Loading [MathJax]/jax/output/SVG/fonts/TeX/Main/Regular/BasicLatin.js
  • EI
  • Scopus
  • 中国科技期刊卓越行动计划项目资助期刊
  • 北大核心期刊
  • DOAJ
  • EBSCO
  • 中国核心学术期刊RCCSE A+
  • 中国精品科技期刊
  • JST China
  • FSTA
  • 中国农林核心期刊
  • 中国科技核心期刊CSTPCD
  • CA
  • WJCI
  • 食品科学与工程领域高质量科技期刊分级目录第一方阵T1
中国精品科技期刊2020

基于网络药理学研究化橘红-蛹虫草复方止咳活性及作用机制

焦春伟, 钟静, 黄海勇, 梁慧嘉, 郑娇吉, 陈家明, 谢意珍

焦春伟,钟静,黄海勇,等. 基于网络药理学研究化橘红-蛹虫草复方止咳活性及作用机制[J]. 食品工业科技,2022,43(13):17−24. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2021100261.
引用本文: 焦春伟,钟静,黄海勇,等. 基于网络药理学研究化橘红-蛹虫草复方止咳活性及作用机制[J]. 食品工业科技,2022,43(13):17−24. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2021100261.
JIAO Chunwei, ZHONG Jing, HUANG Haiyong, et al. Activity and Mechanism of Citri grandis Exocarpium-Cordyceps militaris Compound on Reliving Cough Based on Network Pharmacology[J]. Science and Technology of Food Industry, 2022, 43(13): 17−24. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2021100261.
Citation: JIAO Chunwei, ZHONG Jing, HUANG Haiyong, et al. Activity and Mechanism of Citri grandis Exocarpium-Cordyceps militaris Compound on Reliving Cough Based on Network Pharmacology[J]. Science and Technology of Food Industry, 2022, 43(13): 17−24. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2021100261.

基于网络药理学研究化橘红-蛹虫草复方止咳活性及作用机制

基金项目: 肇庆高新区创新团队项目(2019ZHQ10);广州开发区国际科技合作项目(2020GH07)。
详细信息
    作者简介:

    焦春伟(1980−),女,博士,高级工程师,研究方向:食品科学,E-mail:jiao19800205@126.com

    通讯作者:

    谢意珍(1975−),女,硕士,研究员,研究方向:食药用菌资源的高效利用,E-mail:xieyizhen@126.com

  • 中图分类号: R285.1

Activity and Mechanism of Citri grandis Exocarpium-Cordyceps militaris Compound on Reliving Cough Based on Network Pharmacology

  • 摘要: 本研究运用网络药理学研究化橘红-蛹虫草复方止咳活性及作用机制。构建小鼠氨水引咳模型,评价复方的止咳活性。再利用多个在线数据库和文献检索,收集复方的活性成分、作用靶点及疾病靶点。使用Cytoscape、STRING构建复方-靶点-疾病网络与蛋白质相互作用网络,并运用Meatscape对靶点基因进行GO与KEGG富集分析。结果表明,低、高剂量组能显著减少小鼠咳嗽次数(P<0.001),并降低小鼠血清中肿瘤坏死因子、白细胞介素1α和白细胞介素1β三种炎症因子水平,其中高剂量组存在显著差异(P<0.05,P<0.01,P<0.05)。网络药理学分析结果显示该复方能通过作用于转录因子AP-1、白细胞介素6及肿瘤坏死因子等78个靶点,调控575个GO条目与272条信号通路发挥止咳作用,其中虫草酸、虫草素、芹菜素、beta-谷甾醇及柚皮素是其重要的物质基础。结果说明,化橘红-蛹虫草复方具有止咳活性,该活性作用是复方中多种物质成分对多靶点、多通路的综合作用结果。
    Abstract: This study aimed to investigate the activity and mechanism of Citri grandis Exocarpium-Cordyceps militaris compound on reliving cough by the use of network pharmacology. Mouse cough inducing models were constructed by ammonia water to evaluate the cough suppressant activity of the compound. Multiple online databases and literature searches were then used to collect the active ingredients, targets of action and disease targets of the compound. Construction of compound-target-disease networks and protein interaction networks using Cytoscape and STRING, and GO and KEGG enrichment analysis of target genes using Meatscape. The results showed that the low and high dose groups significantly reduced the number of coughs in mice (P<0.001) and decreased the levels of three inflammatory factors, tumor necrosis factor, interleukin 1α and interleukin 1β in mice serum, with significant differences in the high dose group (P<0.05, P<0.01, P<0.05). The results of the network pharmacological analysis showed that this compound could act on 78 targets including transcription factor AP-1, interleukin 6 and tumor necrosis factor, regulating 575 GO entries and 272 signalling pathways to exert cough suppressant effects, of which cordycepic acid, cordycepin, apigenin, beta-sitosterol and naringenin were the important material basis. The results indicated that the combination of Citri grandis Exocarpium-Cordyceps militaris has cough suppressant activity, which was the result of the combined action of multiple substances in the combination on multiple targets and pathways.
  • 咳嗽是健康人体清除呼吸道异物和过量支气管分泌物的生理防御机制,在宿主防御中具有一定有益作用[1]。然而,持续性的咳嗽会导致机体衰弱,提高慢阻肺、哮喘及呼吸衰竭等疾病的发病率,严重影响患者身心健康和生活质量[2]

    化橘红,即化州橘红,是化州柚(Citrus grandis Tomentosa)或柚(Citrus grandis (L.) Osbeck)的未成熟或近成熟的干燥外层果皮,含柚皮素、芹黄素及橙皮苷等活性成分[3]。蛹虫草(Cordyceps militaris L. Link),又被称为北冬虫夏草,含虫草酸、虫草素等活性成分[4]。临床调查研究显示,多个止咳平喘中医验方中含化橘红与蛹虫草两种成分,其中化橘红在验方中发挥“化痰降气”功效;蛹虫草在验方中发挥“益肾”作用[5-7]。同时,药理试验研究表明化橘红具有治疗咳嗽、咳痰及流涕等活性[8];蛹虫草具有抗炎、缓解气管敏感及降低咳嗽反射等活性[9]。咳痰与炎症是咳嗽的两大主要特征,化橘红与蛹虫草分别对两种特征具有缓解作用,截止目前,暂未见两种原料复配的功能和机制研究报道。

    基于中药成分多、作用靶点多和作用途径复杂等特点,本研究利用网络药理学方法研究复方止咳的的物质基础和作用机制,为进一步开发化橘红-蛹虫草复方功能产品和保健食品的研发提供理论依据。

    化橘红水提物和蛹虫草水提物 均由广东粤微食用菌技术有限公司提供,两种水提物按1:1的比例进行混合,实验时使用纯化水稀释至所需浓度;TNF-α、IL-1α和IL-1β的ELISA检测试剂盒 武汉华美生物工程有限公司;SPF级健康成年昆明小鼠70只,雌雄各半,体质量14~18 g 购自南方医科大学(许可证号:SCXK(粤)2016-0041),饲养于广东省微生物研究所动物中心,饲养环境条件为温度18~29 ℃,相对湿度40%~70%,12 h/12 h明暗交替,自由摄食和饮水。动物经适应性饲养1周后开始实验。

    402B超声雾化器 江苏鱼跃医疗设备股份有限公司;BS200S分析天平 北京赛多利斯天平有限公司;JJ1000型电子天平 江苏常熟市双杰测试仪器厂;ML-1600平板显微镜 武汉塞维尔生物技术有限公司;L535R台式离心机 湖南湘仪离心机仪器有限公司;Infinite M200 Pro多功能酶标仪 瑞士Tecan公司。

    参考谢伟娜等[10-11]研究对昆明小鼠进行引咳筛选试验,喷雾为浓氨水,喷雾时间2.5 min,测定小鼠10 min内的咳嗽次数,剔除10 min内咳嗽次数<10次的小鼠。将测试合格的48只小鼠随机分成四组,每组12只(雌雄各半),分别是空白对照组、模型组、复方低剂量组、高剂量组。本试验从生产运用角度出发,考虑产品加工工艺、市售片剂、粉剂规格、产品提取物含量等多个因素,并参考《保健食品检验与评价技术规范》,确定复方低剂量与高剂量分别为200 mg/kg/d和400 mg/kg/d。各组小鼠每日按0.1 mL/10 g体积进行灌胃给药,空白组和模型组小鼠灌胃纯水,复方低剂量组与复方高剂量组小鼠灌胃对应剂量的提取物溶液,每日灌胃1次,连续给药7 d。在末次给药1 h后,将小鼠放入引咳仪器中,按上法,喷雾2.5 min,测定小鼠10 min内的咳嗽次数。

    小鼠咳嗽试验检测结束后,对小鼠进行摘眼球取血。血样室温静置分层后,在设置为4 ℃,3000 r/min的离心机中离心10 min,小心吸出上层血清。采用ELISA试剂盒检测各组小鼠血清中TNF-α、IL-1α和IL-1β的含量。

    在TCMSP(http://tcmspw.com/tcmsp.php)数据库中检索搜集化橘红的化学成分信息,筛选出OB≥20%和DL≥0.1的化合物。在CNKI与Web of Science文献数据库中以化橘红和蛹虫草作为关键词进行搜索,查找与咳嗽相关药理作用的活性成分,汇总后得到复方的主要活性成分。随后在TCMSP数据库中获得化橘红候选化合物对应的潜在靶标。在PubChem(https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/)数据库获取蛹虫草主要化学成分的SMILES信息用于化合物的靶点预测。将候选化合物的SMILES导入到Swiss Target Prediction(http://www.swisstargetprediction.ch/)与Pharm-Mapper (http://www.Lilab-ecust.cn/pharmmapper/)数据库,物种选“Homosapiens”,收集并整理出“Probability”>0的潜在靶点。将获得的靶点名称导入到Uniprot数据库(http://www.uniprot.org/),其中物种被选为“homo sapiens”,可将靶标名称进行格式转换,获得对应的Gene name。

    在Genecards(http://www.genecards.org/)数据库中以“cough”为关键词,检索获得咳嗽相关靶点。以相关性评分>1.8分作为筛选条件,获得与咳嗽相关性较高的疾病靶点。

    将咳嗽疾病靶点、化橘红-蛹虫草复方活性成分及其对应靶点导入Cytoscape软件,构建“复方-靶点-咳嗽”网络,并对网络进行拓扑分析。

    绘制韦恩图 (https://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/index.html)获得化橘红-蛹虫草复方治疗咳嗽的相关靶点。应用String平台对筛选出的交集靶点构建蛋白作用网络。设置靶点间相互作用分值大于0.9,即得蛋白相互作用网络。然后将得到的蛋白网络导入Cytoscape3.6.0软件中,根据得分值和节点度值设定对应节点和边的颜色和粗细大小进行调节。

    运用Metascape对复方与咳嗽交集靶点进行GO与KEGG富集分析,按P值大小排序,筛选P值最小的前10条GO条目与信号通路,用于绘制气泡图。

    采用SPSS 25.0统计软件包进行数据分析,本文中的定量参数以均数±标准差(¯X±S)的形式表示。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表示组间差异显著,P<0.01表示组间差异极显著。

    本试验构建了氨水引咳模型,通过测定给药前后10 min内模型动物的咳嗽次数对比分析复方对咳嗽的改善作用。试验期间,空白组老鼠均未咳嗽,与模型组差异显著(P<0.05)。由表1可知,给药前10 min内,三组小鼠咳嗽次数无显著性差异(P>0.05);而给药后,复方低、高剂量组小鼠的咳嗽次数较模型组均极显著下降(P均<0.001),说明化橘红-蛹虫草复方低、高剂量组对氨水引起小鼠的咳嗽均有一定改善作用。已有研究表明,蛹虫草对慢性支气管炎具有良好治疗作用,能明显减轻患者咳嗽、咳痰及喘息等不良症状[12-13]。此外,侯秀娟等[14]研究发现化橘红提取物能明显延长浓氨水刺激引起的咳嗽潜伏期,减少2 min内的咳嗽次数。以上结果与本研究结果相似,说明本复方能够一定程度减少咳嗽次数。

    表  1  化橘红-蛹虫草复方对小鼠咳嗽次数的影响(n=10)
    Table  1.  The effect of Citri grandis Exocarpium-Cordyceps militaris compound on the number of cough in mice (n=10)
    组别给药前10 min内
    咳嗽次数(次)
    给药后10 min内
    咳嗽次数(次)
    模型组25.42±6.8429.50±5.14
    复方低剂量组25.25±7.3015.50±6.24***
    复方高剂量组26.00±7.359.08±4.38***
    注:与同一时间点模型组相比,***P<0.001。
    下载: 导出CSV 
    | 显示表格

    图1的ELISA测定结果可知,与空白组对比,模型组小鼠的TNF-α、IL-1α和IL-1β水平均显著增加(P<0.05)。与模型组相比,复方低剂量组小鼠血清TNF-α、IL-1α及IL-1β水平均降低;复方高剂量组小鼠血清TNF-α与IL-1β水平显著降低(P<0.05),IL-1α水平极显著降低(P<0.01)。炎症是咳嗽的重要病理特征之一,其产生会导致气道狭窄,呼吸功能低下,诱发咳嗽[15]。因此,植物提取物的抗炎活性对咳嗽的缓解具有一定的促进作用[16-17]。王春燕等[18],王红霞等[19]研究显示,咳嗽小鼠血清炎症因子水平显著高于健康小鼠,补充百合、生地黄、沙参等复方提取物或柚皮素等天然成分后,炎症因子水平明显降低,同时咳嗽得到缓解。上述结果表明,化橘红-蛹虫草复方对咳嗽模型小鼠血清炎症因子水平升高现象具有一定抑制作用。

    图  1  化橘红-蛹虫草复方对小鼠血清炎症因子水平的影响(n=10)
    注:A:TNF-α;B:IL-1α;C:IL-1β;*表示与空白组对比差异显著(P<0.05);#表示与模型组对比差异显著(P<0.05),##表示与模型组相比差异极显著(P<0.01)。
    Figure  1.  The effect of Citri grandis Exocarpium-Cordyceps militaris compound on the levels of serum inflammatory factors in mice (n=10)

    在明确化橘红-蛹虫草复方具有一定止咳活性的基础上,运用网络药理学进一步研究该复方发挥止咳活性的作用机制。首先,运用多个在线数据库和现有文献收集复方的活性成分及其对应靶点。在TCMSP数据库与文献检索共收集到化橘红活性成分44种,以OB≥20%和DL≥0.10为筛选条件初筛后,获得化橘红活性成分17种,除去3种没有靶点的化合物,得到14种化橘红活性成分。此外,柚皮苷做为化橘红的主要组成成分,虽然其OB值和DL值不满足筛选条件,但已有文献报道证明柚皮苷具有止咳作用,故直接将其纳入分析,最终共获得15种化橘红活性成分,对应靶点139个。通过文献检索确定蛹虫草的有效成分为虫草素和虫草酸,从Swiss Target Prediction和PharmMapper数据库中筛选得到83个虫草素靶标和88个虫草酸靶标。具体结果如表2所述。

    表  2  化橘红-蛹虫草复方活性成分与靶点信息
    Table  2.  Active compositions and potential targets of Citri grandis Exocarpium-Cordyceps militaris compound
    组分名称中文名称英文名称CAS号靶点数量
    化橘红异橙黄酮Isosinensetin17290-70-920
    5,7,4-三甲氧基黄酮5,7,4'-Trimethylapigenin5631-70-911
    新橙皮苷Neohesperidin13241-33-35
    甜橙黄酮Sinensetin2306-27-616
    β-谷甾醇Beta-sitosterol83-46-534
    柚皮素Naringenin153-18-432
    川陈皮素Nobiletin478-01-326
    香风草甙Didymin14259-47-38
    柚皮苷Naringin10236-47-24
    4',5,7,8-四甲氧基黄酮4',5,7,8-Tetramethoxyflavone6601-66-711
    亚油酸甲酯Methyl linoleate112-63-04
    西托糖苷Sitogluside474-58-814
    石竹素Caryophyllene oxide1139-30-67
    芹菜素Apigenin520-36-564
    桔皮素Tangeretin481-53-818
    蛹虫草虫草素Cordycepin73-03-083
    虫草酸D-Mannitol69-65-888
    下载: 导出CSV 
    | 显示表格

    通过Genecards数据库共获得699个咳嗽相关靶点。Venn图显示(如图2),将咳嗽对应靶点与化橘红-蛹虫草活性成分对应的265个靶点取交集后,共获得78个交集靶点,提示复方对咳嗽的治疗作用与其对78个交集靶点的调控有关。

    图  2  化橘红-蛹虫草复方靶点与咳嗽相关靶点韦恩图
    Figure  2.  Venn diagram of Citri grandis Exocarpium-Cordyceps militaris compound targets and cough related targets

    运用Cytoscape软件构建“复方-靶点-咳嗽”网络,建立活性成分、潜在靶点及疾病三者之间的联系。结果如图3所示,其中黄色节点代表活性成分,绿色节点代表疾病靶点,共包括95个节点(17个活性成分节点,78个疾病节点)和164条边。从活性成分角度分析(如表3所述),通过Degree、Betweenness Centrality及Closeness Centrality值排序,发现排名前5的活性成分为虫草酸(D-Mannitol)、虫草素(Cordycepin)、芹菜素(Apigenin)、β-谷甾醇(Beta-sitosterol)、柚皮素(Naringenin)。从靶点角度分析,排名前4的靶点为PTGS2、PTGS1、SCN5A及ADRB2,分别与15、13、11、8种化合物发生相互作用。“复方-靶点-咳嗽”网络中有17种有效成分作用于78个靶点,说明复方治疗咳嗽具有多成分、多靶点的作用特点。柚皮素的止咳活性已被多篇研究报道,该成分能显著延长枸橼酸引咳豚鼠的咳嗽潜伏期,并能显著减少豚鼠咳嗽次数[20-21],其作用机制可能与该成分通过抑制NF-κB活性与抑制CD4 T细胞产生Th2细胞因子两种途径,来减轻气道炎症因子与粘液产生有关[22-23]。虫草素、芹菜素及β-谷甾醇三种物质未被证明其对咳嗽次数具有直接抑制作用,但这三种成分能有效调节炎症因子与细胞因子水平,缓解气道炎症[24-26]。这对后期开展天然成分止咳活性研究提供了理论参考。

    图  3  “复方-靶点-咳嗽”网络图
    Figure  3.  Network of “Compound-targets-cough”
    表  3  “复方-靶点-咳嗽”网络拓扑分析
    Table  3.  Network topology analysis of “Compound-targets-cough”
    中文名称英文名称DegreeBetweenness
    Centrality
    Closeness
    Centrality
    虫草酸D-Mannitol290.340.41
    虫草素Cordycepin280.340.45
    芹菜素Apigenin280.360.45
    β-谷甾醇beta-Sitosterol120.130.38
    柚皮素Naringenin100.090.38
    川陈皮素Nobiletin100.050.38
    异橙黄酮Isosinensetin70.010.33
    桔皮素Tangeretin70.030.33
    5,7,4-三甲氧基黄酮5,7,4'-Trimethylapigenin60.030.32
    甜橙黄酮Sinensetin50.000.32
    香风草甙Didymin50.000.32
    4',5,7,8-四甲氧基黄酮4',5,7,8-Tetramethoxyflavone50.000.32
    西托糖苷Sitogluside40.000.32
    新橙皮苷Neohesperidin30.000.32
    柚皮苷Naringin20.020.30
    亚油酸甲酯Methyl linoleate20.000.32
    石竹素Caryophyllene oxide10.000.31
    下载: 导出CSV 
    | 显示表格

    蛋白质交互作用网络(Protein-protein interaction network,PPI)是以蛋白质为节点,不同蛋白间的交互作用为边所构成的网络,对分析蛋白质功能和关系具有重要意义[27]。本研究中,将得到的78个交集靶点上传至String数据库,物种选择“Homo sapiens”构建PPI网络(设置最低交互作用得分为0.90,隐藏网络中独立的节点)。将得到的蛋白交互作用网络图导入Cytoscape软件进行可视化处理后得到图4。图中节点大小与颜色深浅代表节点度值,即节点越大,颜色越深,则节点对应的degree值越大。分析结果显示,该网络的平均节点度值为7.75,聚类系数为0.52。交互网络中degree值排名前5的靶点分别是JUN、IL6、MAPK3、TNF和MAPK1,提示这几个靶点是交集靶点相互作用网络中的核心靶点。JUN是炎症基因的主要激活剂,能够直接影响IL-1β、IL-6及TNF-α等细胞因子的表达[28],大量的细胞因子,会激活MAPKs,引起气道与肺部炎症。TNF是在炎症大鼠模型体内早期表达的炎症细胞因子,而IL6可能对炎症的进一步发展有促进作用[29]

    图  4  PPI网络图
    Figure  4.  PPI network diagram

    运用Metascape对交集靶点进行KEGG与GO富集分析,核心过程如图5所述。GO富集分析结果显示,化橘红-蛹虫草复方治疗咳嗽共涉及575个GO条目,包括生物学过程(biological processes,BP)424条,分子功能(molecular function,MF)89条及细胞组成(cellular component,CC)62条,核心条目包括对脂多糖的反应(response to lipopolysaccharide)、细胞质囊泡腔(cytoplasmic vesicle lumen)及细胞因子受体结合(cytokine receptor binding)等。KEGG富集分析结果显示,该复方治疗咳嗽共涉及272条信号通路,核心信号通路包括IL-17信号通路(IL-17 signaling pathway)及TNF信号传导途径(TNF signaling pathway)及AGE-RAGE糖尿病并发症途径(AGE-RAGE signaling pathway in diabetic complications)等。临床调查研究显示,慢性气道炎症患者中存在IL-17信号通路基因表达异常现象,该通路能够通过促进气道平滑肌收缩驱动气道高反应性,促进中性粒细胞引发肺部炎症,对多种炎症性疾病都存在广泛的影响[30]。TNF信号通路由多种诱导细胞内信号通路的细胞因子组成,能够直接影响机体炎症、免疫、细胞凋亡及存活等[31]。AGE-RAGE糖尿病并发症途径由机体中晚期糖基化终末产物与其受体RAGE相互作用而激活,引起多种细胞内信号通路激活,如包括NADPH氧化酶、蛋白激酶C和MAPKs,然后导致NF-κB活性[32]。NF-κB能够促进多种促炎细胞因子,如IL-1β、IL-6及TNF-α的表达,从而诱发机体炎症[33]。KEGG富集分析结果显示,化橘红-蛹虫草复方治疗咳嗽作用机制中涉及对多条炎症相关信号通路的调控,说明该复方的止咳活性可能与其通过多种途径改善机体炎症相关。

    图  5  KEGG与GO富集分析核心生物过程
    Figure  5.  KEGG and GO enrichment analysis of core biological processes

    本研究结果表明,化橘红-蛹虫草复方能显著减少引咳模型小鼠咳嗽次数,调节机体炎症因子水平异常,展现出良好的止咳活性。在此基础上,通过网络药理学对其止咳作用机制进行分析发现,化橘红-蛹虫草复方的止咳活性源于多种活性成分对多靶点、多通路综合作用的结果,其中虫草酸、虫草素、芹菜素、β-谷甾醇及柚皮素是其重要的物质基础。该结论为化橘红-蛹虫草复方止咳作用机制研究提供了一定的理论依据,后续可继续开展相关试验对活性成分、核心靶点及通路进行验证,以揭示该复方止咳的分子机制,推动相关保健食品的研发。

  • 图  1   化橘红-蛹虫草复方对小鼠血清炎症因子水平的影响(n=10)

    注:A:TNF-α;B:IL-1α;C:IL-1β;*表示与空白组对比差异显著(P<0.05);#表示与模型组对比差异显著(P<0.05),##表示与模型组相比差异极显著(P<0.01)。

    Figure  1.   The effect of Citri grandis Exocarpium-Cordyceps militaris compound on the levels of serum inflammatory factors in mice (n=10)

    图  2   化橘红-蛹虫草复方靶点与咳嗽相关靶点韦恩图

    Figure  2.   Venn diagram of Citri grandis Exocarpium-Cordyceps militaris compound targets and cough related targets

    图  3   “复方-靶点-咳嗽”网络图

    Figure  3.   Network of “Compound-targets-cough”

    图  4   PPI网络图

    Figure  4.   PPI network diagram

    图  5   KEGG与GO富集分析核心生物过程

    Figure  5.   KEGG and GO enrichment analysis of core biological processes

    表  1   化橘红-蛹虫草复方对小鼠咳嗽次数的影响(n=10)

    Table  1   The effect of Citri grandis Exocarpium-Cordyceps militaris compound on the number of cough in mice (n=10)

    组别给药前10 min内
    咳嗽次数(次)
    给药后10 min内
    咳嗽次数(次)
    模型组25.42±6.8429.50±5.14
    复方低剂量组25.25±7.3015.50±6.24***
    复方高剂量组26.00±7.359.08±4.38***
    注:与同一时间点模型组相比,***P<0.001。
    下载: 导出CSV

    表  2   化橘红-蛹虫草复方活性成分与靶点信息

    Table  2   Active compositions and potential targets of Citri grandis Exocarpium-Cordyceps militaris compound

    组分名称中文名称英文名称CAS号靶点数量
    化橘红异橙黄酮Isosinensetin17290-70-920
    5,7,4-三甲氧基黄酮5,7,4'-Trimethylapigenin5631-70-911
    新橙皮苷Neohesperidin13241-33-35
    甜橙黄酮Sinensetin2306-27-616
    β-谷甾醇Beta-sitosterol83-46-534
    柚皮素Naringenin153-18-432
    川陈皮素Nobiletin478-01-326
    香风草甙Didymin14259-47-38
    柚皮苷Naringin10236-47-24
    4',5,7,8-四甲氧基黄酮4',5,7,8-Tetramethoxyflavone6601-66-711
    亚油酸甲酯Methyl linoleate112-63-04
    西托糖苷Sitogluside474-58-814
    石竹素Caryophyllene oxide1139-30-67
    芹菜素Apigenin520-36-564
    桔皮素Tangeretin481-53-818
    蛹虫草虫草素Cordycepin73-03-083
    虫草酸D-Mannitol69-65-888
    下载: 导出CSV

    表  3   “复方-靶点-咳嗽”网络拓扑分析

    Table  3   Network topology analysis of “Compound-targets-cough”

    中文名称英文名称DegreeBetweenness
    Centrality
    Closeness
    Centrality
    虫草酸D-Mannitol290.340.41
    虫草素Cordycepin280.340.45
    芹菜素Apigenin280.360.45
    β-谷甾醇beta-Sitosterol120.130.38
    柚皮素Naringenin100.090.38
    川陈皮素Nobiletin100.050.38
    异橙黄酮Isosinensetin70.010.33
    桔皮素Tangeretin70.030.33
    5,7,4-三甲氧基黄酮5,7,4'-Trimethylapigenin60.030.32
    甜橙黄酮Sinensetin50.000.32
    香风草甙Didymin50.000.32
    4',5,7,8-四甲氧基黄酮4',5,7,8-Tetramethoxyflavone50.000.32
    西托糖苷Sitogluside40.000.32
    新橙皮苷Neohesperidin30.000.32
    柚皮苷Naringin20.020.30
    亚油酸甲酯Methyl linoleate20.000.32
    石竹素Caryophyllene oxide10.000.31
    下载: 导出CSV
  • [1]

    PLEVKOVA J, BROZMANOVA M, MATLOOBI A, et al. Animal models of cough[J]. Respiratory Physiology & Neurobiology,2021,290:103656.

    [2] 高龙霞, 阎玥, 包海鹏, 等. 咳嗽变异性哮喘现代研究进展[J]. 中华中医药杂志,2021,34(9):4171−4174. [GAO L X, YAN Y, BAO H P, et al. Modern research progress of cough variant asthma[J]. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy,2021,34(9):4171−4174.

    GAO L X, YAN Y, BAO H P, et al. Modern research progress of cough variant asthma[J]. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy, 2021, 34(9): 4171-4174.

    [3] 王艳慧. 化橘红的研究进展[J]. 世界科学技术-中医药现代化,2017,19(6):1076−1082. [WANG Y H. Research progress of Citri grandis Exocarpium[J]. Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica-World Science and Technology,2017,19(6):1076−1082.

    WANG Y H. Research Progress of Citri grandis Exocarpium[J]. Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica-World Science and Technology, 2017, 19(6): 1076-1082.

    [4]

    CHEN Y, WU Y, LI S, et al. Large-scale isolation and antitumor mechanism evaluation of compounds from the traditional Chinese medicine Cordyceps militaris[J]. European Journal of Medicinal Chemistry,2021,212:113142. doi: 10.1016/j.ejmech.2020.113142

    [5] 嵇冰. 平喘固本汤治疗稳定期慢性阻塞性肺病的临床研究[D]. 苏州: 苏州大学, 2012.

    JI B. Clinical study of Pingchuanguben Tang on stable chronic obstructive pulmonary disease (COPD)[D]. Suzhou: Soochow University, 2012.

    [6] 杜雨茂. 痰饮咳嗽(慢性支气管炎并间质性感染)一例治验[J]. 陕西中医学院学报,1978(2):23−25. [DU Y M. A case of cough due to phlegm retention (Bronchitis and Interstitial Infection)[J]. Journal of Shaanxi College of Traditional Chinese Medicine,1978(2):23−25.

    DU Y M. A case of cough due to phlegm retention (Bronchitis and Interstitial Infection)[J]. Journal of Shaanxi College of Traditional Chinese Medicine, 1978(2): 23-25.

    [7] 毛树贵. 浅谈天降镇压胶囊治高血压与天降镇咳胶囊的独特功效[J]. 中华养生保健,2004(10):50. [MAO S G. Discussion on the unique efficacy of Tianjiang Zhenke capsule and Tianjiang Zhenke capsule in treating hypertension[J]. China Health Care,2004(10):50.

    MAO S G. Discussion on the unique efficacy of Tianjiang Zhenke capsule and Tianjiang Zhenke capsule in treating hypertension[J]. China Health Care, 2004(10) : 50.

    [8] 陈志华. 橘红痰咳液治疗小儿急性支气管炎的临床疗效分析[J]. 中国处方药,2019,17(1):86−87. [CHEN Z C. Clinical analysis of Juhong Tanke liquid in treating acute bronchitis in children[J]. Journal of China Prescription Drug,2019,17(1):86−87. doi: 10.3969/j.issn.1671-945X.2019.01.056

    CHEN Z C. Clinical analysis of Juhong Tanke liquid in treating acute bronchitis in children[J]. Journal of China Prescription Drug, 2019, 17(1) : 86-87. doi: 10.3969/j.issn.1671-945X.2019.01.056

    [9] 孟泽彬, 陈林会, 韩近雨, 等. 蛹虫草化学活性成分的研究进展[J]. 分子植物育种,2015,13(9):2147−2154. [MENG Z M, CEHN L H, HAN J Y, et al. Research advances of the chemical active constituents of Cordyceps militaris[J]. Molecular Plant Breeding,2015,13(9):2147−2154.

    MENG Z M, CEHN L H , HAN J Y, et al. Research advances of the chemical active constituents of Cordyceps militaris[J]. Molecular Plant Breeding, 2015, 13(9) : 2147-2154.

    [10] 谢伟娜, 王宝娟, 张海波, 等. 肺炎颗粒成型工艺的优化及其对小鼠的镇咳作用[J]. 中成药,2021,43(5):1123−1128. [XIE W N, WANG B J, SHANG H B, et al. Optimization of forming process for granules for pneumonia and its antitussive effect on mice[J]. Chinese Traditional Patent Medicine,2021,43(5):1123−1128. doi: 10.3969/j.issn.1001-1528.2021.05.002

    XIE W N, WANG B J, SHANG H B, et al. Optimization of forming process for granules for pneumonia and its antitussive effect on mice[J]. Chinese Traditional Patent Medicine, 2021, 43(5): 1123-1128. doi: 10.3969/j.issn.1001-1528.2021.05.002

    [11] 王翰华, 杨晓春, 陈云. 宁海白枇杷花醇提物不同极性部位的止咳化痰抗炎活性[J]. 中国老年学杂志,2019,39(6):1431−1434. [WANG H H, YANG X C, CHEN Y. Antitussive, expectorant and anti-inflammatory activities of ethanol extracts from the flower of Eriobotrya japonica in Ninghai County[J]. Chinese Journal of Gerontology,2019,39(6):1431−1434. doi: 10.3969/j.issn.1005-9202.2019.06.048

    WANG H H, YANG X C, CHEN Y. Antitussive, expectorant and anti-inflammatory activities of ethanol extracts from the flower of Eriobotrya japonica in Ninghai County[J]. Chinese Journal of Gerontology, 2019, 39(6) : 1431-1434. doi: 10.3969/j.issn.1005-9202.2019.06.048

    [12] 盖国忠, 金顺姬, 王波, 等. 蛹虫草菌粉胶囊和金水宝胶囊对照治疗慢性支气管炎[J]. 中国新药杂志,2004(2):169−171. [GAI G Z, JIN S J, WANG B, et al. The efficacy of Cordyceps militaris capsules in treatment of chronic bronchitis in comparison with Jinshuibao capsules[J]. Chinese New Drugs Journal,2004(2):169−171. doi: 10.3321/j.issn:1003-3734.2004.02.024

    GAI G Z, JIN S J, WANG B, et al. The efficacy of Cordyceps militaris capsules in treatment of chronic bronchitis in comparison with Jinshuibao capsules[J]. Chinese New Drugs Journal, 2004(2): 169-171. doi: 10.3321/j.issn:1003-3734.2004.02.024

    [13] 蔡鸿彦, 刘志成, 逄建伟, 等. 蛹虫草菌粉胶囊治疗慢性支气管炎510例[J]. 中国新药杂志,2004(2):171−174. [CAI H Y, LIU Z C, PANG J W, et al. Efficacy of Cordyceps militaris capsules in treatment of chronic bronchitis[J]. Chinese New Drugs Journal,2004(2):171−174. doi: 10.3321/j.issn:1003-3734.2004.02.025

    CAI H Y, LIU Z C, PANG J W, et al. Efficacy of Cordyceps militaris capsules in treatment of chronic bronchitis[J]. Chinese New Drugs Journal, 2004(2): 171-174. doi: 10.3321/j.issn:1003-3734.2004.02.025

    [14] 侯秀娟, 沈勇根, 徐明生, 等. 化州橘红多糖对小鼠消炎、止咳及化痰功效的影响研究[J]. 现代食品科技,2013,29(6):1227−1229. [HOU C J, SHEN Y G, XU M S, et al. Dephlogisticate, antitussive and expectorant effects of polysaccharides from Citri grandis Exocarpium on mice[J]. Modern Food Science and Technology,2013,29(6):1227−1229.

    HOU C J, SHEN Y G, XU M S, et al. Dephlogisticate, antitussive and expectorant effects of polysaccharides from Citri grandis Exocarpium on mice[J]. Modern Food Science and Technology, 2013, 29(6): 1227-1229.

    [15]

    CHAE H, KIM S Y, PEL P, et al. Standardized extract of Atractylodis Rhizoma Alba and Fructus Schisandrae ameliorates coughing and increases expectoration of phlegm[J]. Molecules,2020,25(13):3064. doi: 10.3390/molecules25133064

    [16]

    YANG E J, LEE J, SONG B B, et al. Anti-inflammatory effects of ethanolic extract from Lagerstroemia indica on airway inflammation in mice[J]. Journal of Ethnopharmacology,2011,136(3):422−427. doi: 10.1016/j.jep.2010.05.066

    [17]

    ZHONG S, NIE Y, GAN Z, et al. Effects of Schisandra chinensis extracts on cough and pulmonary inflammation in a cough hypersensitivity guinea pig model induced by cigarette smoke exposure[J]. Journal of Ethnopharmacology,2015,165:73−82. doi: 10.1016/j.jep.2015.02.009

    [18] 王春燕, 隆红艳. 黄龙止咳口服液对咳嗽变异性哮喘模型小鼠的作用机制研究[J]. 天津中医药大学学报,2020,39(3):330−335. [WANG C W, LONG H Y. Study on the mechanism of Huanglong Zhike oral liquid on mouse with cough variant asthma model[J]. Journal of Tianjin University of Traditional Chinese Medicine,2020,39(3):330−335.

    YAN C W, YAN H L. Study on the mechanism of Huanglong Zhike oral liquid on mouse with cough variant asthma model[J]. Journal of Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, 2020, 39(3): 330-335.

    [19] 王红霞, 郭烁, 郭雨晴, 等. 百杏润肺止咳方对肺阴亏虚型咳嗽变异性哮喘患者炎症因子及肺功能的影响[J]. 中国中医基础医学杂志,2019,25(10):1377−1379. [WANG H X, GUO S, GUO Y Q, et al. Effect of Baixing Runfei Zhike recipe on inflammatory factors and lung function in patients with cough variant asthma of deficiency of Lung Yin typet[J]. Chinese Journal of Basic Medicine in Traditional Chinese Medicine,2019,25(10):1377−1379.

    WANG H X, GUO S, GUO Y Q, et al. Effect of Baixing Runfei Zhike recipe on inflammatory factors and lung function in patients with cough variant asthma of deficiency of lung yin typet[J]. Chinese Journal of Basic Medicine in Traditional Chinese Medicine, 2019, 25(10): 1377-1379.

    [20] 陈欲云, 马清萍, 王涛, 等. 柚皮素止咳化痰平喘作用的研究[J]. 食品工业科技,2014,35(19):355−358. [CHEN Y Y, MA Q P, WANG T, et al. Experimental study on antitussive, expectorant and anti-asthmatic effects of naringenin[J]. Science and Technology of Food Industry,2014,35(19):355−358.

    CHEN Y Y, MA Q P, WANG T, et al. Experimental study on antitussive, expectorant and anti-asthmatic effects of naringenin[J]. Science and Technology of Food Industry, 2014, 35(19): 355-358.

    [21]

    LUO Y, ZHANG C, LI P, et al. Naringin attenuates enhanced cough, airway hyperresponsiveness and airway inflammation in a guinea pig model of chronic bronchitis induced by cigarette smoke[J]. International Immunopharmacology,2012,13(3):301−307. doi: 10.1016/j.intimp.2012.04.019

    [22]

    IWAMURA C, SHINODA K, YOSHIMURA M, et al. Naringenin chalcone suppresses allergic asthma by inhibiting the type-2 function of CD4 T cells[J]. Allergol Int,2010,59(1):67−73. doi: 10.2332/allergolint.09-OA-0118

    [23]

    YANG J, LI Q, ZHOU X D, et al. Naringenin attenuates mucous hypersecretion by modulating reactive oxygen species production and inhibiting NF-κB activity via EGFR-PI3K-Akt/ERK MAPKinase signaling in human airway epithelial cells[J]. Molecular and Cellular Biochemistry,2011,351(1-2):29−40. doi: 10.1007/s11010-010-0708-y

    [24]

    FEI X, ZHANG X, ZHANG G, et al. Cordycepin inhibits airway remodeling in a rat model of chronic asthma[J]. Biomedicine & Pharmacotherapy,2017,88:335−341.

    [25]

    LI R, PANG L, DU Q, et al. Apigenin inhibits allergen-induced airway inflammation and switches immune response in a murine model of asthma[J]. Immunopharmacology and Immunotoxicology,2010,32(3):364−370. doi: 10.3109/08923970903420566

    [26]

    LAMPRONTI I, DECHECCHI M C, RIMESSI A, et al. β-Sitosterol reduces the expression of chemotactic cytokine genes in cystic fibrosis bronchial epithelial cells[J]. Frontiers in Pharmacology,2017,8:e00236.

    [27] 刘晓霞. 蛋白质交互网络中的复合物识别与应用研究[D]. 大连: 大连理工大学, 2018.

    LIU X X. Research on identification and application of protein complexes in protein-protein interaction networks[D]. Dalian: Dalian University of Technology, 2018.

    [28]

    PATIL R H, NAVEEN KUMAR M, KIRAN KUMAR K M, et al. Dexamethasone inhibits inflammatory response via down regulation of AP-1 transcription factor in human lung epithelial cells[J]. Gene,2018,645:85−94. doi: 10.1016/j.gene.2017.12.024

    [29] 张青, 徐剑铖, 毛宝龄, 等. 内毒素致伤大鼠肺组织TNF-α、IL-6的mRNA表达及NF-IL6活化研究[J]. 中国危重病急救医学,2001(9):523−526. [ZHANG Q, XU J C, MAO B L, et al. Studies on the expression of tumor necrosis factor-α and interleukin-6 mRNA and the activity of nuclear factor in acute lung injury induced by lipopolysaccharide[J]. Chinese Critical Care Medicine,2001(9):523−526.

    ZHANG Q, XU J C, MAO B L, et al. Studies on the expression of tumor necrosis factor-α and interleukin-6 mRNA and the activity of nuclear factor in acute lung injury induced by lipopolysaccharide[J]. Chinese Critical Care Medicine, 2001(9): 523-526.

    [30]

    SONG X, QIAN Y. IL-17 family cytokines mediated signaling in the pathogenesis of inflammatory diseases[J]. Cellular Signalling,2013,25(12):2335−2347. doi: 10.1016/j.cellsig.2013.07.021

    [31]

    JAROSZ-GRIFFITHS H H, HOLBROOK J, LARA-REYNA S, et al. TNF receptor signalling in autoinflammatory diseases[J]. International Immunology,2019,31(10):639−648. doi: 10.1093/intimm/dxz024

    [32]

    OHTSU A, SHIBUTANI Y, SENO K, et al. Advanced glycation end products and lipopolysaccharides stimulate interleukin-6 secretion via the RAGE/TLR4-NF-κB-ROS pathways and resveratrol attenuates these inflammatory responses in mouse macrophages[J]. Experimental and Therapeutic Medicine,2017,14(5):4363−4370.

    [33]

    YU W, TAO M, ZHAO Y, et al. 4’-Methoxyresveratrol alleviated AGE-induced inflammation via RAGE-mediated NF-κB and NLRP3 inflammasome pathway[J]. Molecules,2018,23(6):1447. doi: 10.3390/molecules23061447

  • 期刊类型引用(1)

    1. 赵康妤,杨萍,马俊坤,舒文静,杨凤,谢伊莎,刘庆庆. 超声协同热处理对菜籽蛋白结构及溶解性的影响. 食品科学. 2025(01): 100-107 . 百度学术

    其他类型引用(0)

图(5)  /  表(3)
计量
  • 文章访问数:  215
  • HTML全文浏览量:  43
  • PDF下载量:  35
  • 被引次数: 1
出版历程
  • 收稿日期:  2021-10-25
  • 网络出版日期:  2022-05-20
  • 刊出日期:  2022-06-30

目录

/

返回文章
返回
x 关闭 永久关闭