Effect of Yujing Jiangtang Recipe on Blood Glucose, Lipid and Serum Oxidative Stress Related Indexes in Type 2 diabetes Rats
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摘要: 目的：研究萸精降糖方对2型糖尿病大鼠血糖血脂及体内抗氧化作用的影响。方法：采用高脂饮食联合腹腔注射40 mg/kg链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）构建2型糖尿病大鼠模型。将造模成功大鼠随机分为糖尿病模型组、二甲双胍组（0.2 g/kg）、萸精降糖方低、中、高剂量组（1、2、4 g/kg），另设正常对照组，每组各9只。治疗组按相应剂量灌胃，正常对照组、糖尿病模型组给予10 mL/kg生理盐水按体重灌胃，各组每天灌胃1次，连续灌胃6周。实验过程中观察并记录各组大鼠体重变化，测定空腹血糖（FBG）；连续灌胃6周后取大鼠腹主动脉血，测定空腹胰岛素（FINS）水平、糖化血红蛋白（HbA1c）百分含量，并计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）和胰岛素敏感指数（ISI）；测定大鼠血清甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量；采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定大鼠血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、一氧化氮（NO）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）水平；采用苏木精-伊红染色法（HE）对大鼠胰腺组织进行染色，观察大鼠病理形态学的改变。结果：与糖尿病模型组相比，萸精降糖方高剂量组体重极显著升高（P<0.01）；萸精降糖方各剂量组均可极显著降低FBG（P<0.01）；可不同程度降低大鼠FINS、HOMA-IR水平和HbA1c百分含量，升高ISI水平（P<0.05或P<0.01）；可降低血清TG、TC、LDL-C含量和MDA水平（P<0.05或P<0.01），升高HDL-C含量和SOD、GSH水平（P<0.01）；萸精降糖方中、高剂量组可明显升高NO、GSH-Px、CAT水平（P<0.01）；萸精降糖方高剂量组外分泌腺腺泡结构较完整规则，胰岛细胞形态较规则，胰岛内细胞数量较多，排列均匀。结论：萸精降糖方对2型糖尿病大鼠具有降血糖作用，其作用机制可能与调节血脂代谢、改善胰岛素抵抗、抗氧化作用及修复胰腺组织相关。Abstract: Objective: To study the effect of Yujing Jiangtang Recipe on blood glucose, lipid and antioxidation in type 2 diabetes rats. Methods: High fat diet and intraperitoneal injection of 40 mg/kg STZ were used to establish the model of type 2 diabetes rats. The successful rats were randomly divided into diabetes model group, metformin group (0.2 g/kg), low, medium and high dose Yujing Jiangtang Recipe groups (1、2、4 g/kg), and another normal control group with nine rats in each group. The treatment group was gavaged with corresponding dose, the normal control group and the diabetes model group were gavaged with 10 mL/kg normal saline according to weight, and each group was gavaged once a day for six consecutive weeks. During the experiment, observe and record the weight changes of rats in each group, and measure the fasting blood glucose (FBG). After continuous gavage for six weeks, the abdominal aorta blood of rats was taken, the fasting insulin (FINS) level and the percentage content of glycosylated hemoglobin (HbA1c) were measured, and the HOMA-IR, ISI were calculated. The contents of serum TG, TC, HDL-C, LDL-C were measured. The serum levels of MDA, SOD, GSH, NO, GSH-Px and CAT were measured by ELISA. The pancreatic tissue of rats was stained with HE to observe the pathological changes of rats. Results: Compared with the diabetes model group, the body weight of the high dose group of Yujing Jiangtang Recipe increased significantly (P<0.01). Each dose group of Yujing Jiangtang Recipe could significantly reduce FBG (P<0.01). It could reduce the levels of FINS, HOMA-IR and the percentage of HbA1c in rats to varying degrees, and increase the level of ISI (P<0.05 or P<0.01). It could reduce the content of serum TG, TC, LDL-C and MDA (P<0.05 or P<0.01), and increase the content of HDL-C and the level of SOD and GSH (P<0.01). The levels of NO, GSH-Px and CAT were significantly increased in the middle and high dose groups of Yujing Jiangtang Recipe (P<0.01). In the high-dose group of Yujing Jiangtang Recipe, the structure of exocrine gland acini was relatively complete and regular, the shape of islet cells was relatively regular, and the number of islet cells was large and evenly arranged. Conclusion: Yujing Jiangtang Recipe has hypoglycemic effect on type 2 diabetes rats, and its mechanism may be related to regulating blood lipid metabolism, improving insulin resistance, antioxidation and repairing pancreatic tissue.
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Keywords:
- Yujing Jiangtang recipe /
- type 2 diabetes /
- blood sugar /
- blood lipid /
- oxidative stress
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糖尿病（DM）是由多种病因引起的以慢性高血糖为主要特征的代谢紊乱的疾病，尚有蛋白质、脂肪代谢紊乱。一般认为，高血糖是由于胰岛素分泌缺陷或胰岛素抵抗，或者两者同时存在引起的[1]。久病可出现多种并发症，引起多系统损害，导致眼睛、肾脏、神经、心脏、血管等组织的慢性进行性功能缺陷及衰竭。临床中多数2型糖尿病（T2DM）患者存在血脂代谢紊乱，糖尿病及其慢性并发症的发病机制十分复杂。早在2001年Brownlee[2]就已经提出氧化应激是2型糖尿病的发病机制之一。而且多项相关实验和临床研究表明，氧化应激与DM的发病机制和并发症有关[3-4]。研究发现，相比健康人，T2DM患者的血清丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）等标志物含量明显升高，超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）等抗氧化酶的活性显著下降[5-6]。此外，对于经过治疗后的T2DM患者，能够有效抑制氧化应激反应[7-8]。这些研究均阐明2型糖尿病的发生发展与氧化应激有很大的关联性。因此，具有抗氧化作用的药物已成为防治糖尿病及其并发症的研究热点。
萸精降糖方是陕西省中医医院内分泌专家沈璐主任医师以传统中医药理论和多年临床实践基础上，结合现代药理研究及消渴病的发病机理进行筛选，进一步拟定而成。具体组方如下：山茱萸、黄精、西洋参、枸杞子、知母和绿茶（汉中仙毫），以上中药属于药食同源性药材。相关研究证实，山茱萸具有抗氧作用，可有效改善胰岛素抵抗（IR），降低血糖，改善糖尿病症状，是一种可有效治疗糖尿病的天然产物[9-11]。黄精主要通过降血糖、改善脂代谢、调节胰岛素分泌及抗氧化等发挥作用[12-14]。同时临床研究表明，该方可降低T2DM患者血糖，改善糖化血红蛋白、高密度脂蛋白胆固醇和胰岛素抵抗指数[15]。本实验建立2型糖尿病大鼠模型，观察萸精降糖方对2型糖尿病大鼠血糖血脂代谢紊乱及氧化应激的影响，以期为萸精降糖方的临床用药及合理开发提供更多的参考数据。
1. 材料与方法
1.1 材料与仪器
健康雄性SPF级SD大鼠54只，体重量为（190~230） g 购买于北京维通利华实验动物技术有限公司（动物许可证号SCXK（京）2021-0011）。动物实验在陕西省中医药研究院动物实验室进行。饲养环境：室内温度22～26 ℃，相对湿度40%~50%，通风良好，自然采光的标准条件下，自由摄食饮水。动物分笼饲养，每笼3只，保持饲养环境干净卫生，垫料定期更换；普通维持饲料 江苏美迪森生物医药有限公司；45 kcal% Fat超高脂饲料 睿迪生物科技（深圳）有限公司；山茱萸、黄精、西洋参、枸杞子、知母和绿茶（汉中仙毫） 陕西兴盛德药业有限责任公司；盐酸二甲双胍片（0.5 g/片） 中美上海施贵宝制药有限公司；链脲佐菌素（STZ） 美国Sigma公司；0.1 mol/L pH 4.5柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液 上海源叶生物科技有限公司；10%水合氯醛溶液 福州文莱生物科技有限公司；糖化血红蛋白试剂盒 南京欧凯生物科技有限公司；ELISA检测试剂盒 元甲生物技术（陕西）有限公司；血液生化指标检测试剂盒 湖南永和阳光生物科技有限责任公司；苏木精伊红染液 国药集团化学试剂有限公司。
Yuwell-580血糖仪及血糖试纸 江苏鱼跃医疗设备股份有限公司；Sorvall ST-40离心机、4640030高精度移液器 赛默飞世尔科技公司；Infinite F50酶标分析仪 瑞士Tecan有限公司；BS-200全自动生化分析仪 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司；JJ-12J脱水机、JB-P5包埋机、JB-L5冻台 俊杰电子有限公司；RM2016病理切片机 上海莱卡仪器有限公司；KD-P组织摊片机 科迪仪器设备有限公司；DHG-9140A烤箱 上海慧泰仪器制造有限公司；DS-FI3显微镜 尼康精机（上海）有限公司。
1.2 实验方法
1.2.1 萸精降糖方制备
实验用药萸精降糖方由山茱萸800 g、黄精1000 g、枸杞子600 g、知母700 g、绿茶（汉中仙毫）1000 g加水煎煮2次，每次13倍量水，各煎煮1.5 h，煎液滤过，合并滤液并减压浓缩为清膏，再将清膏减压干燥膏粉碎成细粉，过80目筛，与西洋参研粉500 g、绿茶研粉1000 g混匀，用60%乙醇制软材，用12目筛制粒，55～60 ℃干燥，用10目筛整粒，分裂，包装，检验，即得成品（每袋装3.0 g），委托陕西兴盛德药业有限责任公司制作。
1.2.2 2型糖尿病大鼠模型建立
将54只健康雄性SPF级SD大鼠，适应性饲养1周后，随机抽取9只，设为正常对照组（NC），喂食普通饲料（主要原料组成：豆粕、鱼粉、植物油等）。余45只大鼠喂食45 kcal% Fat超高脂饲料4周后，禁食不禁水12 h，按其体重腹腔注射浓度为10 mg/mL（100 mg STZ粉剂溶于10 mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液）的链脲佐菌素，剂量为40 mg/kg诱导糖尿病[16]，正常对照组按体重注射缓冲液。注射后监测第72 h随机血糖水平，并记录注射后第1周大鼠摄食、饮水及排泄尿液情况。将随机血糖水平≥16.7 mmol/L及大鼠出现多食、多饮、多尿症状视为造模成功[17]，造模成功大鼠喂食高脂饲料。
1.2.3 实验分组及给药方案
将造模成功的大鼠随机分为5组，即糖尿病模型组（MD）、二甲双胍组（MET）、萸精降糖方低（YJ-L）、中（YJ-M）、高（YJ-H）剂量组，每组各9只。给药灌胃剂量根据《现代医学实验动物学》中人与大鼠等效计量折算方法换算出大鼠的药物用量[18]。MET组每日给药灌胃0.2 g/kg的二甲双胍，YJ-L、YJ-M和YJ-H剂量组每日分别给药灌胃1、2、4 g/kg萸精降糖方，NC组和MD组每日灌胃10 mL/kg生理盐水，各组每日灌胃1次，连续给药灌胃6周。
1.2.4 体质量
各组大鼠在造模前、造模后、给药后第2、4、6周后分别称量其体重的变化，观察药物对各组大鼠生长情况的影响。
1.2.5 血清相关标本检测
各组大鼠在给药前、给药第2、4、6周后采用血糖仪试纸法测定空腹血糖（FBG），采血当天给药前各组大鼠禁食不禁水12 h，次日早晨抽取大鼠尾部静脉血测定FBG并记录。第6周末次给药后大鼠禁食不禁水12 h，用10%水合氯醛溶液（3 ml/kg）麻醉大鼠，解剖腹主动脉取血,室温静置2 h后3000 r/min离心20 min取上清液。糖化血红蛋白（HbA1c）百分含量、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量由生物分析仪检测；严格按照试剂盒说明书采用酶联免疫法（ELISA）测定大鼠血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、一氧化氮（NO）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）水平和空腹胰岛素（FINS）水平并计算胰岛素抵抗指数：HOMA-IR= FBG×FINS/22.5和胰岛素敏感指数：ISI=（1/FBG×FINS）×100[19-20]。
1.2.6 胰腺组织病理切片
将大鼠胰腺组织从固定液中取出对其进行修剪，放于脱水盒内依次梯度酒精进行脱水后进行石蜡包埋。将修整好的蜡块用石蜡切片机切成4 μm的厚度，然后将其展平，烘箱内烘干。依次将切片放入二甲苯I 、二甲苯II、无水乙醇I、无水乙醇II、95%、85%、75%酒精进行脱水，再用流水进行冲洗。再将切片用苏木精-伊红染色法（HE）进行染色，最后使用显微镜观察各组大鼠胰腺组织切片，并对其病理形态学进行分析。
1.3 数据处理
使用Excle软件进行数据录入整理，采用 SPSS 19.0 统计软件进行数据处理，实验数据以均数和标准差（±s）表示，多组间样本对比采用单因素方差（ANOVA）分析，若实验数据方差齐性检验为方差齐，则使用邦弗伦尼（Bonferroni）检验；若方差不齐，则使用塔姆黑尼（Tamhane’s T2）检验。结果以P<0.05为差异有统计学意义。
2. 结果与分析
2.1 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠体重的影响
由表1可知，造模前各组大鼠体重变化无统计学意义（P>0.05）。连续给药6周后，正常对照组（NC）体重保持一定水平增长。造模后，糖尿病模型组（MD）、萸精降糖方高剂量组（YJ-H）体重极显著高于NC组（P<0.01）；二甲双胍组（MET）、萸精降糖方低剂量组（YJ-L）、中剂量组（YJ-M）体重显著高于NC组（P<0.05）。与MD组相比，MET组、YJ-L、YJ-M组在给药期间出现体重下降趋势，体重变化无统计学意义（P>0.05）；给药4周、6周后，YJ-H组体重极显著高于MD组（P<0.01），YJ各组与MET组间体重变化无统计学意义（P>0.05）。对造模后的T2DM大鼠，MD组、各治疗组大鼠体重均有不同程度的下降，其中MD组下降程度最为明显，YJ-L、YJ-M组下降程度较MET组与YJ-H组稍高，这可能与T2DM血糖高时消耗脂肪来提供能量有关。
表 1 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠体重的影响Table 1. Effect of Yujing Jiangtang Recipe on body weight of type 2 diabetes rats组别 体重（g） 造模前 造模后 给药2周后 给药4周后 给药6周后 NC 219.67±
4.44358.67±
11.47406.68±
8.22464.12±
9.22521.20±
10.35MD 215.50±
6.41417.10±18.21** 390.99±14.89 367.74±14.57** 344.04±
13.11**MET 216.89±11.27 420.10±
38.92*403.66±38.88 394.00±
40.88*391.50±
37.94**YJ-L 210.77±
8.94418.56±
38.16*399.98±36.68 385.00±35.25** 380.32±
37.28**YJ-M 217.63±
6.08419.83±
42.46*402.99±39.34 389.72±42.24** 376.31±
47.26**YJ-H 218.77±
5.92436.56±18.87** 419.53±24.92 409.00±20.08**## 396.87±22.23**## 注：与正常对照组（NC）比较，*P<0.05，**P<0.01；与糖尿病模型组（MD）比较，#P<0.05，##P<0.01,与二甲双胍组（MET）比较，&P<0.05，&&P<0.01；表2~表5同。 2.2 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠FBG的影响
空腹血糖可以间接反映机体在没有各种应激作用下，机体自身基础胰岛素的分泌水平。萸精降糖方中多种药物的活性物质均已证实其具有降低血糖作用，其机制可能与改善胰岛β细胞功能，增强对胰岛素的敏感性等多方面相关[21-23]。右表2可知，对比NC组，给药前及给药后MD组、MET组、YJ各组FBG数值极显著升高（P<0.01）。对比MD组，给药2周后，MET组FBG数值降低（P<0.05）；给药4周后，MET组、YJ-M、YJ-H组FBG数值极显著降低（P<0.01）；给药6周后，MET组、YJ各组FBG数值极显著降低（P<0.01）。对比MET组，给药2周后，YJ各组与MET组间FBG变化无统计学意义（P>0.05）；给药４周后，YJ-L组FBG数值显著升高（P<0.05），YJ-M、YJ-H组与MET组间FBG变化无统计学意义（P>0.05）；给药6周后，YJ各组FBG数值极显著高于MET组（P<0.01）。NC组大鼠FBG保持在一定的平稳水平。给药前MD组、各治疗组大鼠FBG均明显高于NC组，说明T2DM大鼠造模成功。MD组大鼠FBG保持在一定水平的上升；而各治疗组大鼠FBG均有不同程度的下降，其中MET组下降程度最为明显，YJ-H组下降程度较YJ-M、YJ-L组稍高。证明了萸精降糖方治疗T2DM有一定的降低血糖作用。
表 2 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠FBG的影响Table 2. Effect of Yujing Jiangtang Recipe on FBG in type 2 diabetes rats组别 FBG（mmol/L） 给药前 给药２周后 给药4周后 给药6周后 NC 5.12±0.38 5.40±0.37 5.39±0.48 5.44±0.36 MD 23.71±1.48** 25.70±1.39**& 26.91±1.84**&& 27.68±1.49**&& MET 24.64±1.74** 22.76±1.64**# 19.91±1.30**## 16.76±0.93**## YJ-L 25.87±2.07** 25.14±2.05** 23.52±2.34**& 22.61±2.32**##&& YJ-M 24.79±1.93** 23.28±2.19** 21.48±2.14**## 20.22±2.00**##&& YJ-H 25.87±1.51** 23.94±1.14** 21.57±1.16**## 19.30±1.33**##&& 2.3 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠FINS、HOMA-IR、ISI、HbA1c的影响
2型糖尿病（T2DM）的主要特点是胰岛素抵抗及胰岛功能损伤，胰岛β细胞受损，导致血糖升高。相关研究发现，该方中药物活性物质可降低糖尿病小鼠 FINS水平，可能与其提升胰岛素受体表达相关[24-25]。由表3可知，对比NC组，MD组空腹胰岛素（FINS）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）水平和糖化血红蛋白（HbA1c）百分含量极显著升高（P<0.01），胰岛素敏感指数（ISI）水平极显著降低（P<0.01）。对比MD组，给药6周后，MET组、YJ各组可降低FINS、HOMA-IR水平和HbA1c（P<0.05或P<0.01），可升高ISI水平（P<0.05或P<0.01）。YJ各组FINS、HOMA-IR水平显著高于MET组（P<0.05或P<0.01），ISI水平显著低于MET组（P<0.05或P<0.01）；YJ-L、YJ-M组HbA1c显著高于MET组（P<0.05或P<0.01），而YJ-H组与MET组HbA1c无统计学意义（P>0.05）。给药后与NC组相比，MD组、各治疗组大鼠FINS、HOMA-IR、和HbA1c均有所升高，ISI有所下降，说明T2DM大鼠存在胰岛素抵抗。给药后与MD组相比，各治疗组对大鼠FINS、HOMA-IR、和HbA1c均有所降低，ISI有所升高，结果表明治疗组对降低胰岛素，改善胰岛素抵抗及降低糖化水平均有一定的治疗效果，且YJ-H组效果优于YJ-M、YJ-L组。
表 3 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠FINS、HOMA-IR、ISI、 HbA1c的影响Table 3. Effect of Yujing Jiangtang Recipe on FINS, HOMA-IR, ISI and HbA1c in type 2 diabetes rats组别 FINS（mIU/L） HOMA-IR ISI HbA1c（%） NC 13.46±1.26 3.25±0.29 1.38±0.11 4.83±0.33 MD 27.91±1.54**&& 34.33±2.66**&& 0.13±0.01**&& 15.87±1.02**&& MET 20.21±1.73**## 15.11±2.04**## 0.30±0.04**## 9.63±0.71**## YJ-L 25.16±1.69**##&& 25.41±4.05**##&& 0.18±0.03**#&& 13.62±1.23**#&& YJ-M 24.33±1.81**##&& 21.98±3.68**##&& 0.21±0.03**##&& 11.89±1.55**##& YJ-H 22.46±0.90**##& 19.28±1.87**##&& 0.23±0.02**##& 10.50±0.53**## 2.4 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠血脂的影响
2型糖尿病（T2DM）常伴随有血脂代谢紊乱，血糖与血脂异常常相互影响，血糖异常时，常降低胰岛素利用率，影响脂溶性激素活性上升，从而造成血脂代谢紊乱[26]；血脂异常时，则会影响胰岛细胞，造成胰岛功能受损和加重胰岛素抵抗，其为2型糖尿病病理学特征之一。由表4可知，对比NC组，MD组血清TG、TC、LDL-C含量极显著升高（P<0.01），HDL-C含量极显著降低（P<0.01），说明MD组血脂出现异常。对比MD组，给药6周后，MET组、YJ各组血清TG、TC和LDL-C含量显著降低（P<0.05或P<0.01），HDL-C含量极显著升高（P<0.01）。对比MET组，YJ-L组TG、TC和LDL-C含量显著升高（P<0.05或P<0.01），HDL-C含量极显著降低（P<0.01）；YJ-M、YJ-H组血清TG、TC、LDL-C、HDL-C含量与MET组无统计学意义（P>0.05）。结果表明萸精降糖方能够改善糖尿病大鼠血脂代谢异常，且YJ-M、YJ-H组对改善血脂异常效果优于YJ-L组。
表 4 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠血脂的影响Table 4. Effect of Yujing Jiangtang Recipe on blood lipid of type 2 diabetes rats组别 TG
（mmol/L）TC
（mmol/L）HDL-C
（mmol/L）LDL-C
（mmol/L）NC 1.11±0.24 3.73±0.39 1.73±0.11 1.85±0.22 MD 1.76±0.04**&& 6.04±0.16**&& 1.06±0.13**&& 3.50±0.23**&& MET 1.32±0.11## 4.32±0.32*## 1.48±0.11**## 2.49±0.33**## YJ-L 1.50±0.10**##& 5.39±0.45**#&& 1.26±0.14**##&& 3.04±0.16**##& YJ-M 1.47±0.11*## 4.97±0.49**## 1.34±0.05**## 2.94±0.10**## YJ-H 1.38±0.08## 4.59±0.46**## 1.39±0.05**## 2.72±0.22**## 2.5 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠氧化应激水平的影响
长期糖脂异常状态会影响抗氧化酶的作用，出现氧化应激反应，机体的MDA、SOD、GSH、CAT等指标常用于观察氧化应激的水平，其含量测定对于糖尿病的发生与发展与氧化应激反应的相关性具有重要意义[27]。SOD、CAT、GSH、GSH-Px可将超氧产物转化为氧气和水，起到抗氧化作用，NO可直接反应机体的氧化应激水平，MDA是氧化应激的产物，能发应细胞受到氧化应激的损伤程度[28]。相关研究表明，该方药物能够抑制氧化应激反应，降低氧化应激对机体的损伤，从而发挥降低血糖的作用[29-31]。由表5可知，对比NC组，MD组血清MDA含量极显著升高（P<0.01），血清SOD、GSH、NO、GSH-Px、CAT水平极显著降低（P<0.01），表明MD组抗氧化能力极显著低于NC组，存在氧化应激现象。对比MD组，给药6周后，MET组、YJ各组血清MDA含量显著降低（P<0.05或P<0.01）；血清SOD、GSH 水平极显著升高（P<0.01）；MET组、YJ-M、YJ-H组血清NO、GSH-Px、CAT水平极显著升高（P<0.01）；YJ-L组血清NO、GSH-Px、CAT水平与MD组无统计学意义（P>0.05）。对比MET组，YJ-L组血清MDA含量极显著升高（P<0.01），血清SOD、GSH、NO、GSH-Px、CAT水平极显著降低（P<0.01）；YJ-M组血清SOD、GSH、NO、CAT水平极显著降低（P<0.01）；YJ-H组血清MDA、SOD、NO、GSH-Px、CAT与MET组无统计学意义（P>0.05）。结果证明了萸精降糖方能够抑制氧化应激反应，从而降低MDA含量，升高SOD、GSH、NO、GSH-Px和CAT水平，表明萸精降糖方对糖尿病抗氧化作用具有明显改善作用，保护机体进一步受到氧化损伤，达到降低血糖作用，且YJ-H组对降低大鼠的氧化应激作用优于YJ-M、YJ-L组，说明萸精降糖方具有抑制氧化应激的作用。
表 5 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠氧化应激水平的影响Table 5. Effect of Yujing Jiangtang Recipe on oxidative stress level in type 2 diabetes rats组别 MDA（nmol/mL） SOD（U/mL） GSH（ng/mL） NO（μmol/L） GSH-Px（U/L） CAT（U/mL） NC 2.80±0.16 216.98±12.12 9.62±0.62 48.18±3.12 194.55±13.69 105.49±5.90 MD 5.27±0.53**&& 94.82±30.29**&& 4.5±1.33**&& 24.92±6.72**&& 97.76±27.93**&& 57.87±11.95**&& MET 3.64±0.30**## 194.80±16.83## 9.10±0.63## 43.85±3.45## 171.33±12.14*## 94.04±5.66**## YJ-L 4.48±0.32**#&& 136.40±18.03**##&& 6.09±0.56**##&& 33.56±3.40**&& 123.64±14.94**&& 73.79±5.32**&& YJ-M 4.23±0.48**## 150.89±11.02**##&& 6.95±0.79**##&& 37.68±2.05**##&& 152.79±12.84**## 83.40±4.48**##&& YJ-H 3.70±0.39**## 171.13±23.10**## 7.88±0.55**##& 40.18±3.30**## 160.73±22.03*## 83.99±8.86**## 2.6 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠胰腺组织病理学的影响
对2型糖尿病大鼠胰腺组织进行HE染色。NC组（图1A）：胰腺泡呈锥形结构正常，呈锥体形，胰岛数量及体积正常，呈椭圆形。MD组（图1B）：胰岛数量减少，且体积减少，胰岛内细胞边界不清，结构被破坏。MET组（图1C）：胰腺泡结构较完整规则，胰岛细胞形态较规则，胰岛内细胞数量增多，排列较均匀。 YJ-L组（图1D）、YJ-M组（图1E）、YJ-H组（图1F）：与MD组比较，胰岛数量均有一定增加，单个胰岛体积有所增加，形态逐渐恢复。胰腺组织病理切片显示各治疗组胰腺组织形态均有不同程度的改善，尤其以MET组、YJ-H组改善最为明显。说明萸精降糖方具有修复胰腺组织的作用。结果见图1。
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图 1 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠胰腺组织病理学的影响（HE，100×）Figure 1. Effect of Yujing Jiangtang Formula on pancreatic histopathology in type 2 diabetes rats (HE, 100×)3. 结论
本实验研究结果表明：萸精降糖方高剂量组能缓解糖尿病大鼠体重减轻的作用。经过给药灌胃治疗，萸精降糖方各剂量组均能明显降低空腹血糖，说明其治疗糖尿病有一定的降低血糖作用；可降低大鼠空腹胰岛素水平和糖化血红蛋白百分含量，改善胰岛素抵抗指数和升高胰岛素敏感指数；能够降低血清甘油三酯、胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量，且提高高密度脂蛋白胆固醇含量，表明萸精降糖方能有效改善糖尿病血脂代谢异常，从而发挥降血糖作用；萸精降糖方能够抑制氧化应激反应，从而降低丙二醛含量，升高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽、一氧化氮、谷胱甘肽过氧化酶和过氧化氢酶水平，表明萸精降糖方对糖尿病抗氧化作用具有明显改善作用，保护机体进一步受到氧化损伤，达到降低血糖作用；萸精降糖方高剂量组病理切片示外分泌腺腺泡结构较完整规则，胰岛细胞形态较规则，胰岛内细胞数量较多，排列均匀。表明萸精降糖方具有修复胰腺组织的作用。
综上所述，萸精降糖方对改善2型糖尿病大鼠血糖、血脂、改善胰岛素抵抗、抑制氧化应激反应及修复胰腺组织具有一定的疗效。但有关萸精降糖方对具体降糖机制的信号通路或分子水平未进行深入研究，未来应针对此方面开展更多的基础实验和临床研究，为萸精降糖方治疗2型糖尿病提供更多的理论基础及实验依据。
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图 1 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠胰腺组织病理学的影响（HE，100×）
Figure 1. Effect of Yujing Jiangtang Formula on pancreatic histopathology in type 2 diabetes rats (HE, 100×)
表 1 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠体重的影响
Table 1 Effect of Yujing Jiangtang Recipe on body weight of type 2 diabetes rats
组别 体重（g） 造模前 造模后 给药2周后 给药4周后 给药6周后 NC 219.67±
4.44358.67±
11.47406.68±
8.22464.12±
9.22521.20±
10.35MD 215.50±
6.41417.10±18.21** 390.99±14.89 367.74±14.57** 344.04±
13.11**MET 216.89±11.27 420.10±
38.92*403.66±38.88 394.00±
40.88*391.50±
37.94**YJ-L 210.77±
8.94418.56±
38.16*399.98±36.68 385.00±35.25** 380.32±
37.28**YJ-M 217.63±
6.08419.83±
42.46*402.99±39.34 389.72±42.24** 376.31±
47.26**YJ-H 218.77±
5.92436.56±18.87** 419.53±24.92 409.00±20.08**## 396.87±22.23**## 注：与正常对照组（NC）比较，*P<0.05，**P<0.01；与糖尿病模型组（MD）比较，#P<0.05，##P<0.01,与二甲双胍组（MET）比较，&P<0.05，&&P<0.01；表2~表5同。 
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表 2 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠FBG的影响
Table 2 Effect of Yujing Jiangtang Recipe on FBG in type 2 diabetes rats
组别 FBG（mmol/L） 给药前 给药２周后 给药4周后 给药6周后 NC 5.12±0.38 5.40±0.37 5.39±0.48 5.44±0.36 MD 23.71±1.48** 25.70±1.39**& 26.91±1.84**&& 27.68±1.49**&& MET 24.64±1.74** 22.76±1.64**# 19.91±1.30**## 16.76±0.93**## YJ-L 25.87±2.07** 25.14±2.05** 23.52±2.34**& 22.61±2.32**##&& YJ-M 24.79±1.93** 23.28±2.19** 21.48±2.14**## 20.22±2.00**##&& YJ-H 25.87±1.51** 23.94±1.14** 21.57±1.16**## 19.30±1.33**##&&
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表 3 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠FINS、HOMA-IR、ISI、 HbA1c的影响
Table 3 Effect of Yujing Jiangtang Recipe on FINS, HOMA-IR, ISI and HbA1c in type 2 diabetes rats
组别 FINS（mIU/L） HOMA-IR ISI HbA1c（%） NC 13.46±1.26 3.25±0.29 1.38±0.11 4.83±0.33 MD 27.91±1.54**&& 34.33±2.66**&& 0.13±0.01**&& 15.87±1.02**&& MET 20.21±1.73**## 15.11±2.04**## 0.30±0.04**## 9.63±0.71**## YJ-L 25.16±1.69**##&& 25.41±4.05**##&& 0.18±0.03**#&& 13.62±1.23**#&& YJ-M 24.33±1.81**##&& 21.98±3.68**##&& 0.21±0.03**##&& 11.89±1.55**##& YJ-H 22.46±0.90**##& 19.28±1.87**##&& 0.23±0.02**##& 10.50±0.53**##
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表 4 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠血脂的影响
Table 4 Effect of Yujing Jiangtang Recipe on blood lipid of type 2 diabetes rats
组别 TG
（mmol/L）TC
（mmol/L）HDL-C
（mmol/L）LDL-C
（mmol/L）NC 1.11±0.24 3.73±0.39 1.73±0.11 1.85±0.22 MD 1.76±0.04**&& 6.04±0.16**&& 1.06±0.13**&& 3.50±0.23**&& MET 1.32±0.11## 4.32±0.32*## 1.48±0.11**## 2.49±0.33**## YJ-L 1.50±0.10**##& 5.39±0.45**#&& 1.26±0.14**##&& 3.04±0.16**##& YJ-M 1.47±0.11*## 4.97±0.49**## 1.34±0.05**## 2.94±0.10**## YJ-H 1.38±0.08## 4.59±0.46**## 1.39±0.05**## 2.72±0.22**##
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表 5 萸精降糖方对2型糖尿病大鼠氧化应激水平的影响
Table 5 Effect of Yujing Jiangtang Recipe on oxidative stress level in type 2 diabetes rats
组别 MDA（nmol/mL） SOD（U/mL） GSH（ng/mL） NO（μmol/L） GSH-Px（U/L） CAT（U/mL） NC 2.80±0.16 216.98±12.12 9.62±0.62 48.18±3.12 194.55±13.69 105.49±5.90 MD 5.27±0.53**&& 94.82±30.29**&& 4.5±1.33**&& 24.92±6.72**&& 97.76±27.93**&& 57.87±11.95**&& MET 3.64±0.30**## 194.80±16.83## 9.10±0.63## 43.85±3.45## 171.33±12.14*## 94.04±5.66**## YJ-L 4.48±0.32**#&& 136.40±18.03**##&& 6.09±0.56**##&& 33.56±3.40**&& 123.64±14.94**&& 73.79±5.32**&& YJ-M 4.23±0.48**## 150.89±11.02**##&& 6.95±0.79**##&& 37.68±2.05**##&& 152.79±12.84**## 83.40±4.48**##&& YJ-H 3.70±0.39**## 171.13±23.10**## 7.88±0.55**##& 40.18±3.30**## 160.73±22.03*## 83.99±8.86**##
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