蒸汽爆破处理对金针菇菇脚水提物抗氧化及抗炎活性的影响

孙梦雪; 倪立颖; 黄裕鸿; 王彬; 张明; 吴茂玉; 于发家; 马超

doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022110116

蒸汽爆破处理对金针菇菇脚水提物抗氧化及抗炎活性的影响

1.
中华全国供销合作总社济南果品研究所，山东济南 250014
2.
长江大学生命科学学院，湖北荆州 434022
3.
山东恒宝食品集团有限公司，山东日照 276800

基金项目: 泰山产业领军人才项目（LJNY202105）；日照市科技创新专项项目（2020CXZX1105）；济南果品研究所科研发展基金（CTCF202115）。

详细信息

作者简介:
孙梦雪（1994−），女，硕士，研究实习员，研究方向：食品功能评价，E-mail：smx18313941107@163.com

通讯作者:
马超（1982−），男，博士，研究员，研究方向：功能食品研发，E-mail：mch.01@163.com

中图分类号: TS201.4
计量
- 文章访问数: 119
- HTML全文浏览量: 56
- PDF下载量: 31
出版历程
- 收稿日期: 2022-11-13
- 网络出版日期: 2023-07-04
- 刊出日期: 2023-08-23

Effects of Steam Explosion on Antioxidant and Anti-inflammatory Activities of Water Extracts of Flammulina velutipes Stembase

1.
Jinan Fruit Research Institute, All China Federation of Supply & Marketing Co-operatives, Jinan 250014, China
2.
College of Life Science, Yangtze University, Jingzhou 434022, China
3.
Shandong Hengbao Food Group Co., Ltd., Rizhao 276800, China

摘要

摘要: 采用蒸汽爆破的方式对金针菇菇脚进行预处理，探究蒸汽爆破对金针菇菇脚水提物抗氧化及抗炎活性的影响。利用超高效液相色谱-质谱联用技术（UHPLC-MS/MS）对比分析汽爆前后金针菇菇脚水提物活性成分的差异；采用苯酚硫酸法、福林酚法及氯化铝法分别对粗多糖、总酚及总黄酮的含量进行测定；通过DPPH、ABTS和FRAP法测定蒸汽爆破前后金针菇菇脚水提物的体外抗氧化能力；研究了金针菇菇脚水提物对脂多糖（LPS）激活的RAW264.7细胞的潜在抗炎活性及抗炎机制。结果表明，经过蒸汽爆破处理后，金针菇菇脚部分活性化合物相对含量显著升高（P<0.05），如甜菜碱、反式-3-吲哚丙烯酸、腺苷、烟酰胺等，分别是未汽爆组的1.14倍、1.32倍、3.39倍、3.21倍，且粗多糖含量增加了56.03%。蒸汽爆破后的金针菇菇脚水提物（SFVE）抗氧化活性更强，其中DPPH自由基的清除能力、ABTS⁺自由基清除能力和Fe³⁺还原能力分别为未汽爆组（FVE）的1.12倍、1.07倍、1.12倍；抗炎实验证明蒸汽爆破后的金针菇菇脚水提物对LPS诱导RAW264.7细胞产生NO有较为显著的抑制活性（P<0.05），且ELISA测定细胞因子水平结果表明其能下调TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌水平（P<0.05）。因此，蒸汽爆破技术可以作为一种新型食用菌废弃物预处理技术，为功能性食品的开发提供了新的方法，值得进一步深入研究。
- 金针菇 /
- 蒸汽爆破 /
- 抗氧化 /
- 抗炎 /
- RAW264.7
Abstract: The stembase of Flammulina velutipes was pretreated by steam explosion, to explore the effects on antioxidant and anti-inflammatory activities of its water extract. The differences of active components in water extract of F.velutipes stembase before and after steam explosion were analyzed by ultra-high performance liquid chromatography-mass spectrometry (UHPLC-MS/MS). The contents of crude polysaccharides, total phenols and total flavonoids were determined by phenol-sulfuric acid method, Folin-Ciocalteu method and aluminum chloride method. The in vitro antioxidant capacity of water extract of F.velutipes stembase before and after steam explosion was determined by DPPH, ABTS and FRAP methods. The potential anti-inflammatory activity and mechanism of F.velutipes stembase water extract on LPS-activated cells were investigated. The results showed that the relative content of active compounds of F.velutipes stembase increased significantly after steam explosion, such as betaine, trans-3-indoleacrylic acid, adenosine and nicotinamide, which were 1.14 times, 1.32 times, 3.39 times and 3.21 times of that in the non-steam explosion group, respectively, and the content of crude polysaccharide increased by 56.03%. SFVE had better antioxidant activity, the DPPH free radical scavenging ability, ABTS⁺ free radical scavenging ability and Fe³⁺ reducing ability were 1.12 times, 1.07 times and 1.12 times of those in the non-steam explosion group (FVE), respectively. The anti-inflammatory result showed that the water extract of F.velutipes stembase after steam explosion had significant inhibitory activity on LPS-induced NO production in RAW264.7 cells (P<0.05), and the water extract of F.velutipes stembase could down-regulate the secretion levels of TNF-α, IL-1β and IL-6 (P<0.05). Therefore, steam explosion technology can be used as a new type of edible fungus waste pretreatment technology, which provides a new method for the development of functional food and is worthy of further study.
- Flammulina velutipes /
- steam explosion /
- antioxidant /
- anti-inflammatory /
- RAW264.7

HTML全文

金针菇（Flammulina velutipes），一种腐生异养型真菌，又名构菌、毛柄金钱菌和冬菇，属于口蘑科金钱菌属，是著名的食药用菌^[1]。金针菇从外界吸收氮元素、微量元素、糖类等^[2]，在子实体中转化为蛋白质、氨基酸、维生素、膳食纤维等多种营养物质。金针菇还含有多糖、萜类、脂肪酸、多酚等活性物质^[3]，具有抗肿瘤、抗衰老、抗炎、增强记忆力、降血脂、免疫调节、抗氧化等生物活性^[4-7]。近年来，金针菇需求量不断增加，加工后剩余的菌柄、菌盖、畸形菇等副产物除极少部分被作为饲料外，绝大部分被直接丢弃，不仅造成了严重的环境污染，而且不符合绿色、持续、健康的发展理念，资源浪费极大。目前，我国在农产品加工领域大力倡导资源高值利用和产品多元化开发，因此，急需发现新的技术促进金针菇废弃物高值利用，提升国际竞争力，带动金针菇产业多元化发展。

蒸汽爆破技术（steam explosion，简称汽爆技术）是指在高压密闭环境中，利用高温高压的蒸汽作用于原料，通过瞬间释压过程实现原料组分的分离和结构变化的一项技术。物料在蒸汽中加热并维持高压后瞬间泄压，随着压强骤降、水分汽化，气体迅速膨胀，固体物料受机械力作用结构受到破坏并产生爆破效应^[8-9]。蒸汽爆破作为新兴的预处理技术，最早是在1926年，由美国学者W.·H. 梅森（W. H. Mason）开发，应用于硬纸板生产、造纸、木材加工等工业化领域^[10]。截至目前，蒸汽爆破技术已被开发用于动物饲料加工、食品预处理、中草药预处理和农业副产品的开发^[11]，汽爆技术可以促使膳食纤维改性，在高温高压的处理条件破坏了纤维素的氢键和有序结构，降低多糖的分子量，提高其可溶性膳食纤维的溶出并提高了相关的理化特性^[12-16]。然而，汽爆技术由于其复杂的物理和化学过程，难以准确地控制处理的强度和均匀性，因此更容易引起有效成分的降解和美拉德反应的发生，且处理不能连续进行^[17]。金针菇菇脚中含有多种生物活性成分，因此，本研究采用蒸汽爆破技术对金针菇菇脚进行预处理，利用超高效液相色谱-质谱联用技术（UHPLC-MS/MS）对比分析汽爆前后金针菇菇脚水提物活性成分的差异；通过DPPH、ABTS和FRAP法测定蒸汽爆破前后金针菇菇脚水提物的体外抗氧化能力；研究其对LPS刺激的巨噬细胞释放NO的影响及抗炎机制，对比汽爆前后金针菇菇脚水提物抗炎活性的差异。本研究旨为金针菇废弃物产品加工工艺优化及新产品研发提供技术参考，以期为金针菇菇脚的高值化利用提供参考，并拓展蒸汽爆破技术在食品预处理及加工行业的利用范围。

1. 材料与方法

1.1 材料与仪器

金针菇菇脚　山东邹城友和菌业有限公司；没食子酸、抗坏血酸、苯酚、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼　上海MACKLIN生化科技有限公司；2,2′-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐（ABTS）、2,2-联苯基-1-苦基肼基（DPPH）、Trolox（水溶性维生素E）、FeCl₃、Cell Counting Kit-8（CCK-8）试剂　北京索莱宝科技有限公司；脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）、氨卡青霉素/链霉素　美国Sigma公司；无水乙醇　国药集团化学试剂有限公司；小鼠巨噬细胞系RAW264.7、IL-6试剂盒、IL-1β试剂盒、TNF-α试剂盒　武汉博士德生物技术股份有限公司；胎牛血清　美国ScienCell公司；DMEM高糖培养基、胰蛋白酶消化液　武汉普诺赛生命科技有限公司。

QBS-80型蒸汽爆破设备　鹤壁政道启宝实业有限公司；MCO-18AC细胞培养箱　松下健康医疗器械有限公司；SHA-B双功能水浴恒温振荡器　苏杰瑞尔电器有限公司；JRA-1000X低温超声波破碎仪　无锡杰瑞安仪器设备有限公司；RXH-B-1热风循环烘箱　江阴市宏达粉体设备有限公司；FD-2真空冷冻干燥机　上海比朗仪器制造有限公司；JXFSTPRP-48全自动样品快速研磨仪　上海净信科技公司；TGL-10B高速台式离心机　上海安亭科学仪器厂；RH-600A高速粉碎机　永康市荣浩工贸有限公司；Multiskan FC酶标仪　美国赛默飞世尔科技公司；超高效液相色谱质谱联用UHPLC-MS/MS（Thermo，Ultimate 3000LC，Q Exactive HF）　美国赛默飞世尔科技公司；Zorbax Eclipse C₁₈色谱柱（1.8 μm×2.1 mm×100 mm）　美国安捷伦科技公司。

1.2 实验方法

1.2.1 蒸汽爆破处理

将金针菇菇脚分为蒸汽爆破处理组（命名为SFV组），和未经蒸汽爆破处理组（命名为FV组），每组1 kg。SFV组按照之前研究对金针菇菇脚膳食纤维汽爆改性工艺优化后的参数^[18]进行蒸汽爆破处理，即蒸汽爆破料腔比5:8，保压时间105 s，蒸汽爆破压强1 MPa。随后，将SFV组和FV组同时置于电热鼓风干燥箱中，60 ℃，干燥5 h以上至恒重。干燥的金针菇菇脚用高速粉碎机打粉，过80目筛，备用。

1.2.2 水提物的制备

采用梁慧嘉等^[19]的方法测定并稍作改进。分别取SFV和FV组金针菇菇脚粉末100 g，料液比1:30（g/mL）加入蒸馏水，100 ℃水浴提取3 h，过滤，取滤液。重复2次，合并2次滤液，减压浓缩，冷冻干燥，即得水提物SFVE和FVE，放入4 ℃冰箱备用，用于后续成分分析及抗氧化、抗炎活性评价实验。

1.2.3 UHPLC-MS/MS分析

采用An等^[20]的方法测定并稍作改进，称取上述得到的金针菇菇脚水提物100 mg置于2 mL离心管中，加入1 mL 70%甲醇和3 mm规格钢珠，用全自动样品快速研磨仪（JXFSTPRP-48，70 Hz）振荡破碎3 min，冷却后低温超声（40 kHz）10 min，4 ℃低温下12000 r/min离心10 min。取上清液稀释100倍，加入10 μL浓度为100 μg/mL的内标（二氯苯丙氨酸），用0.22 μm PTFE滤头过滤后，使用安捷伦C₁₈柱（1.8 μm×2.1 mm×100 mm），通过超高效液相色谱-质谱联用仪（UHPLC-MS/MS）进行化学组成分析。使用Compound Discoverer 3.3 进行保留时间矫正、峰识别、峰提取等工作，根据二级质谱信息利用Thermo mzCloud在线数据库、Thermo mzValut本地数据库进行物质鉴定。根据各样品中物质的峰面积，计算物质在样品中相对百分比，确定含量（各物质相对浓度=内标浓度/内标峰面积×代谢物峰面积/样品取样量）。

色谱条件为：柱温30 ℃，进样量2 μL，流速0.3 mL/min。流动相为0.1%甲酸水（A）和乙腈（B），梯度洗脱程序为5% B，0~2 min；5%~30% B，2~6 min；30% B，6~7 min；30%~78% B，7~12 min；78% B，12~14 min；78%~95% B，14~17 min；95% B，17~20 min。质谱条件为：正离子模式下进行全扫描，一级全扫描（Full Scan，m/z 100~1500）与数据依赖性二级质谱扫描（dd-MS2，TopN=10）；分辨率：120000（一级质谱），60000（二级质谱）。碰撞模式：高能量碰撞解离（HCD）。加热器温度325 ℃；鞘气流速：45 arb；辅助气流速：15 arb；吹扫气流速：1 arb；电喷雾电压：3.5 kV；毛细管温度：330 °C；S-Lens RF Level：55%。

1.2.4 粗多糖的测定

金针菇菇脚粗多糖的测定参照NY/T 1676-2008《食用菌中粗多糖含量的测定》所述方法进行测定，根据试验测定的葡萄糖溶液OD值制得粗多糖标准曲线y=0.0065x+0.0255，R²=0.9994。

1.2.5 总酚含量的测定

用Folin-Ciocalteu（FC）法^[21]测定样品的总酚（TPC）含量，以没食子酸作为标准品制得标准曲线y=0.0198x+0.0091, R²=0.9993。通过甲醇溶解样品后，向0.5 mL的福林酚试剂和0.4 mL蒸馏水的混合液中加入0.6 mL样品溶液，反应1 min后，加入1.5 mL Na₂CO₃（m/v: 20%）和6 mL蒸馏水。将整个反应体系放置于70 ℃中，水浴10 min。待冷却到室温，用酶标仪765 nm处测定吸光值。样品中总酚含量表示为每mg样品中含有没食子酸（GAE）的量（mg GAE/mg水提物）。

1.2.6 总黄酮含量测定

总黄酮（TFC）的含量根据Cai等^[22]的方法测定。用芦丁作为标准品，制得标准曲线y=0.3189x+0.0066， R²=0.9995。在0.3 mL的5% NaNO₂和3.8 mL的70%乙醇混合液中加入样品溶液1.2 mL，充分混合。反应8 min后，加入0.3 mL 10% Al（NO₃）₃、4.0 mL 4% NaOH溶液和0.4 mL的水溶液，在室温下反应12 min，用酶标仪测量510 nm处的吸光度。样品中总黄酮含量表示为每mg样品含有芦丁（RE）的量（mg RE/mg水提物）。

1.2.7 DPPH自由基清除能力测定

按照文献[23]的方法测定样品的DPPH自由基清除能力。0.1 mmol/L的DPPH甲醇溶液现用现配。0.5 mL的水提物溶液以及Trolox标准溶液分别与2 mL的DPPH溶液混合，在25 ℃条件下避光反应30 min，用酶标仪测量517 nm处的吸光度。水提物的DPPH自由基清除能力用每mg水提物含有Trolox（TE）的量来表示（nmol TE/mg水提物）。

1.2.8 ABTS⁺自由基清除能力测定

ABTS⁺自由基清除能力的测定方法按照文献[24]的报道并稍作修改。7 mmol/L的ABTS溶液和40 mmol/L的过硫酸钾溶液按照5:88比例进行混合，避光条件下反应12 h后ABTS工作溶液配制完成。1 mL ABTS溶液用100 mL左右的无水乙醇进行稀释，在波长734 nm测量其吸光值。取0.5 mL的样品溶液加入4 mL的ABTS工作液，混匀后，37 ℃避光反应6 min。用酶标仪测定734 nm处的吸光值。以Trolox作为标准品，制作标准曲线。样品中ABTS⁺自由基清除能力用每mg水提物含有Trolox（TE）的量（nmol TE/mg水提物）来表示。

1.2.9 铁离子还原能力测定

铁离子还原能力测定按照文献[25]的报道并稍作修改。0.5 mL水提物溶液或Trolox溶液与4.5 mL现配FRAP试剂混匀，在37 ℃的避光环境中反应10 min。使用酶标仪测定593 nm处的吸光值。以Trolox作为标准品，做标准曲线。样品中铁离子还原能力用每mg水提物含有Trolox （TE）的量来表示（nmol TE/mg水提物）。

1.2.10 抗炎活性测定

1.2.10.1 金针菇菇脚水提物对RAW264.7细胞相对活性的影响

在96孔板中加入1×10⁴个/孔对数期生长的RAW264.7细胞，37 ℃，5% CO₂细胞培养箱中过夜。根据实验设计空白组、阴性对照组及样品组，空白组为正常培养基培养，阴性对照组每孔加入终浓度为1 μg/mL LPS，样品组为LPS+终浓度为62.5、125、250、500 μg/mL的FVE或SFVE。处理24 h后，每孔分别加入CCK-8试剂10 μL，放入37 ℃，5%的CO₂的细胞培养箱中反应4 h。反应结束后，用酶标仪检测450 nm处的吸光度，细胞相对活性根据公式（1）计算。

$\begin{split} & \text{细胞}\text{相对活性}(\text{%})=\\ & \frac{\text{样品组}\text{OD}\text{值－空白组}\text{OD}\text{值}}{\text{阴性对照组}\text{OD}\text{值－空白组}\text{OD}\text{值}}\text{×100} \end{split}$

(1)

1.2.10.2 金针菇菇脚水提物对LPS诱导的RAW264.7细胞NO产生量的影响

NO产生量采用Griess分析法^[26]。在96孔板中加入1×10⁴个/孔对数期生长的RAW264.7细胞，37 ℃，5% CO₂条件下过夜培养。加入不同浓度的FVE和SFVE（0、62.5、125、250、500 μg/mL）处理1 h，加入终浓度为1 μg/mL的LPS溶液，37 ℃、5% CO₂的培养箱中培养24 h。培养结束后，在96孔板中加入100 μL上清液，随加入100 μL Griess试剂，反应10 min，于540 nm处测定吸光度值。NO的产生率根据公式（2）计算。

$\text{NO}\text{产}\text{生率}(\text{%})\text=\frac{\mathrm{样}\mathrm{品}\mathrm{孔}\text{NO}\mathrm{含}\mathrm{量}}{\text{LPS}\text{孔}\text{NO}\mathrm{含}\mathrm{量}}\text{×100}$

(2)

1.2.10.3 炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β分泌量的影响

按1.2.10.2对细胞进行处理，取细胞上清液，参照酶联免疫吸附剂（ELISA）试剂盒说明书对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）的分泌量进行测定，根据标准曲线，计算各种炎症因子的含量。

1.3 数据处理

所有实验至少重复三次，结果以平均值±标准差（ $\overline{\mathrm{X}}$ ±SD）表示，通过one-way ANOVA对实验结果进行统计学分析，运用多重比较Turkey检验分析实验数据间的差异性。所示结果中，P<0.05判断为具有显著性差异。

2. 结果与分析

2.1 金针菇菇脚水提物化合物种类及含量的差异

金针菇菇脚的食用和药用价值很大程度上取决于其生物活性化合物的含量。因此，本研究通过UHPLC-MS/MS检测了蒸汽爆破前后金针菇菇脚水提物的化合物种类及含量变化。图1展示了未蒸汽爆破（FVE）与蒸汽爆破后（SFVE）金针菇菇脚水提物的总离子色谱图（TIC）。结果可知，金针菇菇脚水提物具有136种羧酸衍生物、肉桂酸及其衍生物和吲哚类衍生物及有机氧化物等化合物等，主要化合物如表1所示。结果表明，经过蒸汽爆破后，部分化合物含量显著升高（P<0.05），如甜菜碱、反式-3-吲哚丙烯酸、腺苷、烟酰胺等，含量为1356.69、832.86、1134.54和192.15 μg/g，分别是未汽爆组的1.14倍、1.32倍、3.39倍、3.21倍，相关研究表明，汽爆的物理爆破作用能够打破植物组织-细胞-细胞壁水平的多尺度抗提取屏障结构，提高活性成分的破壁促溶效果^[17]，这可能是影响蒸汽爆破前后水提物化合物含量差异的原因。据报道，甜菜碱具有显著的抗氧化、抗炎、保肝护肝等生物活性^[27]，吲哚类衍生物同样具有广泛的生物活性，如抗癌、抗抑郁、抗炎、抗真菌及抗HIV等^[28]。烟酰胺具有显著的降低皮肤黑色素的作用及抗菌活性^[29]。腺苷具有降血糖及保肝护肝及治疗肾功能紊乱和肾衰竭的作用^[30]，值得注意的是，蒸汽爆破处理促进了N-甲酰基-L-酪氨酸、α-亚麻酸、4-胍基丁酸的溶出，在未汽爆组中未检出。因此，蒸汽爆破处理能够促进部分活性化合物的溶出，增加其提取率。蒸汽爆破前后化合物种类及含量的不同可能会导致样品抗氧化及抗炎等生物活性存在差异。

图 1 蒸汽爆破前后金针菇菇脚水提物总离子流色谱图

Figure 1. Total ion chromatograms of Flammulina velutipes stembase water extracts before and after steam explosion

下载: 全尺寸图片幻灯片

表 1 蒸汽爆破前后金针菇菇脚化合物组成及含量

Table 1. Composition and content of compounds in Flammulina velutipes stembase before and after steam explosion

化合物名称	分子式	类别	含量（μg/g）
化合物名称	分子式	类别	FVE	SFVE
甜菜碱Betaine	C₅H₁₁NO₂	羧酸及其衍生物	1188.99±85.63^a	1356.69±88.37^b
反式-3-吲哚丙烯酸trans-3-Indoleacrylic acid	C₁₁H₉NO₂	吲哚及其衍生物	628.98±46.35^a	832.86±55.44^b
腺苷Adenosine	C₁₀H₁₃N₅O₄	嘌呤核苷	335.03±21.68^a	1134.55±25.33^b
5-氨基咪唑核苷酸5-Aminoimidazole ribotide	C₈H₁₄N₃O₇P	有机氧化合物	290.61±15.97^a	363.11±18.54^b
N-苄基甲酰胺N-Benzylformamide	C₈H₉NO	苯及其取代衍生物	281.31±20.64^a	243.01±25.31^a
烟酰胺Nicotinamide	C₆H₆N₂O	吡啶及其衍生物	59.75±5.99^a	192.15±5.68^b
左旋肉碱L（-）-Carnitine	C₇H₁₅NO₃	有机氮化合物	147.16±12.37^a	137.79±15.29^a
腺苷基琥珀酸Adenylosuccinic acid	C₁₄H₁₈N₅O₁₁P	嘌呤核苷	13.82±0.70^a	92.49±1.77^b
N-果基糖苯丙氨酸N-Fructosyl phenylalanine	C₁₅H₂₁NO₇	羧酸及其衍生物	200.71±22.37^a	243.20±20.69^b
乙酰-左旋肉碱Acetyl-L-carnitine	C₉H₁₇NO₄	脂肪酰类	50.18±6.74^a	45.39±7.08^a
泛酸（维生素b5）Pantothenic acid	C₉H₁₇NO₅	有机氧化合物	99.00±11.16^b	69.99±4.79^a
丁酰肉碱（异构体920）Butyryl carnitine	C₁₁H₂₁NO₄	脂肪酰类	91.80±5.95^a	86.27±5.73^a
L-谷胱甘肽氧化型L-Glutathione oxidized	C₂₀H₃₂N₆O₁₂S₂	羧酸及其衍生物	45.57±2.56^a	98.59±4.74^b
L-焦谷氨酸L-Pyroglutamic acid	C₅H₇NO₃	羧酸及其衍生物	175.08±13.56^b	83.58±8.40^a
2-羟基肉桂酸2-Hydroxycinnamic acid	C₉H₈O₃	肉桂酸及其衍生物	102.20±9.77^a	95.20±5.99^a
尼古丁酸Nicotinic acid	C₆H₅NO₂	吡啶及其衍生物	140.78±10.66^b	82.50±6.67^a
4-三氟甲基苯乙酸4-（Trifluoromethoxy）phenylacetic acid	C₉H₇F₃O₃	苯酚醚	50.38±4.80^a	63.78±6.43^b
4-吲哚甲醛4-Indolecarbaldehyde	C₉H₇NO	吲哚及其衍生物	41.89±3.34^a	54.46±4.14^b
4-羟基苯甲醛4-Hydroxybenzaldehyde	C₇H₆O₂	有机氧化合物	74.40±6.35^b	62.13±4.79^a
吲哚Indole	C₈H₇N	吲哚及其衍生物	32.66±1.90^a	45.26±1.15^b
4-氨基丁酸叔丁酯4-Aminobutanoate	C₄H₉NO₂	羧酸及其衍生物	36.45±2.03^a	33.14±1.04^a
甲硫腺苷5'-Deoxy-5'-Methylthioadenosine	C₁₁H₁₅N₅O₃S	5'脱氧核糖核苷	4.16±0.10^a	55.26±5.09^b
吲哚-3-乳酸Indole-3-lactic acid	C₁₁H₁₁NO₃	吲哚及其衍生物	29.89±1.02^b	26.16±1.02^a
2-萘胺2-Naphthylamine	C₁₀H₉N	萘类	19.02±1.00^a	26.19±1.19^b
2,6-二氨基庚二酸2,6-diaminopimelic acid	C₇H₁₄N₂O₄	羧酸及其衍生物	16.94±0.96^a	19.76±0.99^b
L-（-）-阿拉伯糖醇L-（-）-Arabitol	C₅H₁₂O₅	有机氧化合物	15.25±1.38^a	32.65±2.14^b
黄嘌呤核苷Xanthosine	C₁₀H₁₂N₄O₆	嘌呤核苷	0.56±0.01^a	7.85±0.20^b
尿嘧啶Uracil	C₄H₄N₂O₂	二嗪	11.81±0.02^a	27.85±1.19^b
7-甲基鸟苷7-Methylguanosine	C₁₁H₁₅N₅O₅	嘌呤核苷	17.33±1.03^a	32.99±2.00^b
N-甲酰基-L-酪氨酸N-Fructosyl tyrosine	C₁₅H₂₁NO₈	羧酸及其衍生物	−	71.25±5.20^a
α-亚麻酸α-Linolenic acid	C₁₈H₃₀O₂	脂肪酰类	−	39.25±2.32^a
4-胍基丁酸4-Guanidinobutyric acid	C₅H₁₁N₃O₂	羧酸及其衍生物	−	6.16±1.00^a
注：“−”表示未检测出；数据为平均值±标准差（n=3）；同一行不同字母上标代表数据有显著性差异（P<0.05）。

下载: 导出CSV

| 显示表格

2.2 蒸汽爆破处理对金针菇菇脚水提物中粗多糖、总酚及总黄酮的含量的影响

为了探究蒸汽爆破处理对金针菇菇脚中活性成分含量的影响，对其粗多糖、总酚及总黄酮的含量进行检测及对比，结果见表2。爆破加工是利用高温和高压共同作用于原料，并通过瞬时释压过程实现原料的组分分离和结构的变化，通过与其他分离技术的结合，可实现物料在组分水平、细胞水平和组织水平的分级分离。由表可知，蒸汽爆破处理后金针菇菇脚水提物（SFVE）多糖含量为（105.37±0.17）mg/g样品干重，相比蒸汽爆破前的金针菇菇脚增加了56.03%，这可能是由于蒸汽爆破过程中存在类酸性水解、热降解、类机械断裂、氢键破坏以及结构重排等作用^[31]打开了多糖溶出的通道，使多糖溶出加快，或者高温高压对化学键的破坏，使多糖的含量及种类发生变化^[32]，实验结果与何陈灿等^[33]的研究一致。值得注意的是，FVE的多酚及黄酮含量分别为（13.47±0.02）mg GAE/g和（11.81±0.18）mg RE/g，而SFVE的多酚及黄酮含量分别为（12.62±0.20）mg GAE/g和（9.86±0.07）mg RE/g，相比之下，蒸汽爆破处理后金针菇菇脚总多酚及总黄酮含量有所减少，这可能是因为样品高温高压环境中长时间停留会导致酚类化合物降解或聚合^[34]，从而导致其含量减少。

表 2 金针菇菇脚水提物总酚、总黄酮含量及抗氧化活性

Table 2. Total phenolics, total flavonoids and antioxidant activities of Flammulina velutipes stembase water extracts

样品	多糖（mg/g 样品干重）	多酚（mg GAE/g 水提物）	黄酮（mg RE/g 水提物）	DPPH•（nmol TE/mg 水提物）	ABTS⁺•（nmol TE/mg 水提物）	FRAP•（nmol TE/mg 水提物）
FVE	67.53±0.13^a	13.47±0.02^b	11.81±0.18^b	69.36±1.85^a	71.02±1.26^a	47.18±1.43^a
SFVE	105.37±0.17^b	12.62±0.20^a	9.86±0.07^a	77.59±0.84^b	76.38±2.78^b	53.29±2.05^b
注：数据为平均值±标准差（n=3）；同一列不同字母上标代表数据有显著性差异（P<0.05）。

下载: 导出CSV

| 显示表格

2.3 蒸汽爆破处理对金针菇菇脚抗氧化活性的影响

由表2可知，汽爆前后的金针菇菇脚水提物均具有DPPH自由基清除能力、ABTS⁺自由基清除能力和Fe³⁺还原能力，说明金针菇菇脚水提物具有显著的抗氧化活性，且汽爆后的金针菇菇脚（SFVE）抗氧化活性更强。蒸汽爆破后的DPPH自由基的清除能力、ABTS⁺自由基清除能力和Fe³⁺还原能力分别为（77.59±0.84）nmol TE/mg水提物、（76.38±2.78）nmol TE/mg水提物、（53.29±2.05）nmol TE/mg水提物（P<0.05），分别为未汽爆组（FVE）的1.12倍、1.07倍、1.12倍。与DPPH及ABTS⁺自由基清除能力相比，蒸汽爆破前后金针菇菇脚水提物对Fe³⁺还原能力较弱。经过蒸汽爆破处理后，这些活性的增强可能与其水提物中活性成分的更易溶出及相互协同作用有关^[10,35]，这一结果与徐一凡等^[36]的研究结果一致。结果表明金针菇菇脚水提物是一种有效的天然抗氧化剂，具有较好的保健功效，有望开发新型天然功能食品用于缓解人体衰老或预防疾病发生。

2.4 蒸汽爆破前后金针菇菇脚水提物的体外抗炎作用比较

2.4.1 细胞存活率分析

为了明确本实验所采用的LPS刺激和金针菇菇脚水提物处理是否影响RAW264.7细胞的正常生长，本文分别采用不同浓度LPS和水提物处理细胞24 h，然后采用CCK-8法对细胞的相对活性进行了检测。如图2所示，与CON组相比，添加浓度为62.5、125、250和500 μg/mL时，FVE和SFVE的细胞相对活性均在空白组的98%以上。该结果表明，FVE和SFVE在上述浓度范围内未表现任何细胞毒性。在后续试验中采用1 μg/mL LPS作为刺激浓度，并将500、250、125、62.5 μg/mL作为FVE及SFVE的处理浓度。

图 2 金针菇菇脚水提物对RAW264.7巨噬细胞活力的影响

注：不同小写字母代表数据有显著性差异（P<0.05）；图3、图4同。

Figure 2. Effect of Flammulina velutipes stembase water extracts on cell viability in RAW264.7 macrophages

下载: 全尺寸图片幻灯片

2.4.2 金针菇菇脚水提物对LPS诱导的RAW264.7细胞NO产生率的影响

由图3可知，模型组的NO释放量显著高于对照组（P<0.05），表明造模成功。与模型组相比，各浓度FVE和SFVE处理均能显著降低NO释放量（P<0.05），且具有浓度依赖性。据报道，金针菇多糖具有明显的抗炎活性，增强RAW264.7细胞活力和吞噬能力，抑制NO和ROS的分泌，抑制炎症因子IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α的分泌与基因表达^[37]，这可能是FVE/SFVE主要的抗炎活性物质，蒸汽爆破从样品抑制LPS诱导RAW264.7细胞产生NO的结果中显示，和模型组相比，FVE和SFVE均有一定的抑制NO生成效果，当样品浓度在62.5 μg/mL时，FVE和SFVE的NO产生率分别为96.78%±0.41%、73.18%±1.52%，样品浓度达到500 μg/mL时，FVE和SFVE的NO产生率分别为56.12%±0.23%、52.01%±0.88%。其中蒸汽爆破后的金针菇菇脚水提物对LPS诱导RAW264.7细胞产生NO有较为显著的抑制活性（P<0.05），且存在剂量依赖关系，SFVE的抗炎效果优于FVE，这可能和提取物中的多糖含量有关系，也可能是因为经过蒸汽爆破处理促进了其他抗炎活性物质的溶出及化合物之间的协同作用，如甜菜碱、吲哚类衍生物等化合物。

图 3 金针菇菇脚水提物对RAW264.7巨噬细胞NO产生率的影响

Figure 3. Effects of Flammulina velutipes stembase water extracts on NO production rate in RAW264.7 macrophages

下载: 全尺寸图片幻灯片

2.4.3 金针菇菇脚水提物对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的影响

LPS可以诱导炎症细胞中促炎细胞因子的分泌增加，如TNF-α、IL-1β和IL-6等，这些细胞因子的过度分泌是炎症的标志^[38]。在这种情况下，一些具有抗炎活性的物质可以减少促炎细胞因子的分泌^[39-42]。由图4可知，各浓度FVE和SFVE处理后TNF-α表达量分别为852.27~1254.51 pg/mL和736.20~1146.21 pg/mL，IL-1β的表达量分别为81.52~133.32 pg/mL和73.18~130.88 pg/mL，IL-6的表达量分别为228.87~297.80 pg/mL和205.84~288.20 pg/mL。与模型组相比，FVE和SFVE在一定浓度下均对细胞炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的表达具有显著的抑制作用（P<0.05），这一结果与马升等^[43]的金针菇多糖研究结果一致，说明多糖可能是主要的抗炎活性成分。在62.5 μg/mL的浓度处理下，FVE和SFVE就对TNF-α和IL-6表现出了抑制活性，当浓度为125 μg/mL时，FVE和SFVE处理才对IL-1β表现出明显的抑制效果。结果表明，FVE和SFVE处理对TNF-α、IL-1β和IL-6的蛋白表达具有很强的抑制作用，呈浓度依赖性，且SFVE处理后的抑制效果更显著，这一结果与NO产生率一致。与FVE相比，SFVE是一种更好的炎症抑制剂。综上，FVE和SFVE处理对细胞炎症因子均有抑制作用，表明金针菇菇脚水提物能在蛋白表达水平上抑制细胞炎症因子的表达，降低机体炎症反应，从而发挥抗炎作用。

图 4 金针菇菇脚水提物对RAW264.7巨噬细胞产生的炎症因子的影响

Figure 4. Effect of Flammulina velutipes stembase water extracts on inflammatory cytokines in RAW264.7 macrophages

下载: 全尺寸图片幻灯片

3. 结论

本研究开展了蒸汽爆破前后金针菇菇脚的活性成分及相关生物活性评价相关工作。研究证明，蒸汽爆破能有效提高金针菇菇脚中多糖的得率，而且会影响金针菇菇脚中其他化合物的含量及组成。相关活性评价结果证明，金针菇菇脚水提物具有显著的抗氧化及抗炎活性，经过蒸汽爆破后效果会更为显著，这可能和多糖的溶出率及活性成分之间的协同作用有关。且ELISA测定细胞因子水平结果表明金针菇菇脚水提物能下调TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌水平，从蛋白表达水平上阐述了FVE以及SFVE抗炎机制。综上所述，蒸汽爆破对金针菇菇脚生物活性物质的释放及抗氧化抗炎活性的提升具有良好的效果，并为金针菇菇脚功能性成分提取、多糖制备等方面的应用提供有效的途径，为金针菇菇脚等天然食用菌废弃物产品开发提供新思路和理论依据。蒸汽爆破技术在食用菌废弃物的预处理方面有巨大的潜力，随着研究的深入，将致力于研究蒸汽爆破的强度和均匀性，避免有效成分的降解和美拉德反应的发生，进一步拓展爆破技术在食品原料预处理及加工行业的利用范围。

图 1 蒸汽爆破前后金针菇菇脚水提物总离子流色谱图

Figure 1. Total ion chromatograms of Flammulina velutipes stembase water extracts before and after steam explosion

下载: 全尺寸图片幻灯片

图 2 金针菇菇脚水提物对RAW264.7巨噬细胞活力的影响

注：不同小写字母代表数据有显著性差异（P<0.05）；图3、图4同。

Figure 2. Effect of Flammulina velutipes stembase water extracts on cell viability in RAW264.7 macrophages

下载: 全尺寸图片幻灯片

图 3 金针菇菇脚水提物对RAW264.7巨噬细胞NO产生率的影响

Figure 3. Effects of Flammulina velutipes stembase water extracts on NO production rate in RAW264.7 macrophages

下载: 全尺寸图片幻灯片

图 4 金针菇菇脚水提物对RAW264.7巨噬细胞产生的炎症因子的影响

Figure 4. Effect of Flammulina velutipes stembase water extracts on inflammatory cytokines in RAW264.7 macrophages

下载: 全尺寸图片幻灯片

表 1 蒸汽爆破前后金针菇菇脚化合物组成及含量

Table 1 Composition and content of compounds in Flammulina velutipes stembase before and after steam explosion

化合物名称	分子式	类别	含量（μg/g）
化合物名称	分子式	类别	FVE	SFVE
甜菜碱Betaine	C₅H₁₁NO₂	羧酸及其衍生物	1188.99±85.63^a	1356.69±88.37^b
反式-3-吲哚丙烯酸trans-3-Indoleacrylic acid	C₁₁H₉NO₂	吲哚及其衍生物	628.98±46.35^a	832.86±55.44^b
腺苷Adenosine	C₁₀H₁₃N₅O₄	嘌呤核苷	335.03±21.68^a	1134.55±25.33^b
5-氨基咪唑核苷酸5-Aminoimidazole ribotide	C₈H₁₄N₃O₇P	有机氧化合物	290.61±15.97^a	363.11±18.54^b
N-苄基甲酰胺N-Benzylformamide	C₈H₉NO	苯及其取代衍生物	281.31±20.64^a	243.01±25.31^a
烟酰胺Nicotinamide	C₆H₆N₂O	吡啶及其衍生物	59.75±5.99^a	192.15±5.68^b
左旋肉碱L（-）-Carnitine	C₇H₁₅NO₃	有机氮化合物	147.16±12.37^a	137.79±15.29^a
腺苷基琥珀酸Adenylosuccinic acid	C₁₄H₁₈N₅O₁₁P	嘌呤核苷	13.82±0.70^a	92.49±1.77^b
N-果基糖苯丙氨酸N-Fructosyl phenylalanine	C₁₅H₂₁NO₇	羧酸及其衍生物	200.71±22.37^a	243.20±20.69^b
乙酰-左旋肉碱Acetyl-L-carnitine	C₉H₁₇NO₄	脂肪酰类	50.18±6.74^a	45.39±7.08^a
泛酸（维生素b5）Pantothenic acid	C₉H₁₇NO₅	有机氧化合物	99.00±11.16^b	69.99±4.79^a
丁酰肉碱（异构体920）Butyryl carnitine	C₁₁H₂₁NO₄	脂肪酰类	91.80±5.95^a	86.27±5.73^a
L-谷胱甘肽氧化型L-Glutathione oxidized	C₂₀H₃₂N₆O₁₂S₂	羧酸及其衍生物	45.57±2.56^a	98.59±4.74^b
L-焦谷氨酸L-Pyroglutamic acid	C₅H₇NO₃	羧酸及其衍生物	175.08±13.56^b	83.58±8.40^a
2-羟基肉桂酸2-Hydroxycinnamic acid	C₉H₈O₃	肉桂酸及其衍生物	102.20±9.77^a	95.20±5.99^a
尼古丁酸Nicotinic acid	C₆H₅NO₂	吡啶及其衍生物	140.78±10.66^b	82.50±6.67^a
4-三氟甲基苯乙酸4-（Trifluoromethoxy）phenylacetic acid	C₉H₇F₃O₃	苯酚醚	50.38±4.80^a	63.78±6.43^b
4-吲哚甲醛4-Indolecarbaldehyde	C₉H₇NO	吲哚及其衍生物	41.89±3.34^a	54.46±4.14^b
4-羟基苯甲醛4-Hydroxybenzaldehyde	C₇H₆O₂	有机氧化合物	74.40±6.35^b	62.13±4.79^a
吲哚Indole	C₈H₇N	吲哚及其衍生物	32.66±1.90^a	45.26±1.15^b
4-氨基丁酸叔丁酯4-Aminobutanoate	C₄H₉NO₂	羧酸及其衍生物	36.45±2.03^a	33.14±1.04^a
甲硫腺苷5'-Deoxy-5'-Methylthioadenosine	C₁₁H₁₅N₅O₃S	5'脱氧核糖核苷	4.16±0.10^a	55.26±5.09^b
吲哚-3-乳酸Indole-3-lactic acid	C₁₁H₁₁NO₃	吲哚及其衍生物	29.89±1.02^b	26.16±1.02^a
2-萘胺2-Naphthylamine	C₁₀H₉N	萘类	19.02±1.00^a	26.19±1.19^b
2,6-二氨基庚二酸2,6-diaminopimelic acid	C₇H₁₄N₂O₄	羧酸及其衍生物	16.94±0.96^a	19.76±0.99^b
L-（-）-阿拉伯糖醇L-（-）-Arabitol	C₅H₁₂O₅	有机氧化合物	15.25±1.38^a	32.65±2.14^b
黄嘌呤核苷Xanthosine	C₁₀H₁₂N₄O₆	嘌呤核苷	0.56±0.01^a	7.85±0.20^b
尿嘧啶Uracil	C₄H₄N₂O₂	二嗪	11.81±0.02^a	27.85±1.19^b
7-甲基鸟苷7-Methylguanosine	C₁₁H₁₅N₅O₅	嘌呤核苷	17.33±1.03^a	32.99±2.00^b
N-甲酰基-L-酪氨酸N-Fructosyl tyrosine	C₁₅H₂₁NO₈	羧酸及其衍生物	−	71.25±5.20^a
α-亚麻酸α-Linolenic acid	C₁₈H₃₀O₂	脂肪酰类	−	39.25±2.32^a
4-胍基丁酸4-Guanidinobutyric acid	C₅H₁₁N₃O₂	羧酸及其衍生物	−	6.16±1.00^a
注：“−”表示未检测出；数据为平均值±标准差（n=3）；同一行不同字母上标代表数据有显著性差异（P<0.05）。

下载: 导出CSV

表 2 金针菇菇脚水提物总酚、总黄酮含量及抗氧化活性

Table 2 Total phenolics, total flavonoids and antioxidant activities of Flammulina velutipes stembase water extracts

样品	多糖（mg/g 样品干重）	多酚（mg GAE/g 水提物）	黄酮（mg RE/g 水提物）	DPPH•（nmol TE/mg 水提物）	ABTS⁺•（nmol TE/mg 水提物）	FRAP•（nmol TE/mg 水提物）
FVE	67.53±0.13^a	13.47±0.02^b	11.81±0.18^b	69.36±1.85^a	71.02±1.26^a	47.18±1.43^a
SFVE	105.37±0.17^b	12.62±0.20^a	9.86±0.07^a	77.59±0.84^b	76.38±2.78^b	53.29±2.05^b
注：数据为平均值±标准差（n=3）；同一列不同字母上标代表数据有显著性差异（P<0.05）。

下载: 导出CSV

参考文献(43)

[1]	戴玉成, 杨祝良. 中国药用真菌名录及部分名称的修订[J]. 菌物学报,2008,27(6):801−824. [DAI Y C, YANG Z L. A revised checklist of medicinal fungi in China[J]. Mycosystema,2008,27(6):801−824. doi: 10.3969/j.issn.1672-6472.2008.06.001 DAI Y C, YANG Z L. A revised checklist of medicinal fungi in China[J]. Mycosystema, 2008, 27(6): 801-824. doi: 10.3969/j.issn.1672-6472.2008.06.001
[2]	宋鑫茹, 张嘉, 陆帅. 金针菇菇脚的栽培技术与管理[J]. 陕西农业科学,2011,57(1):264−265, 267. [SONG X R, ZHANG J, LU S. Cultivation technology and management of Flammulina velutipes[J]. Shaanxi Journal of Agricultural Sciences,2011,57(1):264−265, 267. doi: 10.3969/j.issn.0488-5368.2011.01.085 SONG X R, ZHANG J, LU S. Cultivation technology and management of Flammulina velutipes[J]. Shaanxi Journal of Agricultural Sciences, 2011, 57(1): 264-265, 267. doi: 10.3969/j.issn.0488-5368.2011.01.085
[3]	黄世群, 秦琳, 赵珊, 等. 长根菇与金针菇菇脚主要营养成分及必需氨基酸含量的差异[J]. 贵州农业科学,2022,50(2):50−57. [HUANG S Q, QING L, ZHAO S, et al. Differences in main nutritional components and essential amino acid content between Oudemansiella radicata and Flammulina velutipes[J]. Guizhou Agricultural Sciences,2022,50(2):50−57. HUANG S Q, QING L, ZHAO S, et al. Differences in main nutritional components and essential amino acid content between Oudemansiella radicata and Flammulina velutipes[J]. Guizhou Agricultural Sciences, 2022, 50(2): 50-57.
[4]	常昕. 金针菇菇脚种植及发展前景浅析[J]. 南方农业,2021,15(2):39−41. [CHANG X. Analysis on cultivation and development prospect of Flammulina velutipes[J]. South China Agriculture,2021,15(2):39−41. CHANG X. Analysis on cultivation and development prospect of Flammulina velutipes[J]. South China Agriculture, 2021, 15(2): 39-41.
[5]	ZHANG T T, YE J F, XUE C H, et al. Structural characteristics and bioactive properties of a novel polysaccharide from Flammulina velutipes[J]. Carbohydrate Polymers:Scientific and Technological Aspects of Industrially Important Polysaccharides,2018,197:147−156.
[6]	ZHAO R Q, JI Y, CHENX, et al. Polysaccharide from Flammulina velutipes attenuates markers of metabolic syndrome by modulating the gut microbiota and lipid metabolism in high fat diet-fed mice[J]. Food & Function,2021,12(15):6964−6980.
[7]	TANG C, HOO P C X, TAN L T H, et al. Golden needle mushroom: A culinary medicine with evidenced-based biological activities and health promoting properties[J]. Frontiers in Pharmacology,2016,7:474.
[8]	张君仪, 刘飞, 徐虹. 蒸汽爆破技术在食品原料预处理中的应用研究进展[J]. 食品工业科技,2019,40(4):331−334. [ZHANG J Y, LIU F, XU H. Research progress of application of steam explosion technology in pretreatment of food raw materials[J]. Science and Technology of Food Industry,2019,40(4):331−334. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.04.055 ZHANG J Y, LIU F, XU H. Research progress of application of steam explosion technology in pretreatment of food raw materials[J]. Science and Technology of Food Industry, 2019, 40(4): 331-334. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.04.055
[9]	康芳芳, 聂远洋, 邓楚君, 等. 蒸汽爆破对豆渣膳食纤维的影响及在韧性饼干中的应用[J]. 食品工业科技,2018,39(2):188−191. [KANG F F, NIE Y Y, DENG C J, et al. Effect of steam explosion on dietary fiber of okara and its application in semi hard biscuit[J]. Science and Technology of Food Industry,2018,39(2):188−191. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2018.02.035 KANG F F, NIE Y Y, DENG C J, et al. Effect of steam explosion on dietary fiber of okara and its application in semi hard biscuit[J]. Science and Technology of Food Industry, 2018, 39(2): 188-191. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2018.02.035
[10]	WAN F C, FENG C F, LUO K Y, et al. Effect of steam explosion on phenolics and antioxidant activity in plants: A review[J]. Trends in Food Science & Technology,2022,124(4):13−24.
[11]	何晓琴, 李苇舟, 李富华, 等. 蒸汽爆破预处理在农产品加工副产物综合利用中的应用[J]. 食品与发酵工业,2019,45(8):252−257. [HE X Q, LI W Z, LI F H, et al. Application of steam-explosion pretreatment in utilizing agricultural by-products[J]. Food and Fermentation Industries,2019,45(8):252−257. HE X Q, LI W Z, LI F H, et al. Application of steam-explosion pretreatment in utilizing agricultural by-products[J]. Food and Fermentation Industries, 2019, 45(8): 252-257.
[12]	LI B, YANG W, NIE Y, et al. Effect of steam explosion on dietary fiber, polysaccharide, protein and physicochemical properties of okara[J]. Food Hydrocoll,2019,94:48−56. doi: 10.1016/j.foodhyd.2019.02.042
[13]	何晓琴, 李苇舟, 夏晓霞, 等. 蒸汽爆破预处理的苦荞麸皮不溶性膳食纤维理化特性及结构研究[J]. 食品与发酵工业,2020,46(18):47−53. [[HE X Q, LI W Z, XIA X X, et al. Study on physicochemical properties and structure of insoluble dietary fiber from tartary buckwheat bran pretreated by steam explosion[J]. Food and Fermentation Industries,2020,46(18):47−53. doi: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.024224 [HE X Q, LI W Z, XIA X X, et al. Study on physicochemical properties and structure of insoluble dietary fiber from Tartary buckwheat bran pretreated by steam explosion[J]. Food and Fermentation Industries, 2020, 46(18): 47-53. doi: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.024224
[14]	ZHAI X, AO H, LIU W, et al. Physicochemical and structural properties of dietary fiber from Rosa roxburghii pomace by steam explosion[J]. Journal of Food Science and Technology, 2022, 59: 2381–2391.
[15]	崔潇文, 袁茂翼, 叶发银, 等. 蒸汽爆破预处理对番茄皮渣膳食纤维组成及理化特性的影响[J]. 食品与发酵工业,2021,47(21):170−177. [CUI X W, YUAN M Y, YE F G, et al. Effect of steam explosion pretreatment on the composition and physicochemical properties of dietary fiber from tomato pomace[J]. Food and Fermentation Industries,2021,47(21):170−177. doi: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.027095 CUI X W, YUAN M Y, YE F G, et al. Effect of steam explosion pretreatment on the composition and physicochemical properties of dietary fiber from tomato pomace[J]. Food and Fermentation Industries, 2021, 47(21): 170-177. doi: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.027095
[16]	白晓州, 张镒飞. 蒸汽爆破预处理对沙棘果渣可溶性膳食纤维含量及性质的影响[J]. 食品研究与开发,2019,40(12):148−153. [BAI X Z, ZHANG Y F. Effect of steam explosion pretreatment on the content and properties of soluble dietary fiber in Seabuckthorn pomace[J]. Food Research and Development,2019,40(12):148−153. BAI X Z, ZHANG Y F. Effect of steam explosion pretreatment on the content and properties of soluble dietary fiber in Seabuckthorn pomace[J]. Food Research and Development, 2019, 40(12): 148-153.
[17]	MA C, NI L Y, GUO Z B, et al. Principle and application of steam sxplosion technology in modification of food fiber[J]. Foods,2022,11:3370. doi: 10.3390/foods11213370
[18]	张明, 马百惠, 吴茂玉, 等. 金针菇菇脚菇根膳食纤维蒸汽爆破改性工艺优化研究[J]. 中国果菜,2020,40(5):32−35. [ZHANG M, MA B H, WU M Y, et al. Optimization on steam explosion modification process of dietary fiber of Flammulina velutipes root[J]. China Fruit & Vegetable,2020,40(5):32−35. ZHANG M, MA B H, WU M Y, et al. Optimization on steam explosion modification process of dietary fiber of Flammulina velutipes root[J]. China Fruit & Vegetable, 2020, 40(5): 32-35.
[19]	梁慧嘉, 焦春伟, 杨咏善, 等. 4种珍稀食用菌水提物的抗氧化活性研究[J]. 微生物学杂志,2015,35(4):4. [LIANG H J, JIAO C W, YANG Y S, et al. Antioxidant activity of water extraction from four rare edible mushroom species[J]. Journal of Microbiology,2015,35(4):4. doi: 10.3969/j.issn.1005-7021.2015.04.019 LIANG H J, JIAO C W, YANG Y S, et al. Antioxidant activity of water extraction from four rare edible mushroom species[J]. Journal of Microbiology, 2015, 35(4): 4. doi: 10.3969/j.issn.1005-7021.2015.04.019
[20]	AN X, WANG Z, LI J, et al. Analysis of flavor-related compounds in fermented persimmon beverages stored at different temperatures[J]. LWT,2022,163:113524. doi: 10.1016/j.lwt.2022.113524
[21]	刘学铭, 胡淑琴. 我国15种常见和珍稀食用菌化学成分谱研究[C]. 2010年中国菌物学会学术年会论文摘要集, 2010: 157−158 LIU X M, HU S Q. Studies on chemical composition spectra of 15 common and rare edible fungi in china[C]. Abstracts of Academic Annual Meeting of China Society of Mycology in 2010, 2010: 157−158.
[22]	CAI S B, WANG O, WU W, et al. Comparative study of the effects of solid-state fermentation with three filamentous fungi on the total phenolics content (TPC), flavonoids, and antioxidant activities of subfractions from oats (Avena sativa L.)[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry,2012,60(1):507−513. doi: 10.1021/jf204163a
[23]	KEDARE S B, SINGH R P. Genesis and development of DPPH method of antioxidant assay[J]. Journal of Food Science & Technology,2011,48(4):412−422.
[24]	EREL O. A novel automated direct measurement method for total antioxidant capacity using a new generation, more stable ABTS radical cation[J]. Clinical Biochemistry,2004,37(4):277−285. doi: 10.1016/j.clinbiochem.2003.11.015
[25]	AMAMCHARLA J K, METZGER L E. Modification of the ferric reducing antioxidant power (FRAP) assay to determine the susceptibility of raw milk to oxidation[J]. International Dairy Journal,2014,34(2):177−179. doi: 10.1016/j.idairyj.2013.09.004
[26]	李可, 曹硕, 焦思敏, 等. 蛴螬多肽对免疫抑制小鼠免疫功能的影响[J]. 免疫学杂志,2019,35(5):369−376. [LI K, CAO S, JIAO S M, et al. Effects of polypeptide extracts from grub on immune function of immunosuppressive mice[J]. Immunological Journal,2019,35(5):369−376. doi: 10.13431/j.cnki.immunol.j.20190071 LI K, CAO S, JIAO S M, et al. Effects of polypeptide extracts from grub on immune function of immunosuppressive mice[J]. Immunological Journal, 2019, 35(5): 369-376. doi: 10.13431/j.cnki.immunol.j.20190071
[27]	李梦杰, 王志青, 仝涛. 甜菜根关键活性成分及其生物功能研究进展[J]. 食品安全质量检测学报,2022,13(2):343−350. [LI M J, WANG Q Z, TONG T. Research progress on key bioactive components and bioactivities of Beta vulgaris L[J]. Journal of Food Safety and Quality,2022,13(2):343−350. doi: 10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2022.02.056 LI M J, WANG Q Z, TONG T. Research progress on key bioactive components and bioactivities of Beta vulgaris L[J]. Journal of Food Safety and Quality, 2022, 13(2): 343-350. doi: 10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2022.02.056
[28]	滕玉鸥, 赵红叶, 周瑶, 等. 新型吲哚类衍生物对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响[J]. 天津科技大学学报,2016,31(3):16−19. [TENG Y O, ZHAO H Y, ZHOU Y, et al. Effects of novel indole derivatives on human gastric cancer MGC-803 cell proliferation[J]. Journal of Tianjin University of Science & Technology,2016,31(3):16−19. TENG Y O, ZHAO H Y, ZHOU Y, et al. Effects of novel indole derivatives on human gastric cancer MGC-803 cell proliferation[J]. Journal of Tianjin University of Science & Technology, 2016, 31(3): 16-19.
[29]	帕它木·莫合买提, 阿尔孜古丽·吐尔逊, 热沙来提·阿不都瓦衣特, 等. 烟酰胺对人皮肤黑素细胞黑素转运作用研究[J]. 环境与健康杂志,2009,26(8):680−683. [MOHEMAITI P, TUERXUN A, ABUDU W R, et al. Effects of nicotinamide on melanin transportation in humerzigulian skin melanocytes[J]. Journal of Environment and Health,2009,26(8):680−683. doi: 10.16241/j.cnki.1001-5914.2009.08.040 MOHEMAITI P, TUERXUN A, ABUDU W R, et al. Effects of nicotinamide on melanin transportation in humerzigulian skin melanocytes[J]. Journal of Environment and Health, 2009, 26(8): 680-683. doi: 10.16241/j.cnki.1001-5914.2009.08.040
[30]	黄兰芳, 郭方遒, 梁逸曾, 等. HPLC-ESI-MS测定冬虫夏草和蚕蛹虫草中腺苷和虫草素含量[J]. 中国中药杂志,2004,29(8):49−51. [HUANG L F, GUO F Q, LIANG Y Z, et al. Determination of adenosine and cordycepin in Cordyceps sinensis and C. militarris with HPLC-ESI-MS[J]. China Journal of Chinese Materia Medica,2004,29(8):49−51. HUANG L F, GUO F Q, LIANG Y Z, et al. Determination of adenosine and cordycepin in Cordyceps sinensis and C. militarris with HPLC-ESI-MS[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2004, 29(8): 49-51.
[31]	崔文玉, 丰程凤, 夏智慧, 等. 蒸汽爆破对葡萄皮渣酚类物质含量及抗氧化活性的影响[J]. 食品与发酵工业,2023,49(5):157−163. [CUI W Y, FENG C F, XIA Z H, et al. Effect of steam explosion on the phenolics and antioxidant activities in grape pomace[J]. Food and Fermentation Industries,2023,49(5):157−163. CUI W Y, FENG C F, XIA Z H, et al. Effect of steam explosion on the phenolics and antioxidant activities in grape pomace[J].Food and Fermentation Industries,2023,49(5):157-163.
[32]	张博华, 张明, 范祺, 等. 蒸汽爆破超声波复合提取灵芝多糖及抗氧化活性[J]. 食品工业,2021,42(8):125−129. [ZHANG B H, ZHANG M, FAN Q, et al. Extraction of polysaccharide from Ganoderma lucidum and its antioxidant activity by steam explosion combined with ultrasonic[J]. The Food Industry,2021,42(8):125−129. ZHANG B H, ZHANG M, FAN Q, et al. Extraction of polysaccharide from Ganoderma lucidum and its antioxidant activity by steam explosion combined with ultrasonic[J]. The Food Industry, 2021, 42(8): 125-129.
[33]	何陈灿, 吴洁, 陈翠, 等. 蒸汽破壁预处理技术对黄芪提取的影响研究[J]. 广东饲料,2022,31(4):25−29. [HE C C, WU J, CHEN C, et al. Effects of steam wall breaking pretreatment technology on extraction of Astragalus membranaceus[J]. Guangdong Feed,2022,31(4):25−29. HE C C, WU J, CHEN C, et al. Effects of steam wall breaking pretreatment technology on extraction of Astragalus membranaceus[J]. Guangdong Feed, 2022, 31(4): 25-29.
[34]	GONG L X, HUANG L L, ZHANG Y. Effect of steam explosion treatment on barley bran phenolic compounds and antioxidant capacity[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry,2012,60(29):7177−7184. doi: 10.1021/jf301599a
[35]	古江勇. 基于系统的天然产物研究[D]. 北京: 北京大学, 2014 GU J Y. Research on natural products based on system[D]. Beijing: Peking University, 2014.
[36]	徐一凡, 部建雯, 吴茂玉, 等. 蒸汽爆破对桑黄功能成分含量及活性的影响[J]. 食品科技,2022(7):47. [XU Y F, BU J W, WU M Y, et al. Effect of steam explosion on content and activity of functional ingredients in Inonotus hispidus[J]. Food Science,2022(7):47. XU Y F, BU J W, WU M Y, et al. Effect of steam explosion on content and activity of functional ingredients in Inonotus hispidus[J]. Food Science, 2022(7): 47
[37]	MA S, ZHANG H C, XU J X. Characterization, antioxidant and anti-inflammation capacities of fermented Flammulina velutipes polyphenols[J]. Molecules,2021,26(20):6205. doi: 10.3390/molecules26206205
[38]	XIAO J, THWE A A, LIU T T, et al. Anti-inflammatory effects of an extract from Pseudomonas aeruginosa and its purified product 1-hydroxyphenazine on RAW264.7 cells[J]. Current Microbiology,2021,78(7):2762−2773. doi: 10.1007/s00284-021-02544-3
[39]	ZHANG M Z, TIAN X H, WANG Y, et al. Immunomodulating activity of the polysaccharide TLH-3 from Tricholoma lobayense in RAW264.7 macrophages[J]. International Journal of Biological Macromolecules, 2018, 107(Pt B): 2679–2685.
[40]	LI G R, XIANG Y, ZHAO J, et al. Saccharum Alhagi polysaccharide-1 and-2 promote the immunocompetence of RAW264.7 macrophages in vitro[J]. Experimental and Therapeutic Medicine,2018,15(4):3556−3562.
[41]	TANG C, SUN J, ZHOU, et al. Immunomodulatory effects of polysaccharides from purple sweet potato on lipopolysaccharide treated RAW264.7 macrophages[J]. Journal of Food Biochemistry,2018,42(1−2):e12535.
[42]	HAN C, YANG J K, SONG P Y, et al. Effects of Salvia miltiorrhiza polysaccharides on lipopolysaccharide-induced inflammatory factor release in RAW264.7 cells[J]. Journal of Interferon & Cytokine Research,2018,38(1):29−37.
[43]	马升, 高青莹, 徐建雄. 发酵金针菇多糖通过核转录因子-κBNOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3信号通路抑制巨噬细胞炎症反应[J]. 动物营养学报,2022(2):1205−1216. [MA S, GAO Q, XU J. Fermented Flammulina velutipes polysaccharide inhibits macrophage inflammatory response through nuclear factor-κBNOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3 signaling pathway[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition,2022(2):1205−1216. MA S, GAO Q, XU J. Fermented Flammulina velutipes polysaccharide inhibits macrophage inflammatory response through nuclear factor-κBNOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3 signaling pathway[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition. 2022(2): 1205-1216.

施引文献(5)

期刊类型引用(4)

1.	贾明月，贵香茹，原秋艳，陈美玲，简磊，董晓博，徐怀德. 不同提取方式对金针菇菇脚蛋白性质的影响. 食品工业科技. 2024(08): 119-126 . 本站查看
2.	罗羽，刘利平，冯杰，姜斯琪，张劲松，郭庆彬，刘艳芳. 不同预处理对荷叶离褶伞水提残渣多糖理化性质及免疫活性的影响. 食用菌学报. 2024(04): 75-84 . 百度学术
3.	王丽，张明，王崇队，朱雅萌，范祺，吴茂玉，和法涛，郑晓冬，马超. 金银花抗炎固体饮料的研究与开发. 中国果菜. 2024(11): 38-44+52 . 百度学术
4.	熊心怡，刘利平，冯杰，张劲松，李德顺，刘朋，刘艳芳. 蛹虫草提取物对高尿酸血症大鼠的降尿酸作用及机制. 生物技术通报. 2024(11): 34-46 . 百度学术

其他类型引用(1)

资源附件(0)

图(4) / 表(2)

计量

文章访问数: 119
HTML全文浏览量: 56
PDF下载量: 31
被引次数: 5

1. 材料与方法
1.1 材料与仪器
1.2 实验方法
1.2.1 蒸汽爆破处理
1.2.2 水提物的制备
1.2.3 UHPLC-MS/MS分析
1.2.4 粗多糖的测定
1.2.5 总酚含量的测定
1.2.6 总黄酮含量测定
1.2.7 DPPH自由基清除能力测定
1.2.8 ABTS+自由基清除能力测定
1.2.9 铁离子还原能力测定
1.2.10 抗炎活性测定
1.2.10.1 金针菇菇脚水提物对RAW264.7细胞相对活性的影响
1.2.10.2 金针菇菇脚水提物对LPS诱导的RAW264.7细胞NO产生量的影响
1.2.10.3 炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β分泌量的影响
1.3 数据处理
2. 结果与分析
2.1 金针菇菇脚水提物化合物种类及含量的差异
2.2 蒸汽爆破处理对金针菇菇脚水提物中粗多糖、总酚及总黄酮的含量的影响
2.3 蒸汽爆破处理对金针菇菇脚抗氧化活性的影响
2.4 蒸汽爆破前后金针菇菇脚水提物的体外抗炎作用比较
2.4.1 细胞存活率分析
2.4.2 金针菇菇脚水提物对LPS诱导的RAW264.7细胞NO产生率的影响
2.4.3 金针菇菇脚水提物对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的影响
3. 结论

1. 材料与方法
1.1 材料与仪器
1.2 实验方法
1.2.1 蒸汽爆破处理
1.2.2 水提物的制备
1.2.3 UHPLC-MS/MS分析
1.2.4 粗多糖的测定
1.2.5 总酚含量的测定
1.2.6 总黄酮含量测定
1.2.7 DPPH自由基清除能力测定
1.2.8 ABTS⁺自由基清除能力测定
1.2.9 铁离子还原能力测定
1.2.10 抗炎活性测定
1.2.10.1 金针菇菇脚水提物对RAW264.7细胞相对活性的影响
1.2.10.2 金针菇菇脚水提物对LPS诱导的RAW264.7细胞NO产生量的影响
1.2.10.3 炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β分泌量的影响
1.3 数据处理
2. 结果与分析
2.1 金针菇菇脚水提物化合物种类及含量的差异
2.2 蒸汽爆破处理对金针菇菇脚水提物中粗多糖、总酚及总黄酮的含量的影响
2.3 蒸汽爆破处理对金针菇菇脚抗氧化活性的影响
2.4 蒸汽爆破前后金针菇菇脚水提物的体外抗炎作用比较
2.4.1 细胞存活率分析
2.4.2 金针菇菇脚水提物对LPS诱导的RAW264.7细胞NO产生率的影响
2.4.3 金针菇菇脚水提物对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的影响
3. 结论

参考文献(43)

施引文献

资源附件(0)

蒸汽爆破处理对金针菇菇脚水提物抗氧化及抗炎活性的影响

作者简介: 孙梦雪（1994−），女，硕士，研究实习员，研究方向：食品功能评价，E-mail：smx18313941107@163.com

通讯作者: 马超（1982−），男，博士，研究员，研究方向：功能食品研发，E-mail：mch.01@163.com

计量

出版历程