三孢布拉氏霉菌体中辅酶Q10测定方法的条件优化
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摘要: 为快速测定三孢布拉氏霉发酵制备生产中的辅酶Q10,本研究采用醇碱皂化法,其工艺条件为:KOH加量为干菌体质量的1.9倍,醇碱浓度为10%,焦性没食子酸添加量为湿菌体质量的10%,在70℃下皂化60min。将萃取得到的皂化液采用硅胶HF254为固定相的薄层层析,石油醚(60~90℃):乙醚(20:3)为流动相,分离菌体皂化液中的辅酶Q10。然后在薄板上刮下与辅酶Q10标准品相同Rf值的色带,溶于无水乙醇中,用紫外分光光度法测定其辅酶Q10含量,其回收率达82.8%(RSD值为1.49%)。同时结合高效液相色谱法,确证三孢布拉氏霉菌体中辅酶Q10的存在及含量。