Disinfection Effect of High-pressure Carbon Dioxide on Human Coronavirus (hCoV-229E)
-
摘要: 目的：探究高压二氧化碳（HPCD）对人冠状病毒229E（hCoV-229E）的消杀效果。方法：采用HPCD在不同温度（10、25、37 ℃）、压力（6.3、10 MPa）和时间（15、30 min）条件下，对hCoV-229E进行消杀处理。结果：与不加压相同温度处理的对照组相比，HPCD在10 ℃、6.3 MPa条件下对50 mL离心管中的病毒液处理30 min后，病毒滴度显著降低（P<0.05）；在37 ℃、10 MPa条件下对50 mL离心管中的病毒液处理15 min后，病毒滴度极显著降低（P<0.01）；在37 ℃、10 MPa条件下对表面含有病毒的三文鱼肉、虾壳、聚乙烯类包装材料处理15 min，病毒滴度显著降低（P<0.05）。结论：HPCD在37 ℃、10 MPa条件下处理15 min，可以有效消杀食品（三文鱼肉和虾壳）及聚乙烯类包装材料表面的hCoV-229E。Abstract: Objective: Exploring the disinfection effect of high-pressure carbon dioxide (HPCD) on human coronavirus 229E (hCoV-229E). Methods: The human coronavirus 229E (hCoV-229E) was treated by HPCD at different temperatures (10, 25, and 37 ℃) and pressures (6.3 and 10 MPa) for different time (15 and 30 min). Result: Compared with the control groups under the corresponding temperatures, the virus titer in 50 mL tube treated with HPCD at 10 ℃ and 6.3 MPa for 30 min was significantly decreased (P<0.05). The virus titer was also significantly reduced after treatment with HPCD at 37 ℃ and 10 MPa for 15 min (P<0.01). Moreover, the virus titers inoculated on the surfaces of salmon meat, shrimp shell, and polyethylene packing materials were all significantly decreased after HPCD treatment at 37 ℃ and 10 MPa for 15 min as compared with the corresponding control groups (P<0.05). Conclusion: HPCD treatment at 37 ℃ and 10 MPa for 15 minutes could effectively disinfect hCoV-229E on the surface of food (salmon meat and shrimp shell) and polyethylene packaging materials.
-
2019新型冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）自出现以来，至今仍在全球大流行[1]。截至2022年6月13日，造成全球约5.3亿人感染，630余万人死亡（https://covid19.who.int/）。随着病毒的广泛传播，SARS-CoV-2不断发生突变，德尔塔及奥密克戎等变异毒株层出不穷，病毒感染力和致病力不断变化[2-5]，严重威胁人类健康及公共卫生安全。
冠状病毒是有囊膜的单股正链RNA病毒，分为α、β、γ、δ四个属。目前可以感染人的冠状病毒有人冠状病毒229E（human coronavirus 229E，hCoV-229E）、OC43（human coronavirus OC43，hCoV-OC43）、NL63（human coronavirus NL63，hCoV-NL63）、HKU1（human coronavirus HKU1，hCoV-HKU1）及严重急性呼吸综合征冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus，SARS-CoV）、中东呼吸综合征冠状病毒（Middle East respiratory syndrome coronavirus，MERS-CoV）和SARS-CoV-2等7种冠状病毒，其中hCoV-229E、hCoV-NL63为α属，hCoV-OC43、hCoV-HKU1、SARS-CoV、MERS-CoV和SARS-CoV-2为β属[6-9]。所有冠状病毒在复制、形态结构等方面都存在相似之处，但感染后的潜伏期和致病力有所差别[10]。
有研究表明，新冠肺炎（coronavirus disease 2019，COVID-19）患者呼吸系统和消化系统均可排毒，且消化系统排毒时间更长[11]；而SARS-CoV-2可以通过消化系统感染实验动物[12-13]，表明SARS-CoV-2存在粪口传播的风险。同时，在冷链温度条件下（4 和−20 ℃），SARS-CoV-2可以在三文鱼、牛肉和猪肉表面存活一段时间[14]；而在我国进口的冷链运输食品包装表面检测出SARS-CoV-2核酸并分离到活病毒，提示SARS-CoV-2存在冷链传播途径[15-17]。此外，海洋中多种鱼类血管紧张素转化酶2（angiotensin-converting enzyme 2，ACE2）受体与人ACE2受体的氨基酸序列同源性较高，存在感染SARS-CoV-2的风险[18]。以上研究结果表明，在“新冠肺炎”疫情防控工作中不仅要防止“人传人”，还要防止“物传人”，需要加强对冷链食品及外包装的消杀工作。
冠状病毒结构较简单，易受温度、紫外线辐射、pH和渗透压等环境因素影响，诱导病毒结构蛋白构象发生变化，破坏病毒囊膜或降解病毒核酸，影响病毒稳定性或丧失感染性[19]。研究表明，冠状病毒在56 ℃的条件下30 min即可灭活；在70%乙醇作用10 min、丙醇作用90 s或0.5%戊二醇作用2 min即可丧失感染性[20]。由于食品中严禁添加非食用成分，常规的消毒剂无法在食品表面使用，而传统的巴氏杀菌、高温杀菌等热杀菌技术对冷链食品处理后，会引起食品中营养物质流失、食品颜色改变，影响食品口感及风味[21-23]。高压二氧化碳（high-pressure carbon dioxide，HPCD）是一种新型非热杀菌技术，可有效克服传统热杀菌技术的弊端，在较低压力（<50 MPa）和较低温度（5~60 ℃）条件下利用CO2对食品进行处理，可实现杀菌钝酶效果，同时保留食品原有风味、口感及营养成分[24-26]。HPCD处理过程温度低、杀菌效果好，泄压过程CO2吸热产生的冷冻效应可实现对冷冻产品品质的维持，使其在冷链食品消杀方面具有较好的应用潜力。
由于SARS-CoV-2需要在生物安全三级实验室中进行操作，受试验条件限制；而hCoV-229E的稳定性等生物学特性与MERS-CoV、SARS-CoV等冠状病毒较为相近[27]，并可以在生物安全二级实验室进行操作。因此，本研究选用hCoV-229E作为SARS-CoV-2的替代毒株，探究HPCD对冠状病毒的消杀效果，为HPCD应用于冷链食品及包装的消杀提供理论依据，为疫情常态化防控中冷链食品的消毒和管理措施提供新思路。
1. 材料与方法
1.1 材料与仪器
三文鱼肉、虾壳、聚乙烯类包装材料 中国农业大学食品科学与营养工程学院提供；人肝癌细胞（Huh-7） 中国医学科学院基础医学研究所；人冠状病毒229E（毒株名：VR-740） 赵金存教授惠赠，实验室培养保存；DMEM培养基、胎牛血清（FBS） GIBCO公司；青霉素钠、硫酸链霉素 山东鲁抗医药股份有限公司；生理盐水 山东华鲁制药有限公司；二氧化碳（纯度≥99.5%） 河南沂之源气体销售有限公司。
CAU-HPCD-1间歇式HPCD杀菌装置 中国农业大学专利产品（专利号ZL200520132590.X）；5424R高速冷冻离心机 Eppendorf公司；ME-E涡旋仪 大龙兴创实验仪器有限公司；MCO-170AICUVL-PC CO2细胞培养箱 普和希株式会社；LEICA DMi1倒置显微镜 德国徕卡公司。
1.2 实验方法
1.2.1 hCoV-229E病毒增殖
取100 μL hCoV-229E病毒液加入Huh-7细胞中，置于5% CO2、37 ℃恒温培养箱中孵育1 h，孵育结束后对细胞培养瓶中补充细胞维持液（DMEM培养基中含终浓度为100 U/mL的青霉素和100 μg/mL的链霉素、2% FBS），于5% CO2、37 ℃恒温培养箱中继续培养。每24 h观察细胞病变（cytopathic effect，CPE）情况；当细胞出现80%以上CPE时收获病毒培养液[20]。
1.2.2 HPCD对hCoV-229E消杀条件的研究
50 mL离心管中加入5×103.5 TCID50的hCoV-229E病毒液（总体积5 mL，生理盐水稀释）；在不同的消杀条件下（见表1）使用HPCD对hCoV-229E进行处理，每组进行三次重复试验。消杀处理方法如下：试验组标记后放入预热（预冷）的间歇式HPCD杀菌装置反应釜中，关闭反应釜通入CO2，加压至预设压力后进行保压、保温，到达保压时间后对反应釜泄压，完成后取出置于冰上；将不加压、相同温度处理的对照组放入反应釜，不通入CO2，使用间歇式HPCD杀菌装置对样品进行热处理；所有样品处理完成后进行TCID50测定。
表 1 HPCD对hCoV-229E的处理条件Table 1. Treatment conditions of HPCD for hCoV-229E实验分组 样品分组 处理温度（℃） 处理压力（MPa） 保压时间（min） 组A 试验组A 10 6.3 15 对照组A 10 − 15 组B 试验组B 25 6.3 15 对照组B 25 − 15 组C 试验组C1 37 6.3 15 试验组C2 37 10 15 对照组C 37 − 15 组D 试验组D 10 6.3 30 对照组D 10 − 30 1.2.3 HPCD对食品及聚乙烯类包装材料表面hCoV-229E的消杀效果
三文鱼肉、虾壳、聚乙烯类包装材料表面滴加103.5 TCID50的hCoV-229E病毒液（滴加病毒液的总体积为100 μL），根据1.2.2确定的HPCD最佳消杀条件，对三文鱼肉、虾壳、聚乙烯类包装材料等样品（三文鱼肉边长为1 cm×1 cm×1 cm，为块状；虾壳、聚乙烯类包装材料边长为1 cm×1 cm，为片状）进行消杀处理，同时设立相对应不加压的相同温度处理的对照组；每组三次重复试验，试验操作方法同1.2.2。HPCD对样品消杀后，向盛放样品的离心管中加入900 μL病毒稀释液（DMEM培养基中含终浓度为100 U/mL的青霉素和100 μg/mL的链霉素），涡旋振荡2 min，回收上清液后在高速冷冻离心机中7000 r/min离心10 min，取离心后的上清液使用0.22 μm滤器过滤，然后滴定TCID50[18]。TCID50计算方法如下：
待滴定样品的不同稀释度稀释液加入96孔板细胞后，培养至120 h，显微镜观察并记录96孔细胞培养板中的细胞病变情况，按照Reed-Muench法[28]计算病毒的TCID50，计算公式如下：
Log10TCID50=高于50%感染率的病毒稀释度对数+相应距离比×稀释系数的对数
相应距离比=高于50%的阳性百分数−50%高于50%的阳性百分数−低于50%的阳性百分数 1.3 数据处理
本试验所有数据使用GraphPad Prism 8进行统计，使用T-test对数据进行统计学分析，当P<0.05时具有统计学意义。
2. 结果与分析
2.1 hCoV-229E在Huh-7细胞中增殖
如图1所示，接种病毒24 h后，与对照Huh-7细胞（图1a）相比，接种hCoV-229E的细胞（图1b）无明显细胞形态差异；接种病毒96 h后，与对照Huh-7细胞（图1c）相比，接种hCoV-229E的Huh-7细胞（图1d）出现细胞皱缩、脱落等典型细胞病变。
![]()
图 1 hCoV-229E接种Huh-7细胞后细胞病变观察结果（200×）注：培养24 h后对照组（a）和感染组（b）Huh-7细胞的形态；培养96 h后对照组（c）和感染组（d）Huh-7细胞的形态。Figure 1. Cytopathic effects of the hCoV-229E infected Huh-7 cells (200×)2.2 HPCD对hCoV-229E的最佳消杀条件
HPCD在6.3 MPa压力和不同的温度（10、25及37 ℃）条件下，分别对5×103.5 TCID50的hCoV-229E病毒液处理15 min。由图2可知：试验组A、试验组B及试验组C1之间病毒滴度无显著差异（P>0.05），与对应的相同温度处理对照组相比，各试验组经HPCD处理后hCoV-229E病毒滴度有下降趋势，但无统计学意义（P>0.05）；在6.3 MPa压力、10 ℃条件下（试验组D）对5×103.5 TCID50的hCoV-229E病毒液进行30 min处理，发现试验组与对照组差异显著（P<0.05）；在相同压力和相同温度（10 ℃）消杀条件下，试验组A（处理15 min）和试验组D（处理30 min）之间的病毒滴度没有显著差异（P>0.05），提示在10 ℃低温条件下延长HPCD处理时间不是HPCD消杀hCoV-229E的主要因素；在37 ℃处理15 min条件下，提高HPCD处理压力，由6.3 MPa（试验组C1）提升至10 MPa（试验组C2），结果显示提高压力后试验组C2的病毒滴度较试验组C1显著下降（P<0.05），较对照组C相比极显著下降（P<0.01）。试验结果表明，提高CO2的压力会提升HPCD对hCoV-229E的消杀效果。综上，HPCD对hCoV-229E的最佳消杀条件为37 ℃、10 MPa消杀15 min。
![]()
图 2 不同的HPCD处理条件对hCoV-229E滴度的影响注：*表示P<0.05；**表示P<0.01；ns表示P>0.05。Figure 2. Effects of different HPCD treatment conditions on virus titers of hCoV-229E2.3 HPCD对食品及包装材料表面hCoV-229E消杀效果
HPCD在37 ℃、10 MPa的条件下，对表面含103.5 TCID50 hCoV-229E的三文鱼肉、虾壳及聚乙烯类包装材料处理15 min。结果如图3所示：与不加压的温度处理对照组相比，三文鱼肉试验组的病毒滴度显著下降（P<0.05），虾壳及聚乙烯类包装材料试验组病毒滴度极显著下降（P<0.01）。说明HPCD在37 ℃、10 MPa的条件下对表面含有hCoV-229E的三文鱼肉、虾壳和聚乙烯类包装材料处理15 min后，对hCoV-229E具有一定的消杀效果；同时，相同HPCD的处理条件对虾壳及包装材料表面hCoV-229E的消杀效果要强于对三文鱼肉表面病毒的消杀效果，原因可能是由于三文鱼肉蛋白质含量较高[29]，影响HPCD对三文鱼肉中hCoV-229E病毒的消杀效果。
![]()
图 3 HPCD对表面含有hCoV-229E的食品及包装材料的消杀效果注：*表示P<0.05；**表示P<0.01；***表示P<0.001。Figure 3. Disinfection effects of HPCD against hCoV-229E virus on the surface of food and packaging materials3. 讨论与结论
HPCD是一种绿色环保、无毒无害的杀菌方式，对微生物具有良好的杀菌作用，广泛应用于食品中大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、芽孢杆菌及孢子等微生物的消杀[30-33]。温度和压力是影响HPCD消杀微生物的主要因素[34]。有研究发现，提高HPCD消杀的处理温度、压力及延长消杀时间可有效提高对微生物的消杀效果[35-36]。本研究发现，HPCD在6.3 MPa和处理15 min的条件下，提高处理温度（10、25和37 ℃）并不能显著提高消杀效果（P>0.05），表明在6.3 MPa处理15 min条件下温度不是影响HPCD对hCoV-229E消杀效果的主要因素。此外，在10 ℃、6.3 MPa的条件下，延长HPCD的保压处理时间（由15 min延长至30 min）后发现，病毒滴度差异不显著（P>0.05），提示在该条件下处理时间也不是HPCD对hCoV-229E消杀的主要因素。
在本研究中，使用37 ℃和10 MPa的试验条件对样品处理15 min，获得了较好的消杀效果。可能是由于相比气态的CO2，超临界状态下（Tc=31.1 ℃；Pc=7.38 MPa）的CO2具有较低表面张力，可以更好地渗透到微孔中，对微生物具有更高的杀灭作用[21,37]。Werenr等研究也证实超临界的CO2相比于气态的CO2对牛奶中的微生物具有更好的杀灭作用[38]。此外，食品中蛋白质含量也是影响HPCD消杀效果的另一个因素，对脂肪含量较高的食品的消杀效果较差[29]。本研究也发现，超临界状态的CO2对三文鱼肉样品表面的hCoV-229E有一定消杀效果，对虾壳和聚乙烯类包装材料表面病毒的消杀效果更佳。
冠状病毒对pH敏感，不同的pH条件会影响冠状病毒的刺突蛋白结构，进而影响刺突蛋白与受体结合能力。研究发现冠状病毒在25 ℃、pH=1或37 ℃、pH=3条件下放置1 h 可完全被灭活[39]。而CO2可以在水中溶解形成碳酸，降低水溶液的pH[40]。Spilimbergo等研究发现，使用HPCD在8 MPa、30 ℃的条件下处理5 min，可以使枯草芽孢杆菌悬液的pH降低至3.3，表明含水溶液经HPCD处理后，pH会明显降低[41]；因此，HPCD引起水溶液中pH的降低是对冠状病毒消杀的重要因素。
综上，本研究以人冠状病毒（hCoV-229E）为研究对象，优化确定了HPCD对人冠状病毒的最佳消杀条件为37 ℃、10 MPa处理15 min，发现消杀压力是HPCD消杀冠状病毒的重要因素。本研究得到的消杀参数可以应用于食品包装表面的消杀。对于冷链食品消杀，可以考虑进一步提高处理压力，一方面实现消杀效果的提升，另一方面利用泄压过程CO2吸热产生的冷冻效应实现对产品品质的维持。此外，为应对实际生产应用需求，未来需要开发处理容积大、自动化程度高、稳定性好的商业化设备，实现在中央厨房、大型食品生产工厂、生鲜食品集散地及海关进出口食品检测等场景推广应用，为疫情常态化防控形势下保障冷链食品安全起到一定作用。在后续研究中，将继续探究HPCD对冠状病毒的消杀机制，进一步完善HPCD对病毒的消杀理论。
-
![]()
图 1 hCoV-229E接种Huh-7细胞后细胞病变观察结果（200×）
注：培养24 h后对照组（a）和感染组（b）Huh-7细胞的形态；培养96 h后对照组（c）和感染组（d）Huh-7细胞的形态。
Figure 1. Cytopathic effects of the hCoV-229E infected Huh-7 cells (200×)
![]()
图 2 不同的HPCD处理条件对hCoV-229E滴度的影响
注：*表示P<0.05；**表示P<0.01；ns表示P>0.05。
Figure 2. Effects of different HPCD treatment conditions on virus titers of hCoV-229E
![]()
图 3 HPCD对表面含有hCoV-229E的食品及包装材料的消杀效果
注：*表示P<0.05；**表示P<0.01；***表示P<0.001。
Figure 3. Disinfection effects of HPCD against hCoV-229E virus on the surface of food and packaging materials
表 1 HPCD对hCoV-229E的处理条件
Table 1 Treatment conditions of HPCD for hCoV-229E
实验分组 样品分组 处理温度（℃） 处理压力（MPa） 保压时间（min） 组A 试验组A 10 6.3 15 对照组A 10 − 15 组B 试验组B 25 6.3 15 对照组B 25 − 15 组C 试验组C1 37 6.3 15 试验组C2 37 10 15 对照组C 37 − 15 组D 试验组D 10 6.3 30 对照组D 10 − 30 
下载: 导出CSV
-
[1] LI D D, LI Q H. SARS-CoV-2: Vaccines in the pandemic era[J]. Military Medical Research,2021,8(2):15. doi: 10.1186/s40779-020-00296-y
[2] ARNAUD F, BRIGITTE A, BRUNO L, et al. SARS-CoV-2 variants and ending the COVID-19 pandemic[J]. The Lancet,2021,397(10278):952−954. doi: 10.1016/S0140-6736(21)00370-6
[3] LUO C H, MORRIS C P, SACHITHANANDHAM J, et al. Infection with the SARS-CoV-2 delta variant is associated with higher infectious virus loads compared to the alpha variant in both unvaccinated and vaccinated individuals[J]. Clinical Infectious Diseases,2021:ciab986.
[4] KARIM S S A, KARIM Q A. Omicron SARS-CoV-2 variant: A new chapter in the COVID-19 pandemic[J]. The Lancet,2021,398(10317):2126−2128. doi: 10.1016/S0140-6736(21)02758-6
[5] SHUAI H P, CHAN J F W, HU B J, et al. Attenuated replication and pathogenicity of SARS-CoV-2 B. 1.1. 529 Omicron[J]. Nature,2022,603(7902):693−699. doi: 10.1038/s41586-022-04442-5
[6] SU S, WONG G, SHI W F, et al. Epidemiology, genetic recombination, and pathogenesis of coronaviruses[J]. Trends in Microbiology,2016,24(6):490−502. doi: 10.1016/j.tim.2016.03.003
[7] WU Y, WANG F R, SHEN C G, et al. A noncompeting pair of human neutralizing antibodies block COVID-19 virus binding to its receptor ACE2[J]. Science,2020,368(6496):1274−1278. doi: 10.1126/science.abc2241
[8] ZHOU H, JI J K, CHEN X, et al. Identification of novel bat coronaviruses sheds light on the evolutionary origins of SARS-CoV-2 and related viruses[J]. Cell,2021,184(17):4380−4391. doi: 10.1016/j.cell.2021.06.008
[9] LI F. Structure, function, and evolution of coronavirus spike proteins[J]. Annual Review of Virology,2016,3(1):237−261. doi: 10.1146/annurev-virology-110615-042301
[10] KESHEH M M, HOSSEINI P, SOLTANI S, et al. An overview on the seven pathogenic human coronaviruses[J]. Reviews in Medical Virology,2022,32(2):e2282.
[11] ZHANG N, GONG Y H, MENG F P, et al. Comparative study on virus shedding patterns in nasopharyngeal and fecal specimens of COVID-19 patients[J]. Science China-Life Sciences,2021,64(3):486−488. doi: 10.1007/s11427-020-1783-9
[12] SUN S H, CHEN Q, GU H J, et al. A mouse model of SARS-CoV-2 infection and pathogenesis[J]. Cell Host & Microbe,2020,28(1):124−133.
[13] LI J, LI H Y, XU J W, et al. The gastrointestinal tract is an alternative route for SARS-CoV-2 infection in a nonhuman primate model[J]. Gastroenterology,2021,160(5):1647−1661. doi: 10.1053/j.gastro.2020.12.001
[14] FENG X L, LI B, LIN H F, et al. Stability of SARS-CoV-2 on the surfaces of three meats in the setting that simulates the cold chain transportation[J]. Virologica Sinica,2021,36(5):1069−1072. doi: 10.1007/s12250-021-00367-x
[15] 张玮珊, 胡新玲, 律娜, 等. 新型冠状病毒对冷链运输食品质量安全的影响[J]. 食品安全质量检测学报,2021,12(17):6735−6742. [ZHANG W S, HU X L, LÜ N, et al. Influence of SARS-CoV-2 on the quality and safety of cold chain transportation food[J]. Journal of Food Safety & Quality,2021,12(17):6735−6742. [16] 王艺菲, 谢婧荷, 厉曙光, 等. 新型冠状病毒肺炎疫情下进口冷链食品的风险防控[J]. 上海预防医学,2021,33(5):397−403. [WANG Y F, XIE J H, LI S G, et al. Risk management of imported cold-chain foods during the COVID-19 pandemic[J]. Shanghai Journal of Preventive Medicine,2021,33(5):397−403. [17] 李婉, 黄毅, 凌伟, 等. 海鲜水产品可能是新型冠状病毒滋生的重要“培养基”[J]. 医学争鸣,2021,12(3):55−59. [LI W, HUANG Y, LING W, et al. Seafood and aquatic products might be an important culture medium for SARS-CoV-2[J]. Negative,2021,12(3):55−59. [18] MATHAVARAJAH S, STODDART A K, GAGNON G A, et al. Pandemic danger to the deep: The risk of marine mammals contracting SARS-CoV-2 from wastewater[J]. Science of the Total Environment,2021,760:143346. doi: 10.1016/j.scitotenv.2020.143346
[19] FUMAGALLI M J, CAPATO C F, CASTRO-JORGE L A, et al. Stability of SARS-CoV-2 and other airborne viruses under different stress conditions[J]. Archives of Virology,2022,167(1):183−187. doi: 10.1007/s00705-021-05293-7
[20] RABENAU H F, CINATL J, MORGENSGERN B, et al. Stability and inactivation of SARS coronavirus[J]. Medical Microbiology and Immunology,2005,194(1−2):1−6. doi: 10.1007/s00430-004-0219-0
[21] GARCIA-GONZALEZ L, GEERAERD A H, SPILIMBERGO S, et al. High pressure carbon dioxide inactivation of microorganisms in foods: The past, the present and the future[J]. International Journal of Food Microbiology,2007,117(1):1−28. doi: 10.1016/j.ijfoodmicro.2007.02.018
[22] YU T H, NIU L Y, HITOSHI I. High-pressure carbon dioxide used for pasteurization in food industry[J]. Food Engineering Reviews,2020,12(3):364−380. doi: 10.1007/s12393-020-09240-1
[23] 李靖, 王嘉祥, 陈欢, 等. 超高压与热杀菌对刺梨汁贮藏期品质影响的比较[J]. 食品科学,2022,43(15):101−108. [LI J, WANG J X, CHEN H, et al. Comparison of the effects of ultra-high pressure and thermal processing on quality changes of Rosa roxburghii juice during storage[J]. Food Science,2022,43(15):101−108. doi: 10.7506/spkx1002-6630-20210807-093 [24] ZHOU L Y, BI X F, XU Z H, et al. Effects of high-pressure CO2 processing on flavor, texture, and color of foods[J]. Critical Reviews in Food Science and Nutrition,2015,55(6):750−768. doi: 10.1080/10408398.2012.677871
[25] 侯志强, 赵凤, 饶雷, 等. 高压二氧化碳技术的杀菌研究进展[J]. 中国农业科技导报,2015,17(5):40−48. [HOU Z Q, ZHAO F, RAO L, et al. Research progress on pasteurization and sterilization using high pressure carbon dioxide technology[J]. Journal of Agricultural Science and Technology,2015,17(5):40−48. [26] RAO L, BI X F, ZHAO F, et al. Effect of high-pressure CO2 processing on bacterial spores[J]. Critical Reviews in Food Science and Nutrition,2016,56(11):1808−1825. doi: 10.1080/10408398.2013.787385
[27] BLONDIN-BROSSEAU M, HARLOWJ, DOCTOR T, et al. Examining the persistence of human coronavirus 229E on fresh produce[J]. Food Microbiol,2021,98:103780. doi: 10.1016/j.fm.2021.103780
[28] REED L J, MUENCH H. A simple method of estimating fifty per cent endpoints[J]. American Journal of Epidemiology,1938,27(3):493−497. doi: 10.1093/oxfordjournals.aje.a118408
[29] ERKMN O. Antimicrobial effect of pressurized carbon dioxide onStaphylococcus aureus in broth and milk[J]. LWT-Food Science and Technology,1997,30(8):826−829. doi: 10.1006/fstl.1997.0277
[30] RAO L, LIANG Z, WANG Y T, et al. Mechanism of inactivation of Bacillus subtilis spores by high pressure CO2 at high temperature[J]. Food Microbiology,2019,82:36−45. doi: 10.1016/j.fm.2019.01.014
[31] ZHAO L, QIN X, WANG Y T, et al. CO2-assisted high pressure processing on inactivation of Escherichia coli and Staphylococcus aureus[J]. Journal of CO2 Utilization,2017,22:53−62. doi: 10.1016/j.jcou.2017.09.005
[32] RAO L, XU Z Z, WANG Y T, et al. Inactivation of Bacillus subtilis spores by high pressure CO2 with high temperature[J]. International Journal of Food Microbiology,2015,205:73−80. doi: 10.1016/j.ijfoodmicro.2015.04.012
[33] FERRENTINO G, BRUNO M, FERRARI G, et al. Microbial inactivation and shelf life of apple juice treated with high pressure carbon dioxide[J]. Journal of Biological Engineering,2009,3:3. doi: 10.1186/1754-1611-3-3
[34] HATA C, KUMAGAI H, NAKAMURA K. Rate analysis of the sterilization of microbial cells in high pressure carbon dioxide[J]. Food Science and Technology International, Tokyo,1996,2(4):229−233. doi: 10.3136/fsti9596t9798.2.229
[35] WATANABE T, FURUKAWA S, HIRATA J, et al. Inactivation of Geobacillus stearothermophilus spores by high-pressure carbon dioxide treatment[J]. Applied and Environmental Microbiology,2003,69(12):7124−7129. doi: 10.1128/AEM.69.12.7124-7129.2003
[36] ERKMEN O. Inactivation of Salmonella typhimurium by high pressure carbon dioxide[J]. Food Microbiology,2000,17(2):225−232. doi: 10.1006/fmic.1999.0308
[37] RIBEIRO N, SOARES G, SANTOS-ROSALES V, et al. A new era for sterilization based on supercritical CO2 technology[J]. Journal of Biomedical Materials Research Part B:Applied Biomaterials,2020,108(2):399−428. doi: 10.1002/jbm.b.34398
[38] WERENR B G, HOTCHKISS J H. Continuous flow nonthermal CO2 processing: The lethal effects of subcritical and supercritical CO2 on total microbial populations and bacterial spores in raw milk[J]. Journal of Dairy Science,2006,89(3):872−881. doi: 10.3168/jds.S0022-0302(06)72151-8
[39] DARNELL M E R, SUBBARAO K, FEINSTONE S M, et al. Inactivation of the coronavirus that induces severe acute respiratory syndrome, SARS-CoV[J]. Journal of Virological Methods,2004,121(1):85−91. doi: 10.1016/j.jviromet.2004.06.006
[40] 廖红梅, 廖小军, 胡小松. 高压二氧化碳杀菌机理研究进展[J]. 食品工业科技,2012,33(19):387−390,395. [LIAO H M, LIAO X J, HU X S. Research progress in inactivation mechanisms of high pressure carbon dioxide[J]. Science and Technology of Food Industry,2012,33(19):387−390,395. [41] SPILIMBERGO S, BERTUCCO A, BASSO G, et al. Determination of extracellular and intracellular pH of Bacillus subtilis suspension under CO2 treatment[J]. Biotechnol Bioeng,2005,92(4):447−451. doi: 10.1002/bit.20606
-
期刊类型引用(17)
1. 张根，陈宝锐，潘璐璐，王慧，杨波，卜钦鹏. 农产品抗生素残留现状及快速检测方法研究进展. 应用生态学报. 2024(05): 1408-1418 . 
百度学术
2. 张波，郭二菱，黄笑晨，郭爱静，王可. 豆粉中31种杀菌剂残留的UPLC-MS/MS测定法. 职业与健康. 2024(12): 1590-1595 . 百度学术
3. 舒达，江敏，吴昊，王凌宇，李昊霖. 改良QuEChERs法联合超高效液相色谱-质谱法测定水产养殖池塘底泥中8种抗生素残留. 分析试验室. 2024(08): 1139-1145 . 百度学术
4. 杨飘飘，张静雅，刘红，李丽霞. 高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品中禁用磺胺和喹诺酮类化合物. 日用化学工业(中英文). 2024(08): 997-1007 . 百度学术
5. 王宁，粟有志，阿斯喀·夏热甫汉，雷红琴，李艳美，李芳，王兴磊. QuEChERS净化-高效液相色谱-串联质谱法同时测定动物尿液中16种磺胺类和6种大环内酯类抗生素的残留量. 理化检验-化学分册. 2024(08): 802-809 . 百度学术
6. 魏宁果，贾亦森，范芳芳，吴坤. 基于QuEChERS原则的样品处理技术在动物源性食品兽药残留分析中的应用. 化学分析计量. 2024(09): 124-132 . 百度学术
7. 张晓艺，郑三燕，张秀尧，李瑞芬，杨舒然. 超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用-内标法对豆芽中抗生素的测定. 上海预防医学. 2024(11): 1100-1105 . 百度学术
8. 潘永波，万娜，王承业，邹冬梅. 快速滤过型净化结合液相色谱-质谱联用法测定海产品中19种磺胺类药物残留. 食品工业科技. 2023(07): 320-328 . 本站查看
9. 孙德军. 畜产品中磺胺类药物残留危害及检测技术的研究进展. 饲料工业. 2023(09): 73-80 . 百度学术
10. 邱启全，李美玲，孙悦. 微流控芯片联用高效液相色谱-荧光检测器同时测定肉类食品中4种磺胺类药物残留. 食品安全质量检测学报. 2023(09): 202-211 . 百度学术
11. 谷悦，唐会鑫，李朔，马玲，王可，杨莉丽. QuEChERS-超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法测定水果制品和肉酱中10种四环素类抗生素. 食品工业科技. 2023(18): 313-320 . 本站查看
12. 马思琪，张敏，张世卓，崔圣宇，邵杰，王洋，孙辑凯，张宏莲. 食用鱼中残留的2种磺胺类成分TLC-SERS检测方法的建立. 中国食品工业. 2023(19): 63-65 . 百度学术
13. 邵丽，王晓，张伟，徐淑飞. QuEChERS方法应用研究进展. 安徽农业科学. 2023(24): 9-18 . 百度学术
14. 苏敏，吴彦蕾，邓惠玲，董宪兵，陈欣，黄大亮，周纯洁. QuEChERS-LC-MS/MS法快速检测鱼肉中54种兽药残留. 食品与发酵科技. 2023(06): 135-141 . 百度学术
15. 张慧芳，孙文. 高效液相色谱-串联质谱法测定牛奶中9种磺胺类药物残留不确定度的评定. 食品安全导刊. 2022(26): 92-94 . 百度学术
16. 洪妍妍，陈海玲，王翠玲，余艳明，王敏杰，李宝珠，庄春红. 样品前处理QuEChERS法及新型吸附材料在水产品中抗生素残留分析中的应用进展. 食品安全质量检测学报. 2022(21): 6898-6906 . 百度学术
17. 高云慨，陈小妹，陈春泉，肖璇，郑金明，尹青春. HPLC-MS/MS法测定罗非鱼中4种四环素类抗生素残留量及不确定度评定. 食品安全导刊. 2022(32): 97-101+105 . 百度学术
其他类型引用(2)
下载:
计量
- 文章访问数:
- HTML全文浏览量:
- PDF下载量:
- 被引次数: 19
