霍山石斛苯丙氨酸解氨酶的分离纯化及基本性质的研究
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摘要: 对霍山石斛(Dendrobium huoshanense C·Z·Tang et S·J·Cheng)中的苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL EC·4·3·1·5)进行了部分分离纯化和性质研究,取组织培养试管苗经过冰浴研磨、硫酸铵分级沉淀、DE-52阴离子交换层析,分离纯化苯丙氨酸解氨酶。经过测定,苯丙氨酸解氨酶的纯化倍数为2·33,蛋白质得率0·41%,酶得率1%。霍山石斛苯丙氨酸解氨酶在硼酸缓冲液中最适pH为8·4,PAL最适反应温度为45℃。霍山石斛苯丙氨酸解氨酶的最适底物浓度为2mmol/L,有两个Km值,即Km1为0·4425×10-3mol/L,Km2为0·847×10-4mol/L。