异、灵敏的实时荧光PCR方法,对于收集到的食品相关产品以及保健品中牡蛎粉的检出率为100%,该方法可广泛应用于食品中牡蛎成分的快速鉴定。

2,4-二硝基氟苯柱前衍生HPLC-UV法测定海稻米中的γ-氨基丁酸含量

段智红 , 黄永梅 , 吕应年 , 梁力中 , 黄燕霞 , 叶华 , 叶盛权

2019, 40(2): 257-261,270. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.044

摘要(7)

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摘要:
为建立海水稻活性成分γ-氨基丁酸(GABA)的高效液相色谱-紫外检测(HPLC-UV)方法。以2,4-二硝基氟苯(FDNB)为衍生化试剂,采用高效液相色谱法测定了精白米、玉米、海稻米、发芽海稻米24 h、发芽海稻米48 h、发芽海稻米72 h的γ-氨基丁酸(GABA)含量,研究了FDNB的投量,醋酸铵溶液-乙腈作为流动相以及样品的pH对GABA衍生物保留时间的影响,并考察了该方法的精密度、重复性和稳定性及加标回收率。结果表明,发芽海稻米24 h中GABA的含量最高,为34.35 μg/mg,玉米、未发芽海稻米、发芽海稻米48 h、发芽海稻米72 h中GABA的含量分别为为3.74、3.63、17.03、9.54 μg/mg,而精白米中GABA含量几乎为零;FDNB投量为0.3 mL时,可确保反应完全;用0.5%醋酸铵水溶液:乙腈(V:V)=85:15作流动相克服了泵压不稳定的现象;用硼酸盐缓冲液对衍生化后的样品进行稀释(1、5、10、15、20、40倍)后,样品的pH在9.0左右,GABA衍生物的保留时间几乎不漂移,在15.8 min左右;该方法精密度高、重复性和稳定性好,相对标准偏差值分别是0.08%、0.66%和0.60%;样品在24 h内稳定,回收率在99.29%~101.35%。结论本实验方法简便、结果可靠,可用于高含量GABA功能性食品的质量控制。

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贮运保鲜

不同保鲜剂处理对4℃低温贮藏下兰州百合鳞茎片的品质及抗氧化活性的影响

魏丽娟 , 李翠红 , 慕钰文 , 张振华 , 冯毓琴

2019, 40(2): 262-265,270. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.045

摘要(13)

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摘要:
为有效解决生产实践中兰州百合鳞茎片的保鲜问题,本文研究了三种绿色保鲜剂处理对兰州百合鳞茎片低温贮藏期间品质和抗氧化活性的影响。先将新鲜完整的兰州百合鳞茎剥片,鳞茎片称重分组,分别用蒸馏水,0.5 mmol/L的水杨酸溶液,6 mg/L的二氧化氯溶液,1%的壳聚糖溶液浸泡处理10 min,捞出自然晾干鳞片表面水分后于4 ℃下贮藏15 d。结果表明,相比蒸馏水对照处理,水杨酸、二氧化氯、壳聚糖三种保鲜剂均不同程度地促进了兰州百合鳞茎片的总酚(贮藏末期分别比对照高出33.44%、27.36%、11.46%)、总黄酮含量(贮藏末期分别比对照高出34.52%、27.56%、8.57%)和DPPH自由基清除率(贮藏末期分别比对照高出36.23%、38.90%、9.88%)、总抗氧化能力的上升(贮藏末期分别比对照高出43.71%、38.46%、7.31%),抑制其褐变(贮藏末期分别低于对照4.61%、10.86%、0.45%)、丙二醛的积累(贮藏末期分别低于对照11.33%、28.00%、1.07%)以及V_C含量的下降(贮藏末期分别比对照高出24.62%、23.83%、4.54%),其中,二氧化氯和水杨酸处理较壳聚糖处理效果更显著。单一保鲜剂二氧化氯和水杨酸处理能很好地保持兰州百合鳞茎片的品质并提高其抗氧化活性。

不同贮藏条件下鸡肉肌苷酸含量的变化规律

唐修君 , 樊艳凤 , 葛庆联 , 贾晓旭 , 高玉时 , 唐梦君 , 陈大伟 , 张静 , 王珏 , 杨星星

2019, 40(2): 266-270. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.046

摘要(8)

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摘要:
为了探讨肌苷酸在冷藏和冷冻期间产生和降解规律,以70日龄黄羽肉鸡为实验材料,连续7 d测量4 ℃冷藏期间胸肌IMP、HxR、Hx、ADP、AMP和IMPc含量以及-20 ℃不同冷冻时间鸡肉IMP及其代谢物含量。结果显示:冷藏第2 d和第5 d IMP含量有显著降解,分别为屠宰后4 h的66%和45%。Hx含量在第2 d和第5 d极显著增加,分别为屠宰后4 h的2.6倍和4.6倍。HxR含量第4 d达到最大值,之后快速下降。IMPc含量从第5 d开始降解趋势明显。冷冻1周内IMP、Hx和HxR含量变化均不大。IMP含量冷冻1个月、210 d和540 d后分别为屠宰后4 h的65%、41%和6%,冷冻1个月到4个月之间变化不大。Hx和HxR含量分别在冷冻30 d和300 d时最高。IMPc含量冷冻210 d和540 d时下降极显著,分别为屠宰后4 h的84%和42%。因此,建议鸡肉4 ℃冷藏保存时货架期4 d为宜;-20 ℃冷冻保存时1周最宜,鸡肉冷冻保存时间最好不超过4个月。

贮前光照处理对伽师瓜贮藏品质及部分防御酶活性影响

玛尔哈巴·帕尔哈提 , 白羽嘉 , 李梦 , 李佳 , 张明明 , 王瑾 , 冯作山

2019, 40(2): 271-275,281. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.047

摘要(31)

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摘要:
以伽师瓜为试材,研究了采后贮前经4500 lux光照处理对25 ℃下贮藏的甜瓜果实品质及部分酶活性的影响。伽师瓜在贮藏前处理阶段经光照强度4500 lux,贮藏温度25 ℃保存,后期贮藏阶段经0 lux,7 ℃保存,测定整个贮藏期间果实硬度及失重率、可溶性固形物、果皮色素含量、还原糖含量,以及过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性。结果表明:伽师瓜经光照,软化加快,并显著地提高了果实失重率(p<0.05);经过49 d贮藏,光照果实可溶性固形物含量仅下降了25.13%,还原糖含量上升了65.0%;光照促使伽师瓜果皮色素含量的积累,光照与避光两种色素含量变化均存在显著差异(p<0.05);同时,光照CAT、POD、PPO酶活性均高于避光处理,且果皮酶活性均显著大于果肉(p<0.05)。

硝普钠对生姜根茎抗氧化酶和苯丙烷途径的影响

李雪 , 葛永红 , 李灿婴 , 段斌 , 魏美林 , 唐琦 , 陈延儒

2019, 40(2): 276-281. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.048

摘要(5)

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摘要:
以生姜根茎为试材,研究采后不同浓度硝普钠溶液浸泡处理10 min对其呼吸强度和失重率的影响并筛选最佳浓度,同时分析最佳浓度处理后生姜根茎抗氧化酶活性及苯丙烷途径关键酶活性和产物含量的变化。结果表明,0.25 mmol/L硝普钠处理降低了生姜根茎呼吸强度、抑制了失重率的升高,硝普钠处理还显著提高了生姜根茎过氧化氢含量、超氧化物歧化酶、过氧化物酶和抗坏血酸过氧化物酶的活性。此外,硝普钠处理还提高了苯丙氨酸解氨酶活性、显著提高了4-香豆酰CoA连接酶的活性,促进了木质素、总酚和类黄酮的积累。由此表明,硝普钠处理通过调节生姜根茎抗氧化酶活性和苯丙烷途径延缓其衰老。

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营养与保健

D-手性肌醇对高糖导致氧化损伤线虫延缓衰老的作用及机制

王慧 , 赵江 , 杨胜楠 , 张晓寒 , 程静 , 王浩

2019, 40(2): 282-286. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.049

摘要(10)

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摘要:
目的:研究D-手性肌醇(D-chiro-inositol,DCI)对高糖膳食导致氧化损伤的线虫延缓衰老的作用,并探究其延缓衰老的作用机制。方法:将线虫同期化后分别培养在含有0、5、10、20 μm/L的DCI的高糖培养基中,记录线虫死亡数目,检测线虫体内脂褐素自发荧光强度及体内的活性氧(ROS)水平;试剂盒法检测线虫的体内相关抗氧化酶活力;PCR 法检测抗衰老相关基因mRNA表达水平。结果表明:DCI可以显著延长线虫的平均寿命(10、20 μm/L,p<0.05),极显著降低线虫体内脂褐素和ROS水平(20 μm/L,p<0.01)。此外,20 μm/L剂量组氧化损伤线虫体内超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力显著增加(p<0.05),age-1、daf-2基因mRNA 表达水平显著下调(p<0.05),而sir-2.1、sod-3、daf-16、ctl-1基因的mRNA表达水平显著上调(p<0.05)。结论:DCI对高糖导致氧化损伤线虫有保护作用,其延缓线虫衰老的作用机制可能与其调控抗衰老相关基因表达有关。

柚叶总黄酮对LPS所致Caco-2结肠上皮细胞间高通透性的保护作用

宋家乐 , 钱波 , 王程强 , 曾榛 , 吴华 , 高扬

2019, 40(2): 287-292,299. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.050

摘要(5)

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摘要:
探讨柚叶总黄酮(PLTFE)对脂多糖(LPS,2 μg/mL)诱发Caco-2高通透性细胞模型的保护作用。Caco-2模型细胞以不同浓度的PLTFE(0、10、50、100、150 μg/mL)处理培养24 h进行后续实验。MTT法测定细胞生存率,细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平依说明书使用试剂盒测定。酶联法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定白介素(interlukin-1β,IL-1β)、IL-8和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分泌水平。跨上皮细胞电阻(trans epithelial electrical resistance,TEER)值和异硫氰酸荧光素-右旋糖酐(FD40)透过度用于评估细胞通透性水平。实时定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测细胞IL-1β、IL-8、TNF-α、闭锁蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白-1(claudin-1)、封闭小带蛋白(ZO-1)和肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)的mRNA表达。结果表明,柚叶总黄酮能显著提高受损细胞生存率至86.1%,抑制受损细胞中LDH的溢出(p<0.05)。同时还能有效抑制受损细胞中炎性细胞因子(IL-1β、IL-8、TNF-α)的分泌及mRNA转录。此外,柚叶总黄酮可增强细胞紧密连接因子(Occludin、claudin-1、ZO-1)的mRNA转录,抑制MLCK的mRNA转录,改善细胞间高通透性qRT-PCR法检测细胞中相关因子的mRNA转录水平。结果提示,柚叶总黄酮具有较强的抗炎活性,能通过上调细胞内细胞紧密连接相关因子的mRNA转录显著改善LPS造成的Caco-2细胞间高通透性的发生(p<0.05)。

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