Properties of Celery Soluble Dietary Fiber and Its Synergistic Effect with TG Enzyme to Improve Gel Properties of Nemipterus virgatus Unrinsed Surimi
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摘要: 针对未漂洗鱼糜凝胶差，凝胶易劣化的问题，提取后测定芹菜可溶性膳食纤维（SDF）的基本性质（平均粒径、溶解度、持水力、持油力、膨胀力）、抗氧化特性（DPPH自由基清除活性、·OH自由基清除活性、还原力）和结构特性（红外光谱、微观结构）并研究不同添加量SDF（0%、0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%）协同TG酶对未漂洗鱼糜凝胶特性（持水力、蒸煮损失、水分分布、凝胶强度、硬度、弹性、胶着度、咀嚼度、微观结构）的影响。结果表明：SDF平均粒径为11.35 μm，较对照组，SDF的溶解度、持水力、持油力、膨胀力均有所提升，具有一定的抗氧化能力，呈大块疏松空间排布；未漂洗鱼糜凝胶样品随则着SDF和TG酶的加入，持水力、凝胶强度、质构特性均出现先增加后降低的趋势，但蒸煮损失的变化则是先降低后增加，均在TG-UW-0.5%时达到最大，此时未漂洗鱼糜凝胶的持水力为78.07%，蒸煮损失为6.65%，表面自由水含量为0.95%，凝胶强度为288.95 g·cm，硬度、弹性、胶着度和咀嚼度分别为3485.87 g、0.83、1891.19、1565.33 g；鱼糜凝胶表面均匀、致密，具有良好的凝胶特性。SDF和TG酶在改善未漂洗鱼糜凝胶特性上存在的协同作用，为二者在未漂洗鱼糜制品中的应用以及开发低脂鱼糜制品提供理论依据。Abstract: Addressing the issue of poor gelation and easy deterioration of unrinsed surimi, the basic properties (average particle size, solubility, water holding capacity, oil holding capacity, swelling capacity), antioxidant properties (DPPH radical scavenging activity, ·OH radical scavenging activity, reducing power) and structural properties (infrared spectroscopy, microstructure) of celery soluble dietary fibers (SDF), were determined after extraction. The effects of different amounts of SDF (0%, 0.1%, 0.3%, 0.5%, 0.7%, 0.9%) and TGase on the gelation properties (water holding capacity, steaming loss, moisture distribution, gel strength, hardness, elasticity, adhesion, chewiness, microstructure) of unrinsed surimi were studied. The results showed that the average particle size of SDF was 11.35 μm, compared with the control group, the solubility, water-holding capacity, oil-holding capacity and swelling capacity of SDF were more improved, and it had a degree of antioxidant capacity, and it was arranged in a large and loose space. With the addition of SDF and TGase, the water holding capacity, gel strength and texture of unrinsed surimi gel showed a trend of increasing and then decreasing, however, the change in steaming loss was first decreased and then increased, all of which reached the maximum in the TG-UW-0.5%, at this point, the water holding capacity was 78.07%, the steaming loss was 6.65%, the free water content on the surface was 0.95%, and the gel strength was 288.95 g·cm, and the hardness, elasticity, gumminess and chewiness were 3485.87 g, 0.83, 1891.19, and 1565.33 g, respectively. The surface of surimi gel showed uniformity and denseness with good gelation properties. The synergistic effect of SDF and TGase in improving the gel properties of unrinsed surimi provides a theoretical basis for the application of both in unrinsed surimi products and the development of low-fat surimi products.
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Keywords:
- unrinsed surimi /
- celery /
- soluble dietary fiber /
- TGase /
- gel properties
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金线鱼（Nemipterus virgatus）肉质鲜嫩、营养物质丰富，具有较大的捕捞量及良好的凝胶特性，是鱼糜及鱼糜制品加工的主要海水鱼原料之一[1]。鱼糜是将鱼肉去除鳞、头、内脏等部分，进行清洗、搅碎、精滤、漂洗、脱水，加入磷酸盐和糖类物质制成的半成品[2]。漂洗是鱼糜加工中最关键的工艺之一，可以增强鱼糜凝胶的弹性，并且去除鱼肉中的水溶性蛋白质，然而漂洗会造成水资源和能源的损耗以及鱼糜水溶性营养成分的流失[3]。未漂洗鱼糜保留了鱼肉中的营养物质，但其凝胶特性会受到影响，常表现为鱼糜凝胶差，凝胶易劣化。添加外源添加物是最普遍改善凝胶强度的方法，其主要包括动物源添加物、植物源添加物、微生物源添加物三大类。膳食纤维作为植物源外源添加物具有安全性和合理的价格，而TG酶作为微生物源外源添加物常被用作提升鱼糜制品的凝胶强度，并且TG酶能够与蛋白质交联形成高分子量蛋白质[4]，是具有良好蛋白质交联能力的酶。
芹菜富含纤维素、维生素、碳水化合物等多种营养物质[5]，具有价格低廉，容易获取的特点。膳食纤维作为芹菜中主要的营养物质，在维持人体健康方面表现出独特的生理功能。其中可溶性膳食纤维既能够促进双歧杆菌和乳酸菌增殖，控制血糖指数、减少血浆中胆固醇的含量，还具有预防糖尿病、癌症、心脏病和肥胖症等人体健康问题的作用[6]。近年来，研究报道不溶性大豆纤维在高酰基结冷胶形成及性能研究中，膳食纤维在凝胶网络空隙中主要起到支撑和填充作用[7]。而可溶性膳食纤维对鱼糜制品凝胶特性的影响研究中发现，聚葡萄糖和菊粉常被用作低脂鱼肉制品研究中，目的是改善产品工艺性能和营养价值。另外，果胶类物质对肌球蛋白凝胶化也具有促进作用[8]。
多糖类膳食纤维常被用作外源添加物改善鱼糜凝胶特性，但从植物中提取可溶性膳食纤维并探究其对未漂洗鱼糜凝胶特性的影响研究少有报道。前期研究发现芹菜对鱼糜凝胶特性存在改善作用，但其中何种成分起到作用尚不清晰，其与常用的改善鱼糜凝胶特性的外源添加物TG酶是否存在协同作用也尚不可知。因此试验采用未漂洗鱼糜为研究对象，以漂洗鱼糜作为阳性对照组，通过添加外源添加物中植物源的可溶性膳食纤维和微生物源的TG酶来改善未漂洗鱼糜凝胶差的问题，采用低场核磁共振、质构仪、扫描电镜等技术手段，探究芹菜可溶性膳食纤维和TG酶对未漂洗鱼糜凝胶特性的影响，为低脂高凝胶未漂洗鱼糜凝胶制品的开发奠定理论基础。
1. 材料与方法
1.1 材料与仪器
金线鱼（Nemipterus virgatus） 规格在0.3~0.6 kg之间，锦州市林西路水产市场；芹菜（旱芹） 锦州当地蔬菜批发市场；TG酶120 U/g 分析纯，泰兴市东圣生物科技有限公司；食用盐（食品级） 中盐上海市盐业有限公司；山梨糖醇（食品级） 河南千志食品有限公司；蔗糖（食品级） 南京甘汁园糖业有限公司；大豆油（食品级） 益海嘉里金龙鱼粮油食品股份有限公司；柠檬酸 分析纯，上海阿拉丁生化科技股份有限公司；无水乙醇 分析纯，天津市风船化学试剂科技有限公司；硫酸 分析纯，广州化学试剂厂；石油醚、戊二醛 分析纯，天津福晨化学试剂有限公司。
NanoBrook粒度仪 美国布鲁克海文仪器公司；Thermo Scientific傅里叶红外光谱仪 美国Thermo Fisher公司；NMI20低场核磁共振分析仪 苏州纽迈仪器分析股份有限公司；TA-XT-Plus质构仪 英国Stable Micro Systems公司；S4800场发射扫描电镜 日本日立高新技术公司。
1.2 实验方法
1.2.1 芹菜可溶性膳食纤维提取
参考李昌文等[9]的方法并作适当修改。以芹菜为原料，55 ℃，恒温干燥24 h，粉碎后过60目筛，其中微波工作过程中的频率为2450 MHz，通过微波辅助酸法（图1）提取芹菜可溶性膳食纤维并命名为SDF，芹菜干粉作为SDF特性测定过程中的对照组命名为QY。
1.2.2 金线鱼未漂洗鱼糜及鱼糜凝胶的制备
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图 2 未漂洗鱼糜及鱼糜凝胶制备技术路线图Figure 2. Technology roadmap for preparation of unrinsed surimi and surimi gel将金线鱼体去鳞、去头、去内脏，清洗2~3次。采肉、精滤得到未漂洗鱼糜，漂洗则在精滤后进行漂洗和脱水。漂洗共三次，前两次加入5倍体积的纯净水（10 ℃以下）迅速搅拌10 min，静置15 min，倾去表面漂洗液，按上述方法重复两次，第三次加入0.3%的食用盐，脱水每次15 min。未漂洗鱼糜及漂洗鱼糜均加入4%的蔗糖和4%的山梨糖醇作为抗冻剂，样品−80 ℃冰箱贮藏备用。鱼糜进行空擂、盐擂、混合擂并采用二段加热的方式制备成鱼糜凝胶样品。
未漂洗鱼糜混合擂过程中添加0、0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%的SDF作为SDF实验组，通过前期预实验确定TG酶添加量，在SDF实验组的基础上各组均添加0.3%的TG酶作为TG-SDF实验组。漂洗鱼糜则作为阳性对照组在SDF实验组中既不添加SDF也不添加TG酶，在TG-SDF实验组不添加SDF但添加0.3%的TG酶，分别对各组进行水分含量、凝胶特性及微观结构分析。SDF实验组根据SDF添加量未漂洗鱼糜凝胶样品分别命名为UW-0、UW-0.1%、UW-0.3%、UW-0.5%、UW-0.7%、UW-0.9%，漂洗鱼糜凝胶样品命名为W-0；TG-SDF实验组未漂洗鱼糜凝胶样品分别命名为TG-UW-0、TG-UW-0.1%、TG-UW-0.3%、TG-UW-0.5%、TG-UW-0.7%、TG-UW-0.9%，漂洗鱼糜凝胶样品命名为TG-W-0。
1.2.3 芹菜可溶性膳食纤维特性测定
1.2.3.1 芹菜可溶性膳食纤维提取率的测定
称取干燥的芹菜质量（m）以及提取的SDF质量（m1），记录并计算SDF的得率。计算公式见式（1）。
得率(\%)=m1m×100 (1) 1.2.3.2 芹菜可溶性膳食纤维粒径的测定
配制浓度为1 mg/mL的SDF和QY悬浮液（无水乙醇为连续相），充分振荡，采用NanoBrook粒度仪测定。
1.2.3.3 芹菜可溶性膳食纤维结构表征
采用傅里叶红外光谱仪（FTIR）进行光谱分析，将SDF和QY与纯KBr（1:100 m/m）混合压片，样品扫描范围：4000~400 cm−1，分辨率：4 cm−1[10]。
1.2.3.4 芹菜可溶性膳食纤维基本性质测定
溶解度：参考李昌文等[9]的方法并作适当修改。准确称取SDF和QY粉末1.00 g（m），加入蒸馏水（3:100 g/mL），40 min后离心（3000 r/min，25 min），取上清液于100 ℃烘至质量不变，记录样品质量（m1）。溶解度计算公式见式（2）。
溶解度(%)=m1m×100 (2) 持水力：参考Wang等[11]的方法并作适当修改。准确称取SDF和QY粉末1.00 g（m1），加入蒸馏水（20 mL），涡旋振荡30 min，充分混匀，室温静置24 h，3000 r/min离心20 min，沥干水分后称取湿质量（m2）。持水力计算公式见式（3）。
持水力(g/g)=m2−m1m1×100 (3) 持油力：参考Li等[12]的方法并稍作修改。准确称取SDF和QY粉末1.00 g（m1），置于30 mL离心管中，加入10 mL大豆油，充分混合，静置（24 h），离心（5000 r/min，20 min），弃去上清液，用滤纸吸去管内水分和多余油脂，称得沉淀物持油后质量（m2）。持油力计算公式见式（4）。
持油力(g/g)=m2−m1m1×100 (4) 膨胀力：称取SDF和QY粉末1.00 g（m），置于具刻度10 mL玻璃管内并记录干粉体积为V1，加水至10 mL，室温静置24 h，将SDF和QY的体积记作V2[10]。膨胀力计算公式见式（5）。
膨胀力(mL/g)=V2−V1m×100 (5) 1.2.3.5 芹菜可溶性膳食纤维抗氧化特性测定
DPPH自由基清除活性：参考杜晓静等[13]的方法稍作修改，将SDF和QY配置成1、2、3、4、5、6 mg/mL浓度的溶液，准确吸取待测液4 mL，加入DPPH溶液（0.2 mmol/L）4 mL，以蒸馏水与无水乙醇1:1做空白对照，测定517 nm处的吸光度值。DPPH自由基清除率计算公式见式（6）。
DPPH自由基清除率(%)=(1−A1−A2A3)×100 (6) 式中：A1为样品溶液+DPPH溶液的吸光值；A2为样品溶液+无水乙醇的吸光值；A3为DPPH溶液+蒸馏水的吸光值。
·OH自由基清除活性：参考杜晓静等[13]的方法稍作修改，取SDF和QY配置成1、2、3、4、5、6 mg/mL浓度的溶液1 mL于试管中，加入0.5 mL 8 mmol/L FeSO4溶液、水杨酸溶液和5 mL H2O2溶液，混合均匀，静置（1 h），测定510 nm处的吸光度值。·OH自由基清除率计算公式见式（7）。
⋅OH自由基清除率(%)=(1−A1−A2A3)×100 (7) 式中：A1为纯水代替过氧化氢溶液吸光值；A2为纯水代替水杨酸溶液吸光值；A3为蒸馏水代替样品溶液吸光值。
还原力：SDF和QY分别配置成1、2、3、4、5、6 mg/mL浓度的溶液，取2.5 mL不同质量浓度的待测液于50 mL试管中，依次加入pH6.6的磷酸盐缓冲溶液和1%铁氰化钾各2.5 mL，混匀后于50 ℃水浴保温20 min，反应后进行急速冷却，然后加入10%三氯化钾2.5 mL，取5 mL反应液加入0.5 mL三氯化铁（0.1%）和4 mL蒸馏水，将溶液混合均匀后，反应10 min，以无水乙醇替代样品作空白对照，测定样品还原力[13]。
1.2.3.6 芹菜可溶性膳食纤维微观结构测定
利用扫描电子显微镜（SEM）观察SDF和QY粉末微观结构，样品进行喷金处理后于载物台上放大1000倍进行观察[10]。
1.2.4 鱼糜凝胶基本组成成分测定
水分（GB/T 5009.3-2016）、灰分（GB/T 5009.4-2016）、蛋白质（GB/T 5009.5-2016）和脂肪（GB/T 5009.6-2016）测定参照国标的方法进行[14−17]。
1.2.5 鱼糜凝胶水分状态测定
1.2.5.1 鱼糜凝胶持水力和蒸煮损失测定
持水力：将鱼糜凝胶样品切成2 g左右（W1），用3层滤纸进行包裹，离心（5000 g，15 min，4 ℃），称取离心后样品的质量（W2），如式（8）所示计算持水力[18]。
持水力(%)=W2W1×100 (8) 蒸煮损失：取1 g左右鱼糜凝胶样品（G1），置于恒温水浴锅（90 ℃，20 min）中进行加热，冷却后擦干表面水分，称重（G2）[18]。如式（9）所示计算蒸煮损失。
蒸煮损失(%)=G1−G2G1×100 (9) 1.2.5.2 鱼糜凝胶水分分布测定
采用取样器切取鱼糜凝胶样品，测定其横向弛豫时间T2。参数设置为SW（KHz）=100，Echocnt=4000，NS=8，τ（μs）=150，P3（μs）=80，TR（μs）=2000，P90（μs）=13.5，P180=27.0，RG1（db）=20，RG2=3[19]。
1.2.5.3 鱼糜凝胶氢质子分布成像测定
参考孙炳新等[20]的方法并作适当修改，采用低场核磁共振仪对鱼糜凝胶样品进行成像测定。测定条件设置为中心频率（O1）为911040.0 Hz，SW=20K Hz，RG1=25.00 db，DRG1=5.00，TW=60.00 ms，TD=200.00，重复扫描（NS）8次。
1.2.6 鱼糜凝胶色泽测定
将鱼糜凝胶样品切成25 mm圆柱体，利用色差计测定鱼糜凝胶样品的L*（亮度），a*（红色/绿色），b*（黄色/蓝色），按照公式（10）进行计算。
白度值=100−√(100−L∗)2+a∗2+b∗2 (10) 1.2.7 鱼糜凝胶凝胶强度测定
将鱼糜凝胶样品切成高为25 mm的圆柱体，室温放置30 min，触发力为10 g，下压距离为10 mm，每次试验测定6次平行，取平均值[21]。凝胶强度计算如式（11）所示。
凝胶强度(g⋅cm)=破断力(g)×破断距离(cm) (11) 1.2.8 鱼糜凝胶质构测定
参考张智铭等[18]的方法稍作修改，选用P/50柱形探头测定鱼糜凝胶样品的质构特性，同样将鱼糜凝胶样品切成高度为25 mm圆柱体，形变量为70%，测试前、中、后速度均为1 mm/s，记录其硬度、弹性、胶着度和咀嚼度。
1.2.9 鱼糜凝胶pH测定
将鱼糜凝胶样品与蒸馏水均质混合均匀后，静置30 min，进行过滤取上清液，使用pH计对鱼糜凝胶样品pH进行测定[22]。
1.2.10 鱼糜凝胶微观结构测定
鱼糜凝胶样品切制成2 cm×2 cm×2 cm小方块，用2.5%戊二醛溶液固定24 h，采用梯度乙醇溶液进行洗脱，然后室温下自然风干。样品及进行喷金后，采用S4800场发射扫描电镜进行微观结构扫描[21]，放大倍数为20000倍。
1.3 数据处理
使用SPSS 19.0软件对数据进行统计分析，并用Duncan法进行多极差验证（P<0.05），结果用均值±标准差表示。所有图均用Origin 2023版绘制。
2. 结果与分析
2.1 芹菜可溶性膳食纤维提取率及粒径分析
提取率是表征SDF产出量的重要指标，本研究采用微波辅助酸法提取芹菜SDF，提取得率为8.92%。SDF整体为微黄色，细密且无特殊异味。这与李昌文等[9]的研究结果相似，芹菜可溶性膳食纤维整体呈淡黄色，无特殊异味。外源添加物的粒径会显著影响产品的口感、风味、质地及物化指标。如图3所示，与QY的平均粒径相比，由微波辅助酸法提取的SDF的平均粒径显著降低（P<0.05），具有较小粒度的SDF更加均匀、细腻，有利于提升产品的口感、质地。
2.2 芹菜可溶性膳食纤维结构表征
傅里叶红外光谱图能够反映出样品的官能团种类。QY和SDF在3409 cm−1处均呈现1个较强的吸收峰（图4），即纤维素和半纤维素分子中羟基（-OH）的特征峰，表明存在缔合状态的氢键。相比于QY，SDF羟基吸收峰强度增强，峰形增宽，表明SDF中缔合状态的氢键有所增加。此外，在SDF光谱中，亚甲基（CH2-）的伸缩振动峰（2350 cm−1），半纤维素羰基（C=O）的伸缩振动峰（1601 cm−1），纤维素及半纤维素（C-O）的伸缩振动峰（1084 cm−1）均有所呈现，表明本研究所提取的SDF符合纤维素的结构特征。
2.3 芹菜可溶性膳食纤维基本性质分析
膳食纤维溶解度大小取决于其本身大小及组成，是影响产品感官品质的重要指标。如表1所示，QY组溶解度较低，SDF的溶解度明显著加（P<0.05），达到30%左右，由于SDF进行了微波辅助酸法提取冻干后的样品进行二次粉碎导致其纤维基质破裂，溶解度有所提高。SDF具有较大溶解度能加快产品的结合速度，从而影响产品的感官品质，大豆膳食纤维中添加非纤维成分，样品的溶解度呈现增加趋势[23]，与本研究具有相似的结论；持水力是反映膳食纤维水合性质的重要指标，与表面积、质量分数和分子结构等相关。QY组持水力为4.79 g/g，SDF组的持水力有所提高，达到5.13 g/g。持水力的提高表明SDF中的亲水基团数量增多，能够捕获更多的水分。SDF还可以作为功能成分来防止食品中的脱水以及延缓食品变质[24]；良好的持油力使得可溶性膳食纤维能够将油分保持在其结构框架内，从而减缓胃肠道对油脂的吸收，达到减少人体油脂摄入并保护肠道的功效[25]。与QY组相比，SDF持油力增大到2.63 g/g，表明SDF可以吸附更多的油脂。并且SDF能够与脂类强烈结合，有助于清除油脂成分；纤维品质好坏能够通过其膨胀力来衡量。QY的膨胀力大于SDF（表1），膨胀力的大小与粉末的比表面积和多孔性有关，SDF粉体的比表面积增大，改善其水合性质，增加人体的饱腹感[26]。
表 1 SDF和QY基本性质Table 1. Basic properties of SDF and QY组别 基本性质 溶解度（%） 持水力（g/g） 持油力（g/g） 膨胀力（mL/g） QY 9.67±0.38 4.79±0.14 2.23±0.06 7.4±0.14 SDF 29.99±1.23 5.13±0.44 2.63±0.60 6.8±0.57 2.4 芹菜可溶性膳食纤维抗氧化特性分析
DPPH自由基清除能力被广泛应用于评价膳食纤维的体外抗氧化活性。DPPH自由基若被SDF清除，则表明SDF能够使过氧自由基、羟基自由基和烷基自由基含量降低[27]。SDF和QY对DPPH自由基存在清除能力（图5a）。随着浓度的增加，DPPH自由基清除能力逐渐增大，在浓度为6 mg/mL达到最大。其中QY具有较高的DPPH自由基清除活性（70.64%），SDF有所降低，造成此种现象的原因可能是QY中除了含有SDF外，还含有胡萝卜素、维生素C和维生素K等物质同样具有抗氧化能力。SDF抗氧化能力表现在SDF结构中含有较多的羟基，可以提供氢原子或电子与自由基结合[28]。
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图 5 SDF和QY抗氧化特性图注：（a）DPPH自由基清除能力；（b）·OH自由基清除活性；（c）还原力。Figure 5. Antioxidant properties chart of SDF and QY·OH具有极强的氧化能力，引起机体中蛋白质的交联变性，从而导致细胞衰老、吞噬和肿瘤等损害。QY、SDF的·OH自由基清除率与浓度之间表现出良好的线性关系。随着浓度的增大，·OH自由基清除活性逐渐增大（图5b），可能是SDF中含有黄酮类物质，可以与SDF中的葡萄糖结合，形成糖苷键。在麦麸膳食纤维清除·OH自由基的研究中发现，麦麸中具有极强抗氧化活性的物质是阿魏酸[29]。葡萄皮渣里主要是多酚类物质起到·OH自由基清除的作用[30]。车前草SDF的·OH自由基清除能力则与多糖组成有关[31]。整体来看，SDF的·OH自由基清除率呈现增加趋势，表明SDF具有抗氧化特性。
还原力是指铁离子被还原成亚铁离子的过程，吸光度越高，还原能力越强。SDF和QY的还原能力随着浓度的增大而不断增加。浓度在3 mg/mL以下还原力急剧增加，在3 mg/mL以上增加相对平缓（图5c），表明SDF和QY对铁离子的还原能力具有相同的趋势，其中SDF的还原能力在2 mg/mL与QY最为接近。另外，其他植物源的可溶性膳食纤维也发现具有还原力，与本研究结果相似[32]。
2.5 芹菜可溶性膳食纤维微观结构分析
微观结构是反映SDF和QY空间结构的直接指标。QY中具有较大的团块，表面相对粗糙，存在不规则碎片，SDF团块较小，表面相对平坦均匀，结构更加紧凑（图6）。SDF团块较小，其内部空隙增加，从而使SDF的比表面积增大，空间结构更为疏松。豌豆膳食纤维也具有类似的结构[33]。持水力、持油力和膨胀力等理化指标与膳食纤维的空间结构相关性较大，空间越疏松SDF结构越良好[34]。因此，与QY相比，SDF具有良好的理化性质。
2.6 金线鱼鱼糜基本组成成分分析
未漂洗鱼糜和漂洗鱼糜基本成分分析如表2。与未漂洗鱼糜相比，漂洗鱼糜（78.47 g/100 g）水分含量稍高于未漂洗鱼糜（71.90 g/100 g），漂洗鱼糜蛋白质含量增加，可能是因为漂洗过程中添加了食用盐导致部分盐溶性蛋白溶出，但经过漂洗的鱼糜的脂肪和灰分含量明显降低（P<0.05），即漂洗会造成了大部分的水溶性的营养物质损失[35]。此外，多次漂洗也会造成水资源的浪费影响环境。
表 2 金线鱼糜基本组成成分Table 2. Nemipterus Virgatus surimi basic composition组别 水分
（g/100 g）蛋白质（以干
基计g/100 g）脂肪（以干
基计g/100 g）灰分（以干
基计g/100 g）未漂洗鱼糜 71.90±0.79 56.16±0.23 9.61±0.29 6.12±0.25 漂洗鱼糜 78.47±0.20 66.60±0.16 2.69±0.08 1.59±0.13 注：鱼糜中添加商业抗冻剂，其他成分为碳水化合物，其中未漂洗鱼糜碳水化合物含量为28.11（以干基计g/100 g），漂洗鱼糜碳水化合物含量为29.12（以干基计g/100 g）。 2.7 鱼糜凝胶水分状态分析
2.7.1 鱼糜凝胶持水力和蒸煮损失分析
持水性（WHC）和蒸煮损失反映了鱼糜凝胶结合水分的能力，鱼糜中水分结合能力主要取决于肌球蛋白与肌动蛋白的交联作用，以及三维网状结构的形成。如图7a，与UW-0组（63.93%）相比，随着SDF添加量的增加，鱼糜凝胶的WHC呈现先升高后降低的趋势，在SDF添加量为0.5%时达到最大，增加了17.27%，说明SDF能增加鱼糜凝胶的持水性，鱼糜凝胶持水性降低可能是因为SDF添加量过大与鱼糜凝胶中蛋白质竞争水分。添加TG酶后，鱼糜凝胶持水性显著提高（P<0.05）。
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图 7 SDF和TG酶对未漂洗鱼糜持水力和蒸煮损失的影响注：（a）持水性；（b）蒸煮损失；数值以平均值±SD表示，不同小写字母表示差异有统计学意义（P<0.05），不同大写字母表示差异有统计学意义（P<0.05）。Figure 7. Effects of SDF and TGase on water holding power and steaming loss of unrinsed surimi蒸煮损失是指鱼糜凝胶在加热过程中水分、蛋白质等物质流失而造成的质量减少。SDF组、TG-SDF组蒸煮损失先降低后升高，在SDF添加量为0.5%时达到最低，UW-0.5%组、TG-UW-0.5%组较UW-0组和TG-UW-0组分别减少了30.83%和45.39%。如图7b所示，添加TG酶后，鱼糜凝胶样品的蒸煮损失降低程度显著增大（P<0.05）。SDF具有一定的吸水性使鱼糜凝胶结构更加紧密，其与鱼糜凝胶中的蛋白质相互作用产生网络结构将更多的锁住水分。此外，TG酶能催化鱼糜肌球蛋白重链交联，形成ε-（γ-谷氨酰）赖氨酸交联键，TG酶增加了蛋白质之间的交联作用导致蛋白质网络中保留水分的空间减少，鱼糜凝胶的蒸煮损失降低[36]。SDF添加量过大会导致SDF与鱼糜凝胶中蛋白质过度聚集使蛋白质中的疏水基团暴露，在鱼糜凝胶化过程中破坏蛋白质的凝胶基质，使鱼糜凝胶失水。熊泽语等[37]研究也存在类似的规律，发现漂洗鱼糜和未漂洗鱼糜的蒸煮损失相差不大，实验组蒸煮损失明显降低。
2.7.2 鱼糜凝胶水分分布分析
较W-0组和TG-W-0组，实验组T2峰个数并未发生变化，说明没有形成新型的流动性水（图8a~b）。SDF和TG酶对未漂洗鱼糜结合水（P21）、不易流动水（P22）自由水（P23）的相对含量变化如图8c~d所示。随着SDF添加量的增大，P22出现先增加后降低的变化趋势，并且在添加量为0.5%时达到最大值94.84%。P23的变化规律则相反，说明部分自由水被加入的SDF羟基所吸收。T2弛豫时间主要代表蛋白质结构中的水分，与羟基、羧基和亚磺基的可交换质子的化学交换有关[38]。SDF的傅里叶红外光谱结果发现，SDF中含有羟基并且具有水结合极性基团的SDF不影响水分子与蛋白质分子紧密结合[39]。因此，水分相对含量的变化可以归因于水分子附着在SDF上。此外，与SDF组相比，TG-SDF组P22增大，且TG-UW-0.5%组P22达到最大（图8d），表明TG酶影响了蛋白质的聚集、蛋白质分子之间的静电相互作用和疏水相互作用发生改变，从而使P22增加，与持水性和蒸煮损失研究结果相一致。
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图 8 SDF和TG酶对未漂洗鱼糜水分分布的影响注：（a）SDF弛豫时间；（b）TG-SDF弛豫时间；（c）SDF水分含量；（d）TG-SDF水分含量。Figure 8. Effect of SDF and TGase on the moisture distribution of unrinsed surimi2.7.3 鱼糜凝胶氢质子分布成像分析
核磁共振成像（MRI）是检测食品基质中的水分分布以及加工过程中食品内部结构变化的一种方法。通过MRI测得未漂洗鱼糜凝胶氢质子水分分布图。用颜色来衡量水分子的质子密度，质子密度高颜色越红，结合水在鱼糜凝胶中所占的比例较低，大部分为不易流动水和自由水[40]。UW-0组中存在大量的红色和橙色信号（图9），表明局部区域存在着大量的自由水，水分子在未漂洗鱼糜凝胶中分布不均匀。随着SDF添加量的增加，红色和橙色信号逐渐减弱，表明水分分布逐渐均匀，SDF吸收了部分自由水。当SDF添加量超过0.5%后，红色和橙色信号又逐渐增加，可能是由于SDF含量较高使蛋白质聚集速度加快，导致鱼糜凝胶网络不均匀[41]。添加TG酶后，可以清楚地观察到红色和橙色信号减少，鱼糜凝胶中自由水含量降低，TG酶与鱼糜凝胶中蛋白质交联使得部分自由水转化为结合水和不易流动水。TG-UW-0.5%组检测到大量的蓝色和绿色信号，表明TG-UW-0.5%组中结合水和不易流动水含量相对稍高，SDF与TG酶共同作用使鱼糜凝胶中水分分布更加均匀，此时鱼糜凝胶中水分分布更接近于W-0组。
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图 9 SDF和TG酶对未漂洗鱼糜核磁成像Figure 9. Effects of SDF and TGase on nuclear magnetic imaging of unrinsed surimi2.8 鱼糜凝胶色泽分析
色泽是可以直观的看出鱼糜凝胶的外观状态。由表3可知，W-0组鱼糜凝胶白度值最大（75.03），漂洗会去除鱼糜中大部分水溶性色素物质。随着SDF添加量的增加，实验组样品的白度和L*值逐渐降低，一方面，SDF为淡黄色粉末，其中色素类物质会使未漂洗鱼糜凝胶的白度值降低。另一方面，可能是因为SDF中的亲水成分与鱼肉内部的水分结合，导致鱼肉表面自由水含量减少，光折射能力减弱。另外，TG酶使白度轻微降低，但变化不明显，TG酶作为品质改良剂，对鱼糜制品颜色影响不大。
表 3 SDF和TG酶对未漂洗鱼糜色泽的影响Table 3. Effect of SDF and TGase on the color of unrinsed surimi组别 L* a* b* 白度 W-0 76.47±0.03a −1.69±0.05d 8.18±0.20f 75.03±0.04a UW-0 72.70±0.10c −0.42±0.05c 12.71±0.12cd 69.89±0.04c UW-0.1% 72.54±0.05d −0.66±0.09c 12.73±0.14cd 69.72±0.06d UW-0.3% 72.4±0.11d −0.64±0.15c 13.11±0.22ab 69.44±0.02e UW-0.5% 71.89±0.13e −0.73±0.06c 13.19±0.19a 68.94±0.06f UW-0.7% 71.43±0.15f 0.12±0.72b 13.04±0.16ab 68.59±0.08g UW-0.9% 70.81±0.08h 0.14±0.29ab 12.48±0.26d 68.26±0.04h TG-W-0 74.33±0.12b −0.79±0.27c 9.58±0.11e 72.59±0.10b TG-UW-0 71.03±0.071g 0.16±0.04ab 13.20±0.14a 68.16±0.10h TG-UW-0.1% 70.81±0.04h 0.15±0.05ab 13.06±0.04ab 68.02±0.04i TG-UW-0.3% 70.64±0.13i 0.27±0.02ab 12.83±0.14bc 67.96±0.07i TG-UW-0.5% 70.29±0.06j 0.36±0.03ab 12.53±0.20cd 67.75±0.05j TG-UW-0.7% 69.86±0.04k 0.58±0.01a 12.60±0.11cd 67.33±0.02k TG-UW-0.9% 69.63±0.06l 0.58±0.14a 12.81±0.14bc 67.03±0.05l 注：数值以平均值±SD表示，不同小写字母表示差异有统计学意义（P<0.05），表4同。 2.9 鱼糜凝胶强度分析
凝胶强度是表征未漂洗鱼糜凝胶特性的直观指标。图10可以看出，UW-0组凝胶强度最低，由于未漂洗鱼糜中含有较多的肌浆蛋白、脂类和一些化合物，会干扰凝胶的形成，导致蛋白的相互作用减少。随着SDF的添加量的增加凝胶强度先增加后下降，凝胶强度增加可能是由于SDF具有良好的持水力和膨胀力，能够吸附鱼糜凝胶中的水分。另一方面，SDF也可以充当填充剂，促进鱼糜凝胶化过程中蛋白质的疏水聚集，蛋白质能够形成良好的空间结构[42]。此外，纤维本身具有凝胶性，与蛋白质之间形成氢键改善鱼糜的凝胶强度。鱼糜凝胶强度下降与芹菜添加量超过10%后凝胶强度下降的结果相一致[43]，可能是由于SDF与蛋白质过度聚集从而使蛋白质中的疏水基团暴露，在鱼糜凝胶化过程中破坏蛋白质的凝胶基质，并与蛋白质竞争水分。也可能是在加热过程中SDF吸水溶胀程度增大，影响了鱼糜肌球蛋白分子间的相互作用，使其变性不完全导致的[44]。
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图 10 SDF和TG酶对未漂洗鱼糜凝胶强度的影响注：数值以平均值±SD表示，不同小写字母表示差异有统计学意义（P<0.05），图11同。Figure 10. Effects of SDF and TGase on gel strength of unrinsed surimi在SDF添加量为0.5%时，凝胶强度达到最大，相比于UW-0组增加了50.24%。鱼糜凝胶样品的凝胶强度改变与蛋白质空间交联有关，UW-0组鱼糜凝胶样品主要是水和蛋白质之间产生交联作用，而添加SDF后，则形成了水、蛋白质、纤维三者之间相互交联，使空间结构更加紧密。TG酶催化肌球蛋白分子，产生非二硫共价键，形成交联的蛋白质结构，使凝胶强度提高[45]。TG-SDF组与SDF组凝胶强度变化规律相同，均在SDF添加量为0.5%时达到最大值，并且与SDF组相比，TG-SDF组凝胶强度显著提高（P<0.05）。另外，TG-UW-0.5%组凝胶强度接近W-0组，说明在SDF添加量为0.5%、TG酶添加量为0.3%时，未漂洗鱼糜凝胶具有良好的凝胶特性。
2.10 鱼糜凝胶质构分析
质构特性是评价鱼糜制品感官品质的重要指标。其中主要包括硬度、弹性、胶着度、咀嚼度等指标，其中硬度代表鱼糜凝胶第一次被压缩时的最大峰；弹性反映了压缩鱼糜凝胶恢复到变形前状态的能力；胶着度和咀嚼度是吞咽或咀嚼过程中所需要的能量大小。较UW-0组和TG-UW-0组，添加SDF后，硬度、弹性、胶着度和咀嚼度显著升高（P<0.05），并且随着SDF添加量的增加呈现先升高后降低的趋势，在SDF添加量为0.5%时达到最大值（表4），可能是因为SDF的主要成分是一些非淀粉类多糖，填充到鱼糜蛋白质的三维结构中，形成了致密的凝胶网络。另外，SDF具有吸水性，能够与多价阳离子产生反应，相互交联，从而控制水分子的流动，改善鱼糜凝胶的硬度、弹性、胶着度和咀嚼度，而出现降低的原因可能是SDF添加量过大导致鱼糜凝胶基质被破坏。相比于SDF组，TG-SDF组鱼糜凝胶硬度、弹性、胶着度、咀嚼度显著增大（P<0.05），表明TG酶能够促进蛋白质产生交联作用。TG-UW-0.5%组更接近于W-0组，此时未漂洗鱼糜凝胶具有良好的质构特性。
表 4 SDF和TG酶对未漂洗鱼糜质构特性的影响Table 4. Effect of SDF and TGase on the TPA of unrinsed surimi组别 硬度（g） 弹性 胶着度 咀嚼度（g） W-0 5550.40±8.88b 0.90±0.00b 3947.18±30.19b 3369.07±25.89b UW-0 1402.28±10.02j 0.57±0.01m 387.73±2.28l 236.28±3.58j UW-0.1% 1675.451±24.35i 0.62±0.01l 546.26±17.85k 324.06±8.60i UW-0.3% 1803.21±4.62i 0.71±0.00i 749.45±12.77i 366.26±3.26di UW-0.5% 2849.59±58.32e 0.73±0.00h 836.94±29.74h 675.31±75.06g UW-0.7% 2131.47±2.44h 0.70±0.00j 698.74±14.31ij 496.72±2.13h UW-0.9%% 2124.54±11.86h 0.67±0.00k 665.90±9.00j 386.87±1.07i TG-W-0 8666.84±265.27a 0.93±0.00a 6613.99±77.86a 6169.79±100.34a TG-UW-0 2332.56±107.84g 0.71±0.000i 955.46±27.36g 781.16±2.73f TG-UW-0.1% 2657.17±33.51f 0.81±0.00e 1362.74±101.57e 969.86±18.55e TG-UW-0.3% 3181.28±52.90d 0.82±0.00d 1569.09±34.09d 1221.33±41.96d TG-UW-0.5% 3485.87±18.62c 0.83±0.00c 1891.19±62.15c 1565.33±7.86c TG-UW-0.7% 3161.99±14.05d 0.78±0.00f 1150.00±26.93f 968.81±3.88e TG-UW-0.9% 2760.60±24.96ef 0.75±0.00g 1083.50±50.98f 943.24±16.03e 2.11 鱼糜凝胶pH分析
pH会影响蛋白质分子的电荷性质来影响蛋白质分子的聚集。从图11可以看出，W-0组的pH（6.93）高于UW-0组（6.86），可能是由于漂洗过程中除去了鱼糜中的水溶性酸性物质。随着SDF添加量的增加鱼糜凝胶的pH逐渐降低，可能是因为微波辅助酸法提取的SDF呈弱酸性，降低了鱼糜凝胶的pH。添加TG酶后，pH略有回升，表明添加TG酶后鱼糜凝胶中蛋白质与TG酶产生交联，使蛋白质之间空隙减小，SDF的填充作用减弱，pH有所增加。
2.12 鱼糜凝胶微观结构分析
SDF和TG酶对未漂洗鱼糜凝胶微观结构的影响，白色区域是未漂洗鱼糜的凝胶网络，黑色区域是网络结构中的水孔。UW-0组鱼糜凝胶微观结构不均匀，存在较多水孔，有少量未折叠的鱼糜凝胶形成聚集体。较UW-0组，添加SDF后未漂洗鱼糜凝胶具有更均匀的孔洞和有序的网络结构。随着添加量的增大，鱼糜凝胶中水孔呈现出先均匀后逐渐增多的趋势（图12）。由于SDF具有一定的吸附作用，可以吸附未漂洗鱼糜凝胶中的水分，从而使未漂洗鱼糜凝胶结构更加均匀、致密。TG-SDF组较SDF组未漂洗鱼糜凝胶网络结构更均匀、致密，水孔尺寸更小，具有更有序的网络结构。鱼糜凝胶具有均匀、致密的网络结构可以更有效的锁住水分子[46]，从而使鱼糜凝胶品质呈现出理想状态。
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图 12 SDF和TG酶对未漂洗鱼糜微观结构的影响Figure 12. Effect of SDF and TGase on the microstructure of unrinsed surimi对扫描电子显微镜图像进行分形维数分析，以精准量化SDF和TG酶对鱼糜凝胶微观结构的变化趋势。分形维数是表征鱼糜凝胶体系中不规则聚集体占空间的有效性，分形维数越小，鱼糜凝胶网络结构之间的交联程度越弱，形成的网络结构越无序[47]。较UW-0组，添加SDF后未漂洗鱼糜凝胶的分形维数先增加后降低，总体比UW-0组高，说明SDF可以有效地改善鱼糜凝胶的网络结构。TG-SDF组分形维数增大，TG-UW-0.5%组分形维数达到最大为1.801，接近W-0组，说明SDF和TG酶对未漂洗鱼糜凝胶的改善起到一个协同作用。
2.13 鱼糜凝胶机理分析
肌原纤维蛋白为鱼糜凝胶过程中起主要作用的盐溶性蛋白质。SDF与鱼糜凝胶中肌原纤维蛋白的相互作用一方面体现在SDF断键与肌原纤维蛋白形成氢键，另一方面则体现在SDF可以填充肌原纤维蛋白体系中，使凝胶结构更加紧密，锁住更多水分子。TG酶则通过与肌原纤维蛋白形成ε-（γ-谷氨酰）赖氨酸交联键，从而使肌原纤维蛋白聚集。SDF和TG酶对未漂洗鱼糜凝胶起到协同作用，从而形成均匀致密的凝胶体系。
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图 13 SDF、TG酶-未漂洗鱼糜凝胶体系机理图Figure 13. Mechanism diagram of SDF、TGase and unrinsed surimi gel system3. 结论
研究了SDF的基本特性以及其与TG酶协同作用对未漂洗鱼糜凝胶特性的影响。SDF具有良好的持水力、持油力、膨胀力及抗氧化能力，添加至未漂洗鱼糜凝胶中，随着其添加量的增大，持水性、蒸煮损失、水分分布、凝胶强度、质构特性均有所改善，在SDF添加量为0.5%，未漂洗鱼糜持水性、凝胶强度、硬度、弹性、胶着度、咀嚼度均增加，蒸煮损失降低，水分分布更加均匀，空间结构致密。而添加TG酶后，凝胶特性改善明显，二者存在协同作用，使得TG-UW-0.5%组未漂洗鱼糜凝胶效果达到最佳。而这种协同作用主要体现在TG酶与未漂洗鱼糜凝胶形成ε-（γ-谷氨酰）赖氨酸交联键，将SDF包裹在凝胶网络中，从而使SDF吸附未漂洗鱼糜凝胶中更多的水分，并形成氢键。因此，SDF和TG酶在改善鱼糜凝胶样品中存在的协同作用，为其在未漂洗鱼糜制品的应用提供理论参考。
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图 2 未漂洗鱼糜及鱼糜凝胶制备技术路线图
Figure 2. Technology roadmap for preparation of unrinsed surimi and surimi gel
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图 5 SDF和QY抗氧化特性图
注：（a）DPPH自由基清除能力；（b）·OH自由基清除活性；（c）还原力。
Figure 5. Antioxidant properties chart of SDF and QY
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图 7 SDF和TG酶对未漂洗鱼糜持水力和蒸煮损失的影响
注：（a）持水性；（b）蒸煮损失；数值以平均值±SD表示，不同小写字母表示差异有统计学意义（P<0.05），不同大写字母表示差异有统计学意义（P<0.05）。
Figure 7. Effects of SDF and TGase on water holding power and steaming loss of unrinsed surimi
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图 8 SDF和TG酶对未漂洗鱼糜水分分布的影响
注：（a）SDF弛豫时间；（b）TG-SDF弛豫时间；（c）SDF水分含量；（d）TG-SDF水分含量。
Figure 8. Effect of SDF and TGase on the moisture distribution of unrinsed surimi
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图 9 SDF和TG酶对未漂洗鱼糜核磁成像
Figure 9. Effects of SDF and TGase on nuclear magnetic imaging of unrinsed surimi
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图 10 SDF和TG酶对未漂洗鱼糜凝胶强度的影响
注：数值以平均值±SD表示，不同小写字母表示差异有统计学意义（P<0.05），图11同。
Figure 10. Effects of SDF and TGase on gel strength of unrinsed surimi
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图 12 SDF和TG酶对未漂洗鱼糜微观结构的影响
Figure 12. Effect of SDF and TGase on the microstructure of unrinsed surimi
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图 13 SDF、TG酶-未漂洗鱼糜凝胶体系机理图
Figure 13. Mechanism diagram of SDF、TGase and unrinsed surimi gel system
表 1 SDF和QY基本性质
Table 1 Basic properties of SDF and QY
组别 基本性质 溶解度（%） 持水力（g/g） 持油力（g/g） 膨胀力（mL/g） QY 9.67±0.38 4.79±0.14 2.23±0.06 7.4±0.14 SDF 29.99±1.23 5.13±0.44 2.63±0.60 6.8±0.57 
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表 2 金线鱼糜基本组成成分
Table 2 Nemipterus Virgatus surimi basic composition
组别 水分
（g/100 g）蛋白质（以干
基计g/100 g）脂肪（以干
基计g/100 g）灰分（以干
基计g/100 g）未漂洗鱼糜 71.90±0.79 56.16±0.23 9.61±0.29 6.12±0.25 漂洗鱼糜 78.47±0.20 66.60±0.16 2.69±0.08 1.59±0.13 注：鱼糜中添加商业抗冻剂，其他成分为碳水化合物，其中未漂洗鱼糜碳水化合物含量为28.11（以干基计g/100 g），漂洗鱼糜碳水化合物含量为29.12（以干基计g/100 g）。
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表 3 SDF和TG酶对未漂洗鱼糜色泽的影响
Table 3 Effect of SDF and TGase on the color of unrinsed surimi
组别 L* a* b* 白度 W-0 76.47±0.03a −1.69±0.05d 8.18±0.20f 75.03±0.04a UW-0 72.70±0.10c −0.42±0.05c 12.71±0.12cd 69.89±0.04c UW-0.1% 72.54±0.05d −0.66±0.09c 12.73±0.14cd 69.72±0.06d UW-0.3% 72.4±0.11d −0.64±0.15c 13.11±0.22ab 69.44±0.02e UW-0.5% 71.89±0.13e −0.73±0.06c 13.19±0.19a 68.94±0.06f UW-0.7% 71.43±0.15f 0.12±0.72b 13.04±0.16ab 68.59±0.08g UW-0.9% 70.81±0.08h 0.14±0.29ab 12.48±0.26d 68.26±0.04h TG-W-0 74.33±0.12b −0.79±0.27c 9.58±0.11e 72.59±0.10b TG-UW-0 71.03±0.071g 0.16±0.04ab 13.20±0.14a 68.16±0.10h TG-UW-0.1% 70.81±0.04h 0.15±0.05ab 13.06±0.04ab 68.02±0.04i TG-UW-0.3% 70.64±0.13i 0.27±0.02ab 12.83±0.14bc 67.96±0.07i TG-UW-0.5% 70.29±0.06j 0.36±0.03ab 12.53±0.20cd 67.75±0.05j TG-UW-0.7% 69.86±0.04k 0.58±0.01a 12.60±0.11cd 67.33±0.02k TG-UW-0.9% 69.63±0.06l 0.58±0.14a 12.81±0.14bc 67.03±0.05l 注：数值以平均值±SD表示，不同小写字母表示差异有统计学意义（P<0.05），表4同。
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表 4 SDF和TG酶对未漂洗鱼糜质构特性的影响
Table 4 Effect of SDF and TGase on the TPA of unrinsed surimi
组别 硬度（g） 弹性 胶着度 咀嚼度（g） W-0 5550.40±8.88b 0.90±0.00b 3947.18±30.19b 3369.07±25.89b UW-0 1402.28±10.02j 0.57±0.01m 387.73±2.28l 236.28±3.58j UW-0.1% 1675.451±24.35i 0.62±0.01l 546.26±17.85k 324.06±8.60i UW-0.3% 1803.21±4.62i 0.71±0.00i 749.45±12.77i 366.26±3.26di UW-0.5% 2849.59±58.32e 0.73±0.00h 836.94±29.74h 675.31±75.06g UW-0.7% 2131.47±2.44h 0.70±0.00j 698.74±14.31ij 496.72±2.13h UW-0.9%% 2124.54±11.86h 0.67±0.00k 665.90±9.00j 386.87±1.07i TG-W-0 8666.84±265.27a 0.93±0.00a 6613.99±77.86a 6169.79±100.34a TG-UW-0 2332.56±107.84g 0.71±0.000i 955.46±27.36g 781.16±2.73f TG-UW-0.1% 2657.17±33.51f 0.81±0.00e 1362.74±101.57e 969.86±18.55e TG-UW-0.3% 3181.28±52.90d 0.82±0.00d 1569.09±34.09d 1221.33±41.96d TG-UW-0.5% 3485.87±18.62c 0.83±0.00c 1891.19±62.15c 1565.33±7.86c TG-UW-0.7% 3161.99±14.05d 0.78±0.00f 1150.00±26.93f 968.81±3.88e TG-UW-0.9% 2760.60±24.96ef 0.75±0.00g 1083.50±50.98f 943.24±16.03e
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