Optimization of testing method for free amino acid of Chinese olive
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摘要: 探索一种适于橄榄果实游离氨基酸含量测定的方法。通过单因素实验初筛茚三酮显色法中的条件,如p H、显色剂含量、加热温度和加热时间,并通过稳定性、精密性、重复性和加样回收实验进行方法学验证。结果发现:茚三酮显色法的最佳反应条件为最大吸收波长568 nm、p H6.6的磷酸缓冲液、0.5 m L 2%茚三酮溶液、加热温度100℃和加热时间25 min,在30 min内OD值改变0.41%,稳定性RSD=0.34%(n=9)、精密性RSD=0.09%(n=9)、重复性RSD=1.71%(n=6)、回收率达100.34%、RSD=2.21%(n=6)。表明茚三酮显色法测定橄榄果实游离氨基酸含量在此条件下稳定且精密性、重复性和回收率良好,可用于橄榄果实游离氨基酸的快速简便测定。Abstract: The aim of this article was to exploring optimal method of testing the free amino acid of Chinese olive.The conditions of Ninhydrin Colorization method, such as p H, chromogenic agent content, heating temperature and heating time, were selected through single factor experiment, and through the methodology experiment included stability test, exactness test, repeatability test and sample recovery test to verify it. The results showed that the optimal reaction conditions of Ninhydrin Colorization method, such as the maximum absorption wavelength was 568 nm, the optimal p H of phosphate buffer was p H6.6, the optimal content of 2% chromogenic agent was 0.5 m L, the optimal heating temperature was 100 ℃ and the optimal heating time was25 min. The methodology validation results showed that the OD was change 0.41% in 30 minutes, the stability of RSD was equal to 0.34% ( n = 9) , the exactness of RSD was equal to 0.09% ( n = 9) , the repeatability test of RSD was equal to 1.71% ( n = 6) , the sample recovery test of RSD was equal to 2.21% ( n = 6) and the recovery rate was 100.34%. It stated that Ninhydrin chromogenic method of testing free amino acids for Chinese olive was feasible, and it performed very well in the area of the stability, the exactness, the repeatability and recovery rate under this condition. Therefore the method was suitable for testing free amino acids for Chinese olive quickly and easily.
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Keywords:
- ninhydrin colorization method /
- Chinese olive /
- free amino acid
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