Effect of Different Storage Temperatures on Postharvest Quality and Antioxidant Capacity of Yellow-fleshed Peach
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摘要: 本文主要研究了低温贮藏对黄桃果实贮藏品质和抗氧化能力的影响。黄桃采后预冷12 h，在0、4和10 ℃三个不同低温条件下进行贮藏。结果表明，0 ℃贮藏的黄桃采后腐烂率和褐变率均为0，显著低于4和10 ℃（P<0.05）。与4和10 ℃相比，0 ℃贮藏还可以明显抑制膜透率的升高，且贮藏期品质、抗氧化酶活性以及总抗氧化能力均保持在较高水平。在0 ℃下贮藏，果实能够维持较好的硬度、总糖、可溶性固形物、可滴定酸、维生素C、总酚和总黄酮的含量；同时0 ℃贮藏抑制了多酚氧化酶和过氧化物酶活力，而且有利于抗氧化酶维持较高的活性，缓解果实冷害。4和10 ℃下，硬度和维生素C含量显著下降（P<0.05），丙二醛含量显著上升（P<0.05）。采用聚类分析和主成分分析进行数据分析，聚类分析可以将19种生理和品质指标分为两个明显的独立簇，与主成分分析的结果大体一致，即14~21 d是不同温度贮藏的品质劣变点，且第一主成分可以很好地将硬度、维生素含量、可滴定酸含量与其他指标分开，这体现出黄桃果实品质指标和生理指标间的相似性与差异性。因此，0 ℃贮藏可以显著保持黄桃采后品质和抗氧化能力。Abstract: The effect of low temperature storage on the postharvest quality and antioxidant capacity of yellow-fleshed peach (YFP) was investigated. The YFP fruits were pre-cooled for 12 h after harvesting, and grouped and stored at 0, 4 and 10 ℃ in refrigeration. The quality parameters and antioxidant enzyme activities were determined. The results showed that the decay rate and browning index of YFP stored at 0 ℃ were 0, which were significantly lower than those of fruit stored at 4 and 10 ℃ (P<0.05). And membrane permeability of YFP stored at 0 ℃ was significantly suppressed. Compared with 4 and 10 ℃, the quality, total antioxidant capacity and antioxidant enzyme activity stored at 0 ℃ were all maintained at a higher level at the end of storage. The fruit hardness, contents of total sugar, soluble solid content (SSC), titratable acid (TA), vitamin C (VC), total phenol and total flavonoids were better maintained at 0 ℃. At the same time, the activities of polyphenol oxidase and peroxidase were inhibited and the fruit chilling injury was reduced at 0 ℃. At 4 and 10 ℃, hardness and VC content decreased significantly (P<0.05), while malondialdehyde (MDA) content increased rapidly (P<0.05). At present, the 19 physiological and biochemical parameters were separated into two distinct independent clusters were observed by hierarchical clustering analysis (HCA), which were generally consistent with the results of principal component analysis (PCA), the periods of 14~21 d were the quality deterioration points stored at different temperatures, and the first principal component (PC1) could well separate the hardness, VC content, TA and other indicators. The result could indicate the similarity and difference between physiological and biochemical indexes of YFP. Thus, the storage temperature on 0 ℃ can promote the quality and antioxidant ability of yellow-fleshed peach.
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黄桃（Amygdalus persica）属于蔷薇科桃属，别名黄肉桃（yellow-fleshed peach，YFP），颜色鲜艳，味道香甜，质地脆硬，富含各种维生素和矿物质，具有极高的营养价值[1-2]。黄桃属于呼吸跃变型果实，采摘时正值夏季高温天气，因此极易在环境温度下迅速成熟并腐烂。如何采取有效保鲜手段维持果实的新鲜度就成了首要目标[3]。如今已有关桃果实保鲜技术研究，如侯佳迪等[4]使用1-甲基环丙烯（1-MCP）处理不同成熟度的果实发现其对低成熟度的果实保鲜作用更显著。Zhao等[5]将热空气和瓜氏毕赤酵母复合处理桃果实，能有效抑制真菌病害的发生，延缓果实品质和抗氧化指标的下降。王友升等[6]采用水杨酸处理促进了桃果实后熟过程中内酯类物质的释放。周慧娟等[7]采用气调处理延长蟠桃贮藏期和货架期，抑制冷藏褐变。
低温贮藏一直是减缓果实成熟和采后腐烂的有效技术。但桃果实对温度敏感，温度过高保鲜效果有限，温度过低容易引起生理紊乱，直观地表现为果皮或果肉褐变、质地木质化或粉质化、风味变淡、未成熟果实不能正常软化后熟[8-9]。国内外学者采用低温贮藏技术对其他水果研究较多[10-11]，但对黄桃果实研究的较少，且对其品质和抗氧化能力影响尚不清楚。因此确定适宜的贮藏温度，对控制黄桃果实冷害，保持品质和减少采后损失具有重要意义。
因此，本文以‘锦绣’黄桃果实为材料，采后预冷12 h，采用0、4、10 ℃不同低温进行贮藏，比较不同低温处理对黄桃果实贮藏品质及抗氧化能力的影响，确定最佳处理温度；并采用主成分分析（principal component analysis，PCA）和聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）进行综合品质评价，为黄桃贮藏保鲜技术研究提供基础信息和理论支撑。
1. 材料与方法
1.1 材料与仪器
黄桃 2021年8月在湖南省怀化市麻阳县的一家商业果园中进行采摘，品种为‘锦绣’，八成熟，选择表面光滑、颜色、大小一致，没有虫害的果实；2, 6-二氯酚靛酚、VC 标准品、聚乙烯吡咯烷酮(polyvinyl-polypyrrolidone，PVPP)、2, 4, 6-三吡啶基三嗪(2, 4, 6-tris(2-pyridyl)-s-tri-azine，TPTZ) 上海瑞永生物科技有限公司；苯酚、盐酸、硫酸、乙醇、乙酸、乙酸钠、碳酸钠、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、氯化钠、聚乙二醇6000、曲拉通X-100、过氧化氢、氯化铁、硫酸亚铁、邻苯二酚、愈创木酚、钼酸铵、过硫酸钾 国药集团化学试剂有限公司；没食子酸标准品、芦丁标准品 成都曼斯特生物科技有限公司；福林-酚试剂、二硫苏糖醇(dithiothreitol，DTT)、2, 2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(2, 2'-amino-bis (2-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) ammonium-salt，ABTS)、氮蓝四唑(nitro-blue tetrazolium，NBT) 合肥博美生物科技有限责任公司；1, 1-二苯基-2三硝基苯肼(1, 1-diphenyl-2-picrylhy-drazyl，DPPH)、6-羟基-2, 5, 7, 8-四甲基-苯并二氢吡喃-2-羧酸(6-hydroxy-2, 5, 7, 8-tetram-ethylchroman-2-carboxylic acid，Trolox) 梯希爱（上海）化成工业发展有限公司。
DDS-11A电导率仪 上海雷磁仪器厂；HH-W 600电热恒温水浴锅 北京三二八科学仪器有限公司；CT3-4500质构分析仪 美国Brookfield公司；爱拓糖酸度测定仪 日本Atago公司；Avanti J-26XP型冷冻离心机 美国Beckman公司；UV-1800紫外可见分光光度计 岛津仪器（苏州）有限公司；KQ-数控超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司；WP-UP-WF-20超纯水制备机 四川沃特尔水处理设备有限公司。
1.2 实验方法
1.2.1 样品处理方法
采摘完成通过冷链运输至冷库中，将其全部放于6~8 ℃条件下预冷12 h，预冷后果心温度降至6.2 ℃。每个处理三个平行组，每组30个果实，使用0.02 mm厚聚乙烯塑料袋进行封装，然后将其分别放在0~1 ℃、4~5 ℃和10~11 ℃的冷库中贮存，相对湿度85%~90%。在第0、7、14、21、28和35 d进行取样，放至室温（20±1 ℃）半小时后再测定，同时统计黄桃果实的腐烂率、褐变指数，并检测硬度和可溶性固形物（soluble solid content，SSC）等指标，最后将桃果肉切块后用液氮研磨至粉末状，再放入−80 ℃低温冰箱中储存，后续测定生理指标使用。
1.2.2 腐烂率和褐变指数的测定
腐烂面积或果肉纵切面褐变面积超过1 cm2的桃果实均视为坏果。通过从以下等级目测评估桃果实的褐变程度：0=无症状，1=0%~10%，2=10%~25%，3=25%~50%，4=超过50%。褐变指数和腐烂率的计算公式为：
褐变指数(%)=∑（褐变程度×该水平的果实数）果实总数×4×100 (1) 腐烂率(%)=∑坏果原始果总数×100 (2) 1.2.3 膜透性和丙二醛（MDA）的测定
测定膜透性参考Zhou等[12]的方法并加以改进，将果实纵向切开，打孔器打孔，取直径6 mm、高5 mm的圆柱体果粒。将果粒置于烧杯中，在烧杯中加去离子水，在30 ℃的水浴锅中水浴加热1 h，并测定电导率为A0；随后，将其维持沸腾状态10 min后，再冷却到室温，此时测电导率为A1。根据Liu等[13]的方法测定丙二醛含量，将1 g冷冻桃肉粉用5 mL 100 g·L−1的三氯乙酸溶液匀浆，并立即以16000×g离心10 min，收集上清液。准确吸取2 mL的上清液，加入2 mL 6.7 g·L−1硫代巴比妥酸溶液，煮沸20 min，然后立即于冰上冷却，以12000×g离心10 min，于450、532和600 nm处测定吸光值，以每千克所含MDA含量的纳摩尔表示，即nmol·kg−1。
膜透性(%)=A0A1×100 (3) MDA含量=[6.45×(OD532−OD600)−0.56×OD450]×Vt×VrVs×m (4) 式中：Vt为萃取液的总体积，mL；Vr为反应混合液的总体积，mL；Vs为反应混合液中所含的萃取液的体积，mL；m为以新鲜重量（FW）为基础的样品质量，g。
1.2.4 生理参数的测定
使用CT3-4500质构分析仪，测试参数为深度8 mm，测试速度为2 mm/s，距离为8 mm，使用50 kg校准的称重传感器，单位为g；同时采用数字折射计测定桃果实的可溶性固形物（SSC）和可滴定酸（TA）含量，以百分比（%）表示。
维生素C（VC）的含量参考2, 6-二氯酚靛酚法测定[14]，单位为mg/100 g，结果以鲜重计。采用苯酚-硫酸法[15]测定总糖的含量，以百分比（%）表示。
1.2.5 总酚和总黄酮含量的测定
根据Wang等[16]的方法，采用80%（v/v）乙醇溶液提取桃果实中的酚类物质。准确称取5 g冷冻桃肉粉，加入80%（v/v）的乙醇溶液，在60 ℃温度下超声功率为240 W，提取1 h后，在4 ℃下以16000×g转速冷冻离心25 min，将上清液收集作为酚类物质和黄酮物质测定的提取液，于低温环境下保存备用。参考吕群金等[17]的方法测定总酚含量，以标准品没食子酸做标准曲线，回归方程：y=0.0139x+0.1405，相关系数R2=0.998。参考Jia等[18]测定黄酮的方法，用芦丁做标准曲线，回归方程y=0.01116x+0.005756，相关系数R2=0.998。
1.2.6 可溶性蛋白含量的测定
采用考马斯亮蓝染色法测定可溶性蛋白含量，在波长595 nm处测定吸光值，以每100 g鲜重所含可溶性蛋白质的质量表示，即mg/100 g。
1.2.7 抗氧化酶活力的测定
1.2.7.1 过氧化物酶（POD）和多酚氧化酶（PPO）活力的测定
制备提取液：用20 mL含1 mmol 聚乙二醇（PEG 6000）、4%（w/v）交联聚乙烯吡咯烷酮（PVPP）和1%曲拉通X-100（v/v）的乙酸-乙酸钠缓冲液（0.1 mol·L−1，pH5.5）冰浴条件下研磨冷冻桃肉粉成匀浆，冷冻离心后，低温保存备用。POD活力的测定采用愈创木酚染色法，在波长470 nm处测定吸光值，以每克鲜重每分钟吸光值增加1为一个POD活性单位（U）。按照Nguyen等[19]的方法测定PPO活力，以邻苯二酚为底物，在波长420 nm处测定吸光值，以每克鲜重每分钟吸光值增加1为一个PPO活性单位（U）。
1.2.7.2 超氧化物歧化酶（SOD）活力的测定
用20 mL含5 mmol/L DTT（w/v）和5% PVPP（w/v）的磷酸钠缓冲液（0.1 mol·L−1，pH7.8）从冷冻桃肉粉中提取SOD。在波长560 nm处测定吸光值，一个SOD活性单位（U）表示为对NBT光化还原的抑制为50%。
1.2.7.3 过氧化氢酶（CAT）活力的测定
参考Yu等[20]的方法，用0.9%（w/v）的氯化钠水溶液从冷冻桃肉粉中提取CAT，加入钼酸铵迅速中止CAT分解H2O2的反应，剩余的H2O2与钼酸铵反应产生一种淡黄色的络合物，在波长405 nm处测定吸光值，以每克鲜重每分钟分解1 μmol的H2O2的量为一个CAT活性单位（U）。
1.2.8 非酶抗氧化活性的测定
1.2.8.1 DPPH自由基清除能力的测定
参考Brand-Williams等[21]的测定方法，准确吸取1 mL提取液于试管中，随后加入2 mL浓度为0.3 mmol·L−1的DPPH溶液（80%乙醇溶解），混匀，30 ℃水浴中反应1 h后，于波长517 nm处测定吸光值。以Trolox为标准当量，计算反应溶液的抗氧化能力，单位mg TE·100 g−1表示。
1.2.8.2 ABTS自由基清除能力的测定
参考Wang等[22]的测定方法，将7.4 mmol·L−1ABTS水溶液和2.6 mmol·L−1 过硫酸钾水溶液按体积比1:1混合，室温下避光放置12 h后，用80%乙醇（v/v）稀释约50倍其吸光度小于0.7，制成ABTS自由基工作液。准确吸取0.1 mL提取液于试管中，加入5 mL的ABTS自由基工作液，暗处反应10 min后，于波长734 nm处测定吸光值。以Trolox为标准当量，计算反应溶液的抗氧化能力，单位mg TE·100 g−1表示。
1.2.8.3 FRAP自由基清除能力的测定
参考Benzie等[23]测定方法，将300 mmol·L−1乙酸钠缓冲液（pH3.6）、10 mmol·L−1 TPTZ溶液和20 mmol·L−1氯化铁溶液按体积比10:1:1混合，制成FRAP溶液。吸取3.6 mL FRAP溶液，120 μL提取液和360 μL去离子水，混合，在37 ℃水浴中反应1 h，于波长593 nm处测定吸光值。以FeSO4为标准当量，样品抗氧化活性以达到同一吸光度值为为一个FRAP值，计算溶液的抗氧化能力，单位mg FeSO4·100 g−1表示。
1.3 数据处理
所有实验重复三次，实验结果以平均值±标准差表示。数据通过Excel 2010软件统计和整理，并使用SPSS 16.0软件进行方差分析和Duncan多重比较，P<0.05表示差异显著。使用Origin 2021软件绘图。
2. 结果与分析
2.1 黄桃果实腐烂率和褐变指数的变化
如图1A所示，随着贮藏时间的延长，4 和10 ℃贮藏下的黄桃果实腐烂率逐渐上升，在贮藏结束时分别达到最大值为40%和60%。0 ℃下贮藏的黄桃果实在整个贮藏期间内没有明显冷害，且0 ℃组的腐烂率显著低于4和10 ℃组（P<0.05）。
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如图1B所示，4和10 ℃组第7 d首次观察到褐变现象，褐变指数分别为8.3%和25.2%，并于第21 d分别达到25.8%和41.7%，随后，4 ℃组有褐变快速加重的趋势，在第28 d达到76.7%，且比10 ℃组的褐变程度更严重。这可能是由于黄桃果实对温度比较敏感[24]，在6~8 ℃的低温条件贮藏时生理紊乱更快，造成更严重的褐变现象。另外，在整个贮藏期内，0 ℃组没有观察到褐变现象，说明0 ℃贮藏有利于缓解黄桃果实褐变的发生。
2.2 黄桃果实膜透性和丙二醛（MDA）含量的变化
水果在采后贮藏期间出现衰老和冷害时，电解质会发生泄露和细胞膜逐渐不完整[25]。如图2A所示，三组黄桃果实的膜透性在贮藏期内均呈上升趋势，4和10 ℃组第28 d达到最大值分别为67.1%和73.7%，且在贮藏14 d开始，4和10 ℃组的果实膜透性均显著高于0 ℃组（P<0.05）。
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图 2 黄桃果实膜透性（A）和MDA含量（B）的变化Figure 2. Changes of membrane permeability (A) and MDA content (B) of YFPMDA是果实衰老过程的主要产物[26]，是评估细胞膜系统受损程度的另一个指标。如图2B所示，随着贮藏时间的延长，三组黄桃果实的MDA含量在贮藏期内均呈上升趋势与膜透性的趋势相同。在第28 d，4和10 ℃组的MDA含量达到最大值分别为3.97和6.18 nmol·kg−1，而0 ℃组的MDA含量为1.77 nmol·kg−1显著低于4 ℃和10 ℃组（P<0.05）。因此，可以看出当黄桃果实贮藏的温度越高时，MDA含量也就越高，较低的温度贮藏有利于黄桃品质的保持。
2.3 黄桃果实生理品质的变化
如图3A所示，在整个贮藏期，黄桃果实的硬度都呈现不断下降的趋势，且从7 d开始0 ℃组的硬度显著高于4和10 ℃组（P<0.05）。贮藏第0 d时三组硬度为1079.8 g，此时硬度最大；在第28 d时分别下降至716.8 g（0 ℃）、213.2 g（4 ℃）和144.0 g（10 ℃）。
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图 3 黄桃果实硬度（A）、总糖含量（B）、SSC质量分数（C）、TA质量分数（D）和VC含量（E）的变化Figure 3. Changes of the firmness (A), total sugar content (B), SSC content (C), TA content (D) and VC content (E) of YFP如图3B所示，总糖含量的变化呈现先上升后下降的趋势，且在贮藏的第14 d达到峰值，其中，以10 ℃组贮藏的黄桃果实总糖含量最高为34.5%，0和4 ℃组较低分别为30.0%、30.5%。总糖含量下降阶段，0 ℃组下降趋势较为平缓，而10 ℃组下降速度最快；在第28 d分别下降至26.8%（0 ℃）、23.9%（4 ℃）和22.5%（10 ℃）。
如图3C所示，SSC质量分数呈线先上升后下降的趋势，但4 ℃组在第14 d达到峰值13.4%，10 ℃组在第21 d达到峰值13.2%，而0 ℃组到第28 d才达到峰值13.5%。在贮藏后期SSC含量下降阶段，0 ℃组下降较为缓慢，且显著高于10和4 ℃组（P<0.05）。
如图3D所示，TA质量分数总体上呈下降趋势，但10 ℃组有短暂上升。在贮藏第0 d至第7 d期间TA质量分数下降速度最快；贮藏第0 d时TA质量分数为0.95%，在贮藏第7 d分别下降至0.71%（0 ℃）、0.64%（4 ℃）、0.53%（10 ℃），之后0 ℃组下降趋势较为缓慢，且除第21 d外，0 ℃的TA质量分数显著高于10和4 ℃组（P<0.05）。
如图3E所示，VC含量都呈现下降趋势，贮藏第0 d含量最高为9.9 mg/100 g，在贮藏第28 d时，下降至分别为6.8 mg/100 g（0 ℃）、5.8 mg/100 g（4 ℃）和5.5 mg/100 g（10 ℃），且在贮藏过程中0 ℃组VC含量显著高于4和10 ℃组（P<0.05）。
2.4 黄桃果实总酚和总黄酮含量的变化
如图4A所示，总酚含量均呈现先上升后下降的趋势，在贮藏第 21 d，4 和 10 ℃ 达到峰值分别为1094.9和 1210.3 mg/100 g，而 0 ℃ 组在贮藏第 28 d 才达到 1015.4 mg/100 g。在贮藏后期，4 ℃ 和 10 ℃ 组的总酚含量呈现下降的趋势，在第28 d 分别下降至 639.2 和 609.3 mg/100 g，而 0 ℃ 组下降程度与其他两组相比较则较为平缓。如图4B 所示，总黄酮含量的变化与总酚相似，都呈先上升后下降趋势。在贮藏第 21 d，4 和 10 ℃ 组达到峰值分别为 630.4 和 642.5 mg/100 g，在贮藏第 28 d 下降至 448.4 和 398.9 mg/100 g。0 ℃ 组的总黄酮含量在贮藏第28 d达到峰值674.7 mg/100 g，随着贮藏时间的延长，总黄酮含量缓慢地下降，且贮藏结束时总黄酮的含量显著高于 4 和 10 ℃ 组（P<0.05）。因此，以上可以看出 0 ℃ 贮藏明显地延缓了贮藏后期总酚和总黄酮含量的下降。
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图 4 黄桃果实总酚含量（A）和总黄酮含量（B）的变化Figure 4. Changes of the total phenols content (A) and total flavonoids content (B) of YFP2.5 黄桃果实可溶性蛋白含量的变化
如图5所示，4和10 ℃组的可溶性蛋白含量呈现先上升后下降的趋势，在贮藏第0 d时可溶性蛋白含量为0.47 mg/g，贮藏第21 d后达峰值分别为0.77和0.79 mg/g。而0 ℃组整个贮藏期呈上升趋势，贮藏第35 d可溶性蛋白含量达0.70 mg/g，在贮藏后期0 ℃组的可溶性蛋白的含量显著高于4和10 ℃组（P<0.05），可以看出0 ℃可延缓可溶性蛋白含量的下降。
2.6 黄桃果实抗氧化酶活性的变化
如图6A所示，PPO活力均呈现先上升后下降的趋势，贮藏到第21 d时达到峰值，依次为0.84 U·g−1 pro（0 ℃）、1.06 U·g−1 pro（4 ℃）和1.05 U·g−1 pro（10 ℃），随后PPO活力开始降低，0 ℃组相较于其他处理组下降较为缓慢，并与4和10 ℃组具有显著性差异（P<0.05）。
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图 6 黄桃果实PPO活力（A）、POD活力（B）、SOD活力（C）和CAT活力（D）的变化Figure 6. Changes of the PPO activity (A), POD activity (B), SOD activity (C) and CAT activity (D) of YFP如图6B所示，POD活力在整个贮藏期呈先上升后下降趋势，与PPO活力趋势基本一致。4和10 ℃组的POD活力都在贮藏第21 d达到峰值，分别为3.13和2.98 U·g−1 pro，随后在贮藏第28 d下降至2.56和2.79 U·g−1 pro，而0 ℃组的POD活力在第28 d才达到峰值为3.04 U·g−1 pro，可以看出0 ℃可以延缓POD酶活力上升。
如图6C所示，4和10 ℃组的SOD活力在贮藏期呈先上升后下降趋势，与PPO、POD活力趋势相同；在贮藏第21 d达到峰值为3.31和3.24 U·g−1 pro，随后在贮藏第28 d下降至2.55和2.79 U·g−1 pro。而0 ℃组的SOD活力在整个贮藏期呈上升趋势，贮藏结束时达2.63 U·g−1 pro。
如图6D所示，0 ℃组的CAT活力呈先上升后下降趋势在贮藏第28 d达到峰值，此时0 ℃组的峰值为0.054 U·g−1 pro，4和10 ℃组则在贮藏第21 d达到峰值，均为0.056 U·g−1 pro。但在贮藏后期0 ℃组的CAT活力显著高于4和10 ℃组（P<0.05）。
2.7 黄桃果实总抗氧化活性的变化
如图7所示，采用DPPH、ABTS、FRAP三种方法测定0、4和10 ℃对黄桃果实总抗氧化活性的影响。DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和FRAP自由基清除能力都呈先上升后下降的变化趋势。4 ℃组的DPPH和ABTS自由基清除能力的峰值出现在贮藏第21 d分别为227.1 mg TE·100 g−1和114.9 mg TE·100 g−1，而10 ℃组的DPPH和ABTS自由基清除能力峰值出现在贮藏第14 d分别为230.7和119.5 mg TE·100 g−1；4和10 ℃组的FRAP自由基清除能力的峰值均在贮藏第21 d分别为82.4和88.1 mg FeSO4·100 g−1。0 ℃组抗氧化活性的峰值均出现在第28 d，分别为214.8、102.7 mg TE·100 g−1和85.1 mg FeSO4·100 g−1，且贮藏后期0 ℃组的DPPH、ABTS、FRAP的抗氧化值显著高于4和10 ℃组（P<0.05），可以看出0 ℃在贮藏后期有更高的抗氧化能力。
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图 7 黄桃果实DPPH（A）、ABTS（B）和FRAP（C）自由基清除能力的变化Figure 7. Changes of free radical scavenging ability of DPPH (A), ABTS (B) and FRAP (C) of YFP2.8 相关性分析
如图8A所示，通过对黄桃果实的19项生理指标进行主成分分析（PCA），模型显示出样本集的总方差为83.6%（PC1为64.1%，PC2为19.5%）。结果表明，在0、4和10 ℃下，不同时间贮藏的样品可以很好地被区分。如图8A所示，PC1将贮藏前期（0、7、14 d）与贮藏后期（21、28、35 d）的样品分离开，说明贮藏前期与后期样品差异较大，14~21 d是不同温度贮藏的品质劣变点；如图8B，PC1可以很好地将硬度、VC含量、TA质量分数与其他指标分开。
通过对黄桃果实的19项生理指标进行聚类分析（HCA），解析低温对黄桃果实贮藏品质和抗氧化能力的影响。如图9所示，可以观察到两个明显的独立簇，第一组（A）包含腐烂率、褐变指数、膜透性、丙二醛含量、总糖含量、SSC质量分数、CAT活力、总酚含量、PPO活力、可溶性蛋白含量、总黄酮含量、FRAP、DPPH、ABTS、POD活力和SOD活力；该组又分为两小组，第一组由腐烂率、褐变指数、膜透性和丙二醛含量组成，第二小组由其他指标组成。第二组（B）由硬度、VC含量和TA质量分数组成，与PCA分析结果相同。从图9中的皮尔逊相关性可以看出，总酚、总黄酮含量与抗氧化酶和总抗氧化能力呈显著正相关（P<0.05或P<0.01）；抗氧化酶与可溶性蛋白的含量是呈显著正相关（P<0.05或P<0.01）；膜透性和丙二醛含量与抗氧化酶和总抗氧化能力呈显著正相关（P<0.05）。
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图 9 基于黄桃果实生理指标的皮尔逊相关性热图注：**：表示在P<0.01水平显著相关，*：表示在P<0.05水平显著相关。Figure 9. Heatmap of Pearson correlations based on the physiological indicators of YFP3. 讨论与结论
膜透性和MDA含量反映了细胞膜的损害程度，温度越高，膜透性和MDA含量越高，黄桃果实的衰老程度越严重。0 ℃贮藏延缓了膜透性和MDA含量的上升，有利于其结构的完整性，这与先前Liu等[1]的研究结果一致。总酚和总黄酮的含量与抗氧化酶活性变化趋势基本趋于一致，总酚和总黄酮具有清除自由基和降低膜流动性的作用[27]，维持了细胞膜的稳定性。
抗氧化酶对植物细胞具有保护作用[28]，可以减轻活性氧的伤害，且抗氧化酶和抗冷性呈正相关[29]。0 ℃贮藏延缓了SOD和CAT的上升，且在贮藏后期SOD和CAT活力显著高于4和10 ℃组（P<0.05），低温有助于保持高抗氧化酶的活性，减轻果实冷害以及其他生理疾病。可溶性蛋白含量与抗氧化酶活力是呈显著正相关（P<0.05或P<0.01），贮藏初期可溶性蛋白含量增加，是随着酶活力的增加而增加，贮藏后期急剧下降，与黄桃果实的生理紊乱有关，0 ℃贮藏延缓了可溶性蛋白含量的下降。总抗氧化能力与总黄酮、总酚和VC的变化基本一致。据前人研究，桃果实中较高抗氧化活性与果肉褐变相关[1]，0 ℃贮藏保持了较高的抗氧化活性。
果肉褐变或变色或与PPO和POD催化酚类物质有关。0 ℃贮藏延缓了PPO和POD的上升，在贮藏后期PPO和POD活力显著高于4 和10 ℃组（P<0.05），PPO和POD达到一个动态平衡，而贮藏后期4和10 ℃组含量快速下降，可能跟发生生理紊乱有关。
温度是黄桃果实贮藏过程中的最重要因素之一，在不同低温下贮藏黄桃果实的生理品质也有所不同。0 ℃下贮藏可以显著抑制黄桃果实在采后贮藏时的腐烂率、褐变程度和膜透率的上升，保持较高的果实品质和抗氧化活性。0 ℃下贮藏维持了果实硬度、总糖、SSC、TA、VC、总酚和总黄酮的含量；同时抑制了PPO活力、POD活力、SOD活力、CAT活力和总抗氧化能力的降低。因此，0 ℃贮藏可有效延长黄桃的保鲜期，如果0 ℃贮藏与其他的杀菌措施（如臭氧）或包装（如自发气调）效果将更好。
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图 2 黄桃果实膜透性（A）和MDA含量（B）的变化
Figure 2. Changes of membrane permeability (A) and MDA content (B) of YFP
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图 3 黄桃果实硬度（A）、总糖含量（B）、SSC质量分数（C）、TA质量分数（D）和VC含量（E）的变化
Figure 3. Changes of the firmness (A), total sugar content (B), SSC content (C), TA content (D) and VC content (E) of YFP
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图 4 黄桃果实总酚含量（A）和总黄酮含量（B）的变化
Figure 4. Changes of the total phenols content (A) and total flavonoids content (B) of YFP
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图 6 黄桃果实PPO活力（A）、POD活力（B）、SOD活力（C）和CAT活力（D）的变化
Figure 6. Changes of the PPO activity (A), POD activity (B), SOD activity (C) and CAT activity (D) of YFP
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图 7 黄桃果实DPPH（A）、ABTS（B）和FRAP（C）自由基清除能力的变化
Figure 7. Changes of free radical scavenging ability of DPPH (A), ABTS (B) and FRAP (C) of YFP
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