不同采后处理对冷藏‘南丰蜜桔’角质层形态结构及化学组成的影响

陈晟; 葛帅; 罗耀华; 杨绿竹; 何双; 王蓉蓉; 丁胜华

doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022010054

不同采后处理对冷藏‘南丰蜜桔’角质层形态结构及化学组成的影响

陈晟^{1, 2,},
葛帅^{1, 2},
罗耀华^{1, 2},
杨绿竹^{1, 2},
何双²,
王蓉蓉³,
丁胜华^{1, 2, ,}

1.
湖南大学研究生院隆平分院，湖南长沙 410125
2.
湖南省农业科学院农产品加工研究所，湖南长沙 410125
3.
湖南农业大学食品科学技术学院，湖南长沙 410128

基金项目: 湖南省长沙市杰出创新青年培养计划（KQ1905025）；湖南省农业科技创新资金项目（2021CX05）。

详细信息

作者简介:
陈晟（1997−），男，硕士研究生，研究方向：食品营养与安全，E-mail：realchanson@hnu.edu.cn

通讯作者:
丁胜华（1985−），男，博士，副研究员，研究方向：果蔬加工及贮藏研究，E-mail：shhding@hotmail.com

中图分类号: TS255.1
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出版历程
- 收稿日期: 2021-01-09
- 网络出版日期: 2022-09-04
- 刊出日期: 2022-11-14

Effects of Different Postharvest Treatments on Cuticle Microstructure and Components of 'Nanfeng' Mandarins (Citrus reticulata Blanco cv. Kinokuni) During Cold Storage

CHEN Sheng^{1, 2,},
GE Shuai^{1, 2},
LUO Yaohua^{1, 2},
YANG Lüzhu^{1, 2},
HE Shuang²,
WANG Rongrong³,
DING Shenghua^{1, 2, ,}

1.
Longping Branch Graduate School, Hunan University, Changsha 410125, China
2.
Hunan Agricultural Product Processing Institute, Hunan Academy of Agricultural Sciences, Changsha 410125, China
3.
College of Food Science and Technology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China

摘要

摘要: 角质层是采后果实的质量调控器，不同采后贮藏条件可以改变其形态结构及化学组成。热激（heat shock，HT）和壳聚糖（chitosan，CS）处理已被证实能有效延缓果实衰老。本文以‘南丰蜜桔’为实验对象，采用扫描电子显微镜（scanning electron microscopy，SEM）和气相色谱-质谱联用仪（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS），研究不同采后保鲜方式（热激、壳聚糖、热激联合壳聚糖处理）对冷藏75 d期间‘南丰蜜桔’角质层形态结构及化学组成的影响。结果表明：‘南丰蜜桔’外蜡晶体呈不规则血小板状，热激导致外蜡重分布形成更光滑的表皮外观；外蜡和内蜡分别检出38种和50种组分，其主要成分均为烷烃、酸类、酯类、萜类，角质单体共检出7种成分，主要为酸类；十六烷酸是蜡质和角质最主要的组分。外蜡含量整体上无明显的变化规律，而内蜡呈先减后增的趋势，冷藏45 d时3种保鲜方式均能有效延缓外蜡和内蜡含量的降低，其中热激效果最为显著。冷藏期间角质单体含量持续下降，3种保鲜方式均能明显抑制其含量的降低，其中，以热激处理的效果最为明显。热激处理可通过改变外蜡晶体的结构，以及调节角质层的成分代谢来保持‘南丰蜜桔’的贮藏品质，这为其开发采后贮藏保鲜策略提供了科学依据。
- ‘南丰蜜桔’ /
- 角质层 /
- 热激 /
- 壳聚糖 /
- 形态结构 /
- 化学组成
Abstract: The cuticle plays an important role in postharvest physiology of fruit, and its microstructure and components could be affected by different postharvest storage conditions. Heat shock (HT) and chitosan (CS) treatment have been proved to be effective in delaying fruit decay. In this study, 'Nanfeng' mandarins (Citrus reticulata Blanco cv. Kinokuni) were treated with HT, CS and HT combined with CS (HT+CS), and changes in cuticle microstructure and components during cold storage for 75 d were carried out by scanning electron microscopy (SEM) and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS), respectively. The results showed that irregular platelets waxes were deposited on the surface of 'Nanfeng' mandarins. The epicuticular wax redistributed and filled the cracks on the epidermis of the fruit induced by HT. Totally, 38 different components were identified in the epicuticular wax while 50 different components in intracuticular wax. Epicuticular wax and intracuticular wax for all groups were mainly composed of alkanes, acids, esters, and terpenoids. And all the cutin monomers were acids, including 7 different components. Hexadecanoic acid was the main component in cuticle of 'Nanfeng' mandarins. In general, there was no obvious regular change in the amounts of epicuticular wax, while intracuticular wax decreased firstly and then increased. And the amounts of cutin monomers decreased all the time during cold storage. All 3 treatments significantly inhibited the decline of epicuticular wax and intracuticular wax after 45 d, and effectively inhibited the reduction of cutin monomers all along, especially for the heat shock. In summary, heat shock can maintain the storage quality of 'Nanfeng' mandarins by changing the microstructure and regulating the components of cuticle, which shed new light on improving its postharvest storage quality.
- 'Nanfeng' mandarins /
- cuticle /
- heat shock /
- chitosan /
- morphological structure /
- chemical composition

HTML全文

角质层作为植物与环境接触的第一道外部屏障，已被证明在植物免受干旱胁迫、过度紫外线辐射、机械损伤以及微生物侵染等方面发挥重要生理作用^[1]。除了保护作用外，角质层还参与调节植物的生长，保护根的分生组织和促进侧根的发育^[2]。角质层在结构上主要由角质和蜡质组成，角质是一种由羟基脂肪酸组成通过酯键连接的聚酯化合物^[3]；蜡质可分为表皮外蜡和内蜡，表皮外蜡以晶体形式沉积在角质层外表面，主要是由不同比例的烷烃、脂肪酸、酯、初级醇等脂肪族化合物组成^[4-5]；而由烷烃、环氧脂肪酸、萜类、甾醇等主要化合物组成的表皮内蜡则镶嵌在角质聚合物基质中^[6]。

角质层是采后果实的质量调控器，其形态结构、化学组成及含量受采后贮藏条件因素的影响^[7]。Chen等^[8]比较了‘红富士’和‘金冠’两种苹果在货架期内角质层成分的动态变化，证明贮藏期间烷烃对抑制苹果采后失水具有重要作用。Wang等^[9]探讨了‘库尔勒香梨’在常温、冷藏和气调贮藏条件下表皮蜡质与贮藏品质特性的关系，发现冷藏和气调贮藏条件能通过调控果实角质层蜡质形态结构和组分来延缓果实成熟和衰老。张静等^[10]发现‘温州蜜柑’在贮藏期间表皮外蜡和角质单体含量分别呈先增后降和持续下降的变化趋势，体外实验表明外蜡可以促进指状青霉菌丝的生长，而角质则能抑制该菌分生孢子萌发。Zhu等^[11]也通过活体和离体实验证明，柑桔果实蜡质均能显著抑制指状青霉菌落的扩展。此外，徐呈祥等^[12-13]发现常温和低温下‘贡柑’和‘砂糖桔’的理化品质与蜡质含量、化学组成存在密切关联，冷藏不仅能显著抑制果实的失重率、腐烂率及细胞质膜相对透性的降低，还能有效保护果皮蜡质的减少和表面微形态结构的改变。

柑桔是我国重要的水果之一，2020年我国柑桔年产量达5121.90万吨。‘南丰蜜桔’是我国地方的重要名特柑桔之一，年均产量达150万吨，具有皮薄核少、酸甜适口、营养丰富等特点，但由于采后耐贮藏性差，导致采后损失严重^[14-15]。多种环保便捷的采后保鲜手段被应用到柑桔采后商品化处理，且多集中在采后贮藏品质特性评价和微生物防控等方面。如热激（heat shock，HT）被证明能降低柑桔果实呼吸强度和丙二醛含量，提高防御酶活性，进而延长采后贮藏期^[16]；壳聚糖（chitosan，CS）可在柑桔果实表面形成透明薄膜，能够降低果实呼吸强度、减少水分蒸腾和抵御微生物侵染^[17]；热激和壳聚糖联合处理也被证明可于防控茂谷柑采后绿霉病^[18]。然而，目前这些柑桔保鲜研究鲜有报道果实角质层的变化，且采后处理如何影响角质层形态结构及其化学组成尚不明晰。因此，本研究以‘南丰蜜桔’为研究对象，采用热激、壳聚糖以及热激联合壳聚糖处理3种保鲜方式，设置对照组对比探究4 ℃冷藏过程中不同处理对‘南丰蜜桔’角质层形态结构及其化学组成的影响，旨在揭示角质层的演变规律，以期为‘南丰蜜桔’的贮藏保鲜提供科学支撑。

1. 材料与方法

1.1 材料与仪器

南丰蜜桔　选取成熟期的‘南丰蜜桔’ ，于2020年11月采自湖南省郴州市临武县莲塘村果园，果实采后立即运往实验室冷库在（4±0.5） ℃下预冷24 h。挑选果形端正、大小匀称、表面颜色相近、外观完整无损伤的‘南丰蜜桔’，用干布擦净后随机分为4组备用；壳聚糖（食品级）　济南海得贝海洋生物工程有限公司；三氯甲烷、乙酸、碳酸氢钠、无水硫酸钠（均为分析纯）、正二十四烷（色谱纯）　国药集团化学试剂有限公司；14%三氟化硼甲醇溶液　德国CNW 公司；N,O-双（三甲基硅烷）三氟乙酰胺（N,O-bis（trimethylsilyl）trifluoroacetamid, BSTFA）　Sigma-Aldrich上海贸易有限公司；纤维素酶（≥400 U/mg）、半纤维素酶（≥2 U/mg）、果胶酶（≥500 U/mg）　上海瑞永生物科技有限公司。

LGJ-25C型冷冻干燥机　北京四环科学仪器厂；7890A-5975C型气相色谱-质谱联用仪（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）　安捷伦科技有限公司；RE-52AA型旋转蒸发仪　上海亚荣生化仪器厂；EDT-2000型离子溅射仪、EVO/LS10型扫描电子显微镜（scanning electron microscopy，SEM）　德国Zeiss公司。

1.2 实验方法

1.2.1 原料处理

挑选1200个新鲜‘南丰蜜桔’均分为对照组（CK）、热激组（HT）、壳聚糖组（CS）和热激联合壳聚糖组（HT+CS），每组300个果实。对照组：新鲜蜜桔未经任何处理；热激组：蜜桔在52 ℃水中完全浸泡3 min，在约20 ℃室温下沥干冷却^[19]；壳聚糖组：将蜜桔在1%的壳聚糖（W/V）中完全浸泡1 min，后于室温风干至果实表面不粘手^[20]；热激联合壳聚糖组：先将蜜桔在52 ℃水中完全浸泡3 min，在约20 ℃室温下沥干冷却，再将其放入1%的壳聚糖（W/V）中完全浸泡1 min，于室温风干至果实表面不粘手。4个处理完成后，全部分装于穿孔塑封袋中，每袋30个果实，平铺放置在（4±0.5） ℃，相对湿度为85%~90%的冷库中贮藏，在冷藏的第0、15、30、45、75 d取样测定相关指标。

1.2.2 果皮表面外蜡形态结构的SEM观察

每个处理分别取6个果面光洁、大小色泽均一的果实，用打孔器在表皮赤道部位取样，将果皮薄片冷冻干燥后用EDT-2000型离子溅射仪（2×10^-4 MPa, 25 mA，300 s）镀金膜，最后用EVO/LS10 SEM观察拍片。

1.2.3 果皮蜡质成分的提取和检测

每个处理分别选取18个果实，一组重复6个果实，共3次重复。参考Liu等^[21]的方法先后提取表皮外蜡和内蜡。提取外蜡时，用阿拉伯胶（1 g/mL）在果实表面涂抹均匀，室温风干后收集阿拉伯胶层，重复2次。用蒸馏水溶解所得的阿拉伯胶，并在室温下用3倍体积的三氯甲烷萃取3次，收集合并所得的有机相即为外蜡溶液，并用有机滤膜（0.22 µm）过滤，于30 ℃在旋转蒸发仪上挥出有机溶剂后贮藏于−20 ℃待测。去除外蜡的果实在三氯甲烷中完全浸泡1 min得到内蜡溶液，重复2次，合并所得内蜡溶液于30 ℃旋转蒸发干燥后贮藏于−20 ℃待测。

果实表皮蜡质成分测定：旋干的蜡质样品复溶在5 mL三氯甲烷中，有机滤膜（0.22 µm）过滤后，在样品中加入40 μL的内标正二十四烷（0.125 μg/μL）和等体积的衍生试剂BSTFA（含1%TMCS），在70 ℃的烘箱中衍生40 min，用于GC-MS分析。色谱条件：色谱柱为HP-5毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；进样口温度280 ℃，质谱源温度230 ℃，流量2 mL/min；Aux-2 温度280 ℃，载气为氦气，无分流进样，进样量1 μL。质谱条件：电子轰电离方式，能量70 eV，质量扫描范围50~600 u，全扫描方式，溶剂延迟7 min。升温程序：70 ℃保持1 min，以3 ℃/min升温至200 ℃，保持2 min，再以8 ℃/min升温至300 ℃，保持5 min，最后以20 ℃/min升温至320 ℃，保持2 min。各种蜡质成分经GC-MS检测后依据质谱库进行定性，并采用内标法进行定量分析，蜡质含量以μg/cm²表示。

1.2.4 果皮角质单体的提取和检测

果皮角质单体的提取参考Wang等^[22]的方法。用打孔器（内径=1.5 cm）在去蜡后的果实赤道部位均匀打8个孔，收集果皮圆片加入混合酶液（0.5 g/L纤维素酶、0.5 g/L半纤维素酶、0.2 g/L果胶酶）进行酶解，隔天换1次酶液，酶解至圆片表面无碎片物质释出。收集酶解后的角质膜层37 ℃烘干至恒重。取20.0 mg质膜层浸泡在14%三氟化硼甲醇溶液中于70 ℃的烘箱中转酯解聚16 h，然后冷却、过滤，加入3倍体积的饱和碳酸氢钠水溶液终止反应，再用三氯甲烷萃取3次。合并3次的萃取液，用无水硫酸钠干燥，最后旋转蒸发挥出有机溶液，−20 ℃保存待测。

果皮角质单体成分测定：前处理和色谱的条件与蜡质层组分分析一致。质谱条件为：电子轰电离方式，能量70 eV，质量扫描范围50~600 u，全扫描方式，溶剂延迟7 min。升温程序：70 ℃保持1 min，以3 ℃/min 升温至200 ℃，保持2 min，再以8 ℃/min升温至300 ℃，保持5 min，最后以10 ℃/min 升温至310 ℃，保持1 min。角质单体组分经GC-MS检测后依据质谱库定性，并采用内标法进行定量分析，用单位面积所含重量表示角质单体的含量（μg/cm²）。

1.2.5 果实表面积测定

‘南丰蜜桔’的表面积按下式计算：

$\text{果实表面积}\text=\frac{{({\rm{X}}\times {\rm{D}})}}{\text{Y}}$

式中：X表示每个平行处理果皮的总质量，g；D和Y分别表示为在每个平行处理中用打孔器（内径=1.5 cm）获得的48个小圆片的面积，cm²和质量，g。

1.3 数据处理

使用 Excel 统计数据，以平均值±标准差表示数据结果；借助 SPSS 26.0 进行显著性分析，采用Duncan 检验，显著水平设为 P<0.05；运用 GraphPad绘制角质层含量图，Origin 2019 绘制角质层比例图，Origin Pro 2021b Heat Map with Dendrogram 绘制聚类热图。

2. 结果与分析

2.1 冷藏过程中‘南丰蜜桔’表皮外蜡形态结构变化

‘南丰蜜桔’冷藏过程中外观颜色变化如图1右上角所示。冷藏15 d时，所有处理组果实表皮颜色无明显变化。冷藏30 d时，CK组果实基本转为全黄，而其他处理组果实果皮还保留部分青绿色。冷藏45 d开始，保鲜处理组果实颜色转黄，至75 d时CK组出现明显黑斑，HT组和HT+CS组果实表面也伴有泛黑现象，推测为热激产生的应激反应，而CS组果实外观在冷藏期间未出现黑斑，色泽均匀明亮。

图 1 冷藏过程中‘南丰蜜桔’外观及表皮外蜡形态结构变化（400×）

注：A₀~A₄：对照组0~75 d；B₀~B₄：热激组0~75 d；C₀~C₄：壳聚糖组0~75 d；D₀~D₄：热激联合壳聚糖组0~75 d。

Figure 1. Changes in appearance and epicuticular wax crystal structure of 'Nanfeng' mandarins during cold storage (400×)

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‘南丰蜜桔’经不同处理后，各处理的果实表皮外蜡形态结构已发生变化，用浅蓝色箭头在图1中标出了外蜡晶体的位置。0 d时，CK组果皮外蜡层分布了大量的蜡质晶体，为不规则血小板状，与报道的柑桔表皮蜡质晶体形状一致，还能观察到皮孔的存在^[23]；CS组和HT+CS组表面被壳聚糖膜覆盖，可见明显的蜡质晶体轮廓；HT组蜡质层较为光滑平整，无明显的外蜡晶体分布。随着冷藏时间的延长，表皮外蜡在不同处理中呈现不同的变化趋势（图1）。冷藏0~45 d时，CK组的果皮外蜡晶体数量呈先减后增的趋势，且出现明显裂纹；CS组和HT+CS组果皮外蜡晶体数量持续减少，逐渐趋于光滑平整。直到75 d时，观察到4个处理的果皮表面均无明显外蜡晶体。从不同处理间的差异分析，同时期CK组的外蜡晶体数量比其他组更多，表面也更为粗糙。前人^[24]研究表明热激能使果实外蜡晶体结构特征消失，本研究发现HT组果实表皮在冷藏期间基本保持光滑平整状态，推测52 ℃的热激处理导致表皮外蜡熔融重分布形成更光滑的表皮外观。涂膜处理的CS组和HT+CS组，冷藏开始后表皮蜡层完好无损，均被致密完整的聚合膜覆盖。Xu等^[25]也发现壳聚糖涂膜处理对果实表皮外蜡可起到有效的防护。所有处理在贮藏结束时均形成了较完整的表皮表面。表皮蜡质作为‘南丰蜜桔’最外层的保护屏障，较完整的蜡质层和较少的裂缝助于阻止水分散失并有效地抵御外界微生物侵染，进而维持果实品质^[26]。

2.2 ‘南丰蜜桔’表皮蜡质组分及含量变化

2.2.1 ‘南丰蜜桔’表皮外蜡组分及含量变化

不同处理对冷藏‘南丰蜜桔’表皮外蜡主要化学组成及含量的影响如表1所示。主要检出烷烃、酸类、酯类及萜类4类化学成分，包括16种烷烃、14种酸、3种酯、3种萜和2种醇共38种成分。烷烃种类在外蜡成分中最为丰富，其被认为是形成柑桔表皮血小板状蜡质晶体的必需物质^[27]。王敏力等^[28]也在‘南丰蜜桔’中检出了烷烃、脂肪酸和醇类物质，本研究多检出的酯类可能是由于栽培环境或采后贮藏方式的不同所导致。所有处理的各个冷藏阶段均被检出的成分包括十一烷烃、十二烷酸、十四烷酸、十六烷酸、油酸、十八烷酸、脱氢枞酸、28-Nor-17.α.（H）-霍烷、豆甾醇和β-谷甾醇。Liu等^[29]发现十六烷酸是‘纽荷尔’脐橙发育期间外蜡组分中的主要脂肪酸，其次是十八烷酸。本研究检出的外蜡成分中十六烷酸含量同样最高，各处理在15、45和75 d存在显著差异（P<0.05）。冷藏0 d时，HT组十六烷酸含量最高为2.62 μg/cm²，比最低的CK组高24.76%；至75 d发生了显著变化（P<0.05），HT组降为最低的1.77 μg/cm²，比含量最高的CK组低29.48%。在十八烷酸的变化中，HT组含量在冷藏结束为1.20 μg/cm²，相比开始时下降了32.58%。而CK组含量在30~75 d从最低升到最高，推测CK组未做任何保鲜处理，到了冷藏后期合成更多的酸类成分来对抗逆境以维持果体自身状态，因为脂肪酸被证明具有潜在的抗真菌特性^[30]。

表 1 不同处理对‘南丰蜜桔’冷藏过程表皮外蜡主要成分含量的影响

Table 1. Effects of different treatments on content of the main components in epicuticular wax of 'Nanfeng' mandarin during cold storage

化合物	处理	含量（μg/cm²）
化合物	处理	0 d	15 d	30 d	45 d	75 d
二十烷	CK	0.09±0.01^aB	−	0.16±0.10^aA	0.08±0.05^aB	0.21±0.14^aA
	HT	0.07±0.01^abA	0.10±0.02^aA	0.12±0.07^aA	0.14±0.06^aA	0.17±0.03^aA
	CS	−	0.02±0.00^bB	0.03±0.00^bB	0.11±0.07^aAB	0.15±0.06^abA
	HT+CS	0.05±0.02^bA	0.04±0.01^bA	0.05±0.02^bA	0.09±0.07^aA	0.08±0.02^bA
二十五烷	CK	0.25±0.02^a	−	−	−	−
	HT	0.19±0.01 b^AB	−	0.15±0.01^B	0.20±0.07^bAB	0.26±0.10^aA
	CS	0.22±0.02^aA	−	−	−	0.16±0.13^bB
	HT+CS	−	−	−	0.25±0.01^aA	0.25±0.07^aA
二十六烷	CK	−	0.21±0.05^aB	0.40±0.08^aA	−	−
	HT	0.23±0.12^B	−	0.25±0.13^bB	0.41±0.08^aA	0.39±0.26^bA
	CS	−	0.21±0.04^aB	0.37±0.22^aA	0.33±0.11^{b A}	0.37±0.16^bA
	HT+CS	−	0.06±0.01^bB	0.38±0.07^aA	0.42±0.07^aA	0.49± 0.18^aA
二十九烷	CK	0.24±0.02^aA	−	−	0.08±0.02^bB	0.09±0.04^abB
	HT	0.18±0.07^{b A}	0.09±0.02^A	0.13±0.03^A	0.12±0.04^{b A}	0.15±0.03^aA
	CS	−	−	−	−	0.07±0.02^b
	HT+CS	−	−	−	0.22±0.08^aA	0.11±0.06^abB
三十烷	CK	−	−	0.30±0.25^aA	−	0.08 0.01^bB
	HT	−	−	0.25±0.13^a	−	−
	CS	−	−	−	0.35±0.28^a	−
	HT+CS	−	−	0.17±0.11^bA	0.17±0.03^bA	0.11±0.07^aA
十六烷酸	CK	2.10±0.17^aBC	3.23±0.49^aA	1.75±0.53^bBC	1.58±0.01^bC	2.51±0.11^aAB
	HT	2.62±0.46^aA	1.99±0.19^bBC	2.23±0.03^aABC	2.41±0.14^aAB	1.77±0.19^{b C}
	CS	2.19±0.12^aA	2.71±0.38^abA	2.47±0.46^aA	2.29±0.19^aA	2.37±0.09^{ab A}
	HT+CS	2.29±0.27^aABC	2.94±0.27^aA	1.82±0.45^abC	2.80±0.40^aAB	1.97±0.48^abBC
油酸	CK	0.34±0.03^aA	0.35±0.04^aA	0.25±0.06^aAB	0.16±0.06^abB	0.18±0.04^aB
	HT	0.28±0.06^aB	0.41±0.02^aA	0.18±0.01^aC	0.13±0.04^bC	0.11±0.01^bC
	CS	0.23±0.06^aAB	0.34±0.08^aA	0.26±0.15^aAB	0.18±0.02^{ab AB}	0.13±0.01^abB
	HT+CS	0.26±0.13^aA	0.29±0.06^bA	0.18±0.02^aAB	0.23±0.02^aA	0.14±0.01^abB
十八烷酸	CK	1.41±0.12^abBC	2.26±0.47^aA	0.84±0.28^aCD	0.69±0.08^bD	1.60±0.22^aB
	HT	1.78±0.29^aA	1.15±0.19^bB	1.41±0.24^aAB	1.32±0.09^aAB	1.20±0.17^bB
	CS	1.14±0.05^bA	1.45±0.27^bA	1.40±0.30^aA	1.23±0.11^aA	1.58±0.25^aA
	HT+CS	1.18±0.31^bB	1.68±0.29^abA	1.11±0.32^aB	1.48±0.17^aA	1.30±0.33^abA
脱氢枞酸	CK	0.29±0.02^bB	0.69±0.08^aA	0.58±0.11^aAB	0.28±0.08^bB	0.48±0.27^aAB
	HT	0.60±0.20^aA	0.31±0.10^cA	0.23±0.03^bB	0.48±0.30^aA	0.29±0.13^bAB
	CS	0.54±0.21^aA	0.57±0.08^abA	0.38±0.17^abA	0.51±0.22^aA	0.27±0.07^bA
	HT+CS	0.47±0.26^aA	0.47±0.05^bA	0.46±0.16^abA	0.59±0.12^aA	0.29±0.06^bA
2-羟基十六酸甲酯	CK	0.04±0.00^bD	0.08±0.00^aC	0.25±0.01^aA	0.20±0.03^aB	−
	HT	0.11±0.01^aAB	0.15±0.04^bA	0.14±0.02^{b A}	0.06±0.04^bB	0.06±0.05^aB
	CS	0.06±0.03^ab	−	−	−	−
	HT+CS	0.10±0.03^aA	−	0.12±0.01^{b A}	0.09±0.06^{b A}	0.10±0.01^aA
2,3-二羟基十六酸丙酯	CK	−	0.29±0.02^aB	0.47±0.11^{ab A}	−	0.46±0.19^bA
	HT	−	−	0.22±0.08^bB	0.36±0.03^aA	0.51±0.31^bA
	CS	−	0.24±0.10^aA	0.38±0.18^{ab A}	0.47±0.04^aA	0.38±0.13^bA
	HT+CS	−	0.21±0.06^aB	0.75±0.32^aAB	0.36±0.10^aAB	0.94±0.56^aA
2-羟基十六酸乙酯	CK	−	−	−	0.15±0.04^a	−
	HT	−	−	−	0.16±0.03^aA	0.13±0.02^A
	CS	−	−	0.15±0.02^aA	0.19±0.09^aA	−
	HT+CS	−	0.16±0.03^A	0.17±0.05^aA	0.17±0.04^aA	−
28-Nor-17.α.（H）-霍烷	CK	0.08±0.01^bB	0.32±0.02^aA	0.27±0.05^aA	0.27±0.03^aA	0.33±0.07^aA
	HT	0.43±0.08^aA	0.25±0.01^aAB	0.24±0.04^aAB	0.31±0.16^aAB	0.20±0.01^aB
	CS	0.40±0.05^aA	0.34±0.04^aA	0.32±0.10^aA	0.37±0.10^aA	0.25±0.11^aA
	HT+CS	0.29±0.09^aA	0.30±0.06^aA	0.29±0.08^aA	0.35±0.05^aA	0.25±0.11^aA
豆甾醇	CK	0.08±0.01^bB	0.16±0.02^aA	0.14±0.01^aA	0.17±0.01^aA	0.16±0.01^aA
	HT	0.16±0.02^bA	0.10±0.01^bB	0.14±0.02^aAB	0.16±0.02^aA	0.14±0.01^aAB
	CS	0.16±0.01^aA	0.16±0.01^aA	0.15±0.01^aA	0.17±0.03^aA	0.16±0.02^aA
	HT+CS	0.18±0.04^aA	0.16±0.01^aA	0.14±0.02^aA	0.17±0.01^aA	0.14±0.01^aA
β-谷甾醇	CK	0.72±0.06^bB	0.92±0.16^aA	0.79±0.06^aA	0.83±0.06^aA	0.80±0.13^aA
	HT	0.84±0.07^aA	0.78±0.02^bA	0.80±0.10^aA	0.84±0.13^aA	0.72±0.09^aB
	CS	0.80±0.07^abA	0.83±0.11^aA	0.75±0.07^aA	0.82±0.08^aA	0.78±0.07^aA
	HT+CS	0.81±0.16^aA	0.80±0.06^abA	0.69±0.11^aB	0.78±0.05^aAB	0.69±0.06^aB
注：不同小写字母表示同一贮藏期不同处理有显著差异（P<0.05）；不同大写字母表示相同处理在不同贮藏期有显著差异（P<0.05）；“−”表示未检测到物质；表2~表3同。

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图2展示了不同处理果实表皮的外蜡总含量变化。冷藏15~45 d，CK组含量从10.12 μg/cm²下降到5.88 μg/cm²，HT组从6.25 μg/cm²上升到8.19 μg/cm²，而CS和HT+CS组含量随时间变化差异较小。冷藏45 d时，3种保鲜方式均能有效延缓外蜡含量的降低，其中热激效果最为明显。外蜡含量不仅随着冷藏时间产生变化，也在不同处理间存在差异。除第45 d外，CK组冷藏过程中的外蜡含量均比同期处理组更高，这与图1表皮外蜡形态结构现象一致，因为观察到CK组表皮外蜡晶体数量也比同期其他处理组更多。反之，HT组在冷藏过程中，总体来看其外蜡总量相比同期其他处理组更低，也与图1展现的表面光滑无外蜡晶体的现象相佐证。

图 2 不同处理对‘南丰蜜桔’冷藏过程中表皮外蜡组分含量的影响

注：不同小写字母表示同一贮藏期不同处理有显著差异（P<0.05）；不同大写字母表示相同处理在不同贮藏期有显著差异（P<0.05）；图4、图6同。

Figure 2. Effects of different treatments on the content of epicuticular wax components of 'Nanfeng' mandarins during cold storage

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冷藏‘南丰蜜桔’表皮外蜡4类主要成分的含量和比例变化分别如图2和图3所示。从整体上看酸类含量最为丰富且变化较大，第15 d的CK组含量最高为7.25 μg/cm²，是第45 d的2.30倍。酸类所占比例均在50%以上，CK组和CS组的变化趋势为先降后升，HT组表现为持续下降，而HT+CS组则为上升下降交替变化。王敏力^[28]也发现脂肪酸是不同柑桔中最丰富的蜡质成分，其中‘南丰蜜桔’脂肪酸占比最大达到69.47%。各处理的烷烃整体含量从冷藏开始到后期表现为上升趋势，尤其是HT+CS组，从0.24 μg/cm²增至1.32 μg/cm²，增长了4.50倍。其在不同处理中所占比例也呈现上升的现象（图3）。‘南丰蜜桔’随冷藏时间延长失水率变大，为抑制果实失水烷烃含量也随之升高，表明蜡质中烷烃组分在抑制果实采后失水方面发挥重要作用，这与前人报道一致^[8,31]。外蜡中萜类的含量在不同处理间无显著变化。Trivedi等^[32]发现越橘在发育过程中，三萜类比例随着脂肪族化合物比例升高而降低。所有处理组的萜类比例降低的同时，也伴随着其他3类成分占比的升高的现象，这可能是由于萜类化合物一般在角质层内蜡中被检测到，而在外蜡晶体的形成中其作用还尚不明晰。此外，有研究者^[33]报道了酯类的积累会影响苹果表皮的油腻化程度。但酯类在柑桔蜡质中的作用未见报道，推测可能与柑桔挥发性香气有关，因为果实采后成熟衰老的过程伴有表皮香气成分的变化^[34]。本研究中CK组前期含量远高于其他组，而保鲜处理组含量后期增长较大，可能是经热激和壳聚糖处理后的果实响应较慢的缘故。

图 3 不同处理后‘南丰蜜桔’冷藏过程中表皮外蜡各组分比例

注：A：CK组；B：HT组；C：CS组；D：HT+CS组。

Figure 3. Proportion of epicuticular wax components of 'Nanfeng' mandarins from different treatments during cold storage

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2.2.2 ‘南丰蜜桔’表皮内蜡组分及含量变化

‘南丰蜜桔’去除外蜡后制得内蜡，不同处理对表皮内蜡主要化学组成及含量的影响如表2所示。表皮内蜡同样检出烷烃、酸类、酯类及萜类4类主要化学成分，包括19种烷烃、16种酸、8种酯、5种萜、2种醇共50种成分，比外蜡要多12种。其中，所有处理组不同冷藏期果实都能检出12种内蜡组分，含量最多的内蜡成分仍然是十六烷酸。特别注意的是，与果实外蜡萜类成分相比，内蜡还检出了角鲨烯、菜油甾醇和β-香树精3种萜类物质，可能是由于三萜类物质呈环状二维结构多填充于聚酯结构的角质中，因此在内蜡中相对较多而外蜡中相对较少^[35]。前人在探究‘温州蜜柑’和‘冰糖橙’贮藏中的角质层组分差异时，发现内蜡能显著抑制指状青霉菌的菌丝生长和孢子萌发^[10,36]，其中萜类物质起到关键作用。角鲨烯也被证明可参与清除自由基和提高氧负荷^[37]。本研究发现角鲨烯成分仅在CK组第15 d和HT组第0、15、45 d检测到，推测HT处理能更好地保持果实品质。

表 2 不同处理对‘南丰蜜桔’冷藏过程表皮内蜡主要成分含量的影响

Table 2. Effects of different treatments on content of the main components in intracuticular wax of 'Nanfeng' mandarin during cold storage

化合物	处理	含量（μg/cm²）
化合物	处理	0 d	15 d	30 d	45 d	75 d
十八烷	CK	0.19±0.12^aA	0.02±0.00^aB	0.05±0.04^aB	0.02±0.00^bB	0.04±0.01^aB
	HT	0.16±0.05^aA	0.02±0.00^aB	0.06±0.03^aB	0.01±0.00^bB	0.03±0.02^aB
	CS	0.13±0.03^bA	0.03±0.01^aB	0.03±0.02^aAB	0.05±0.04^aB	0.07±0.03^aB
	HT+CS	0.10±0.03^bA	0.02±0.00^aB	0.05±0.04^aAB	0.01±0.00^bB	0.03±0.01^aB
二十烷	CK	0.26±0.17^aA	0.17±0.04^aA	0.04±0.01^aB	0.02±0.00^bB	0.17±0.16^aA
	HT	0.19±0.05^aA	0.07±0.02^bB	0.04±0.01^aB	0.03±0.00^bB	0.06±0.01^aB
	CS	0.21±0.03^aA	0.07±0.02^bB	0.07±0.02^aB	0.09±0.02^aB	0.11±0.03^aB
	HT+CS	0.15±0.06^bA	0.13±0.05^abA	0.07±0.01^aA	0.10±0.02^aA	0.06±0.01^aA
二十一烷	CK	0.21±0.04^aA	0.04±0.01^B	0.04±0.01^abB	0.13±0.11^aA	0.15±0.10^aA
	HT	−	−	0.02±0.01^bB	0.10±0.03^bA	0.12±0.03^aA
	CS	0.05±0.04^bB	−	0.04±0.01^abB	0.15±0.10^aA	0.07±0.00^aB
	HT+CS	−	−	0.05±0.01^aB	0.32±0.20^aA	0.12±0.05^aB
二十二烷	CK	0.17±0.05^aA	−	−	0.08±0.00^aB	−
	HT	0.20±0.07^aA	−	0.08±0.07^B	0.06±0.02^aB	−
	CS	0.20±0.02^aA	0.03±0.01^bB	−	−	−
	HT+CS	−	0.13±0.04^aA	−	0.03±0.00^bB	−
二十六烷	CK	0.04±0.02^bB	−	0.05±0.01^abB	0.06±0.02^bB	0.19±0.09^aA
	HT	0.16±0.04^abA	0.05±0.02^aB	0.09±0.03^abB	0.04±0.01^bB	0.06±0.00^aB
	CS	0.42±0.24^aA	0.08±0.02^aB	0.03±0.01^bB	0.06±0.01^bB	0.11±0.08^aB
	HT+CS	0.16±0.01^abB	0.06±0.03^aB	0.12±0.06^aB	0.29±0.07^aA	0.07±0.02^aB
二十七烷	CK	0.32±0.01^aA	0.15±0.02^abB	0.13±0.01^bB	−	−
	HT	0.10±0.02^aB	0.08±0.01^{c B}	0.14±0.03^bA	0.10±0.01^bB	0.08±0.01^bB
	CS	0.33±0.18^aA	0.18±0.00^aAB	0.04±0.03^{c B}	0.15±0.01^bAB	0.15±0.12^aAB
	HT+CS	−	0.11±0.04^{bc C}	0.25±0.02^aB	0.42±0.04^aA	−
二十九烷	CK	0.16±0.04^abB	0.12±0.02^bB	−	0.07±0.06^bB	0.41±0.38^aA
	HT	0.09±0.02^b	−	−	−	−
	CS	0.26±0.08^aA	0.20±0.02^aAB	−	0.08±0.03^bB	0.17±0.06^bAB
	HT+CS	0.10±0.04^bB	−	0.27±0.05^B	0.47±0.11^aA	−
三十烷	CK	0.19±0.05^abA	0.07±0.02^abB	0.06±0.02^aB	0.03±0.02^bB	−
	HT	0.10±0.03^{bc A}	0.05±0.02^bA	−	−	−
	CS	0.27±0.09^aA	0.11±0.03^aB	0.08±0.01^aB	−	0.09±0.05^B
	HT+CS	0.08±0.03^{c B}	0.05±0.01^bB	0.14±0.05^aB	0.30±0.04^aA	−
十六烷酸	CK	0.87±0.20^bA	0.75±0.22^abA	0.62±0.07^{bc A}	0.26±0.02^bB	0.66±0.15^bA
	HT	0.96±0.17^abA	1.04±0.30^abA	0.91±0.10^abA	0.76±0.09^aA	1.31±0.41^abA
	CS	0.69±0.24^bAB	0.65±0.11^bAB	0.40±0.06^{c B}	0.42±0.18^bB	0.84±0.10^abA
	HT+CS	1.32±0.07^aAB	1.24±0.18^aAB	0.98±0.22^aAB	0.81±0.21^aB	1.65±0.63^aA
亚油酸	CK	0.12±0.00^c	−	−	−	−
	HT	0.40±0.08^bABC	0.66±0.23^aA	0.47±0.06^aAB	0.32±0.08^aBC	0.16±0.06^aC
	CS	0.06±0.01^{c B}	0.14±0.02^bA	−	−	−
	HT+CS	0.56±0.00^aA	0.38±0.13^abB	0.27±0.05^{b C}	0.17±0.02^aC	0.16±0.05^aC
油酸	CK	0.09±0.00^bA	0.06±0.01^bA	0.08±0.01^{c A}	0.07±0.01^bA	0.12±0.06^bA
	HT	0.66±0.12^aAB	1.13±0.37^aA	0.67±0.06^aAB	0.54±0.17^aB	0.37±0.22^aB
	CS	0.05±0.02^bB	0.10±0.02^bAB	0.06±0.02^{c B}	0.05±0.02^bB	0.16±0.07^bA
	HT+CS	0.43±0.27^aAB	0.51±0.16^bA	0.38±0.06^bAB	0.14±0.02^bB	0.24±0.07^aAB
十八烷酸	CK	0.83±0.10^aA	0.78±0.22^abAB	0.36±0.01^aC	0.19±0.01^{b C}	0.47±0.20^bBC
	HT	0.60±0.05^bB	0.48±0.07^bBC	0.38±0.04^aBC	0.26±0.04^{b C}	0.95±0.24^aA
	CS	0.62±0.21^bAB	0.58±0.09^abAB	0.36±0.05^aB	0.29±0.10^bB	0.95±0.32^aA
	HT+CS	0.74±0.01^aAB	0.86±0.07^aAB	0.52±0.12^aB	0.48±0.10^aB	1.12±0.38^aA
2,3-二羟基十六酸丙酯	CK	0.16±0.02^aC	0.09±0.04^aB	0.05±0.00^aA	0.07±0.01^aBC	0.04±0.00^aA
	HT	0.06±0.01^bAB	0.07±0.02^aB	0.07±0.00^aAB	0.04±0.01^aA	0.04±0.00^aA
	CS	0.07±0.02^bA	0.05±0.01^aA	0.05±0.01^aA	0.07±0.02^aA	0.07±0.05^aA
	HT+CS	−	0.08±0.00^aA	0.05±0.02^aB	0.05±0.01^aB	0.04±0.01^aB
亚油酸乙酯	CK	−	0.02±0.01^bA	0.02±0.01^aA	−	0.04±0.03^aA
	HT	0.08±0.02^bA	0.12±0.04^aA	0.03±0.02^aB	0.02±0.01^B	0.01±0.00^aB
	CS	−	0.03±0.01^bA	−	−	0.02±0.00^aA
	HT+CS	0.15±0.02^aA	0.07±0.02^abB	0.04±0.01^aB	−	0.04±0.02^aB
角鲨烯	CK	−	0.05±0.02^a	−	−	−
	HT	0.06±0.00^aAB	0.08±0.01^aA	−	0.05±0.01^aB	−
	CS	−	−	−	−	−
	HT+CS	0.08±0.03^aA	0.11±0.04^aA	0.05±0.00^A	0.07±0.00^aA	−
菜油甾醇	CK	0.10±0.01^bB	0.12±0.05^aB	0.10±0.01^aB	0.11±0.00^aB	0.30±0.28^aA
	HT	0.13±0.03^abA	0.12±0.01^aA	0.12±0.04^aA	0.13±0.02^aA	0.13±0.02^aA
	CS	0.12±0.04^abA	0.11±0.02^aA	0.11±0.00^aA	0.13±0.02^aA	0.15±0.05^aA
	HT+CS	0.16±0.03^aA	0.12±0.02^aAB	0.11±0.00^aAB	0.17±0.06^aA	0.09±0.03^bB
豆甾醇	CK	0.07±0.02^aA	0.06±0.01^aA	0.06±0.00^aA	0.06±0.00^bA	0.07±0.03^aA
	HT	0.05±0.01^aA	0.05±0.00^aA	0.05±0.01^abA	0.07±0.01^bA	0.07±0.01^aA
	CS	0.05±0.01^aAB	0.05±0.01^aAB	0.04±0.00^bB	0.07±0.00^bAB	0.08±0.03^aA
	HT+CS	0.06±0.00^aA	0.05±0.01^aA	0.06±0.00^abA	0.09±0.01^aB	0.06±0.01^aA
β-谷甾醇	CK	0.20±0.04^aA	0.20±0.01^aA	0.23±0.01^aA	0.22±0.01^aA	0.21±0.02^aA
	HT	0.20±0.03^aB	0.20±0.01^aB	0.22±0.03^aAB	0.26±0.03^aAB	0.30±0.05^aA
	CS	0.19±0.04^aB	0.19±0.04^aB	0.18±0.00^bB	0.22±0.02^aAB	0.36±0.13^aA
	HT+CS	0.23±0.01^aBC	0.20±0.01^aC	0.22±0.02^aBC	0.29±0.05^aAB	0.32±0.02^aA
β-香树精	CK	0.22±0.08^aB	0.29±0.06^aB	0.41±0.04^aAB	0.40±0.03^aAB	0.64±0.23^abA
	HT	0.23±0.03^aA	0.32±0.06^aA	0.32±0.11^aA	0.35±0.04^aA	0.31±0.15^bA
	CS	0.25±0.06^aB	0.31±0.07^aB	0.28±0.04^aB	0.38±0.05^aB	0.76±0.23^aA
	HT+CS	0.28±0.04^aB	0.26±0.06^aB	0.34±0.03^aB	0.32±0.06^aB	0.47±0.04^abA

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图4展示了检出的表皮内蜡总量的变化，所有处理的内蜡总量整体趋势为先减后增。在冷藏15~75 d，各处理之间的含量变化差异明显。这期间HT组和HT+CS组保持较高的含量，而CK组和CS组在冷藏过程中都保持着先减后增的变化趋势。冷藏45 d时3种保鲜方式均能有效抑制外蜡和内蜡含量的降低，其中热激效果最为明显。整个冷藏阶段含量最高的是第75 d的CK组，达到5.46 μg/cm²，最低为第30 d的CS组为1.91 μg/cm²。4类主要成分的含量和比例变化与外蜡相比有所不同。酸类同样是表皮内蜡中含量最高的成分（图4）。在酸类的变化中，第15 d HT组含量最高为3.44 μg/cm²，是同期CK组的1.88倍；HT+CS在冷藏结束时达到了3.27 μg/cm²，是同期CK组的1.60倍。Belge等^[38]采用热激和CO₂冲击处理成熟的桃果实，在0 ℃下贮藏2周后在20 ℃下贮藏5 d，发现热激组的蜡质含量和百分比都为最高。与图3不同的是，酸类比例不再占据领先优势，烷烃和萜类占比明显提高。分析图4中烷烃含量的变化，发现冷藏过程中除30~45 d的HT+CS组和第75 d的CK和CS组外，其他时间点的处理组之间差异不显著，表明表皮内蜡对蜜桔果实保水无作用^[4]。与外蜡萜类相反的是内蜡萜类含量随贮藏时间延长而逐渐升高，尤其到了冷藏第75 d，CS组和CK组含量达到最高的1.35和1.23 μg/cm²，分别是冷藏前的2.08倍和2.17倍，可能是冷藏后期为了合成更多的萜类成分以抵御微生物的侵染。针对表皮内蜡各组分的比例变化（图5），观察发现CK组、HT组及CS组3个处理组中的萜类比例存在相同的变化趋势，均为先增后减，而HT+CS组在酯类和萜类中占比分别为持续下降和持续上升。所有处理的酸类比例在冷藏中的趋势一致，为“上升-下降-上升”，所有处理的烷烃比例在冷藏前期也均存在先减后增的现象，表明贮藏期间果实角质层的成分代谢处于动态变化之中。

图 4 不同处理对‘南丰蜜桔’冷藏过程中表皮内蜡组分含量的影响

Figure 4. Effects of different treatments on the content of intracuticular wax components of 'Nanfeng' mandarins during cold storage

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图 5 不同处理后‘南丰蜜桔’冷藏过程中表皮内蜡各组分比例

注：A：CK组；B：HT组；C：CS组；D：HT+CS组。

Figure 5. Proportion of intracuticular wax components of 'Nanfeng' mandarins from different treatments during cold storage

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2.3 ‘南丰蜜桔’表皮角质组分及含量变化

表3列出了不同处理的表皮角质单体组成及含量变化。‘南丰蜜桔’果实角质单体共检出7种，分别为1,4苯二甲酸、十六烷酸、十八烷酸、辛酸、壬酸、α-亚麻酸、亚油酸。不同处理组检出的角质单体数量有所不同，CK组共检出4种，HT组和CS组共检出5种，而7种角质单体均能在HT+CS组检出。冷藏第45 d，CK组角质单体仅为十六烷酸，CS组和HT+CS组角质单体种类均减少到2种，冷藏结束时检出种类又增多；而HT组检出的种类在第45 d增多到4种，75 d时减少到2种。Riikka等^[39]发现浆果角质单体主要物质是含有官能团的C₁₆和C₁₈羟基酸。Marga等^[40]发现角质层的机械性能受C₁₆单体含量的影响，其含量越高表皮韧性越强。随着冷藏时间的延长，各处理组的十六烷酸含量逐渐减少，因此‘南丰蜜桔’果实表皮也逐渐变软。十六烷酸是唯一在所有处理不同时间点都能检出的成分，发现冷藏15~45 d，CK组的含量较其他处理组更低，但冷藏结束时又有所回升，推测是由于逆境胁迫而合成了比其他处理更高的含量，以抵御采后病原菌的侵染^[41]。不同处理检出的表皮角质单体总量如图6所示。冷藏30~45 d，各处理之间存在显著差异（P<0.05）。冷藏期间HT组角质单体总量始终高于其他处理组，最高为冷藏开始的2.73 μg/cm²；而CK组则与之相反，在冷藏0~45 d从2.00 μg/cm²显著下降到0.38 μg/cm²（P<0.05），第75 d回升到0.50 μg/cm²。分析不同处理检出的角质单体的比例变化（图7），发现十六烷酸是冷藏45~75 d的主要角质单体，各处理中所占比例均超过50%。图6中，CK组因未做任何保鲜处理在冷藏过程中角质单体含量较其他处理组更少，而HT组、CS组和HT+CS组明显含量更高，尤其是HT组，表明热激可以抑制角质单体含量的下降，具有更优的保鲜优势。

表 3 不同处理对‘南丰蜜桔’冷藏过程表皮角质单体含量的影响

Table 3. Effects of different treatments on compositions in epidermal cutin monomer of 'Nanfeng' mandarins during cold storage

化合物	处理	含量（μg/cm²）
化合物	处理	0 d	15 d	30 d	45 d	75 d
1,4苯二甲酸	CK	0.69±0.13^bA	0.54±0.02^bB	0.11±0.00^bC	−	−
	HT	1.35±0.53^aA	0.61±0.02^aB	0.45±0.03^aB	0.07±0.04^B	−
	CS	0.71±0.03^bA	0.57±0.04^abA	0.30±0.11^abB	−	−
	HT+CS	0.66±0.06^bA	0.52±0.02^bA	0.20±0.13^bB	−	−
十六烷酸	CK	0.88±0.39^aA	0.43±0.05^aB	0.38±0.09^aB	0.38±0.09^aB	0.44±0.14^aB
	HT	0.82±0.15^aA	0.53±0.12^aAB	0.49±0.12^aAB	0.51±0.19^aAB	0.42±0.16^aB
	CS	0.72±0.16^aA	0.49±0.09^aAB	0.35±0.03^aB	0.41±0.09^aB	0.30±0.08^aB
	HT+CS	0.63±0.18^aA	0.45±0.10^aAB	0.35±0.06^aB	0.54±0.08^aAB	0.34±0.13^aB
十八烷酸	CK	0.43±0.11^abA	0.24±0.02^aB	−	−	−
	HT	0.55±0.15^aA	0.24±0.05^aB	0.25±0.08^aB	0.23±0.12^B	−
	CS	0.36±0.09^abA	0.25±0.04^aB	0.24±0.04^aB	−	−
	HT+CS	0.30±0.06^bA	0.20±0.04^aB	0.17±0.02^bB	−	0.15±0.04^B
辛酸	CK	−	−	−	−	0.06±0.01^a
	HT	−	−	−	0.08±0.01	−
	CS	−	−	−	−	0.05±0.00^b
	HT+CS	−	−	−	−	0.05±0.00^ab
壬酸	CK	−	−	−	−	−
	HT	−	−	−	−	0.06±0.02^a
	CS	0.07±0.01^aA	−	−	0.04±0.00^aB	0.04±0.01^aB
	HT+CS	0.10±0.02^aA	−	−	0.06±0.02^aAB	0.05±0.01^aB
α-亚麻酸	CK	−	−	−	−	−
	HT	−	−	−	−	−
	CS	−	−	−	−	−
	HT+CS	0.42±0.01	−	−	−	−
亚油酸	CK	−	−	−	−	−
	HT	−	−	−	−	−
	CS	−	−	−	−	−
	HT+CS	−	0.16±0.01	−	−	−

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图 6 不同处理对‘南丰蜜桔’冷藏过程中表皮角质单体总量的影响

Figure 6. Effects of different treatments on the total amount of epidermal cutin monomer of 'Nanfeng' mandarins during cold storage

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图 7 不同处理后‘南丰蜜桔’冷藏过程中表皮角质单体组分比例

注：A：CK组；B：HT组；C：CS组；D：HT+CS组。

Figure 7. Proportion of epidermal cutin monomer of 'Nanfeng' mandarins from different treatments during cold storage

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2.4 ‘南丰蜜桔’表皮角质层组分的聚类分析

采用Ward最小方差和欧式距离法对检出的角质层组分数据进行聚类分析，结果以热图形式显示在图8。图例表示红色越深值越大，物质含量就越高；而蓝色越深值越低，含量则越低。左边是样品的聚集区，上边是角质层成分的聚集区。左边分支和上边分支轴欧式距离越长，相关性就越弱。如红线所示样本可以大致分为三大类，为0 d、15~75 d以及CK组第75 d三个贮藏阶段。进一步细分为6类，同一类的样本之间存在较强的相关性。0 d样本进一步分为CK组和其他处理组，表明果实经不同处理后，在冷藏开始时就已经有了成分代谢的响应变化。分类Ⅲ都是15 d样品。而30 d和45 d的样本被归为Ⅳ类，说明该时期各处理之间差异较小，热图也由大面积红色转为临界色，含量明显下降。值得注意的是，HT+CS组第45 d和其他组75 d样本被分到了Ⅴ类，该类样本含量显著升高，说明HT+CS组后期合成角质层成分较其他组更快。而CK组的第75 d样品红色区域较多较深单独归为一类，和前期分析一致，可能是由于冷藏后期CK组以抵御微生物侵染而提前合成更多的角质层成分。表皮外蜡、内蜡和角质单体的聚集可分为3类。几乎所有的第一类物质都是内蜡组分，第二类物质也几乎是外蜡组分，第三类则几乎包括内蜡和绝大多数的角质单体组分，表明外蜡、内蜡以及角质成分之间存在聚类差异。随着冷藏时间的延长，Ⅰ类物质含量总体上呈现先下降后上升的趋势，与图4内蜡总量变化一致；II类物质颜色差异较小，冷藏前后含量变化不明显，也与图2外蜡总量无明显变化规律相吻合；最后一类物质贮藏前后期颜色变化显著，整体上物质含量随着贮藏时间延长而降低。

图 8 不同处理后‘南丰蜜桔’冷藏过程中角质层组分的热图和聚类分析

注：图例中字母表示不同处理组，数字表示不同冷藏天数；-E结尾为外蜡组分；-I为内蜡组分；-C为角质组分。

Figure 8. Heatmap and clustering of cuticle components of 'Nanfeng' mandarins from different treatments during cold storage

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3. 结论

角质层对果实采后贮藏保鲜至关重要，本研究采用不同保鲜方式（热激、壳聚糖、热激联合壳聚糖）处理新鲜‘南丰蜜桔’，探究了其外蜡晶体结构和角质层成分代谢的变化规律。‘南丰蜜桔’外蜡晶体为不规则的血小板状，热激能使外蜡熔融重分布产生更光滑的表皮外观，外蜡晶体随着冷藏时间的延长而逐渐消失。GC-MS分析表明，外蜡一共检出38种成分，包括16种烷烃、14种酸、3种酯、3种萜和2种醇，内蜡共检出50种化学成分，包括19种烷烃、16种酸、8种酯、5种萜、2种醇。蜡质的主要成分均为烷烃、酸类、酯类和萜类，其中酸类含量最为丰富。不管是蜡质还是角质，十六烷酸都是最主要的组分。外蜡含量整体上无明显的变化规律，内蜡含量则随时间延长呈先减后增的变化趋势，冷藏45 d时3种保鲜方式均能有效延缓外蜡和内蜡含量的下降，其中热激处理的效果最为明显。角质单体主要检出1,4苯二甲酸、十六烷酸、十八烷酸、辛酸、壬酸、α-亚麻酸、亚油酸7种成分。角质单体含量随贮藏时间延长而下降，3种保鲜方式都能明显抑制其含量的降低，其中以热激处理的效果最为显著。综上所述，热激作为一种有效的保鲜方式，可通过改变柑桔果实外蜡晶体的结构，以及调控角质层的代谢变化来保持采后贮藏品质。这些结果对开发‘南丰蜜桔’的绿色保鲜方法提供了新视角。

图 1 冷藏过程中‘南丰蜜桔’外观及表皮外蜡形态结构变化（400×）

注：A₀~A₄：对照组0~75 d；B₀~B₄：热激组0~75 d；C₀~C₄：壳聚糖组0~75 d；D₀~D₄：热激联合壳聚糖组0~75 d。

Figure 1. Changes in appearance and epicuticular wax crystal structure of 'Nanfeng' mandarins during cold storage (400×)

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图 2 不同处理对‘南丰蜜桔’冷藏过程中表皮外蜡组分含量的影响

注：不同小写字母表示同一贮藏期不同处理有显著差异（P<0.05）；不同大写字母表示相同处理在不同贮藏期有显著差异（P<0.05）；图4、图6同。

Figure 2. Effects of different treatments on the content of epicuticular wax components of 'Nanfeng' mandarins during cold storage

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图 3 不同处理后‘南丰蜜桔’冷藏过程中表皮外蜡各组分比例

注：A：CK组；B：HT组；C：CS组；D：HT+CS组。

Figure 3. Proportion of epicuticular wax components of 'Nanfeng' mandarins from different treatments during cold storage

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图 4 不同处理对‘南丰蜜桔’冷藏过程中表皮内蜡组分含量的影响

Figure 4. Effects of different treatments on the content of intracuticular wax components of 'Nanfeng' mandarins during cold storage

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图 5 不同处理后‘南丰蜜桔’冷藏过程中表皮内蜡各组分比例

注：A：CK组；B：HT组；C：CS组；D：HT+CS组。

Figure 5. Proportion of intracuticular wax components of 'Nanfeng' mandarins from different treatments during cold storage

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图 6 不同处理对‘南丰蜜桔’冷藏过程中表皮角质单体总量的影响

Figure 6. Effects of different treatments on the total amount of epidermal cutin monomer of 'Nanfeng' mandarins during cold storage

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图 7 不同处理后‘南丰蜜桔’冷藏过程中表皮角质单体组分比例

注：A：CK组；B：HT组；C：CS组；D：HT+CS组。

Figure 7. Proportion of epidermal cutin monomer of 'Nanfeng' mandarins from different treatments during cold storage

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图 8 不同处理后‘南丰蜜桔’冷藏过程中角质层组分的热图和聚类分析

注：图例中字母表示不同处理组，数字表示不同冷藏天数；-E结尾为外蜡组分；-I为内蜡组分；-C为角质组分。

Figure 8. Heatmap and clustering of cuticle components of 'Nanfeng' mandarins from different treatments during cold storage

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表 1 不同处理对‘南丰蜜桔’冷藏过程表皮外蜡主要成分含量的影响

Table 1 Effects of different treatments on content of the main components in epicuticular wax of 'Nanfeng' mandarin during cold storage

化合物	处理	含量（μg/cm²）
化合物	处理	0 d	15 d	30 d	45 d	75 d
二十烷	CK	0.09±0.01^aB	−	0.16±0.10^aA	0.08±0.05^aB	0.21±0.14^aA
	HT	0.07±0.01^abA	0.10±0.02^aA	0.12±0.07^aA	0.14±0.06^aA	0.17±0.03^aA
	CS	−	0.02±0.00^bB	0.03±0.00^bB	0.11±0.07^aAB	0.15±0.06^abA
	HT+CS	0.05±0.02^bA	0.04±0.01^bA	0.05±0.02^bA	0.09±0.07^aA	0.08±0.02^bA
二十五烷	CK	0.25±0.02^a	−	−	−	−
	HT	0.19±0.01 b^AB	−	0.15±0.01^B	0.20±0.07^bAB	0.26±0.10^aA
	CS	0.22±0.02^aA	−	−	−	0.16±0.13^bB
	HT+CS	−	−	−	0.25±0.01^aA	0.25±0.07^aA
二十六烷	CK	−	0.21±0.05^aB	0.40±0.08^aA	−	−
	HT	0.23±0.12^B	−	0.25±0.13^bB	0.41±0.08^aA	0.39±0.26^bA
	CS	−	0.21±0.04^aB	0.37±0.22^aA	0.33±0.11^{b A}	0.37±0.16^bA
	HT+CS	−	0.06±0.01^bB	0.38±0.07^aA	0.42±0.07^aA	0.49± 0.18^aA
二十九烷	CK	0.24±0.02^aA	−	−	0.08±0.02^bB	0.09±0.04^abB
	HT	0.18±0.07^{b A}	0.09±0.02^A	0.13±0.03^A	0.12±0.04^{b A}	0.15±0.03^aA
	CS	−	−	−	−	0.07±0.02^b
	HT+CS	−	−	−	0.22±0.08^aA	0.11±0.06^abB
三十烷	CK	−	−	0.30±0.25^aA	−	0.08 0.01^bB
	HT	−	−	0.25±0.13^a	−	−
	CS	−	−	−	0.35±0.28^a	−
	HT+CS	−	−	0.17±0.11^bA	0.17±0.03^bA	0.11±0.07^aA
十六烷酸	CK	2.10±0.17^aBC	3.23±0.49^aA	1.75±0.53^bBC	1.58±0.01^bC	2.51±0.11^aAB
	HT	2.62±0.46^aA	1.99±0.19^bBC	2.23±0.03^aABC	2.41±0.14^aAB	1.77±0.19^{b C}
	CS	2.19±0.12^aA	2.71±0.38^abA	2.47±0.46^aA	2.29±0.19^aA	2.37±0.09^{ab A}
	HT+CS	2.29±0.27^aABC	2.94±0.27^aA	1.82±0.45^abC	2.80±0.40^aAB	1.97±0.48^abBC
油酸	CK	0.34±0.03^aA	0.35±0.04^aA	0.25±0.06^aAB	0.16±0.06^abB	0.18±0.04^aB
	HT	0.28±0.06^aB	0.41±0.02^aA	0.18±0.01^aC	0.13±0.04^bC	0.11±0.01^bC
	CS	0.23±0.06^aAB	0.34±0.08^aA	0.26±0.15^aAB	0.18±0.02^{ab AB}	0.13±0.01^abB
	HT+CS	0.26±0.13^aA	0.29±0.06^bA	0.18±0.02^aAB	0.23±0.02^aA	0.14±0.01^abB
十八烷酸	CK	1.41±0.12^abBC	2.26±0.47^aA	0.84±0.28^aCD	0.69±0.08^bD	1.60±0.22^aB
	HT	1.78±0.29^aA	1.15±0.19^bB	1.41±0.24^aAB	1.32±0.09^aAB	1.20±0.17^bB
	CS	1.14±0.05^bA	1.45±0.27^bA	1.40±0.30^aA	1.23±0.11^aA	1.58±0.25^aA
	HT+CS	1.18±0.31^bB	1.68±0.29^abA	1.11±0.32^aB	1.48±0.17^aA	1.30±0.33^abA
脱氢枞酸	CK	0.29±0.02^bB	0.69±0.08^aA	0.58±0.11^aAB	0.28±0.08^bB	0.48±0.27^aAB
	HT	0.60±0.20^aA	0.31±0.10^cA	0.23±0.03^bB	0.48±0.30^aA	0.29±0.13^bAB
	CS	0.54±0.21^aA	0.57±0.08^abA	0.38±0.17^abA	0.51±0.22^aA	0.27±0.07^bA
	HT+CS	0.47±0.26^aA	0.47±0.05^bA	0.46±0.16^abA	0.59±0.12^aA	0.29±0.06^bA
2-羟基十六酸甲酯	CK	0.04±0.00^bD	0.08±0.00^aC	0.25±0.01^aA	0.20±0.03^aB	−
	HT	0.11±0.01^aAB	0.15±0.04^bA	0.14±0.02^{b A}	0.06±0.04^bB	0.06±0.05^aB
	CS	0.06±0.03^ab	−	−	−	−
	HT+CS	0.10±0.03^aA	−	0.12±0.01^{b A}	0.09±0.06^{b A}	0.10±0.01^aA
2,3-二羟基十六酸丙酯	CK	−	0.29±0.02^aB	0.47±0.11^{ab A}	−	0.46±0.19^bA
	HT	−	−	0.22±0.08^bB	0.36±0.03^aA	0.51±0.31^bA
	CS	−	0.24±0.10^aA	0.38±0.18^{ab A}	0.47±0.04^aA	0.38±0.13^bA
	HT+CS	−	0.21±0.06^aB	0.75±0.32^aAB	0.36±0.10^aAB	0.94±0.56^aA
2-羟基十六酸乙酯	CK	−	−	−	0.15±0.04^a	−
	HT	−	−	−	0.16±0.03^aA	0.13±0.02^A
	CS	−	−	0.15±0.02^aA	0.19±0.09^aA	−
	HT+CS	−	0.16±0.03^A	0.17±0.05^aA	0.17±0.04^aA	−
28-Nor-17.α.（H）-霍烷	CK	0.08±0.01^bB	0.32±0.02^aA	0.27±0.05^aA	0.27±0.03^aA	0.33±0.07^aA
	HT	0.43±0.08^aA	0.25±0.01^aAB	0.24±0.04^aAB	0.31±0.16^aAB	0.20±0.01^aB
	CS	0.40±0.05^aA	0.34±0.04^aA	0.32±0.10^aA	0.37±0.10^aA	0.25±0.11^aA
	HT+CS	0.29±0.09^aA	0.30±0.06^aA	0.29±0.08^aA	0.35±0.05^aA	0.25±0.11^aA
豆甾醇	CK	0.08±0.01^bB	0.16±0.02^aA	0.14±0.01^aA	0.17±0.01^aA	0.16±0.01^aA
	HT	0.16±0.02^bA	0.10±0.01^bB	0.14±0.02^aAB	0.16±0.02^aA	0.14±0.01^aAB
	CS	0.16±0.01^aA	0.16±0.01^aA	0.15±0.01^aA	0.17±0.03^aA	0.16±0.02^aA
	HT+CS	0.18±0.04^aA	0.16±0.01^aA	0.14±0.02^aA	0.17±0.01^aA	0.14±0.01^aA
β-谷甾醇	CK	0.72±0.06^bB	0.92±0.16^aA	0.79±0.06^aA	0.83±0.06^aA	0.80±0.13^aA
	HT	0.84±0.07^aA	0.78±0.02^bA	0.80±0.10^aA	0.84±0.13^aA	0.72±0.09^aB
	CS	0.80±0.07^abA	0.83±0.11^aA	0.75±0.07^aA	0.82±0.08^aA	0.78±0.07^aA
	HT+CS	0.81±0.16^aA	0.80±0.06^abA	0.69±0.11^aB	0.78±0.05^aAB	0.69±0.06^aB
注：不同小写字母表示同一贮藏期不同处理有显著差异（P<0.05）；不同大写字母表示相同处理在不同贮藏期有显著差异（P<0.05）；“−”表示未检测到物质；表2~表3同。

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表 2 不同处理对‘南丰蜜桔’冷藏过程表皮内蜡主要成分含量的影响

Table 2 Effects of different treatments on content of the main components in intracuticular wax of 'Nanfeng' mandarin during cold storage

化合物	处理	含量（μg/cm²）
化合物	处理	0 d	15 d	30 d	45 d	75 d
十八烷	CK	0.19±0.12^aA	0.02±0.00^aB	0.05±0.04^aB	0.02±0.00^bB	0.04±0.01^aB
	HT	0.16±0.05^aA	0.02±0.00^aB	0.06±0.03^aB	0.01±0.00^bB	0.03±0.02^aB
	CS	0.13±0.03^bA	0.03±0.01^aB	0.03±0.02^aAB	0.05±0.04^aB	0.07±0.03^aB
	HT+CS	0.10±0.03^bA	0.02±0.00^aB	0.05±0.04^aAB	0.01±0.00^bB	0.03±0.01^aB
二十烷	CK	0.26±0.17^aA	0.17±0.04^aA	0.04±0.01^aB	0.02±0.00^bB	0.17±0.16^aA
	HT	0.19±0.05^aA	0.07±0.02^bB	0.04±0.01^aB	0.03±0.00^bB	0.06±0.01^aB
	CS	0.21±0.03^aA	0.07±0.02^bB	0.07±0.02^aB	0.09±0.02^aB	0.11±0.03^aB
	HT+CS	0.15±0.06^bA	0.13±0.05^abA	0.07±0.01^aA	0.10±0.02^aA	0.06±0.01^aA
二十一烷	CK	0.21±0.04^aA	0.04±0.01^B	0.04±0.01^abB	0.13±0.11^aA	0.15±0.10^aA
	HT	−	−	0.02±0.01^bB	0.10±0.03^bA	0.12±0.03^aA
	CS	0.05±0.04^bB	−	0.04±0.01^abB	0.15±0.10^aA	0.07±0.00^aB
	HT+CS	−	−	0.05±0.01^aB	0.32±0.20^aA	0.12±0.05^aB
二十二烷	CK	0.17±0.05^aA	−	−	0.08±0.00^aB	−
	HT	0.20±0.07^aA	−	0.08±0.07^B	0.06±0.02^aB	−
	CS	0.20±0.02^aA	0.03±0.01^bB	−	−	−
	HT+CS	−	0.13±0.04^aA	−	0.03±0.00^bB	−
二十六烷	CK	0.04±0.02^bB	−	0.05±0.01^abB	0.06±0.02^bB	0.19±0.09^aA
	HT	0.16±0.04^abA	0.05±0.02^aB	0.09±0.03^abB	0.04±0.01^bB	0.06±0.00^aB
	CS	0.42±0.24^aA	0.08±0.02^aB	0.03±0.01^bB	0.06±0.01^bB	0.11±0.08^aB
	HT+CS	0.16±0.01^abB	0.06±0.03^aB	0.12±0.06^aB	0.29±0.07^aA	0.07±0.02^aB
二十七烷	CK	0.32±0.01^aA	0.15±0.02^abB	0.13±0.01^bB	−	−
	HT	0.10±0.02^aB	0.08±0.01^{c B}	0.14±0.03^bA	0.10±0.01^bB	0.08±0.01^bB
	CS	0.33±0.18^aA	0.18±0.00^aAB	0.04±0.03^{c B}	0.15±0.01^bAB	0.15±0.12^aAB
	HT+CS	−	0.11±0.04^{bc C}	0.25±0.02^aB	0.42±0.04^aA	−
二十九烷	CK	0.16±0.04^abB	0.12±0.02^bB	−	0.07±0.06^bB	0.41±0.38^aA
	HT	0.09±0.02^b	−	−	−	−
	CS	0.26±0.08^aA	0.20±0.02^aAB	−	0.08±0.03^bB	0.17±0.06^bAB
	HT+CS	0.10±0.04^bB	−	0.27±0.05^B	0.47±0.11^aA	−
三十烷	CK	0.19±0.05^abA	0.07±0.02^abB	0.06±0.02^aB	0.03±0.02^bB	−
	HT	0.10±0.03^{bc A}	0.05±0.02^bA	−	−	−
	CS	0.27±0.09^aA	0.11±0.03^aB	0.08±0.01^aB	−	0.09±0.05^B
	HT+CS	0.08±0.03^{c B}	0.05±0.01^bB	0.14±0.05^aB	0.30±0.04^aA	−
十六烷酸	CK	0.87±0.20^bA	0.75±0.22^abA	0.62±0.07^{bc A}	0.26±0.02^bB	0.66±0.15^bA
	HT	0.96±0.17^abA	1.04±0.30^abA	0.91±0.10^abA	0.76±0.09^aA	1.31±0.41^abA
	CS	0.69±0.24^bAB	0.65±0.11^bAB	0.40±0.06^{c B}	0.42±0.18^bB	0.84±0.10^abA
	HT+CS	1.32±0.07^aAB	1.24±0.18^aAB	0.98±0.22^aAB	0.81±0.21^aB	1.65±0.63^aA
亚油酸	CK	0.12±0.00^c	−	−	−	−
	HT	0.40±0.08^bABC	0.66±0.23^aA	0.47±0.06^aAB	0.32±0.08^aBC	0.16±0.06^aC
	CS	0.06±0.01^{c B}	0.14±0.02^bA	−	−	−
	HT+CS	0.56±0.00^aA	0.38±0.13^abB	0.27±0.05^{b C}	0.17±0.02^aC	0.16±0.05^aC
油酸	CK	0.09±0.00^bA	0.06±0.01^bA	0.08±0.01^{c A}	0.07±0.01^bA	0.12±0.06^bA
	HT	0.66±0.12^aAB	1.13±0.37^aA	0.67±0.06^aAB	0.54±0.17^aB	0.37±0.22^aB
	CS	0.05±0.02^bB	0.10±0.02^bAB	0.06±0.02^{c B}	0.05±0.02^bB	0.16±0.07^bA
	HT+CS	0.43±0.27^aAB	0.51±0.16^bA	0.38±0.06^bAB	0.14±0.02^bB	0.24±0.07^aAB
十八烷酸	CK	0.83±0.10^aA	0.78±0.22^abAB	0.36±0.01^aC	0.19±0.01^{b C}	0.47±0.20^bBC
	HT	0.60±0.05^bB	0.48±0.07^bBC	0.38±0.04^aBC	0.26±0.04^{b C}	0.95±0.24^aA
	CS	0.62±0.21^bAB	0.58±0.09^abAB	0.36±0.05^aB	0.29±0.10^bB	0.95±0.32^aA
	HT+CS	0.74±0.01^aAB	0.86±0.07^aAB	0.52±0.12^aB	0.48±0.10^aB	1.12±0.38^aA
2,3-二羟基十六酸丙酯	CK	0.16±0.02^aC	0.09±0.04^aB	0.05±0.00^aA	0.07±0.01^aBC	0.04±0.00^aA
	HT	0.06±0.01^bAB	0.07±0.02^aB	0.07±0.00^aAB	0.04±0.01^aA	0.04±0.00^aA
	CS	0.07±0.02^bA	0.05±0.01^aA	0.05±0.01^aA	0.07±0.02^aA	0.07±0.05^aA
	HT+CS	−	0.08±0.00^aA	0.05±0.02^aB	0.05±0.01^aB	0.04±0.01^aB
亚油酸乙酯	CK	−	0.02±0.01^bA	0.02±0.01^aA	−	0.04±0.03^aA
	HT	0.08±0.02^bA	0.12±0.04^aA	0.03±0.02^aB	0.02±0.01^B	0.01±0.00^aB
	CS	−	0.03±0.01^bA	−	−	0.02±0.00^aA
	HT+CS	0.15±0.02^aA	0.07±0.02^abB	0.04±0.01^aB	−	0.04±0.02^aB
角鲨烯	CK	−	0.05±0.02^a	−	−	−
	HT	0.06±0.00^aAB	0.08±0.01^aA	−	0.05±0.01^aB	−
	CS	−	−	−	−	−
	HT+CS	0.08±0.03^aA	0.11±0.04^aA	0.05±0.00^A	0.07±0.00^aA	−
菜油甾醇	CK	0.10±0.01^bB	0.12±0.05^aB	0.10±0.01^aB	0.11±0.00^aB	0.30±0.28^aA
	HT	0.13±0.03^abA	0.12±0.01^aA	0.12±0.04^aA	0.13±0.02^aA	0.13±0.02^aA
	CS	0.12±0.04^abA	0.11±0.02^aA	0.11±0.00^aA	0.13±0.02^aA	0.15±0.05^aA
	HT+CS	0.16±0.03^aA	0.12±0.02^aAB	0.11±0.00^aAB	0.17±0.06^aA	0.09±0.03^bB
豆甾醇	CK	0.07±0.02^aA	0.06±0.01^aA	0.06±0.00^aA	0.06±0.00^bA	0.07±0.03^aA
	HT	0.05±0.01^aA	0.05±0.00^aA	0.05±0.01^abA	0.07±0.01^bA	0.07±0.01^aA
	CS	0.05±0.01^aAB	0.05±0.01^aAB	0.04±0.00^bB	0.07±0.00^bAB	0.08±0.03^aA
	HT+CS	0.06±0.00^aA	0.05±0.01^aA	0.06±0.00^abA	0.09±0.01^aB	0.06±0.01^aA
β-谷甾醇	CK	0.20±0.04^aA	0.20±0.01^aA	0.23±0.01^aA	0.22±0.01^aA	0.21±0.02^aA
	HT	0.20±0.03^aB	0.20±0.01^aB	0.22±0.03^aAB	0.26±0.03^aAB	0.30±0.05^aA
	CS	0.19±0.04^aB	0.19±0.04^aB	0.18±0.00^bB	0.22±0.02^aAB	0.36±0.13^aA
	HT+CS	0.23±0.01^aBC	0.20±0.01^aC	0.22±0.02^aBC	0.29±0.05^aAB	0.32±0.02^aA
β-香树精	CK	0.22±0.08^aB	0.29±0.06^aB	0.41±0.04^aAB	0.40±0.03^aAB	0.64±0.23^abA
	HT	0.23±0.03^aA	0.32±0.06^aA	0.32±0.11^aA	0.35±0.04^aA	0.31±0.15^bA
	CS	0.25±0.06^aB	0.31±0.07^aB	0.28±0.04^aB	0.38±0.05^aB	0.76±0.23^aA
	HT+CS	0.28±0.04^aB	0.26±0.06^aB	0.34±0.03^aB	0.32±0.06^aB	0.47±0.04^abA

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表 3 不同处理对‘南丰蜜桔’冷藏过程表皮角质单体含量的影响

Table 3 Effects of different treatments on compositions in epidermal cutin monomer of 'Nanfeng' mandarins during cold storage

化合物	处理	含量（μg/cm²）
化合物	处理	0 d	15 d	30 d	45 d	75 d
1,4苯二甲酸	CK	0.69±0.13^bA	0.54±0.02^bB	0.11±0.00^bC	−	−
	HT	1.35±0.53^aA	0.61±0.02^aB	0.45±0.03^aB	0.07±0.04^B	−
	CS	0.71±0.03^bA	0.57±0.04^abA	0.30±0.11^abB	−	−
	HT+CS	0.66±0.06^bA	0.52±0.02^bA	0.20±0.13^bB	−	−
十六烷酸	CK	0.88±0.39^aA	0.43±0.05^aB	0.38±0.09^aB	0.38±0.09^aB	0.44±0.14^aB
	HT	0.82±0.15^aA	0.53±0.12^aAB	0.49±0.12^aAB	0.51±0.19^aAB	0.42±0.16^aB
	CS	0.72±0.16^aA	0.49±0.09^aAB	0.35±0.03^aB	0.41±0.09^aB	0.30±0.08^aB
	HT+CS	0.63±0.18^aA	0.45±0.10^aAB	0.35±0.06^aB	0.54±0.08^aAB	0.34±0.13^aB
十八烷酸	CK	0.43±0.11^abA	0.24±0.02^aB	−	−	−
	HT	0.55±0.15^aA	0.24±0.05^aB	0.25±0.08^aB	0.23±0.12^B	−
	CS	0.36±0.09^abA	0.25±0.04^aB	0.24±0.04^aB	−	−
	HT+CS	0.30±0.06^bA	0.20±0.04^aB	0.17±0.02^bB	−	0.15±0.04^B
辛酸	CK	−	−	−	−	0.06±0.01^a
	HT	−	−	−	0.08±0.01	−
	CS	−	−	−	−	0.05±0.00^b
	HT+CS	−	−	−	−	0.05±0.00^ab
壬酸	CK	−	−	−	−	−
	HT	−	−	−	−	0.06±0.02^a
	CS	0.07±0.01^aA	−	−	0.04±0.00^aB	0.04±0.01^aB
	HT+CS	0.10±0.02^aA	−	−	0.06±0.02^aAB	0.05±0.01^aB
α-亚麻酸	CK	−	−	−	−	−
	HT	−	−	−	−	−
	CS	−	−	−	−	−
	HT+CS	0.42±0.01	−	−	−	−
亚油酸	CK	−	−	−	−	−
	HT	−	−	−	−	−
	CS	−	−	−	−	−
	HT+CS	−	0.16±0.01	−	−	−

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参考文献(41)

[1]	WANG X, KONG L, ZHI P, et al. Update on cuticular wax biosynthesis and its roles in plant disease resistance[J]. International Journal of Molecular Sciences,2020,21(15):5514. doi: 10.3390/ijms21155514
[2]	BERHIN A, DE BELLIS D, FRANKE R B, et al. The root cap cuticle: A cell wall structure for seedling establishment and lateral root formation[J]. Cell,2019,176(6):1367−1378. doi: 10.1016/j.cell.2019.01.005
[3]	QIAO P, BOURGAULT R, MOHAMMADI M, et al. A maize LIPID TRANSFER PROTEIN may bridge the gap between PHYTOCHROME-mediated light signaling and cuticle biosynthesis[J]. Plant Signaling and Behavior,2020,15(9):e1790824. doi: 10.1080/15592324.2020.1790824
[4]	杨绿竹, 王馨雨, 王蓉蓉, 等. 柑橘果皮角质层及其对采后贮藏保鲜影响的研究进展[J]. 食品科学,2020,41(7):234−244. [YANG L Z, WANG X Y, WANG R R, et al. Progress in the knowledge of the cuticle of citrus fruits and its effect on postharvest fruit quality during storage[J]. Food Science,2020,41(7):234−244. doi: 10.7506/spkx1002-6630-20190324-300
[5]	宿胜男, 赵文启, 陈国刚, 等. 库尔勒香梨表皮蜡质组分的变化与其生理变化的关系[J]. 食品工业科技,2018,39(12):284−289. [SU S N, ZHAO W Q, CHEN G G, et al. Effects of changes in waxy components of Korla fragrant pear on its physiological changes[J]. Science and Technology of Food Industry,2018,39(12):284−289.
[6]	ZHANG Y, CHEN X B, DU Z H, et al. A proposed method for simultaneous measurement of cuticular transpiration from different leaf surfaces in Camellia sinensis[J]. Frontiers in Plant Science,2020,11:420. doi: 10.3389/fpls.2020.00420
[7]	LARA I, BELGE B, GOULAO L F. The fruit cuticle as a modulator of postharvest quality[J]. Postharvest Biology and Technology,2014,87:103−112. doi: 10.1016/j.postharvbio.2013.08.012
[8]	CHEN D, SUN Z Y, WU K S, et al. Dynamic changes in wax and cutin compounds and the relationship with water loss in 'Red Fuji' and 'Golden Delicious' apples during shelf life[J]. International Journal of Food Science and Technology,2021,56(12):6335−6344. doi: 10.1111/ijfs.15369
[9]	WANG Y, SU S, CHEN G, et al. Relationship between cuticular waxes and storage quality parameters of korla pear under different storage methods[J]. Journal of Plant Growth Regulation,2021,40:1152−1165. doi: 10.1007/s00344-020-10176-3
[10]	DING S H, ZHANG J, YANG L Z, et al. Changes in cuticle components and morphology of 'Satsuma' mandarin (Citrus unshiu) during ambient storage and their potential role on Penicillium digitatum infection[J]. Molecules,2020,25(2):412. doi: 10.3390/molecules25020412
[11]	ZHU M, JI J, WANG M, et al. Cuticular wax of mandarin fruit promotes conidial germination and germ tube elongation, and impairs colony expansion of the green mold pathogen, Penicillium digitatum[J]. Postharvest Biology and Technology,2020,169:111296. doi: 10.1016/j.postharvbio.2020.111296
[12]	徐呈祥, 郑福庆, 马艳萍, 等. 贮藏温度对耐贮性不同的柑橘品种果皮蜡质含量及其化学组成的影响[J]. 食品科学,2021,42(13):223−232. [XU C X, ZHENG F Q, MA Y P, et al. Effect of storage temperature on peel wax content and chemical composition of citrus cultivars with different storability[J]. Food Science,2021,42(13):223−232. doi: 10.7506/spkx1002-6630-20190617-167
[13]	徐呈祥, 吴秀兰, 马艳萍, 等. 贮藏温度对砂糖橘果皮表面结构及蜡质的影响[J]. 园艺学报,2019,46(6):1057−1067. [XU C X, WU X L, MA Y P, et al. Effect of storage temperature on the peel surface structure and wax content of 'Shatangju' mandarin (Citrus reticulate) fruit[J]. Acta Horticulturae Sinica,2019,46(6):1057−1067.
[14]	马亚琴, 贾蒙, 周心智. 柑橘采后贮藏保鲜技术研究进展[J]. 食品与发酵工业,2019,45(22):290−297. [MA Y Q, JIA M, ZHOU X Z. Research advances in postharvest preservation techniques of citrus fruits[J]. Food and Fermentation Industries,2019,45(22):290−297.
[15]	杨冲, 彭珍, 熊涛. 南丰蜜桔汁乳酸菌发酵过程中品质的变化[J]. 食品工业科技,2018,39(11):1−5,11. [YANG C, PENG Z, XIONG T. Quality changes of Nan Feng orange juice during lactic acid bacteria fermentation[J]. Science and Technology of Food Industry,2018,39(11):1−5,11.
[16]	KAHRAMANOLU B, CHEN C, CHEN Y, et al. Improving storability of ''Nanfeng'' mandarins by treating with postharvest hot water dipping[J]. Journal of Food Quality,2020,2020:1−12.
[17]	CHEN C, NIE Z, WAN C, et al. Preservation of xinyu tangerines with an edible coating using Ficus hirta vahl. fruits extract-incorporated chitosan[J]. Biomolecules,2019,9(2):46. doi: 10.3390/biom9020046
[18]	SILVA Y C R D, ALVES R M, SILVA B M P D, et al. Chitosan and hot water treatments reduce postharvest green mould in 'Murcott' tangor[J]. Journal of Phytopathology,2020,168(9):542−550. doi: 10.1111/jph.12932
[19]	江靖, 朱向荣, 苏东林, 等. 热激结合臭氧熏蒸对“涟红”蜜桔采后品质的影响[J]. 食品与机械,2018,34(12):120−123, 171. [JIANG J, ZHU X R, SU D L, et al. The effect on the postharvest qualities of 'Lianhong' citrus fruit by using heat shock combined with ozone fumigation[J]. Food and Machinery,2018,34(12):120−123, 171.
[20]	耿红兰, 刘亚平, 王晓闻, 等. 壳聚糖涂膜处理对冷藏砂糖橘冷害和品质影响[J]. 核农学报,2016,30(10):1952−1958. [GENG H L, LIU Y P, WANG X W, et al. Effect of chitosan treatments on storage quality and membrane lipid peroxidation of Shatangju under chilling temperature[J]. Journal of Nuclear Agricultural Sciences,2016,30(10):1952−1958. doi: 10.11869/j.issn.100-8551.2016.10.1952
[21]	LIU D C, LI Y, ZHENG Q, et al. Analysis of cuticular wax constituents and genes that contribute to the formation of 'glossy Newhall', a spontaneous bud mutant from the wild-type a navel 'Newhall' orange[J]. Plant Molecular Biology,2015,88(6):573−590. doi: 10.1007/s11103-015-0343-9
[22]	WANG J Q, LI S, LI X, et al. Regulation of cuticle formation during fruit development and ripening in 'Newhall' navel orange (Citrus sinensis Osbeck) revealed by transcriptomic and metabolomic profiling[J]. Plant Science,2016,243:131−144. doi: 10.1016/j.plantsci.2015.12.010
[23]	CAJUSTE J F, GONZÁLEZ-CANDELAS L, VEYRAT A, et al. Epicuticular wax content and morphology as related to ethylene and storage performance of 'Navelate' orange fruit[J]. Postharvest Biology and Technology,2010,55(1):29−35. doi: 10.1016/j.postharvbio.2009.07.005
[24]	PALMA A, AQUINO S D, VANADIA S, et al. Cold quarantine responses of 'Tarocco' oranges to short hot water and thiabendazole postharvest dip treatments[J]. Postharvest Biology and Technology,2013,78:24−33. doi: 10.1016/j.postharvbio.2012.12.002
[25]	XU D, QIN H R, REN D. Prolonged preservation of tangerine fruits using chitosan/montmorillonite composite coating[J]. Postharvest Biology and Technology,2018,143:50−57. doi: 10.1016/j.postharvbio.2018.04.013
[26]	DONG X, RAO J, HUBER D J, et al. Wax composition of 'Red Fuji' apple fruit during development and during storage after 1-methylcyclopropene treatment[J]. Horticulture, Environment, and Biotechnology,2012,53(4):288−297. doi: 10.1007/s13580-012-0036-0
[27]	WANG J Q, HAO H H, Liu R S, et al. Comparative analysis of surface wax in mature fruits between Satsuma mandarin (Citrus unshiu) and 'Newhall' navel orange (Citrus sinensis) from the perspective of crystal morphology, chemical composition and key gene expression[J]. Food Chemistry,2014,153:177−185. doi: 10.1016/j.foodchem.2013.12.021
[28]	王敏力, 刘德春, 杨莉, 等. 不同种类柑橘的蜡质结构与成分比较[J]. 园艺学报,2014,41(8):1545−1553. [WANG M L, LIU D C, YANG L, et al. Comparative analysis of different citrus wax morphological structure and composition[J]. Acta Horticulturae Sinica,2014,41(8):1545−1553.
[29]	LIU D C, MA Q L, YANG L, et al. Comparative analysis of the cuticular waxes and related gene expression between 'Newhall' and 'Ganqi 3' navel orange during long-term cold storage[J]. Plant Physiology and Biochemistry,2021,167:1049−1060. doi: 10.1016/j.plaphy.2021.09.032
[30]	YIN Y, BI Y, CHEN S J, et al. Chemical composition and antifungal activity of cuticular wax isolated from Asian pear fruit (cv. Pingguoli)[J]. Scientia Horticulturae,2011,129(4):577−582. doi: 10.1016/j.scienta.2011.04.028
[31]	张静, 丁胜华, 谢秋涛, 等. 温州蜜柑和冰糖橙果实表面角质层组分及微观结构差异分析[J]. 食品科学,2018,39(7):131−138. [ZHANG J, DING S H, XIE Q T, et al. Analysis of cuticle components and microstructure of Satsuma mandarin (Citrus unshiu Marc.) and Bingtang sweet orange (Citrus sinensis Osbeck)[J]. Food Science,2018,39(7):131−138. doi: 10.7506/spkx1002-6630-201807020
[32]	TRIVEDIA P, NGUYENA N, KLAVINS L, et al. Analysis of composition, morphology, and biosynthesis of cuticular wax in wild type bilberry (Vaccinium myrtillus L.) and its glossy mutant[J]. Food Chemistry,2021,354:129517. doi: 10.1016/j.foodchem.2021.129517
[33]	YANG Y Q, ZHOU B, WANG C, et al. Analysis of the inhibitory effect of 1-methylcyclopropene on skin greasiness in postharvest apples by revealing the changes of wax constituents and gene expression[J]. Postharvest Biology and Technology,2017,134:87−97. doi: 10.1016/j.postharvbio.2017.08.013
[34]	李湘, 江靖, 李高阳, 等. GC-IMS结合化学计量学分析不同采后处理对柑橘果皮挥发性化合物的影响[J]. 食品科学,2021,42(20):128−134. [LI X, JIANG J, LI G Y, et al. GC-IMS combined with chemometrics to analyze the effects of different post harvest treatments on citrus peel volatile compounds[J]. Food Chemistry,2021,42(20):128−134. doi: 10.7506/spkx1002-6630-20200808-110
[35]	王金秋, 何义仲, 徐坤洋, 等. 三种类型柑橘成熟果实表面蜡质分析[J]. 中国农业科学,2016,49(10):1936−1945. [WANG J Q, HE Y Z, XU K Y, et al. Characterization of mature fruit surface waxes of three cultivated citrus species[J]. Scientia Agricultura Sinica,2016,49(10):1936−1945. doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2016.10.010
[36]	DING S H, ZHANG J, WANG R R, et al. Changes in cuticle compositions and crystal structure of ‘Bingtang’ sweet orange fruits (Citrus sinensis) during storage[J]. International Journal of Food Properties,2018,21(1):2411−2427. doi: 10.1080/10942912.2018.1528272
[37]	NAZIRI E, MANTZOURIDOU F, TSIMIDOU M. Enhanced squalene production by wild-type Saccharomyces cerevisiae strains using safe chemical means[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry,2011,59(18):9980−9989. doi: 10.1021/jf201328a
[38]	BELGE B, GOULAO L F, COMABELLA E, et al. Postharvest heat and CO₂ shocks induce changes in cuticle composition and cuticle-related gene expression in 'October Sun' peach fruit[J]. Postharvest Biology and Technology,2019,148:200−207. doi: 10.1016/j.postharvbio.2018.11.005
[39]	RIIKKA J, MIKA K, HEIKKI K. Cutin composition of selected northern berries and seeds[J]. Food Chemistry,2010,122:137−144. doi: 10.1016/j.foodchem.2010.02.030
[40]	MARGA F, PESACRETA T C, HASENSTEIN K H. Biochemical analysis of elastic and rigid cuticles of Cirsium horridulum[J]. Planta,2001,213(6):841−848. doi: 10.1007/s004250100576
[41]	张静, 王蓉蓉, 单杨, 等. 冷藏过程中温州蜜柑角质层组分变化及其对指状青霉生长的影响[J]. 食品科学,2019,40(1):233−239. [ZHANG J, WANG R R, SHAN Y, et al. Change of cuticle components in mature Satsuma mandarin fruits (Citrus unshiu) during cold storage and their effects on the growth of Penicillium digitatum[J]. Food Science,2019,40(1):233−239. doi: 10.7506/spkx1002-6630-20170928-411