Effect of Different Harvest Maturity on the Nutritional Quality of Midknight Valencia Orange Fruit
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摘要: 蜜奈夏橙(Midknight Valencia Orange)是重要的晚熟柑橘品种之一。为研究不同采收成熟度对该品种夏橙果实营养品质的影响,以确定其最适采收期,测定了采收期Ⅰ~Ⅴ蜜奈夏橙果皮色差值、硬度,果实类胡萝卜素、可溶性糖、有机酸、游离氨基酸、矿质元素、黄酮、总酚等品质指标,并进行相关性分析。结果表明:不同采收成熟度对蜜奈夏橙果实的品质影响显著,随着采收时间的推迟,果皮颜色由果顶至果蒂逐渐变黄,且在花后360 d时果实呈鲜艳的亮黄色;果实总类胡萝卜素、抗坏血酸、总酚和黄酮含量呈上升趋势;可溶性固形物含量先增加后降低,可滴定酸含量显著降低。蜜奈夏橙果实中主要的可溶性糖是葡萄糖、蔗糖、果糖、塔罗糖、肌醇,其中葡萄糖、蔗糖含量在采收期间呈上升趋势;主要的有机酸是柠檬酸、苹果酸、奎宁酸,其中柠檬酸含量在采收期间呈下降趋势;主要的游离氨基酸是脯氨酸、精氨酸、丝氨酸,且在采收期间总体呈上升趋势。综合上述指标变化,在花后360~400 d(4~5月)蜜奈夏橙果实糖酸适宜,营养品质较佳,适宜采收。相关性分析表明,果皮硬度、果肉可滴定酸、固酸比等常用成熟度评价指标与果肉类胡萝卜素、可溶性糖、有机酸、游离氨基酸、矿质元素、黄酮和总酚等内在指标具有高度相关性,因此,实际采摘时,可根据果实硬度、可滴定酸含量或固酸比确定其成熟度,即果实硬度在1.33~1.03 kg,可滴定酸含量在1.77%~1.30%、固酸比在5.41~6.96之间时,适宜采摘。该研究结果可为蜜奈夏橙适宜采收期的确定提供一定科学依据。Abstract: Midknight Valencia Orange is one of the most important late maturing citrus varieties. In order to study the effect of different harvest maturity on the nutritional quality of this variety and to determine its optimal harvesting period, the quality indexes of Midknight Valencia Orange, including color difference, firmness, carotenoid, soluble sugars, organic acids, free amino acids, mineral elements, flavonoid and total phenol content were measured and a correlation analysis was performed. The result showed that different harvest maturity had significant effects on the quality of Midknight Valencia Orange. With the delay of harvesting time, the coloration process of the peel gradually changed from the stem end to the bottom end and the peel showed a bright yellow after 360 days of flowering. The contents of carotenoid, ascorbic acid, total phenol and flavonoid increased, while the content of soluble solid increased first and then decreased, and the titrable acid content decreased significantly. The main soluble sugars in Midknight Valencia Orange fruit were glucose, sucrose, fructose, talose and inositol, and the contents of glucose and sucrose showed an increasing trend during harvesting. The main organic acids were citric acid, malic acid and quinic acid, and the content of citric acid decreased during harvesting. The main free amino acids were proline, arginine and serine, which showed an increasing trend during harvesting. Based on the evaluation indexes prescribed above, 360~400 days (April~May) after flowering is the appropriate harvesting time for Midknight Valencia Orange. Besides, the correlation analysis results showed that, as the indicator often used to judge the maturity of fruit, the firmness and titratable acid content of Midknight Valencia Orange have highly correlation with the content of carotenoid, soluble sugars, organic acids, free amino acids, mineral elements, flavonoid and total phenol. The firmness, titratable acid content and TSSC/TA ratio of Midknight Valencia can be used for the determination of harvesting time, namely fruit with a firmness 1.33~1.03 kg, titratable acid content 1.77%~1.30% and 5.41~6.96 TSS/TA ratio showed a good quality. The results of this study can provide a scientific basis for the determination the suitable harvesting period of Midknight Valencia Orange.
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柑橘是我国主要的鲜销水果,其栽培面积和产量均居世界之首[1]。截至2020年,我国柑橘栽培面积高达269万hm2,总产量高达5121.9万吨,栽培面积和总产量均居世界前列[2]。近年来,我国晚熟柑橘产业发展迅速,夏橙、沃柑、春见、不知火、大雅柑等栽培面积和产量迅速增加,早、中、晚熟柑橘品种的搭配种植在调节柑橘市场供应和缓解产业压力方面发挥了重要作用。但不同晚熟柑橘品种适宜采收时间不同,且由于温度、光照等气候因素及栽培条件对晚熟柑橘成熟期的影响更为复杂,以及晚熟柑橘新品种的不断推出,导致晚熟柑橘成熟期的相关研究不足。
蜜奈夏橙(Midknight Valencia Orange)属甜橙类中的晚熟品种,具有果大皮薄,风味浓郁,营养丰富,味美多汁,酸甜可口等优点[3],主要用于鲜食,深受消费者喜爱,是近年来重点发展的夏橙品种。但是,该品种由于着色期长,且受温度、光照等环境因素影响,在采收时会出现明显的返青现象,即果蒂颜色部分变青,导致果实着色不均,呈现黄绿相间的斑驳状,从而为单纯从感官上判断其采收期造成了困难。采收成熟度作为衡量果实成熟情况的重要指标,一定程度上决定着果实的品质、风味、贮藏期及加工利用[4]。采收期过早,会导致蜜奈夏橙果实外观品质较差,口感酸涩,风味清淡,从而影响销售量[5];采收期过晚,蜜奈夏橙虽然风味浓郁,品质较好,但会使果实变软,容易腐烂,贮藏期短,造成巨大经济损失。因此,确定蜜奈夏橙适宜采收成熟度对改善营养品质、延长贮藏期以及提高柑橘产业经济效益有重要意义。目前,对于蜜奈夏橙的研究多集中在采后保鲜处理、栽培技术[6]等方面,关于不同采收期对其营养品质的影响少有研究。
果实成熟度与色泽、硬度、糖酸含量、氨基酸、矿物质、酚类物质等营养品质密切相关[7]。因此,本研究拟通过测定不同采收成熟度蜜奈夏橙果实的营养品质指标,分析其变化规律,探究最佳采收期,以期为蜜奈夏橙最佳采收期的判断提供理论依据。
1. 材料与方法
1.1 材料与仪器
蜜奈夏橙 采摘于重庆市忠县百粮村,采样的时间分别为2020年12月22日,2021年1月21日,3月1日,4月1日,5月8日,即花后260 d(Ⅰ),300 d(Ⅱ),330 d(Ⅲ),360 d(Ⅳ),400 d(Ⅴ);丙酮、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、2,6-二氯酚靛酚、甲醇、没食子酸、芦丁 分析纯,重庆跃翔化工有限公司;福林酚、氢氧化钠 分析纯,重庆钛新化工有限公司;核糖醇 重庆择物生物科技有限公司;BSTFA-TMCS(99:1)\t[GC衍生化试剂]、吡啶 重庆康坭商贸有限公司。
CR-400色差仪 日本Minolta公司;PAL-1手持糖度计 日本Atago公司;TGL-18MS冷冻离心机 上海卢湘仪离心机仪器有限公司;ZLS-1真空离心浓缩仪 上海精学科学仪器有限公司;752G紫外可见分光光度计 上海仪电分析仪器有限公司;QP2010 PLUS气质联用仪 日本岛津公司;DB-5MS气相色谱柱 安捷伦公司;AA 240原子吸收光谱仪 瓦里安公司;DW-FL270超低温冷冻储存箱 中科美菱低温科技股份有限公司;日立L-8900型氨基酸自动分析仪 上海科学仪器有限公司;KQ5200E数控超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司;HH-6数显恒温水浴锅 常州朗越仪器制造有限公司;DZF-6051真空干燥箱 上海齐欣科学仪器有限公司。
1.2 实验方法
1.2.1 材料取样
每个采样时间点选取大小均匀、色泽一致、无机械伤、无病虫害的健康果实15个,用清水洗净后置于室温晾干。切取赤道部位果肉,部分果肉用于可溶性固形物和可滴定酸含量的测定,其余果肉样本置于液氮中速冻后,存放于−40 ℃冰箱中进行后续其他指标的测定。
1.2.2 果皮色差值测定
果皮色差值通过色差仪测定,分别测定果皮果蒂、赤道、果顶三个部位的亮度L*、红绿度a*、黄蓝度b*和色调角H*值(绿色到红色,180°到0°值)。每个采样时间点测定20个蜜奈夏橙。色调角H*计算公式如下:
H∗=arctan(b∗/a∗) 1.2.3 果皮硬度测定
果皮硬度采用FTA水果质地分析仪进行检测,参照Velardomicharet等[8]的方法稍作修改。于不同采收期随机选取10个蜜奈夏橙,在每个果皮的赤道处等距离选取2个点,以20个读数的平均值代表一批样品的硬度,结果以千克(kg)计。实验选用P/5探头(5 mm直径),测定条件:探头速度10 mm/s;测定深度为1 mm。
1.2.4 果肉总类胡萝卜素含量测定
类胡萝卜素的提取及测定参照袁梓洢[9]的方法并稍作修改。在液氮预冷的研钵中研磨1.0 g夏橙果肉,加入10 mL含0.01% 2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)的丙酮提取液,4 ℃,8400 r/min离心10 min,沉淀再用10 mL丙酮溶液重复提取,合并两次上清液,加丙酮定容至25 mL。用紫外分光光度计测量470、645、662 nm处的吸光度,类胡萝卜素含量按下式计算:
Ca=11.75A662−2.35A645 Cb=18.61A645−3.96A662 类胡萝卜素含量=(1000A470−2.27Ca−81.4Cb)×V227×m 式中:A470、A645、A662代表470、645、662 nm处的吸光度;Ca、Cb代表叶绿素a、b浓度,μg/mL;V代表溶液体积,mL;m代表样品质量,g。
1.2.5 果肉可溶性固形物含量测定
取果实的赤道部位果肉,每3个夏橙果肉分为一组,榨成匀浆经纱布过滤,利用PAL-1型手持糖度折光仪测定果实可溶性固形物(Total solube solids,TSS)的含量,用%表示测定结果。
1.2.6 果肉可滴定酸含量测定
可滴定酸(Titratable acid,TA)含量的测定采用酸碱中和滴定法[10],单位用%表示。
1.2.7 果实抗坏血酸含量测定
抗坏血酸(Vitamin C,VC)含量的测定采用2,6-二氯酚靛酚滴定法[10],单位用mg/100 g表示。
1.2.8 果肉糖酸组分及含量测定
参考Yun等[11]的方法稍作修改。取夏橙果肉0.3 g,加入液氮并充分研磨,加入2.7 mL经-20 ℃预冷的甲醇,摇匀后再加入300 μL(0.2 mg·mL−1)核糖醇溶液作为内标,混匀后将样品置于4 ℃超声处理15 min,再置于70 ℃水浴15 min,冷却后4 ℃,8500 r/min离心20 min。吸取100 μL上清液于30 ℃真空离心浓缩仪浓缩至干,随后在样品中加入100 μL吡啶溶液,真空干燥箱50 ℃孵育30 min。冷却至室温后加入100 μL BSTFA(含1% TMCS,V/V),再置于真空干燥箱中60 ℃孵育40 min。样品过0.22 μm微孔滤膜,得到夏橙果肉的可溶性糖和有机酸,采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)鉴定分析其含量。将结果与标准图谱库NIST 08对照进行定性分析,利用内标物对果实成分进行定量分析。
1.2.8.1 GC条件
色谱柱:DB-5 MS石英毛细管柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm);升温程序:初始100 ℃开始,保持1 min,以3 ℃/min的速度升至175 ℃并保持1 min,以2 ℃/min的速度升至184 ℃,再以0.5 ℃/min的速度升至190 ℃并保持1 min,最后以7 ℃/min的速度升至280 ℃并保持5 min;载气(He)流速1.0 mL/min;进样量1 μL;分流比为10:1。
1.2.8.2 MS条件
质谱条件:进样口温度250 ℃;电子轰击电离源温度230 ℃;接口温度为250 ℃;扫描范围(m/z):45~600 amu。
1.2.9 果肉游离氨基酸含量测定
参照周雅涵等[12]的方法稍作修改。取夏橙果肉2 g,加入液氮,充分研磨成粉末后加入到含6 mL 6%(g/v)磺基水杨酸的离心管中,充分振荡至匀浆,在20~25 ℃下超声处理1 h后离心20 min(4 ℃,10000 r/min)。最后,取上清液过0.22 μm水相滤膜过滤,采用日立L-8900型氨基酸自动分析仪测定样品中游离氨基酸的含量,总游离氨基酸含量用所测游离氨基酸之和表示。鲜味氨基酸含量用天冬氨酸和谷氨酸含量之和表示,甜味氨基酸含量用丝氨酸、甘氨酸、丙氨酸、苏氨酸、赖氨酸和脯氨酸含量之和表示,苦味氨基酸含量用缬氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、精氨酸和亮氨酸含量之和表示,芳香类氨基酸含量用酪氨酸和苯丙氨酸含量之和表示。
1.2.10 果肉矿质元素含量测定
参照Deng等[13]的方法稍作修改。称取夏橙果肉1 g,于液氮中研磨成粉末后置于消化管中,每管分别加入10 mL的HNO3、HClO4和H2SO4(5:1:1),静置12 h。然后将试管放置在80 ℃的消化槽中约1 h,然后将温度缓慢增加到120~130 ℃。消化完成后,冷却,过滤(0.45 μm过滤膜),用去离子水稀释至100 mL,使用原子吸收光谱仪进行分析。
1.2.11 果肉类黄酮和总酚含量测定
参照曹建康[10]的方法稍作修改。称取0.5 g果肉样品,加入8 mL 95%的甲醇,25 ℃超声提取30 min,在4 ℃下14000 r/min离心10 min后收集上清液,重复该步骤直至沉淀无色。收集上述提取液,存放于-20 ℃冰箱。
1.2.11.1 类黄酮含量测定
用酸铝显色法方法测定类黄酮含量[14]。以芦丁制作标准曲线,根据标准曲线计算类黄酮含量。
1.2.11.2 总酚含量测定
参考Kuljarachanan等[15]的方法测定夏橙果肉的总酚含量。以没食子酸制作标准曲线,根据标准曲线计算总酚含量。
1.3 数据处理
所有试验设置3个生物学重复。使用Microsoft Excel 2019软件整理数据,使用GraphPad Prism 8.0绘制相关图表,使用IBM SPSS Statistics 23.0软件对数据进行方差分析,利用Duncan’s多重比较进行差异显著性分析(P<0.05)。
2. 结果与分析
2.1 不同采收期蜜奈夏橙果皮色差值变化
柑橘果实的外观色泽是评价其商品价值的重要指标之一,也是消费者判断果实品质的直观依据。但蜜奈夏橙果实在成熟时,受温度、光照、营养和植物激素等因素影响会发生返青现象,从而影响其商业价值。蜜奈夏橙在不同采收期时的外观变化如图1所示。在采收期Ⅰ~Ⅴ,蜜奈夏橙果皮整体由绿色变为亮黄色再变为橙色,在采收期Ⅱ时,果皮颜色由果顶至果蒂逐渐变黄,采收期Ⅲ果皮整体呈黄色,其中果蒂部分黄绿相间。从蜜奈夏橙果皮的三个部位着色情况来看,着色顺序由果顶至果蒂逐渐变黄,且随着采收期的推迟,蜜奈夏橙果皮在采收期Ⅳ和Ⅴ果实色泽呈鲜艳的亮黄色,然而夏橙在采收期Ⅴ时出现返青现象,即从果蒂开始,颜色又部分变青,导致果实着色不均,呈现黄绿相间的斑驳状,这与Keawmanee等[16]的发现相一致。同时,由于返青现象多发生在春末和夏季,故温度可能是诱导夏橙果实返青的关键因素。Iglesias等[17]研究表明高温会刺激氮的吸收和营养生长激素的形成,用于柑橘的开花和坐果,从而导致果实返青。
蜜奈夏橙在不同采收期时的果皮色差值变化情况如表1所示,采收期Ⅰ~Ⅴ果实的色差参数亮度L*、红绿度a*、黄蓝度b*、a*/b*值整体上呈现增加的趋势,色调角H*值呈下降趋势,这与果皮外观变化情况一致。与采收期Ⅰ相比,采收期Ⅲ的果蒂部位L*、a*、b*、a*/b*值分别显著上升了26.84%、163.97%、50.68%、141.38%(P<0.05),H*值显著下降了21.2%(P<0.05),赤道部位L*、a*、b*、a*/b*值分别显著上升了26.07%、220.51%、53.35%、174.07%(P<0.05),H*值显著下降了25.05%(P<0.05),果顶部位L*、a*、b*、a*/b*值分别显著上升了25.80%、236.62%、52.29%、188%(P<0.05),H*值显著下降了25.36%(P<0.05)。与采收期Ⅳ相比,蜜奈夏橙在采收期Ⅴ出现返青现象,此时果蒂部位L*、a*、b*、a*/b*值均呈下降趋势,其中a*、a*/b*值分别显著下降了59.33%、57.14%(P<0.05),H*值显著上升了8.52%(P<0.05),赤道和果顶部位L*、a*、b*、a*/b*、H*值变化均不显著(P>0.05),也说明返青现象多开始于果实的果蒂部位。总体来说,蜜奈夏橙果皮在采收期Ⅰ~Ⅲ时果蒂、赤道、果顶三个部位色差值变化显著,在采收期Ⅳ~Ⅴ时果蒂部位色差值变化显著,与果皮外观色泽的变化结果保持一致。
表 1 不同采收期蜜奈夏橙果皮色差值变化Table 1. Changes of color difference value of Midknight Valencia Orange peel at different harvesting periods色差值 不同部位 不同采收期 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
L*果蒂 54.44±3.79d 60.97±2.96c 69.05±3.12a 69.01±0.79a 68.22±1.39a 赤道 55.46±4.36d 63.28±2.95bc 69.92±1.75a 68.90±0.99a 69.47±1.71a 果顶 55.28±3.74d 65.31±3.01abc 69.54±1.36a 68.30±0.93a 66.85±2.26ab
a*果蒂 −12.38±1.35e −1.46±3.11d 7.92±5.35c 13.77±1.26ab 5.60±4.14c 赤道 −11.70±2.50e 4.64±2.63c 14.10±3.76ab 17.56±1.56a 14.16±2.64ab 果顶 −11.06±2.46e 8.75±3.37bc 15.11±4.21a 19.00±2.01a 16.60±2.25a
b*果蒂 43.92±5.23d 54.77±4.59c 66.18±4.75a 66.86±1.17a 63.05±2.27ab 赤道 45.17±5.83d 59.31±4.03bc 69.27±2.35a 68.52±1.28a 68.65±1.39a 果顶 45.25±5.49d 62.73±4.55ab 68.91±1.48a 68.53±1.08a 65.90±3.36ab
H*果蒂 105.91±2.28a 91.78±3.58b 83.46±4.55cd 78.37±0.91def 85.05±3.59c 赤道 104.81±3.95a 85.64±2.24c 78.55±2.90def 75.63±1.24f 78.35±2.17def 果顶 104.09±4.09a 82.22±2.67cde 77.69±3.23ef 74.51±1.59f 75.90±1.43f
a*/b*果蒂 −0.29±0.04f −0.03±0.06e 0.12±0.08cd 0.21±0.02abc 0.09±0.06d 赤道 −0.27±0.07f 0.08±0.04d 0.20±0.05abc 0.26±0.02a 0.21±0.04abc 果顶 −0.25±0.08f 0.14±0.05bcd 0.22±0.06ab 0.28±0.03a 0.25±0.03a 注:不同小写字母表示在同一指标下不同采收期差异显著(P<0.05)。 2.2 不同采收期蜜奈夏橙果皮硬度变化
果皮硬度是判断果实成熟度的重要指标之一[18]。随着柑橘果实的成熟,果胶甲酯酶和聚半乳糖醛酸酶能够分解果皮细胞间的果胶,使得果皮间的细胞变得疏散、分离,从而降低果皮硬度[19]。图2为蜜奈夏橙在采收期间的硬度变化情况。采收期Ⅰ~Ⅴ夏橙果实的硬度整体呈下降趋势(1.65±0.15→1.03±0.12 kg),但采收期Ⅱ~Ⅳ硬度下降趋势较为缓慢,没有显著差异(P>0.05),在采收期Ⅴ时,硬度显著下降(P<0.05),表明果实质地不断变软。
2.3 不同采收期蜜奈夏橙果肉总类胡萝卜素含量变化
类胡萝卜素是一种天然的脂溶性色素,是体内维生素A的主要来源,具有抗氧化、延缓衰老、增强机体免疫力等作用。类胡萝卜素不仅使柑橘呈现良好的色泽,而且增加了柑橘的营养品质[20]。图3为蜜奈夏橙在采收期间总类胡萝卜素含量变化情况。采收期Ⅰ~Ⅴ,蜜奈夏橙果肉总类胡萝卜素含量显著上升(P<0.05),分别为13.14、14.89、21.07、25.80、28.01 μg/g FW,采收期Ⅴ总类胡萝卜素含量最高,是采收期Ⅰ的2.13倍。在采收期Ⅱ~Ⅳ,蜜奈夏橙果肉总类胡萝卜素含量迅速增加,采收期Ⅳ之后含量仍在上升,但上升速率变缓。尽管蜜奈夏橙果皮在采收期Ⅳ~Ⅴ出现返青现象,但此阶段果肉的类胡萝卜素仍处于持续积累的过程。在蜜奈夏橙成熟过程中,果肉颜色逐渐由浅黄色变为橙黄色,这可能是由于果肉类胡萝卜素含量不断积累所导致的[21]。
2.4 不同采收期蜜奈夏橙果肉可溶性固形物、可滴定酸、抗坏血酸含量变化
可溶性固形物、可滴定酸和抗坏血酸是采后果实的重要品质指标。表2为蜜奈夏橙果肉在采收期间TSS、TA和VC的变化情况。在采收期Ⅰ~Ⅲ时,TSS含量显著增加(P<0.05),在采收期Ⅳ~Ⅴ含量显著降低(P<0.05),与采收期Ⅰ相比,采收期Ⅳ的夏橙果肉TSS上升了19.70%,采收期Ⅴ的夏橙果肉TSS上升了13.30%。在蜜奈夏橙采收期间,TSS含量先升高后降低,在采收期Ⅲ达到最高,此时TSS含量升高可能与果实体内淀粉转化为可溶性糖有关,后期可溶性糖含量降低可能由于果实的呼吸作用导致有机物的减少[22]。
表 2 不同采收期蜜奈夏橙果肉可溶性固形物、可滴定酸、抗坏血酸含量变化Table 2. Changes of soluble solid, titratable acid and ascorbic acid content of Midknight Valencia Orange fruit at different harvesting periods一般而言,TA含量的变化可显著表征果实的成熟度。在采收期Ⅰ~Ⅴ,蜜奈夏橙果肉中TA含量呈显著下降趋势(P<0.05),与采收期Ⅰ相比,采收期Ⅳ的夏橙果肉TA下降了45.54%,采收期Ⅴ的夏橙果肉TA下降了60%。固酸比是与柑橘类水果品质相关的重要参数,可以直观地反映水果的风味[23-24],用TSS含量与TA含量的比值来表示。随着采收期的延长,固酸比呈上升趋势,蜜奈夏橙果实风味由酸甜变为浓甜。相较于其他采收期,采收期Ⅴ固酸比最高,达到6.96,此时风味最为浓郁。
VC是评价柑橘新鲜度、抗氧化和抗衰老的重要营养指标。VC含量越高,表明果实抗氧化能力越强,营养价值越高[25]。在蜜奈夏橙果实采收期间,VC含量呈显著上升趋势(P<0.05),与采收期Ⅰ相比,采收期Ⅳ的夏橙果肉VC含量上升了87.06%,采收期Ⅴ的夏橙果肉VC含量上升了104.03%,此时含量达到最高,为55.64 mg/100 g,此结果与Rapisarda等[26]研究结果一致。
2.5 不同采收期蜜奈夏橙果肉可溶性糖及有机酸含量变化
2.5.1 不同采收期蜜奈夏橙果肉可溶性糖含量变化
柑橘类水果的甜度和酸度主要取决于糖和酸的含量,尤其是糖与酸的比例[27]。糖是柑橘果实风味物质的主要成分,在果实发育和成熟过程中调控多种物质的代谢,同时在收获后保持相对稳定或减少[23]。如图4所示,蜜奈夏橙果肉中共检测到10种可溶性糖,分别为葡萄糖、蔗糖、鼠李糖、木糖、山梨糖、苏阿糖、塔罗糖、肌醇、阿拉伯糖和果糖,其中葡萄糖、蔗糖、果糖、塔罗糖、肌醇5种可溶性糖含量较高,从采收期Ⅰ到采收期Ⅴ,上述5种可溶性糖总含量由3.74%升高至6.28%,在果实可溶性固形物的占比由46.93%上升至69.55%,可初步判断这5种可溶性糖是蜜奈夏橙果肉中主要的可溶性糖。其中葡萄糖、蔗糖、鼠李糖随着采收期的推迟呈上升趋势,在采收期Ⅴ达到最高,蔗糖在采收期Ⅰ~Ⅳ上升幅度较小,变化不显著(P>0.05);木糖、山梨糖、苏阿糖、塔罗糖、肌醇、阿拉伯糖、果糖随着采收期的推迟呈先上升后降低的趋势,且均在采收期Ⅳ达到最高(苏阿糖除外,在采收期Ⅲ达到最高),木糖和苏阿糖在采收期Ⅳ之前变化显著(P<0.05),在采收期Ⅳ之后趋于稳定,果糖在采收期Ⅲ~Ⅴ变化不显著(P>0.05),含量变化不大;阿拉伯糖在采收期Ⅰ未检出,但在采收期Ⅲ~Ⅳ之间变化显著(P<0.05),采收期Ⅳ果肉中阿拉伯糖含量是采收期Ⅲ的2倍。
2.5.2 不同采收期蜜奈夏橙果肉有机酸含量变化
研究发现,采后柑橘类水果中的可溶性糖含量相对稳定,而有机酸的含量波动较大,酸度是决定水果酸味的关键因素[28-29]。有机酸含量的变化不仅影响果实风味,而且调节果实的衰老和贮藏性能;采后贮藏期间其含量与果实失重呈负相关,凸显了有机酸含量维持果实品质的重要性[27]。不同采收期蜜奈夏橙果肉柠檬酸、苹果酸、奎宁酸和琥珀酸含量变化如图5所示,蜜奈夏橙果实中柠檬酸含量最高,其次为苹果酸。随着采收期的推迟,蜜奈夏橙果肉的柠檬酸含量在整个采收期间呈下降趋势,在采收期Ⅳ~Ⅴ降到750.40~661.51 μg/g FW,此阶段的果实酸甜可口,风味浓郁。琥珀酸和苹果酸含量随着采收期的推迟呈先升高后降低的趋势,且在采收期Ⅳ达到最高,分别为1.63、266.31 μg/g FW。奎宁酸含量在采收期呈波动性变化,且在采收期Ⅴ最低。从采收期Ⅰ到采收期Ⅴ,柠檬酸、苹果酸和奎宁酸3种有机酸总含量由1.25%降至0.95%,在果实TA含量中的占比则由38.47%上升至73.08%,初步判断这3种有机酸在蜜奈夏橙后期品质形成中可能发挥重要作用。
2.6 不同采收期蜜奈夏橙果肉游离氨基酸含量变化
游离氨基酸作为果肉中重要的呈味物质可以分为鲜味氨基酸、甜味氨基酸、苦味氨基酸和芳香族氨基酸[30]。芳香类氨基酸主要包括酪氨酸和苯丙氨酸,鲜味氨基酸主要包括天冬氨酸和谷氨酸,甜味氨基酸主要包括丝氨酸、甘氨酸、丙氨酸、苏氨酸、赖氨酸和脯氨酸;苦味氨基酸主要包括缬氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、精氨酸和亮氨酸。
表3为蜜奈夏橙在采收期间游离氨基酸含量变化的情况。在蜜奈夏橙果肉上共检测了17种游离氨基酸,浓度在0.40±0.04~811.38±3.41 μg·g−1 FW之间。其中,共检测到7种人体必需氨基酸,分别是苏氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸,苏氨酸浓度最高,浓度在34.13±0.48~42.59±5.35 μg·g−1 FW之间。随着果实的成熟,游离氨基酸总量先上升后下降,其中脯氨酸、精氨酸、丝氨酸是含量最高的三种游离氨基酸,其次是谷氨酸、天冬氨酸、苏氨酸,其中脯氨酸含量呈先升高后降低的趋势,在采收期Ⅲ达到最大值811.38±3.41 μg·g−1 FW,对果实的甜味有一定的作用;谷氨酸、天冬氨酸在采收期I~Ⅴ整体呈上升趋势,说明随着果实成熟,鲜味不断增加。精氨酸整体呈上升趋势,采收期Ⅴ的含量最高为449.14±3.68 μg·g−1 FW,丝氨酸在整个采收期含量较高,但不同采收期间含量无显著变化(P>0.05)。在采收期Ⅰ浓度最低的氨基酸是异亮氨酸,为0.40±0.04 μg·g−1 FW,在整个采收过程中,其含量略微上升,采收期Ⅲ~Ⅴ间含量无显著变化(P>0.05)。采收期Ⅲ~Ⅴ,果实必需氨基酸含量无显著变化(P>0.05)。
表 3 不同采收期蜜奈夏橙果肉游离氨基酸含量变化Table 3. Changes of free amino acid content of Midknight Valencia Orange fruit at different harvesting periods氨基酸
(μg·g−1 FW)缩写 不同采收期 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 天冬氨酸 Asp 24.53±9.44c 13.86±1.05d 29.41±0.38c 40.53±0.72b 50.25±1.36a 苏氨酸 Thr 42.59±5.35a 34.23±2.66b 40.70±0.33a 34.13±0.48b 39.14±0.26ab 丝氨酸 Ser 111.04±28.08a 98.31±2.12a 115.26±0.60a 104.23±0.73a 110.83±1.71a 谷氨酸 Glu 17.30±16.34b 24.61±1.56b 42.54±0.20a 45.75±0.05a 48.90±1.02a 甘氨酸 Gly 3.20±0.59d 2.75±0.05d 6.24±0.02c 7.55±0.07b 8.19±0.17a 丙氨酸 Ala 23.96±3.31d 17.72±0.29e 53.02±0.09a 47.89±0.11b 42.33±0.84c 半胱氨酸 Cys 0.52±0.20ab 0.91±0.05a 0.73±0.03ab 0.40±0.24b 0.54±0.32ab 缬氨酸 Val 4.88±0.48d 4.26±0.03e 8.40±0.05b 9.00±0.07a 6.53±0.12c 异亮氨酸 Ile 0.40±0.04b 0.46±0.01b 1.25±0.07a 1.37±0.12a 1.38±0.04a 亮氨酸 Leu 1.45±0.13d 1.14±0.03e 2.54±0.02b 3.04±0.04a 1.99±0.06c 甲硫氨酸 Met 1.75±0.14d 2.34±0.11c 2.51±0.02b 3.16±0.05a 2.32±0.04c 酪氨酸 Tyr 6.15±0.09e 8.56±0.38b 7.58±0.04d 13.33±0.08a 7.99±0.13c 苯丙氨酸 Phe 5.97±0.59d 9.68±0.21c 10.46±0.03b 14.65±0.10a 14.72±0.24a 赖氨酸 Lys 8.13±0.72d 10.31±0.13c 20.18±0.09b 23.69±0.11a 23.95±0.48a 组氨酸 His 3.90±0.61d 3.86±0.10d 8.61±0.00c 12.77±0.13a 11.80±0.22b 精氨酸 Arg 148.52±39.44c 117.09±2.51c 361.68±0.53b 337.00±0.95b 449.14±3.68a 脯氨酸 Pro 341.57±110.53c 251.18±1.67d 811.38±3.41a 546.94±2.26b 487.19±8.60b 必需氨基酸总量 176.21±35.53ab 160.73±5.3b 201.3±1.21a 193.27±1.7a 200.86±2.95a 游离氨基酸总量 759.48±195.70c 616.04±11.08c 1535.79±4.20a 1256.07±4.72b 1314.69±13.84b 表4为蜜奈夏橙在采收期间不同呈味氨基酸的总量变化。随着采收期的推迟,蜜奈夏橙的鲜味氨基酸总量整体呈上升趋势,甜味氨基酸总量在采收期Ⅱ~Ⅲ显著增加(P<0.05),Ⅳ~Ⅴ变化不显著(P>0.05),苦味氨基酸总量在整个采收期均低于甜味氨基酸总量,芳香族氨基酸总量在采收期Ⅰ~Ⅱ及Ⅲ~Ⅴ变化显著(P<0.05)。
表 4 不同采收期蜜奈夏橙果肉不同呈味氨基酸的总量变化Table 4. Changes of total amino acids of different flavor in Midknight Valencia Orange at different harvesting periods不同种类氨基酸的总量
(μg·g−1 FW)不同采收期 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 鲜味氨基酸 41.83±20.44c 38.47±2.61c 71.95±0.21b 86.28±0.68ab 99.15±2.31a 甜味氨基酸 530.49±145.37c 414.5±4.95c 1046.78±3.94a 764.43±2.74b 711.63±11.93b 苦味氨基酸 164.72±41.24c 136.03±2.85c 391.69±0.62b 376.46±1.25b 484.18±3.52a 芳香族氨基酸 12.13±0.68d 18.24±0.59c 18.04±0.05c 27.98±0.17a 22.71±0.36b 2.7 不同采收期蜜奈夏橙果肉矿质元素含量变化
矿质元素是人体健康不可或缺的营养素。植物矿质元素在决定水果品质和可储存性方面起着根本性的作用[31]。K是柑橘皮中存在的主要矿质元素,其次是Ca和Mg,同时果实中足够的Ca浓度可以防止果实采前和采后紊乱,同时增加对病原体的耐受性[32]。表5为蜜奈夏橙在采收期间矿质元素含量变化的情况。在蜜奈夏橙果实中量化了五种矿质元素,包括三种常量矿质元素(Ca、K和Mg)和两种微量矿质元素(Fe和Zn)。在采收期间,Ca含量整体呈波动性变化,在采收期Ⅳ达到最高值106.92±4.23 mg/kg,相较于采收期Ⅰ提高了214.01%,Fe含量整体呈下降趋势,在采收期Ⅳ最低,为6.57±0.20 mg/kg,Zn含量在整个采收期呈波动性变化。K含量最高,且呈显著上升趋势(P<0.05),且在采收期Ⅴ达到最高值2555.00±9.92 mg/kg,相较于采收期Ⅰ提高了49.02%,Mg含量呈先增加后降低的趋势,在采收期Ⅲ含量最高,达到131.25±2.33 mg/kg。
表 5 不同采收期蜜奈夏橙果肉矿质元素含量变化Table 5. Changes of mineral elements content of Midknight Valencia Orange fruit at different harvesting periods矿物质元素(mg/kg) 不同采收期 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ca 34.05±0.89c 55.37±4.65b 27.57±1.78c 106.92±4.23a 32.48±7.35c Fe 30.92±0.66a 11.92±0.23c 10.43±0.78d 6.57±0.20e 15.35±0.44b Zn 7.40±0.91a 5.07±0.53b 7.08±1.09a 4.02±0.73b 5.70±1.22ab K 1714.58±50.27d 1977.50±172.27c 2212.08±99.23b 2534.17±9.55a 2555.00±9.92a Mg 115.37±0.73c 123.67±6.06b 131.25±2.33a 122.63±2.71b 109.37±0.83d 2.8 不同采收期蜜奈夏橙果肉类黄酮和总酚含量变化
酚类物质对果蔬的营养品质及贮藏有重要影响,在果实的色泽发育、品质和风味形成、成熟衰老等过程发挥重要作用[33]。柑橘中含有丰富的酚类物质, 主要为类黄酮和酚酸,它们是果实抗病的重要物质。如图6a所示蜜奈夏橙果肉的黄酮含量在采收期间呈上升趋势,在采收期Ⅲ之前变化不显著(P>0.05),之后快速上升,采收期Ⅴ的黄酮含量是采收期Ⅲ的1.46倍。如图6b所示,蜜奈夏橙果肉的总酚含量在采收期间呈上升趋势,采收期Ⅴ的含量是采收期Ⅰ的1.34倍;在采收期Ⅱ~Ⅳ时,虽然含量呈上升趋势,但变化不显著(P>0.05)。
综合上述指标变化,在花后360~400 d(4~5月)蜜奈夏橙果实糖酸适宜,营养品质较佳,适宜采收。
2.9 不同采收期蜜奈夏橙果肉指标的相关性分析
用Prism 8.0对不同采收期蜜奈夏橙的果皮指标和果肉指标进行了相关性分析,结果如图7所示。蜜奈夏橙果皮硬度与果肉葡萄糖和总酚含量呈极显著负相关(P<0.01),与果肉固酸比、抗坏血酸、葡萄糖、蔗糖和黄酮含量呈显著负相关(P<0.05),与果实可滴定酸和柠檬酸含量呈显著正相关(P<0.05)。表明蜜奈夏橙果皮硬度与果肉指标间存在一定相关性。
果肉类胡萝卜素含量与果肉可滴定酸、柠檬酸含量呈极显著负相关(P<0.01),与葡萄糖、果糖、精氨酸、黄酮、总酚含量呈显著正相关(P<0.05);果肉可溶性固形物与脯氨酸呈显著正相关(P<0.05),但与其他指标无显著相关性(P>0.05);果肉可滴定酸含量与固酸比、抗坏血酸、类胡萝卜素含量呈极显著负相关性(P<0.01),与柠檬酸含量呈极显著正相关性(P<0.01),与葡萄糖、果糖、精氨酸、黄酮、总酚呈显著负相关性(P<0.05);固酸比与抗坏血酸、类胡萝卜素、精氨酸含量呈极显著正相关(P<0.01),与葡萄糖、蔗糖、黄酮和总酚含量呈显著正相关(P<0.05),与可滴定酸、柠檬酸含量呈极显著负相关(P<0.01)。葡萄糖含量与蔗糖和总酚含量呈极显著正相关(P<0.01),与固酸比、抗坏血酸、类胡萝卜素和黄酮含量呈显著正相关(P<0.05),与可滴定酸、柠檬酸含量呈显著负相关(P<0.05)。
硬度、可溶性固形物、可滴定酸、固酸比是产业上常用于评价果实成熟度的指标。通过对蜜奈夏橙果肉类胡萝卜素、可溶性糖、有机酸、游离氨基酸、矿质元素、黄酮和总酚等内在指标的分析发现,果皮硬度、果肉可滴定酸含量、固酸比与蜜奈夏橙果实内在指标相关性较高,可作为判断蜜奈夏橙果实成熟度的指标,而可溶性固形物的指示性较差。综合前述营养指标变化,果实硬度在1.33~1.03 kg之间,可滴定酸含量在1.77%~1.30%之间,固酸比在5.41~6.96之间时,蜜奈夏橙适宜采收。
3. 结论
本文以蜜奈夏橙为实验材料,通过测定果实类胡萝卜素、可溶性糖、有机酸、游离氨基酸、矿物质、黄酮以及总酚等品质指标,研究了不同采收成熟度对蜜奈夏橙营养品质的影响。结果表明,随着采收时间的推迟,果皮颜色由果顶至果蒂逐渐变黄,果实总类胡萝卜素、抗坏血酸、总酚和黄酮含量呈上升趋势;可溶性固形物含量先增加后降低,可滴定酸含量显著降低。蜜奈夏橙果实中主要的可溶性糖是葡萄糖、蔗糖、果糖、塔罗糖、肌醇;主要的有机酸是柠檬酸、苹果酸、奎宁酸;主要的游离氨基酸是脯氨酸、精氨酸、丝氨酸。综合分析各项指标结果,在采收期Ⅳ~Ⅴ,即花后360~400 d,约次年的4月中旬至5月下旬,此时蜜奈夏橙果皮呈亮黄色,硬度较低,总类胡萝卜素、抗坏血酸等营养品质指标增加,糖酸适宜,风味浓郁,成熟度高,营养品质较佳,适宜采收,同时有利于次年果实产量的提升。针对鲜食或短时间贮藏的情况,推荐采收期Ⅴ作为蜜奈夏橙的最适采收期,此时果实成熟度较高,长期贮藏会导致果实硬度大幅降低,腐烂率增加,从而造成经济损失;但对于需长时间贮藏的情况,推荐从采收期Ⅳ开始采摘,这样更有利于贮藏过程中硬度的保持。此外,相关性结果表明,果皮硬度、果肉可滴定酸、固酸比等常用于指示果实成熟度的指标与果肉类胡萝卜素、可溶性糖、有机酸、游离氨基酸、矿质元素、黄酮和总酚等内在指标具有高度相关性,可作为判断蜜奈夏橙采收成熟度的指标。
本文通过对不同采收成熟度蜜奈夏橙果实营养品质的分析,解决了果实由于返青现象造成采收期判断困难的问题,为蜜奈夏橙最佳食用期的判断提供理论依据。
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表 1 不同采收期蜜奈夏橙果皮色差值变化
Table 1 Changes of color difference value of Midknight Valencia Orange peel at different harvesting periods
色差值 不同部位 不同采收期 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
L*果蒂 54.44±3.79d 60.97±2.96c 69.05±3.12a 69.01±0.79a 68.22±1.39a 赤道 55.46±4.36d 63.28±2.95bc 69.92±1.75a 68.90±0.99a 69.47±1.71a 果顶 55.28±3.74d 65.31±3.01abc 69.54±1.36a 68.30±0.93a 66.85±2.26ab
a*果蒂 −12.38±1.35e −1.46±3.11d 7.92±5.35c 13.77±1.26ab 5.60±4.14c 赤道 −11.70±2.50e 4.64±2.63c 14.10±3.76ab 17.56±1.56a 14.16±2.64ab 果顶 −11.06±2.46e 8.75±3.37bc 15.11±4.21a 19.00±2.01a 16.60±2.25a
b*果蒂 43.92±5.23d 54.77±4.59c 66.18±4.75a 66.86±1.17a 63.05±2.27ab 赤道 45.17±5.83d 59.31±4.03bc 69.27±2.35a 68.52±1.28a 68.65±1.39a 果顶 45.25±5.49d 62.73±4.55ab 68.91±1.48a 68.53±1.08a 65.90±3.36ab
H*果蒂 105.91±2.28a 91.78±3.58b 83.46±4.55cd 78.37±0.91def 85.05±3.59c 赤道 104.81±3.95a 85.64±2.24c 78.55±2.90def 75.63±1.24f 78.35±2.17def 果顶 104.09±4.09a 82.22±2.67cde 77.69±3.23ef 74.51±1.59f 75.90±1.43f
a*/b*果蒂 −0.29±0.04f −0.03±0.06e 0.12±0.08cd 0.21±0.02abc 0.09±0.06d 赤道 −0.27±0.07f 0.08±0.04d 0.20±0.05abc 0.26±0.02a 0.21±0.04abc 果顶 −0.25±0.08f 0.14±0.05bcd 0.22±0.06ab 0.28±0.03a 0.25±0.03a 注:不同小写字母表示在同一指标下不同采收期差异显著(P<0.05)。 表 2 不同采收期蜜奈夏橙果肉可溶性固形物、可滴定酸、抗坏血酸含量变化
Table 2 Changes of soluble solid, titratable acid and ascorbic acid content of Midknight Valencia Orange fruit at different harvesting periods
表 3 不同采收期蜜奈夏橙果肉游离氨基酸含量变化
Table 3 Changes of free amino acid content of Midknight Valencia Orange fruit at different harvesting periods
氨基酸
(μg·g−1 FW)缩写 不同采收期 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 天冬氨酸 Asp 24.53±9.44c 13.86±1.05d 29.41±0.38c 40.53±0.72b 50.25±1.36a 苏氨酸 Thr 42.59±5.35a 34.23±2.66b 40.70±0.33a 34.13±0.48b 39.14±0.26ab 丝氨酸 Ser 111.04±28.08a 98.31±2.12a 115.26±0.60a 104.23±0.73a 110.83±1.71a 谷氨酸 Glu 17.30±16.34b 24.61±1.56b 42.54±0.20a 45.75±0.05a 48.90±1.02a 甘氨酸 Gly 3.20±0.59d 2.75±0.05d 6.24±0.02c 7.55±0.07b 8.19±0.17a 丙氨酸 Ala 23.96±3.31d 17.72±0.29e 53.02±0.09a 47.89±0.11b 42.33±0.84c 半胱氨酸 Cys 0.52±0.20ab 0.91±0.05a 0.73±0.03ab 0.40±0.24b 0.54±0.32ab 缬氨酸 Val 4.88±0.48d 4.26±0.03e 8.40±0.05b 9.00±0.07a 6.53±0.12c 异亮氨酸 Ile 0.40±0.04b 0.46±0.01b 1.25±0.07a 1.37±0.12a 1.38±0.04a 亮氨酸 Leu 1.45±0.13d 1.14±0.03e 2.54±0.02b 3.04±0.04a 1.99±0.06c 甲硫氨酸 Met 1.75±0.14d 2.34±0.11c 2.51±0.02b 3.16±0.05a 2.32±0.04c 酪氨酸 Tyr 6.15±0.09e 8.56±0.38b 7.58±0.04d 13.33±0.08a 7.99±0.13c 苯丙氨酸 Phe 5.97±0.59d 9.68±0.21c 10.46±0.03b 14.65±0.10a 14.72±0.24a 赖氨酸 Lys 8.13±0.72d 10.31±0.13c 20.18±0.09b 23.69±0.11a 23.95±0.48a 组氨酸 His 3.90±0.61d 3.86±0.10d 8.61±0.00c 12.77±0.13a 11.80±0.22b 精氨酸 Arg 148.52±39.44c 117.09±2.51c 361.68±0.53b 337.00±0.95b 449.14±3.68a 脯氨酸 Pro 341.57±110.53c 251.18±1.67d 811.38±3.41a 546.94±2.26b 487.19±8.60b 必需氨基酸总量 176.21±35.53ab 160.73±5.3b 201.3±1.21a 193.27±1.7a 200.86±2.95a 游离氨基酸总量 759.48±195.70c 616.04±11.08c 1535.79±4.20a 1256.07±4.72b 1314.69±13.84b 表 4 不同采收期蜜奈夏橙果肉不同呈味氨基酸的总量变化
Table 4 Changes of total amino acids of different flavor in Midknight Valencia Orange at different harvesting periods
不同种类氨基酸的总量
(μg·g−1 FW)不同采收期 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 鲜味氨基酸 41.83±20.44c 38.47±2.61c 71.95±0.21b 86.28±0.68ab 99.15±2.31a 甜味氨基酸 530.49±145.37c 414.5±4.95c 1046.78±3.94a 764.43±2.74b 711.63±11.93b 苦味氨基酸 164.72±41.24c 136.03±2.85c 391.69±0.62b 376.46±1.25b 484.18±3.52a 芳香族氨基酸 12.13±0.68d 18.24±0.59c 18.04±0.05c 27.98±0.17a 22.71±0.36b 表 5 不同采收期蜜奈夏橙果肉矿质元素含量变化
Table 5 Changes of mineral elements content of Midknight Valencia Orange fruit at different harvesting periods
矿物质元素(mg/kg) 不同采收期 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ca 34.05±0.89c 55.37±4.65b 27.57±1.78c 106.92±4.23a 32.48±7.35c Fe 30.92±0.66a 11.92±0.23c 10.43±0.78d 6.57±0.20e 15.35±0.44b Zn 7.40±0.91a 5.07±0.53b 7.08±1.09a 4.02±0.73b 5.70±1.22ab K 1714.58±50.27d 1977.50±172.27c 2212.08±99.23b 2534.17±9.55a 2555.00±9.92a Mg 115.37±0.73c 123.67±6.06b 131.25±2.33a 122.63±2.71b 109.37±0.83d -
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