超高效液相色谱-串联质谱法同时测定玉米中9种真菌毒素

谭莉 孟繁磊 范宏 ANNANowacka 魏春雁

谭莉,孟繁磊,范宏,等. 超高效液相色谱-串联质谱法同时测定玉米中9种真菌毒素[J]. 食品工业科技,2021,42(7):240−245. doi:  10.13386/j.issn1002-0306.2020050057
引用本文: 谭莉,孟繁磊,范宏,等. 超高效液相色谱-串联质谱法同时测定玉米中9种真菌毒素[J]. 食品工业科技,2021,42(7):240−245. doi:  10.13386/j.issn1002-0306.2020050057
TAN Li, MENG Fanlei, FAN Hong, et al. Determination of 9 Kinds of Mycotoxins in Maize by Ultra Performance Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry[J]. Science and Technology of Food Industry, 2021, 42(7): 240−245. (in Chinese with English abstract). doi:  10.13386/j.issn1002-0306.2020050057
Citation: TAN Li, MENG Fanlei, FAN Hong, et al. Determination of 9 Kinds of Mycotoxins in Maize by Ultra Performance Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry[J]. Science and Technology of Food Industry, 2021, 42(7): 240−245. (in Chinese with English abstract). doi:  10.13386/j.issn1002-0306.2020050057

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定玉米中9种真菌毒素

doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2020050057
基金项目: 吉林省科技发展计划项目(20180414076GH);国家农产品质量安全风险评估项目(GJFP2019004)
详细信息
    作者简介:

    谭莉(1991−),女,硕士,主要从事农产品质量安全检测技术方面的研究,E-mail:litan1235@163.com

    通讯作者:

    魏春雁(1962−),女,博士,研究员,主要从事农产品质量安全方面的研究,E-mail:weichy@yeah.net

  • 中图分类号:  TS213.4

Determination of 9 Kinds of Mycotoxins in Maize by Ultra Performance Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry

  • 摘要: 为高效检测玉米中的生物毒素,采用80%乙腈−0.1%甲酸水溶液提取、QuEChERS法净化、甲醇−0.1%甲酸+5 mmol/L甲酸铵水溶液经C18柱梯度洗脱分离、电喷雾正负离子同时扫描并多反应监测模式采集数据的综合方法,对玉米中黄曲霉毒素B1、B2、伏马毒素B1、B2、B3、呕吐毒素、3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇及玉米赤霉烯酮9种真菌毒素进行同时测定。结果表明,9种真菌毒素在0.25~250 μg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数均在0.9999以上,检出限在0.079~1.8 μg/kg之间,定量限在0.26~6.0 μg/kg之间,回收率在80.2%~113.8%之间,相对标准偏差≤7.7%。用该方法同时检测吉林省240份玉米样品中9种真菌毒素,其中未检测出黄曲霉毒素B1、B2,但其它7种毒素均有检出,其中ZEN检出率最小,为14.6%,FB2检出率最大,达到98.3%。本方法操作简单、灵敏度高、重现性好,结果准确,适用于玉米中多组分真菌毒素同时检测。
  • 图  1  9种真菌毒素离子流图

    注:A为8种真菌毒素混合标准溶液总离子流图,B为ZEN标准溶液离子流图。

    Figure  1.  Ion flow diagram of 9 fungal toxins

    图  2  9种真菌毒素基质效应散点图

    Figure  2.  Scatter plots of matrix effects of 9 mycotoxins

    表  1  梯度洗脱程序

    Table  1.   Gradient elution procedures

    时间
    (min)
    流速
    (mL/min)
    甲醇
    (%)
    时间
    (min)
    流速
    (mL/min)
    甲醇
    (%)
    00.310.010.50.360.0
    2.00.310.013.50.360.0
    3.00.320.014.50.395.0
    4.00.321.017.00.395.0
    5.00.326.018.00.310.0
    7.00.326.020.00.310.0
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    表  2  质谱条件

    Table  2.   Mass spectrum conditions

    毒素扫描模式保留时间(min)监测离子对碰撞能量CE(V)去簇电压DP(V)
    AFTB14.0313/285*;313/24131;49150
    AFTB23.7315/287*;315/25935;39150
    ZEN6.9317/175*;317/131−32;−38−140
    DON1.9297/203*;297/24922;16110
    3-ADON2.7339/203*;339/23120;16120
    15-ADON2.7339/137*;339/23111;16120
    FB15.6723/334*;723/35255;50150
    FB26.9706/336*;706/31850;55150
    FB37.6706/336*;706/31850;48150
    注:*表示定量离子。
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    表  3  方法的线性范围、检出限及定量限

    Table  3.   Linear range, detection limit and quantitative limit of the method

    毒素标准曲线线性范围(μg/L)相关系数(rLOD(μg/kg)LOQ(μg/kg)
    ZENY=3003.6 X+4.1×1046.25~2500.999980.732.4
    AFTB2Y=11183.3 X−2731.50.25~100.999950.0790.26
    AFTB1Y=15592.1 X−5794.90.50~200.999970.140.48
    FB1Y=371.1 X−6009.76.25~2500.999911.34.3
    FB2Y=551.1 X−6475.46.25~2500.999950.260.86
    FB3Y=477.3 X−6153.36.25~2500.999931.86.0
    DONY=120.9 X−519.06.25~2500.999931.44.6
    3-ADONY=339.3 X−1819.66.25~2500.999981.13.8
    15-ADONY=355.4 X−1652.36.25~2500.999991.13.8
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    表  4  9种真菌毒素平均回收率和精密度(n = 6)

    Table  4.   Average recovery and precision of 9 mycotoxins (n = 6)

    毒素添加量(μg/kg)平均值(μg/kg)回收率(%)RSD(%)
    ZEN250255.8102.37.7
    AFTB2108.383.40.2
    AFTB12019.295.60.5
    FB1250227.680.22.2
    FB2250253.9101.50.8
    FB3250244.997.92.9
    DON250268.4107.47.3
    3-ADON250284.4113.85.4
    15-ADON250272.3108.97.6
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    表  5  本方法与国标方法对比结果(n = 6)

    Table  5.   Comparison results between this method and GB method (n = 6)

    毒素测定结果(μg·kg−1P
    本方法国标方法
    AFTB124.36 ± 0.9225.53 ± 0.95>0.05差异不显著
    AFTB225.47 ± 1.2225.89 ± 1.08
    ZEN25.09 ± 1.5724.59 ± 1.48
    DON25.11 ± 1.7525.02 ± 1.68
    3-ADON24.70 ± 1.3125.12 ± 1.14
    15-ADON24.83 ± 1.9124.72 ± 1.32
    FB124.80 ± 0.2625.42 ± 0.38
    FB225.47 ± 0.5924.74 ± 0.46
    FB325.45 ± 0.9825.51 ± 0.73
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    表  6  240份玉米样品中各毒素含量的最大值、最小值及检出率

    Table  6.   Maximum and minimum values and detection rates of each toxin content in 240 maize samples

    毒素最低检出值(μg/kg)最高检出值(μg/kg)检出率(%)
    ZEN9.913530.514.6
    DON9.51806.352.9
    3-ADON10.1205.630.4
    15-ADON11.01472.245.1
    FB114.523270.196.7
    FB229.85877.198.3
    FB317.33365.585.8
    AFB1///
    AFB2///
    注:/表示未检出。
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    表  7  同时检测出5种毒素的玉米样品

    Table  7.   Maize samples with 5 toxins detected simultaneously

    样品
    编号
    ZEN
    (μg/kg)
    AFB2
    (μg/kg)
    AFB1
    (μg/kg)
    FB1
    (μg/kg)
    FB2
    (μg/kg)
    FB3
    (μg/kg)
    3-ADON
    (μg/kg)
    15-ADON
    (μg/kg)
    33586.6//23270.155.089.226.9126.6
    34785.8//1162.553.1127.018.1118.0
    35131.4//5313.062.6147.718.050.2
    3813530.5//786.258.8251.879.9365.4
    392621.3//1634.857.5200.246.2229.7
    401008.0//2399.656.948.438.251.3
    6348.5//1008.761.8172.1177.6764.1
    6917.5//510.9180.6320.234.4157.9
    7031.9//2346.668.2170.6140.11472.2
    841274.8//142.062.294.624.164.2
    8577.0//2617.259.040.118.259.4
    86508.1//622.968.427.920.480.9
    87106.4//3667.0288.0215.565.0320.7
    89877.4//3122.5336.8275.862.4304.5
    903653.7//633.7125.8247.2108.8489.2
    1502215.5//1590.6306.8359.918.774.4
    1823834.2//155.379.4385.4198.9849.3
    183203.5//2261.7754.3448.020.572.1
    186210.3//1867.3764.9485.824.117.2
    187251.0//101.565.6433.418.631.7
    1901740.6//147.487.9127.029.8122.5
    192292.9//2661.31032.3147.321.986.6
    196139.5//732.1304.1133.241.3175.4
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出版历程
  • 收稿日期:  2020-05-08
  • 网络出版日期:  2021-01-28
  • 刊出日期:  2021-04-01

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