Effects of Different Temperatures on Storage Quality and Enzyme Activities of Fritillaria thunbergii Miq from the Soil
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摘要: 为了探讨不同贮藏温度对离土浙贝母贮藏品质以及酶活性的影响，以浙贝母为试材，将浙贝母分别置于0、5、10和20 ℃四个温度下贮藏90 d，研究浙贝母在不同贮藏温度下的失重、感官品质、色泽、硬度、总多糖、生物碱、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量、多酚氧化酶（polyphenol oxidase，PPO）、过氧化物酶（peroxidase，POD）以及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性的变化。结果表明：贮藏90 d，0 ℃贮藏的浙贝母失重率仅为7.17%，显著低于5、10和20 ℃（9.92%、19.77%和30.28%）（P<0.05）；与5、10和20 ℃相比，0 ℃贮藏更好地保持浙贝母的色泽、硬度、总多糖含量以及总生物碱含量；与5、10和20 ℃相比，0 ℃贮藏有效抑制了MDA含量上升，延缓了浙贝母鳞茎的衰老进程；同时0 ℃贮藏有效抑制了多酚氧化酶和过氧化物酶活力，而且有利于SOD维持较高的活性。与5、10和20 ℃相比，0 ℃贮藏的浙贝母品质保持得最好。本研究为浙贝母离土贮藏提供了方法参考及理论依据。Abstract: In order to investigate the effects of different storage temperatures on the storage quality and enzyme activities of Fritillaria thunbergii Miq from the soil, which were stored at 0, 5, 10 and 20 ℃ for 90 d. The changes in weight loss, sensory quality, color, hardness, total polysaccharides, alkaloids, malondialdehyde (MDA) contents, polyphenol oxidase (PPO), peroxidase (POD) and superoxide dismutase (SOD) activities of Fritillaria thunbergii Miq were explored at different storage temperatures. The results showed that the weight loss rate of Fritillaria thunbergii Miq at 0 ℃ for 90 d was only 7.17%, which was significantly lower than that at 5, 10 and 20 ℃ (9.92%, 19.77% and 30.28%) (P<0.05). The color, hardness, total polysaccharide content and total alkaloid content of Fritillaria thunbergii Miq were better maintained at 0 ℃ storage compared with 5, 10 and 20 ℃. The increment of MDA content was effectively inhibited at 0 ℃ storage, thus delaying the aging process of Fritillaria thunbergii Miq bulb. Meanwhile, the activities of PPO and POD were effectively inhibited and the maintenance of higher SOD activity at 0 ℃ storage. Compared with 5, 10 and 20 ℃, the quality of Fritillaria thunbergii Miq was best maintained in 0 ℃ storage. Thus, this study provides a methodological reference and a theoretical basis for the off-soil storage of Fritillaria thunbergii Miq.
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浙贝母（Fritillaria thunbergii Miq）系百合科、贝母属中一种多年生草本植物，原产于浙江宁波象山，主产地在浙江且在浙江省的种植面积占全国总面积的90%，产值近9亿元[1]。浙贝母中主要含有生物碱、多糖、皂苷和挥发性成分[2]，具有镇痛止咳[3−4]、抗炎抑菌抗氧化和抗癌抗肿瘤等功效[2,5−6]，它不仅作为传统中药，还用做功能性食品[7]，如浙贝母含有20%的直链淀粉，在加工过程中极易转化成对人体有益的抗性淀粉，对人体肠道有益。
浙贝母采收季节通常在每年的5月份，此季节多阴雨天气且室内外温度较高，而且采后其鳞茎水分含量较高，酶活性较强并且生理代谢旺盛，当被采收离开土地后其贮藏期会变得非常短暂，很容易发霉变质。经查阅文献发现，目前还没有关于采后浙贝母贮藏方式的研究。传统上，大多采用将浙贝母种鳞茎留地或土埋的方法进行贮藏，以防止贮藏期间其鳞茎发生腐烂。但该方法操作繁琐、受气候和储藏环境影响较大，容易造成浙贝母鳞茎的品质损失。研究表明，低温贮藏可以有效延长采后农产品的贮藏期[8−9]。其中，贮藏温度是农产品保持良好品质的重要条件，不当的贮藏温度会对农产品的品质和货架期产生不良的影响[10−11]。低温贮藏一直是延缓果蔬成熟和腐烂的有效技术，其在秋葵[12]以及杏鲍菇[13]等农产品中应用广泛。但是，目前还没有关于离土浙贝母低温贮藏的报道。果蔬类农产品对温度敏感，贮藏温度过高保鲜效果不明显，而温度过低会对果蔬产生冷害并引起生理紊乱，确定适宜的贮藏温度对保持离土浙贝母的品质和减少采后损失具有重要的意义。
因此，本文以成熟的浙贝母鳞茎为材料，采用0、5、10、20 ℃四个贮藏温度，来比较在不同贮藏温度条件下浙贝母的理化品质如失重、色泽、硬度、总生物碱含量、总多糖含量、过氧化物酶（POD）活性、多酚氧化酶（PPO）活性以及超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化，以选择出浙贝母的最佳贮藏温度解决其离土贮藏困难的问题，为下一步浙贝母的贮藏保鲜奠定基础。
1. 材料与方法
1.1 材料与仪器
浙贝母鲜鳞茎 取自宁波市海曙区章水镇浙贝母种植基地，取样时间为2022年5月，室外温度30 ℃，采购后运回实验室进行贮藏实验；总生物碱含量试剂盒、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）试剂盒、丙二醛（malondialdehyde，MDA）试剂盒、过氧化物酶（peroxidase，POD）试剂盒和多酚氧化酶（polyphenol oxidase，PPO）试剂盒 均购自苏州格锐思生物科技有限公司；甲醇、无水乙醇 分析纯，上海凌峰化学试剂有限公司；三氯甲烷 分析纯，杭州高晶精细化工有限公司；木瓜蛋白酶（100000 U/g） 食品级，东恒华道生物科技有限公司；苯酚 分析纯，上海克林生化科技有限公司。
ReadMax 1900/1900Pus型酶标仪 上海闪谱生物科技有限公司；Spectrumlab紫外可见分光光度计 上海力申科学仪器有限公司；125D-1CN型十万分之一电子分析天平 德国Sartorius公司；VS10-300C型超声波清洗器 沃信仪器制造有限公司；DK-S24型电热恒温水浴锅 上海精宏实验设备有限公司；TA.XT plus质构仪 北京鑫奥依克光电技术有限公司；Frontier™ 5000型微量高速离心机 美国Ohaus；X-Rite CI60色差仪 爱色丽（上海）色科技有限公司。
1.2 实验方法
将浙贝母分为12组，每组30个，分别放置在0、5、10和20 ℃条件下贮藏，贮藏前对其硬度、色泽、总生物碱含量、总多糖含量、MDA含量、POD、PPO以及SOD的活性进行测定。之后每15 d从四个温度梯度中各随机挑选30个浙贝母对其理化性质进行测定，测定周期为90 d。
1.2.1 失重率测定
采用差量法计算。按照下式计算失重率[14]。
失重率(%)=(m1−m2)/m1×100 (1) 式中：m1—贮藏前样品质量，g，m2—贮藏后样品质量，g。
1.2.2 感官评价
取样后，对浙贝母进行感官评定。评定时，品评人员对浙贝母的色泽、气味、组织饱满度以及霉变程度4个方面进行评价，最后通过统计总分进行分析。各项指标分别为好、较好、一般、较差和差5个等级，分值分别为10、8、6、4、2分，满分40分。分数在32~40表示产品质量较好；分数在24~32，表示产品质量良好，无明显变化；感观评分低于16分产品品质发生明显变化，达到货架期终点。由20名品评人员（男女各半）作为感官评价小组，对浙贝母进行感官评价，具体标准见表1。
表 1 浙贝母感官评价标准Table 1. Criteria for sensory evaluation of Fritillaria thunbergii Miq果皮色泽（10分） 气味（10分） 组织饱满度（10分） 霉变程度（10分） 色泽正常，表面富有光泽
9～10分固有清香味，很浓
9～10分组织饱满
9～10分无霉变
9～10分色泽正常，表面有光泽
7～8分固有清香味，较浓
7～8分组织较为饱满
7～8分基本无霉变
7～8分色泽稍暗淡，表皮稍有光泽
5～6分略带异味
5～6分组织略有萎蔫
5～6分略有霉变5～6分 色泽较暗淡，表皮无光泽
3～4分清香味消失，有腐败味和泥臭味
3～4分组织萎蔫
3～4分有霉变
3～4分色泽暗淡，表皮无光泽
1～2分有强烈的腐败味和泥臭味
1～2分组织严重萎蔫
1～2分严重霉变1～2分 1.2.3 色泽分析
从每组样品中随机选取10个浙贝母，然后将其切开，使用X-Rite CI60色差仪对其果皮的六个部位（上、下、前、后、左和右）的色差进行测定，每个部位测定三次，其中L*值表示明度，L*值越大，表示亮度越大；a*值正数代表红色，负数代表绿色；b*值正数代表黄色，负数代表蓝色，色泽测定选在相同自然灯光下进行。
1.2.4 硬度分析
采用TA.XT质构仪测定各处理组浙贝母硬度。样品前处理：随机挑选10个直径为5 cm左右的无损浙贝母，洗净晾干，分别在头部、中部和尾部选取平整处进行测试。探头选择：选用直径2 mm的P/2圆柱形探头。参数设定：设置参数为测试前速度1 mm/s，测试速度5 mm/s，测试后速度5 mm/s，位移10 mm。每个样品进行6次重复，取平均值。
1.2.5 总多糖含量测定
总多糖含量的测定根据汪少华等[15]的方法并稍加修改。
标准曲线绘制：准确称取105 ℃烘干至恒重的葡萄糖标准品10.00 mg于100 mL容量瓶中。分别吸取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00 mL葡萄糖标准溶液，用蒸馏水补至1.00 mL，先后加入1.00 mL 5%苯酚、5.00 mL浓硫酸，摇匀冷却，室温放置20 min后于490 nm波长测定其吸光度值。以吸光度值为纵坐标，以葡萄糖浓度为横坐标，绘制标准曲线。回归方程y=0.85824x+0.04438，决定系数R2=0.9981。
总多糖含量的测定：吸取多糖溶液1.00 mL，然后依次加入1.00 mL的5%的苯酚溶液、5.00 mL的浓硫酸，摇匀冷却，室温放置20 min后于490 nm波长测定其吸光度值。根据标准曲线计算多糖含量。
1.2.6 总生物碱含量、丙二醛（MDA）含量、多酚氧化酶（PPO）活性、过氧化物酶（POD）活性和超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定
测定时将浙贝母组织切碎，称取约0.20 g组织于5 mL试管中，加入2 mL提取液冰浴匀浆，4 ℃下离心（10000 r/min）10 min，保留上清液，然后根据试剂盒说明进行操作。分别测定其SOD活性、POD活性、PPO活性、总生物碱含量和MDA含量，每个样品重复3次，结果取平均值。
1.3 数据处理
采用Origin 2021软件进行数据计算和作图，使用SPSS 17.0软件进行方差分析和多重比较。
2. 结果与分析
2.1 不同贮藏温度对浙贝母失重率的影响
失重率是衡量浙贝母贮藏品质的重要指标，失重主要是由于浙贝母水分的蒸腾作用以及呼吸作用消耗体内营养物质造成的。失重率达到一定程度时，会导致浙贝母萎蔫，影响其药用价值[16]。贮藏期间浙贝母失重率变化见图1。
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图1结果显示，贮藏温度对浙贝母失重有显著影响（P<0.05），表现为温度愈高，重量损失愈大。如图1所示，随着贮藏时间的增加，浙贝母失重率不断增加，贮藏到90 d时0和5 ℃浙贝母失重率分别为6.84%和10.25%，而10、20 ℃条件下的浙贝母失重率分别达到19.77%和30.28%，10和20 ℃条件下浙贝母失重率变化明显。方差分析表明，0 ℃与5、10、20 ℃差异显著（P<0.05）。在整个贮藏过程中0 ℃条件下浙贝母的失重最小，品质保持得最好。这也进一步说明了0 ℃低温贮藏环境对浙贝母保鲜效果更佳。
2.2 不同贮藏温度对浙贝母感官评分的影响
果皮色泽、气味、组织饱满度以及霉变程度能反映出贮藏期间浙贝母品质的变化。浙贝母在不同贮藏条件下感官评分变化如图2所示。从图中可以看出，浙贝母在20 ℃条件下可以贮藏45 d，10 ℃条件可以贮藏60 d，而0和5 ℃条件下贮藏90 d其品质依然饱满无变质。不同贮藏条件下的浙贝母感官评分均随贮藏时间的延长而降低，然而四个贮藏条件下浙贝母感官品质变化存在着明显差异，与5、10和20 ℃相比，0 ℃下的浙贝母感官变化相对较平稳。贮藏至75 d时，20 ℃条件下的浙贝母感官评分已经低于14分，而且表皮已经发生严重的霉变，可见其品质已经严重劣变，丧失了药用和经济价值。而贮藏至90 d时，0 ℃的感官评分为28分，其品质状态良好。方差分析表明，在贮藏过程中，0 ℃与5、10和20 ℃具有显著性差异（P<0.05）。可见0 ℃条件可以更好地保持浙贝母的感官品质，从而延长其货架期。
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图 2 不同贮藏温度下浙贝母感官评分变化Figure 2. Changes in sensory scores of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperatures2.3 不同贮藏温度对浙贝母色泽的影响
如图3所示，三个图（a、b、c）展示了不同贮藏温度下浙贝母色泽L*、a*、b*的变化趋势，从图中可以看出三个指标的变化趋势有所差异。其中L*值呈现下降的趋势，贮藏前浙贝母皮的L*值为54.60，在前45 d四个温度下浙贝母的L*值下降较快，后期L*值变化缓慢。其中10和20 ℃下贮藏的浙贝母果皮亮度变化明显。方差分析表明，0 ℃与5 ℃有显著性差异（P<0.05），与10和20 ℃具有极显著性差异（P<0.01）。图3b中，四种条件下的浙贝母a*值呈上升趋势，与贮藏时间成正相关。贮藏15 d后，10和20 ℃条件下的a*值明显高于0和5 ℃。表明贮藏温度越高，浙贝母果皮颜色向红方向变化越快。方差分析显示，0 ℃与5 ℃的a*值变化基本无显著性差异（P>0.05），与10和20 ℃具有显著性差异（P<0.05）。图3c显示，四个贮藏温度下的浙贝母的b*值均呈下降趋势。浙贝母常年生长在泥土里，贮藏前其果皮呈现黄色或淡黄色，而随着贮藏时间的不断延长，浙贝母水分丧失愈加严重并且出现不同程度的霉变，导致浙贝母的表皮颜色变黑变暗，黄色逐渐衰退，因此b*值不断下降。其中10和20 ℃变化较0和5 ℃明显（P<0.05），说明温度越高，浙贝母水分损失越大，浙贝母细胞壁遭受破坏严重，增加了果皮的自身色素的氧化分解，从而导致b*值下降[17]。由此可知，0 ℃贮藏可以有效抑制浙贝母色泽的变化从而具有良好的保鲜效果。
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图 3 不同贮藏温度下浙贝母色泽变化Figure 3. Changes in color of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperatures2.4 不同贮藏温度对浙贝母硬度的影响
硬度是评价果蔬品质的重要指标，可以客观反映果蔬的成熟状态和品质状态。不同贮藏温度下浙贝母的硬度变化见图4。如图4所示，贮藏过程中，浙贝母硬度呈不断下降的趋势。贮藏前15 d，0和5 ℃条件下浙贝母硬度与贮藏前相比无明显变化，而10和20 ℃条件下变化较为明显，可能是因为低温环境抑制其呼吸作用，降低其新陈代谢，从而更好地维持了浙贝母的硬度。在整个贮藏过程中，0 ℃条件下浙贝母的硬度始终大于其它贮藏条件。方差分析表明，贮藏过程中，0 ℃与5、10和20 ℃具有显著性差异（P<0.05），原因可能是低温环境抑制了浙贝母机体水分的流失，以及蛋白质、多糖等大分子成分的降解，更好地抑制了机体的萎蔫软化并且更好地保持细胞壁的张力，从而更有利于其硬度的保持。
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图 4 不同贮藏温度下浙贝母硬度变化Figure 4. Changes in hardness of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperatures2.5 不同贮藏温度对浙贝母总多糖含量的影响
多糖是浙贝母中公认的有效成分之一，浙贝母多糖有良好的清除体外自由基的作用，具有较好的抗氧化功效[1−2]，是中草药研究的重点。如图5示，浙贝母多糖含量呈现先增加后减少的趋势，前30 d，随着贮藏时间的增加多糖含量呈增加的趋势，贮藏至30 d时，四种温度下的浙贝母多糖含量比贮藏前分别增加了39.70%、40.44%、26.97%和36.41%。可能原因是浙贝母从室外高温环境转入室内后，其相对较低的温度有助于解除浙贝母的休眠[18]，从而促进了多糖的合成。在贮藏30 d后，多糖含量随之减少且贮藏温度越高多糖含量减少越多，并且贮藏至90 d时，在10和20 ℃下贮藏的浙贝母多糖含量低于贮藏前。可能因为浙贝母在10和20 ℃条件下呼吸作用强；另外，由感官评价可知，贮藏温度高更有利于霉菌等微生物的滋生，其在生长过程中以多糖作为营养物质，从而导致多糖含量下降[19]。
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图 5 不同贮藏温度下浙贝母多糖含量变化Figure 5. Changes in polysaccharide content of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperatures2.6 不同贮藏对浙贝母总生物碱含量的影响
生物碱是存在于生物体内的含氮有机化合物，大多数存在于植物中。浙贝母中的生物碱，如贝母素甲、贝母素乙、西贝素苷以及蒲贝酮碱等甾体生物碱能够镇痛止咳，而且贝母素甲和贝母素乙还具有抗肿瘤功效[20−21]。不同贮藏温度条件下浙贝母的总生物碱含量变化见表2。
表 2 不同贮藏温度下浙贝母总生物碱含量变化Table 2. Changes in total alkaloid content of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperatures贮藏时间
（d）总生物碱含量（mg/g） 0 ℃ 5 ℃ 10 ℃ 20 ℃ 0 0.25±0.01Ga 0.25±0.01Fa 0.26±0.04Ga 0.25±0.02Fa 15 0.86±0.01Fc 1.00±0.01Eb 0.56±0.02Ed 1.73±0.04Aa 30 1.54±0.00Da 1.25±0.00Db 0.41±0.03Fd 0.43±0.01Ec 45 1.19±0.00Ed 1.90±0.00Ca 1.52±0.02Dc 1.61±0.00Bb 60 2.11±0.01Ca 1.25±0.00Db 2.08±0.00Aa 1.00±0.03Dc 75 3.44±0.01Aa 2.42±0.02Ab 1.71±0.00Cc 1.56±0.01Cd 90 3.13±0.00Ba 1.98±0.03Bb 1.79±0.01Bc 1.55±0.01Cd 注：同一行中，不同小写字母表示有显著性差异，P<0.05；同一列中，不同大写字母表示有显著性差异，P<0.05。 如表2所示，随着贮藏时间的不断增加，浙贝母总生物碱含量整体上呈不断增加的趋势，不同贮藏时间和贮藏温度下的生物碱含量具有显著性差异（P<0.05）。与贮藏前相比，在0、5、10和20 ℃条件下贮藏90 d，浙贝母总生物碱含量分别增加了12.36、7.82、7.08和6.14倍。浙贝母在贮藏期间总生物碱含量呈不断上升的趋势，可能原因是低温环境促进了浙贝母休眠期的解除，使其活性恢复[18]。浙贝母适宜的生长温度是20～25 ℃[22]，贮藏在20 ℃条件下的浙贝母在贮藏15 d后有芽体产生，其总生物碱含量显著高于0、5和10 ℃贮藏条件下的浙贝母（P<0.05）。低温环境抑制了浙贝母的活性，贮藏在10和20 ℃条件下浙贝母优先发芽，因此在贮藏前期总生物碱含量较高。在贮藏后期，0和5 ℃条件下的总生物碱显著高于10和20 ℃条件下的总生物碱含量（P<0.05），因为10和20 ℃贮藏条件下温度相对较高，浙贝母在此贮藏条件下长时间贮藏，过多的失重和不同程度的发霉变质导致浙贝母生理活性减弱，总生物碱含量不断下降。
2.7 不同贮藏温度对浙贝母丙二醛含量的影响
丙二醛（malondialdehyde，MDA）是由于生物体感官衰老或逆环境条件下受伤害，其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的，是细胞衰老的一种表现[23]。如图6可知，贮藏前15 d浙贝母MDA含量变化不明显，其中20 ℃含量最高，达到了2.47 nmol/g，比贮藏前增加了0.75 nmol/g。贮藏到90 d时，10和20 ℃的浙贝母MDA值分别是贮藏前的3.15和3.78倍。随着贮藏时间增加浙贝母MDA含量不断增加，且表现为温度越高增加的越多，主要原因是在贮藏过程中浙贝母组织腐烂变质从而导致MDA含量升高，并且贮藏温度越高加剧了浙贝母膜脂过氧化[24]。MDA作为膜脂过氧化的最终产物，其含量的增加能够抑制细胞保护酶活性和降低抗氧化物的含量，加剧膜脂的过氧化，从而加速浙贝母组织的衰老进程[24]。方差分析表明，0 ℃与10和20 ℃具有极显著性差异（P<0.01），与5 ℃有显著性差异（P<0.05），在整个贮藏过程中0 ℃贮藏条件下浙贝母的MDA含量最低、且变化较为平稳，表明0 ℃贮藏条件有效延缓浙贝母组织的衰老进程，有利于新鲜状态的保持。
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图 6 不同贮藏温度下浙贝母丙二醛（MDA）含量变化Figure 6. Changes in malondialdehyde content of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperatures2.8 不同贮藏温度对浙贝母多酚氧化酶和过氧化物酶活性影响
PPO是一种含铜氧化酶，能够催化酚类与O2氧化成醌类，使组织形成褐变，是引起浙贝母褐变的主要原因之一[25]。如图7a所示，不同贮藏温度下的浙贝母PPO活性呈现先下降后上升的趋势，且低温环境明显抑制了多酚氧化酶活性。在贮藏前15 d，PPO活性呈略微的下降趋势，原因可能是浙贝母从室外高温的环境转移到低温环境条件下，机体受到低温刺激而产生应激反应，该趋势与徐莉等[26]研究的在不同温度条件下枇杷的PPO活性变化趋势相一致。而从贮藏15 d到90 d PPO活性不断升高，贮藏温度愈高PPO活性也越高，可能是因为高温胁迫造成浙贝母组织结构和功能丧失，使结合态PPO转变为游离态，从而使其活性增大[27]。方差分析表明，0和5 ℃无显著性差异（P>0.05），但0 ℃条件下PPO活性保持得更低。由此可知，0 ℃较好地抑制了浙贝母的PPO活性，有利于浙贝母的贮藏保鲜。
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图 7 不同贮藏温度下浙贝母多酚氧化酶（a）和过氧化物酶酶（b）活性变化Figure 7. Changes in polyphenol oxidase activity (a) and peroxidase activity (b) of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperaturesPOD活性与果蔬等的成熟和衰老密切相关，其活性增加代表着果蔬进入衰老阶段，成熟度增加，褐变增加[28]。如图7b所示，浙贝母的POD变化呈先降低后增加的趋势，该趋势与杨光等[29]的研究结果相一致。贮藏前15 d可能是浙贝母受到低温的刺激而导致POD活性有所下降。15～30 d POD活性迅速增加。贮藏到60 d时10和20 ℃条件下浙贝母POD活性达到最大值，其中20 ℃的POD活性最高，是贮藏前的2.49倍。
2.9 不同贮藏温度对超氧化物歧化酶活性的影响
超氧化物歧化酶是一类金属酶,它可以清除组织中活性氧，维持活性氧的代谢平衡，防止细胞遭受超氧阴离子自由基的毒害，保护细胞膜结构的完整和正常生理功能[30]。由图8可知，浙贝母的SOD活性呈先上升后下降的趋势，该变化趋势与李志刚等[13]的研究相一致。贮藏前期（45 d），四个贮藏温度下的浙贝母SOD活性不断增大，其活性分别比贮藏前提高了15.35%、11.31%、14.03%和15.82%，而且在此时10和20 ℃下的浙贝母SOD活性以达到最大值，这在保护细胞以及延缓细胞衰老发挥了重要作用。上升原因可能是浙贝母从室外高温被转移到室内低温条件下进行贮藏，环境条件的改变使SOD被激活以抵御外界环境对浙贝母品质的破坏[31]。达到峰值之后，SOD活性开始下降，可能是在贮藏期间细胞内的活性氧含量不断升高，细胞内自由基清除系统被破坏，从而导致SOD活性下降[32]。与5、10和20 ℃相比，0 ℃条件下的浙贝母SOD活性保持得更高且变化较为平稳。可见，低温可以较好地保持SOD活性，减少超氧阴离子自由基对组织和细胞的破坏。
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图 8 不同贮藏温度下浙贝母超氧化物歧化酶活性变化Figure 8. Changes in superoxide dismutase activity of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperatures3. 结论
从实验结果可知，不同的贮藏温度对浙贝母的感官品质、酶活性、多糖含量以及总生物碱含量有显著的影响，并且在0 ℃条件下浙贝母的各项生理生化指标保持的更加稳定。0 ℃有效抑制了脂膜氧化产物丙二醛含量以及多酚氧化酶和过氧化物酶酶活性的上升，从而延缓了浙贝母的衰老和腐败进程。与10和20 ℃相比，0 ℃可以显著减少贮藏过程中的浙贝母的失重（P<0.05），更好地保持浙贝母的色泽和硬度，从而使其在贮藏过程中保持有更好的感官和质地。在贮藏过程中，四个贮藏温度下的浙贝母超氧化物歧化酶活性和总多糖含量均呈先上升后下降的趋势，但是与其他贮藏条件相比，0 ℃更好地保持了SOD的活性，从而使浙贝母在贮藏期间保持较稳定的氧自由基清除能力从而抑制其脂膜氧化进程，并且有效抑制了总多糖含量的降低从而减少浙贝母的药用成分的损失。
综上，适宜的低温环境可以有效地提高浙贝母的保鲜效果，延长浙贝母的贮藏期。本实验为解决浙贝母离土贮藏困难的问题，以及下一步浙贝母的贮藏保鲜研究奠定基础。
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图 2 不同贮藏温度下浙贝母感官评分变化
Figure 2. Changes in sensory scores of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperatures
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图 3 不同贮藏温度下浙贝母色泽变化
Figure 3. Changes in color of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperatures
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图 4 不同贮藏温度下浙贝母硬度变化
Figure 4. Changes in hardness of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperatures
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图 5 不同贮藏温度下浙贝母多糖含量变化
Figure 5. Changes in polysaccharide content of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperatures
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图 6 不同贮藏温度下浙贝母丙二醛（MDA）含量变化
Figure 6. Changes in malondialdehyde content of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperatures
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图 7 不同贮藏温度下浙贝母多酚氧化酶（a）和过氧化物酶酶（b）活性变化
Figure 7. Changes in polyphenol oxidase activity (a) and peroxidase activity (b) of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperatures
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图 8 不同贮藏温度下浙贝母超氧化物歧化酶活性变化
Figure 8. Changes in superoxide dismutase activity of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperatures
表 1 浙贝母感官评价标准
Table 1 Criteria for sensory evaluation of Fritillaria thunbergii Miq
果皮色泽（10分） 气味（10分） 组织饱满度（10分） 霉变程度（10分） 色泽正常，表面富有光泽
9～10分固有清香味，很浓
9～10分组织饱满
9～10分无霉变
9～10分色泽正常，表面有光泽
7～8分固有清香味，较浓
7～8分组织较为饱满
7～8分基本无霉变
7～8分色泽稍暗淡，表皮稍有光泽
5～6分略带异味
5～6分组织略有萎蔫
5～6分略有霉变5～6分 色泽较暗淡，表皮无光泽
3～4分清香味消失，有腐败味和泥臭味
3～4分组织萎蔫
3～4分有霉变
3～4分色泽暗淡，表皮无光泽
1～2分有强烈的腐败味和泥臭味
1～2分组织严重萎蔫
1～2分严重霉变1～2分 
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表 2 不同贮藏温度下浙贝母总生物碱含量变化
Table 2 Changes in total alkaloid content of Fritillaria thunbergii Miq under different storage temperatures
贮藏时间
（d）总生物碱含量（mg/g） 0 ℃ 5 ℃ 10 ℃ 20 ℃ 0 0.25±0.01Ga 0.25±0.01Fa 0.26±0.04Ga 0.25±0.02Fa 15 0.86±0.01Fc 1.00±0.01Eb 0.56±0.02Ed 1.73±0.04Aa 30 1.54±0.00Da 1.25±0.00Db 0.41±0.03Fd 0.43±0.01Ec 45 1.19±0.00Ed 1.90±0.00Ca 1.52±0.02Dc 1.61±0.00Bb 60 2.11±0.01Ca 1.25±0.00Db 2.08±0.00Aa 1.00±0.03Dc 75 3.44±0.01Aa 2.42±0.02Ab 1.71±0.00Cc 1.56±0.01Cd 90 3.13±0.00Ba 1.98±0.03Bb 1.79±0.01Bc 1.55±0.01Cd 注：同一行中，不同小写字母表示有显著性差异，P<0.05；同一列中，不同大写字母表示有显著性差异，P<0.05。
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[1] 吴秋丽, 沈晓霞, 江晴儿, 等. 辐照处理对浙贝母成熟鳞茎理化成分的影响[J]. 中国现代中药,2018,20(3):305−309. [WU Qiuli, SHEN Xiaoxia, JIANG Qinger, et al. Effects of irradiation treatments on physical-chemical components of Fritillaria thunbergii Bulbus[J]. Modern Chinese medicine,2018,20(3):305−309. doi: 10.13313/j.issn.1673-4890.20171011004 WU Qiuli, SHEN Xiaoxia, JIANG Qinger, et al . Effects of irradiation treatments on physical-chemical components of Fritillaria thunbergii Bulbus[J]. Modern Chinese medicine,2018 ,20 （3 ）:305 −309 . doi: 10.13313/j.issn.1673-4890.20171011004[2] NILE S H, SU J, WU D, et al. Fritillaria thunbergii Miq. (Zhe Beimu):A review on its traditional uses, phytochemical profile and pharmacological properties[J]. Food and Chemical Toxicology,2021,153(5):112289.
[3] 卢琪, 薛淑静, 杨德, 等. 湖北贝母与浙贝母的成分及理化性质对比分析[J]. 食品工业科技,2023,44(3):49−55. [LU Qi, XUE Shujing, YANG De, et al. Comparsion of ingredient composition and physicochemical properties between Fritillaria hupehensis and Fritillaria thunbergii[J]. Science and Technology of Food Industry,2023,44(3):49−55. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022040052 LU Qi, XUE Shujing, YANG De, et al . Comparsion of ingredient composition and physicochemical properties between Fritillaria hupehensis and Fritillaria thunbergii[J]. Science and Technology of Food Industry,2023 ,44 （3 ）:49 −55 . doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022040052[4] PENG R, MA P, MO R, et al. Analysis of the bioactive components from different growth stages of Fritillaria taipaiensis P. Y. Li[J]. Acta Pharmaceutica Sinica B,2013,3(3):167−73. doi: 10.1016/j.apsb.2013.04.006
[5] 赵金凯, 杜伟锋, 应泽茜, 等. 浙贝母的现代研究进展[J]. 时珍国医国药,2019,30(1):177−180. [ZHAO Jinkai, DU Weifeng, YING Zeqian, et al. Modern research progress of Zhejiang Fritillary Mother[J]. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research,2019,30(1):177−180. ZHAO Jinkai, DU Weifeng, YING Zeqian, et al . Modern research progress of Zhejiang Fritillary Mother[J]. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research,2019 ,30 （1 ）:177 −180 .[6] HE C, LIU X, LIU Y, et al. A new alkaloid with cytotoxic activity from Fritillaria thunbergii Miq[J]. Natural Product Research,2022,36:5297−5303. doi: 10.1080/14786419.2021.1933970
[7] CHEN X, LI X, MAO X, et al. Study on the effects of different drying methods on physicochemical properties, structure, and in vitro digestibility of Fritillaria thunbergii Miq. (Zhebeimu) flours[J]. Food and Bioproducts Processing,2016,98:266−274. doi: 10.1016/j.fbp.2016.01.008
[8] 王怡, 袁宁, 王佳宇, 等. 鲜切黄瓜保鲜技术研究进展[J]. 包装工程,2022,43(15):96−104. [WANG Yi, YUAN Ning, WANG Jiayu, et al. Research progress of fresh-cut cucumber preservation technology[J]. Packaging Engineering,2022,43(15):96−104. doi: 10.19554/j.cnki.1001-3563.2022.15.011 WANG Yi, YUAN Ning, WANG Jiayu, et al . Research progress of fresh-cut cucumber preservation technology[J]. Packaging Engineering,2022 ,43 （15 ）:96 −104 . doi: 10.19554/j.cnki.1001-3563.2022.15.011[9] 杨萍, 廖兴梅, 杨爽, 等. 不同保鲜方式对青柠檬护绿效果的研究[J]. 食品研究与开发,2022,43(18):41−48. [YANG Ping, LIAO Xingmei, YANG Shuang, et al. Study on the effect of different preservation methods on the green protection of lemon[J]. Food Research and Development,2022,43(18):41−48. doi: 10.12161/j.issn.1005-6521.2022.18.006 YANG Ping, LIAO Xingmei, YANG Shuang, et al . Study on the effect of different preservation methods on the green protection of lemon[J]. Food Research and Development,2022 ,43 （18 ）:41 −48 . doi: 10.12161/j.issn.1005-6521.2022.18.006[10] 张明昊, 叶正文, 骆军, 等. 1-MCP处理结合低温贮藏对早生新水梨采后生理及品质的影响[J]. 食品与机械,2022,38(10):127−133. [ZHANG Minghao, YE Zhengwen, LUO Jun, et al. Effects of 1-MCP combined with low temperature storage on postharvest physiology and quality of Zaoshengxinshui pear[J]. Food & Machinery,2022,38(10):127−133. doi: 10.13652/j.spjx.1003.5788.2022.90183 ZHANG Minghao, YE Zhengwen, LUO Jun, et al . Effects of 1-MCP combined with low temperature storage on postharvest physiology and quality of Zaoshengxinshui pear[J]. Food & Machinery,2022 ,38 （10 ）:127 −133 . doi: 10.13652/j.spjx.1003.5788.2022.90183[11] AGUAYO E, ESCALONA V, ARTÉS F. Quality of fresh-cut tomato as affected by type of cut, packaging, temperature and storage time[J]. European Food Research & Technology,2004,219(5):492−499.
[12] 黎晓燕, 罗冬兰, 巴良杰. 秋葵贮藏保鲜技术研究进展[J]. 南方农业,2019,13(31):64−66. [LI Xiaoyan, LUO Donglan, BA Liangjie. Research progress on storage and preservation technology of Okra[J]. South China Agriculture,2019,13(31):64−66. doi: 10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.31.016 LI Xiaoyan, LUO Donglan, BA Liangjie . Research progress on storage and preservation technology of Okra[J]. South China Agriculture,2019 ,13 （31 ）:64 −66 . doi: 10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.31.016[13] 李志刚, 宋婷, 冯翠萍, 等. 不同温度对杏鲍菇减压贮藏品质的影响[J]. 农业工程学报,2015(3):332−338. [LI Zhigang, SONG Ting, FENG Cuiping, et al. Effect of different storage temperature on hypobaric storage quality of Pleurotus eryngii[J]. Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering,2015(3):332−338. doi: 10.3969/j.issn.1002-6819.2015.03.045 LI Zhigang, SONG Ting, FENG Cuiping, et al . Effect of different storage temperature on hypobaric storage quality of Pleurotus eryngii[J]. Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering,2015 （3 ）:332 −338 . doi: 10.3969/j.issn.1002-6819.2015.03.045[14] 闫海锋, 李韦柳, 熊军, 等. 不同贮藏温度对甘薯品质及失重率的影响[J]. 湖北农业科学,2020,59(2):137−140. [YAN H F, LI W L, XIONG J, et al. Effect of different storage temperature on quality and weight loss rate of sweet potato[J]. Hubei Agricultural Sciences,2020,59(2):137−140. doi: 10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2020.02.030 YAN H F, LI W L, XIONG J, et al . Effect of different storage temperature on quality and weight loss rate of sweet potato[J]. Hubei Agricultural Sciences,2020 ,59 （2 ）:137 −140 . doi: 10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2020.02.030[15] 汪少华, 乔家法. 不同产地浙贝母多糖含量的比较[J]. 中国现代应用药学,2014,31(10):1256−1258. [WANG Shaohua, QIAO Jiafa. Comparison of total polysaccharide in Fritiliariae thunbergh Bulbus from different habitats[J]. Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy,2014,31(10):1256−1258. doi: 10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2014.10.024 WANG Shaohua, QIAO Jiafa . Comparison of total polysaccharide in Fritiliariae thunbergh Bulbus from different habitats[J]. Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy,2014 ,31 （10 ）:1256 −1258 . doi: 10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2014.10.024[16] 金金, 刘程惠, 胡文忠, 等. 不同贮藏温度对鲜切甘薯呼吸代谢及营养成分的影响[J]. 保鲜与加工,2010,10(4):28−32. [JIN Jin, LIU Chenghui, HU Wenzhong, et al. Effects of different storage temperatures on nutritional compositions and respiratory metabolism and of fresh-cut sweet potato[J]. Storage and Process,2010,10(4):28−32. doi: 10.3969/j.issn.1009-6221.2010.04.009 JIN Jin, LIU Chenghui, HU Wenzhong, et al . Effects of different storage temperatures on nutritional compositions and respiratory metabolism and of fresh-cut sweet potato[J]. Storage and Process,2010 ,10 （4 ）:28 −32 . doi: 10.3969/j.issn.1009-6221.2010.04.009[17] 陈恺, 王娟, 姜婧, 等. 番茄粉中果胶含量粒径贮藏温度与色泽稳定性的相关性[J]. 食品与机械,2012,28(2):170−173. [CHEN Kai, WANG Juan, JIANG Jing, et al. Study on correlation of pectin content, particle size and storage temperature with colour and luster stability of tomato powder[J]. Food & Machinery,2012,28(2):170−173. CHEN Kai, WANG Juan, JIANG Jing, et al . Study on correlation of pectin content, particle size and storage temperature with colour and luster stability of tomato powder[J]. Food & Machinery,2012 ,28 （2 ）:170 −173 .[18] 胡素琴, 高怡宁, 刘鹏, 等. 浙贝母低温解除休眠过程中营养类物质的变化[J]. 安徽农业科学,2006,34(21):5563−5566. [HU Suqin, GAO Yining, LIU Peng, et al. Effect of low temperature treatment on the change of nutrient substence during dormancy-releasing of Fritillaria thunbergii Miq doi: 10.3969/j.issn.0517-6611.2006.21.060 J]. Anhui Agricultural Sciences,2006,34(21):5563−5566. doi: 10.3969/j.issn.0517-6611.2006.21.060
[19] 陈发军, 张春椿, 余杨, 等. 不同湿度贮藏条件下南方红豆杉多糖含量动态变化的研究[J]. 中国现代中药,2016,18(6):772−775. [CHEN Fajun, ZHANG Chunchun, YU Yang, et al. Dynamic changes of polysaccharide content in south Chinese yew under storage conditions of different humidity[J]. Modern Chinese Medicine,2016,18(6):772−775. doi: 10.13313/j.issn.1673-4890.2016.6.018 CHEN Fajun, ZHANG Chunchun, YU Yang, et al . Dynamic changes of polysaccharide content in south Chinese yew under storage conditions of different humidity[J]. Modern Chinese Medicine,2016 ,18 （6 ）:772 −775 . doi: 10.13313/j.issn.1673-4890.2016.6.018[20] TANG Q Q, WANG Y F, MA L J, et al. Peiminine serves as an adriamycin chemosensitizer in gastric cancer by modulating the EGFR/FAK pathway[J]. Oncology Reports,2018,39(3):1299−1305.
[21] MCCA B, SJC B, HHW B, et al. Metabolic profiling investigation of Fritillarii thunbergii Miq. by gas chromatography–mass spectrometry[J]. Journal of Food and Drug Analysis,2018,26(1):337−347. doi: 10.1016/j.jfda.2016.10.003
[22] 尹尚军, 沈秋, 王卓琼, 等. 不同产地和品种对浙贝母生物碱含量的影响[J]. 江苏农业科学,2011,39(3):321−324. [YIN Shangjun, SHEN Qiu, WANG Zhuoqiong, et al. Effects of different origins and varieties on the content of Fritillaria thunbergii Miq doi: 10.3969/j.issn.1002-1302.2011.03.127 J]. Jiangsu Agricultural Sciences,2011,39(3):321−324. doi: 10.3969/j.issn.1002-1302.2011.03.127
[23] VARNALIS A I, BRENNAN J G, MACDOUGALL D B, et al. Optimisation of high temperature puffing of potato cubes using response surface methodology[J]. Journal of Food Engineering,2004,61(2):153−163. doi: 10.1016/S0260-8774(03)00082-7
[24] 侯田莹, 章泳, 姜丽, 等. 不同贮藏条件下枸杞头生理特性变化的研究[J]. 食品科学,2008,29(10):593−597. [HOU Tianying, ZHANG Yong, JIANG Li, et al. Physiological changes of Lycium chinense under different storage conditions[J]. Food Science,2008,29(10):593−597. doi: 10.3321/j.issn:1002-6630.2008.10.143 HOU Tianying, ZHANG Yong, JIANG Li, et al . Physiological changes of Lycium chinense under different storage conditions[J]. Food Science,2008 ,29 （10 ）:593 −597 . doi: 10.3321/j.issn:1002-6630.2008.10.143[25] 冯程程, 于筠, 王春玲. 不同贮藏温度下鲜切紫甘薯褐变相关因素研究[J]. 食品工业科技,2020,41(6):244−253. [FENG Chengcheng, YU Jun, WANG Chunling. Browning related factors of fresh-cut purple sweet potato under different storage temperatures[J]. Science and Technology of Food Industry,2020,41(6):244−253. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2020.06.041 FENG Chengcheng, YU Jun, WANG Chunling . Browning related factors of fresh-cut purple sweet potato under different storage temperatures[J]. Science and Technology of Food Industry,2020 ,41 （6 ）:244 −253 . doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2020.06.041[26] 徐俐, 白超. 不同温度对枇杷贮藏效果和酶活性的影响[J]. 食品研究与开发,2010,31(5):159−163. [XU Li, BAI Chao. Influence on the fresh preservation and enzyme active of loquat in different temperature[J]. Food Research and Development,2010,31(5):159−163. doi: 10.3969/j.issn.1005-6521.2010.05.048 XU Li, BAI Chao . Influence on the fresh preservation and enzyme active of loquat in different temperature[J]. Food Research and Development,2010 ,31 （5 ）:159 −163 . doi: 10.3969/j.issn.1005-6521.2010.05.048[27] 陆云梅, 黄仁华, 徐永杰. 活性氧与果实成熟衰老关系研究进展[J]. 现代农业科学,2009(7):21−22. [LU Yunmei, HUANG Renhua, XU Yongjie. Research progress on the relationship between reactive oxygen species and fruit ripening and aging[J]. Modern Agricultural Science,2009(7):21−22. LU Yunmei, HUANG Renhua, XU Yongjie . Research progress on the relationship between reactive oxygen species and fruit ripening and aging[J]. Modern Agricultural Science,2009 （7 ）:21 −22 .[28] 王成涛, 王昌涛, 赵磊, 等. 不同氧分压条件下金针菇贮藏保鲜相关酶活性的研究[J]. 食品科学,2011,32(8):300−304. [WANG Chengtao, WANG Changtao, ZHAO Lei, et al. Age-related changes in antioxidant enzyme activities in golden needle mushroom during modified atmosphere storage under varying oxygen content conditions[J]. Food Science,2011,32(8):300−304. WANG Chengtao, WANG Changtao, ZHAO Lei, et al . Age-related changes in antioxidant enzyme activities in golden needle mushroom during modified atmosphere storage under varying oxygen content conditions[J]. Food Science,2011 ,32 （8 ）:300 −304 .[29] 杨光, 王丹丹, 李琴, 等. 不同贮藏温度对雷竹笋品质的影响[J]. 食品与发酵工业,2017,43(5):233−239. [YANG Guang, WANG Dandan, LI Qin, et al. Effect of different storage temperatures on the quality of Phyllostachys praccox[J]. Food and Fermentation Industry,2017,43(5):233−239. doi: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201705038 YANG Guang, WANG Dandan, LI Qin, et al . Effect of different storage temperatures on the quality of Phyllostachys praccox[J]. Food and Fermentation Industry,2017 ,43 （5 ）:233 −239 . doi: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201705038[30] BATOOL R, UMER M J, HUSSAIN B, et al. Molecular mechanisms of superoxide dismutase (SODs)-mediated defense in controlling oxidative stress in plants[J]. Antioxidant Defense in Plants,2022(5):157−179.
[31] 张颖. 白玉菇冷藏保鲜及冷链流通技术研究[D]. 福州:福建农林大学, 2014:1−64. [ZHANG Ying. Study on fresh-keeping and cold-chain logistics technology of white Hypsizygus marmoreus[D]. Fuzhou:Fujian Agriculture and Forestry University, 2014:1−64. ZHANG Ying. Study on fresh-keeping and cold-chain logistics technology of white Hypsizygus marmoreus[D]. Fuzhou: Fujian Agriculture and Forestry University, 2014: 1−64.
[32] DONNELLY J K, MCLELLAN K M, WALKER J L, et al. Superoxide dismutases in foods. A review[J]. Food Chemistry,1989,33(4):243−270. doi: 10.1016/0308-8146(89)90036-8
-
期刊类型引用(2)
1. 彭婷，江丹，陈阳，王玉，赖富丽，陈志元，黄林恋. 响应面法优化桑叶提取液脱色工艺及其对α-葡萄糖苷酶抑制活性. 食品与发酵科技. 2024(06): 62-69 . 
百度学术
2. 郑霖华，吴启赐，陈巧玲，林佳燕，廖苑萍. 细梗香草皂苷活性炭脱色工艺及抑菌活性研究. 中国食品添加剂. 2021(11): 67-72 . 百度学术
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