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中国精品科技期刊2020

乳酸菌与酵母菌混合发酵羊奶酒的理化特性、抗氧化活性及香气分析

及祥, 吴彩云, 雷宏杰

及祥,吴彩云,雷宏杰. 乳酸菌与酵母菌混合发酵羊奶酒的理化特性、抗氧化活性及香气分析[J]. 食品工业科技,2024,45(23):140−150. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2024020214.
引用本文: 及祥,吴彩云,雷宏杰. 乳酸菌与酵母菌混合发酵羊奶酒的理化特性、抗氧化活性及香气分析[J]. 食品工业科技,2024,45(23):140−150. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2024020214.
JI Xiang, WU Caiyun, LEI Hongjie. Physicochemical Characterization, Antioxidant Activity and Aroma Analysis of Goat's Milk Wine Fermented with Mixed Lactic Acid Bacteria and Yeasts[J]. Science and Technology of Food Industry, 2024, 45(23): 140−150. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2024020214.
Citation: JI Xiang, WU Caiyun, LEI Hongjie. Physicochemical Characterization, Antioxidant Activity and Aroma Analysis of Goat's Milk Wine Fermented with Mixed Lactic Acid Bacteria and Yeasts[J]. Science and Technology of Food Industry, 2024, 45(23): 140−150. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2024020214.

乳酸菌与酵母菌混合发酵羊奶酒的理化特性、抗氧化活性及香气分析

基金项目: 陕西省重点研发计划一般项目:开菲尔羊奶酒加工关键技术研究(2022NY-034)。
详细信息
    作者简介:

    及祥(1998−),男,硕士研究生,研究方向:食品科学,E-mail:jixiangs@nwafu.edu.cn

    通讯作者:

    雷宏杰(1984−),男,博士,教授,研究方向:酿酒科学与技术,E-mail:leihongjie@nwafu.edu.cn

  • 中图分类号: TS252.4

Physicochemical Characterization, Antioxidant Activity and Aroma Analysis of Goat's Milk Wine Fermented with Mixed Lactic Acid Bacteria and Yeasts

  • 摘要: 本研究以纯山羊奶为原料,利用六株乳酸菌分别与酿酒酵母混合发酵纯山羊奶制备羊奶酒,以酿酒酵母单一发酵的羊奶酒为对照,分析羊奶发酵过程中的理化特性、抗氧化活性以及挥发性成分的变化。结果表明,与对照组相比,接种乳酸菌可加快羊奶酒在发酵初期总糖含量的下降,其中添加发酵乳杆菌的羊奶酒发酵1 d后的总糖含量下降最快,由469.46 g/L降低至210.41 g/L。添加乳酸菌发酵会使羊奶酒的ABTS+自由基清除能力与羟自由基清除能力显著提高(P<0.05),其中嗜酸乳杆菌发酵羊奶酒的ABTS+自由基清除能力与羟自由基清除能力最高,分别比对照组高9.94%、37.75%。此外,接种嗜酸乳杆菌发酵的羊奶酒挥发性化合物含量最高(2688.30 mg/L)。乳酸菌与酵母菌混合发酵减少了醇类和酸类物质含量,使羊奶酒的膻味降低,同时生成了环戊酮、乳酸乙酯、己酸乙酯等新的挥发性物质,赋予了羊奶酒新的香气特征。嗜酸乳杆菌和酿酒酵母混合发酵羊奶酒不仅创新了羊奶酒的酿造工艺,还为羊奶酒的脱膻处理提供了理论依据。
    Abstract: In this study, goat's milk was fermented by Saccharomyces cerevisiae mixed with six strains of Lactobacillus, respectively, to produce goat's milk wine, and goat’s milk fermented with Saccharomyces cerevisiae was used as the control. Changes in the physicochemical properties, antioxidant activity and volatile compounds of goat's milk during fermentation process were studied. The results showed that the addition of lactic acid bacteria accelerated the decrease in total sugar content of goat's milk wine at the early stage of fermentation compared to the control, and the total sugar content of goat's milk wine fermented with Lactobacillus fermentum decreased significantly from 469.46 g/L to 210.41 g/L after 1 d of fermentation. The addition of lactic acid bacteria resulted in a significant increase in the scavenging capacity of ABTS+ radical and hydroxyl radical in fermented goat's milk wine (P<0.05), especially for Lactobacillus acidophilus, increasing ABTS+ radical scavenging capacity and hydroxyl radical scavenging capacity by 9.94% and 37.75%, respectively, compared to the control. In addition, the content of volatile compounds in goat's milk wine fermented with Lactobacillus acidophilus was the highest (2688.30 mg/L). The mixed fermentation of lactic acid bacteria and yeast reduced the content of alcohols and acids, reduced the odor of goat's milk wine, and generated new volatile substances such as cyclopentanone, ethyl lactate and ethyl hexanoate, endowing goat's milk wine new aroma characteristics. The mixed fermentation of Lactobacillus acidophilus and Saccharomyces cerevisiae not only innovated the brewing process of goat's milk wine, but also provided a theoretical basis for the deodorization of goat's milk wine.
  • 奶酒是蒙古、新疆等地区的一种传统饮用酒,是中国食品中唯一以酒命名的民族乳制品[1]。传统奶酒通常是在马奶或牛奶中加入奶酒酒曲,通过搅拌发酵,得到浊酒后进行蒸馏,最终成为奶酒,这种发酵方式工艺复杂,且风味不稳定。通常利用乳酸菌和酵母菌共同发酵,可以产生一些新的代谢产物,能够改善产品的风味[2]。近年来,低醇饮料越来越受到年轻消费者的喜爱,这其中就包括奶酒。林少华等[3]以牛奶和葡萄为原料,添加酵母菌、乳酸菌、曲霉菌混菌发酵制备葡萄汁奶酒,在25 ℃条件下发酵5 d后,得到酒精度为6.8%vol的葡萄汁奶酒,且其中的天门冬氨酸、谷氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸和脯氨酸含量显著高于牛奶酒和牛奶中的含量。常云鹤等[4]以玫瑰花和鲜牛乳为主要原料,利用酒曲发酵,得到一种色泽均匀,液体澄清,口感醇香浓厚,有独特的玫瑰和奶酒香味的玫瑰花奶酒,玫瑰花的加入显著提高了奶酒的抗氧化活性。朱俊杰等[5]以鲜牛乳和核桃为原料,接种酵母菌和乳酸菌进行混菌发酵制备出一种色泽为淡黄色,具有浓郁乳香和核桃香的核桃奶酒,且香气协调,口感醇厚。以上研究均表明乳酸菌与酵母菌混合发酵能显著改善奶酒风味,协调奶酒香气。

    目前,大部分研究侧重于以牛奶或马奶为原料,以开菲尔粒或酵母菌为发酵剂制备奶酒,很少有人以羊奶为原料发酵制备羊奶酒。近年来,羊奶因其营养价值高、易消化、矿物质生物利用度高等优点受到越来越多的关注,成为一种重要的功能性食品[69]。羊奶本身具有膻味,部分人难以接受其独特气味。研究表明,羊奶发酵过程中,乳酸菌会分解乳糖、蛋白质和脂类等,产生芳香味化合物,可在一定程度掩盖羊奶膻味[1011],改善产品的感官品质。

    本研究以纯山羊奶为原料,利用六株乳酸菌:发酵乳杆菌、植物乳植杆菌、干酪乳杆菌、乳双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌,分别与酿酒酵母混合发酵纯山羊奶制备发酵羊奶酒。以酿酒酵母单一发酵的羊奶酒为对照,对不同羊奶酒的理化特性、抗氧化活性、香气成分进行比较分析,探究不同发酵剂发酵羊奶酒在理化特性、抗氧化活性及香气方面的差异。旨在为开发营养健康、风味良好、香气典型的羊奶酒提供理论依据。

    纯山羊奶 购于陕西西安,已灭菌处理,包装完好无破损,在保质期内;发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentans 39,Lf39)、植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum 90,Lp90)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei 37,Lc37)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis 68,Ba68)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus 85,La85)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus 57,Lb57) 由上海华朴生命健康科技有限公司提供;酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae,FC9) 购于安琪酵母股份有限公司;白砂糖 广州福正东海食品有限公司;MRS肉汤培养基 北京陆桥技术股份有限公司;3-辛醇、邻二氮菲、酚酞 上海阿拉丁生化科技股份有限公司;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2'-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS) 北京索莱宝科技有限公司;其他化学试剂均为国产分析纯。

    LRH-250CL恒温培养箱 上海一恒科学仪器有限公司;GL-10MD大容量高速冷冻离心机 湖南湘仪仪器开发有限公司;ALC-210.3电子分析天平 福州华志科学仪器有限公司;SB-500DTY超声波清洗器 深圳市结盟清洗设备有限公司;DMA 35酒精计 奥地利安东帕公司;DK-98-IIA电热恒温水浴锅 金坛市宏华仪器厂;BKQ-B50II立式高压蒸汽灭菌锅 山东博科生物产业有限公司;SW-CJ-1FD超净工作台 苏州安泰空气技术有限公司;PB-10 pH计 上海梅特勒-托利多仪器有限公司;QP2010气相色谱-质谱联用仪 日本岛津公司;UV1800PC紫外可见分光光度计 陕西天平仪器设备有限公司;VORTEX-5混匀器 江苏其林贝尔仪器制造有限公司;CM-5色差仪 柯尼卡美能达公司;ATAGO手持式糖度仪 日本岛津公司。

    将1200 mL的纯山羊奶在超净台内拆封后置于2500 mL锥形瓶,加入100 g/L的白砂糖,充分搅拌,使白砂糖在纯羊奶中充分溶解后密封备用。

    称取Lf39、Lp90、Lc37、Ba68、La85、Lb57六种乳酸菌的菌粉0.01 g,分别置于250 mL MRS肉汤培养基中,置于恒温培养箱中37 ℃恒温活化12 h后,离心弃去上清液,使用生理盐水洗涤菌泥2次,得到活化后的乳酸菌悬液。

    将活化后的乳酸菌按3%(v/v)的添加量接种至调糖后的纯羊奶中,同时将酿酒酵母按0.4 g/L的添加量添加至纯羊奶中。以酿酒酵母单一发酵的羊奶酒为对照,封口后充分摇匀,置于恒温培养箱中25 ℃恒温发酵5 d,期间每隔24 h取一次样,11000 r/min离心20 min后取上清液得到羊奶酒,进行相关指标的测定。

    pH:将待测样品摇匀,取30 mL置于烧杯中,使用pH计在室温下测定pH,待数值稳定后读数。

    可滴定酸:采用酸碱滴定法(GB/T 23546-2009 奶酒)测定,结果以乳酸含量表示[12]

    可溶性固形物:在20 ℃下使用手持糖度仪进行测定,以蒸馏水为空白,结果以°Brix表示。

    总糖:采用苯酚-硫酸法进行测定,结果以葡萄糖含量计算[12]

    乙醇含量:取50 mL样品,倒入250 mL蒸馏瓶中,同时加入50 mL去离子水,加热蒸馏,收集馏出液,当馏出液的体积接近50 mL时停止蒸馏,定容至50 mL。用酒精计测定其乙醇含量。

    色值:使用色差仪在室温条件下进行测定,测定前先使用黑板和白板对色差仪校正,再将样品摇匀置于比色皿中,选取Hunter Lab测试系统,在反射模式下测定L*a*b*值,其中:L*表示亮度;a*表示红度值;b*表示黄度值;ΔE表示色差值。色差(ΔE)计算公式如下:

    ΔE=(L*0L*)2+(a*0a*)2+(b*0b*)2
    (1)

    式中,L0*表示发酵前样品的亮度,a0*表示发酵前样品的红度值,b0*表示发酵前样品的黄度值。

    DPPH自由基清除能力的测定:2 mL经过稀释的样品与4 mL 0.045 mg/mL DPPH甲醇溶液混合后避光反应30 min,用紫外分光光度计在517 nm处测定溶液吸光度值(Asample),以溶剂和DPPH甲醇溶液混合为对照(Acontrol),DPPH自由基清除能力计算公式如下[13]

    DPPH(%)=AcontrolAsampleAcontrol×100
    (2)

    ABTS+自由基清除能力的测定:将2.45 mmol/L K2S2O8溶液和7 mmol/L ABTS 1:1混合,避光反应16 h制备ABTS+自由基,所得溶液用80%乙醇稀释至734 nm处吸光度为0.700±0.02即得到ABTS+自由基试剂。将600 μL稀释后的样品与5.4 mL ABTS+自由基试剂混合,反应6 min,用紫外分光光度计测定溶液在734 nm处的吸光度值(Asample),以溶剂和ABTS+自由基试剂混合为对照(Acontrol),ABTS+自由基清除能力的计算公式如下[14]

    ABTS+(%)=AcontrolAsampleAcontrol×100
    (3)

    羟自由基清除能力的测定:配制0.75 mmol/L邻二氨菲无水乙醇溶液,取1 mL于试管中,依次加入0.2 mmol/L(pH7.4)的磷酸缓冲液2 mL和蒸馏水1 mL,充分混匀,加0.75 mmol/L FeSO4溶液1 mL,混匀,随后加入1 mL 0.01%H2O2,于37 ℃水浴1 h,用紫外分光光度计测定溶液在536 nm处的吸光度值AP。用1 mL蒸馏水代替1 mL H2O2测定吸光值AB。用1 mL样品代替1 mL蒸馏水,测定吸光值As。羟自由基清除能力按以下公式计算[15]

    (%)=ASAPABAP×100
    (4)

    采用顶空固相微萃取-气质联用(HS-SPME-GC-MS)对样品中的挥发性化合物进行分析。5 mL样品添加到含有2 g NaCl的进样瓶中,同时添加10 μL 3-辛醇(0.2 mg/mL,用乙醇配制)作为内标,上机测定。进样瓶先在40 ℃环境下平衡15 min,再将老化后的萃取头插入进样瓶中顶空吸附30 min,然后进行解吸[12]

    色谱条件:色谱柱为DB-17MS毛细管色谱柱(60 m×0.25 mm,0.25 μm)。

    升温程序:起始温度40 ℃,保持30 min后以4 ℃/min的速率升温至120 ℃,再以6 ℃/min的速率升温至240 ℃并保持9 min;系统自动进样;进样口温度250 ℃;载气为氦气;压力112 kPa,总流速为17 mL/min,柱内流速为1 mL/min;不分流进样。

    质谱条件:电子电离源;电子能量70 eV;离子源温度230 ℃;接口温度230 ℃;质量扫描范围m/z 35~500。

    根据气相色谱-质谱中NIST 14质谱数据库、匹配度和保留时间对各物质的检索进行定性。选择匹配度大于85的挥发性化合物作为有效香气成分,根据各物质峰面积分别与内标物峰面积之比进行定量。香气成分含量计算公式如下[12]

    (mg/L)=×
    (5)

    所有实验重复三次,结果以平均值±标准差表示。采用Minitab 21软件进行方差分析,采用Origin 2023b软件制作图表。经Tukey检验,P<0.05表示样本之间存在显著性差异。

    图1a所示,随着发酵时间的延长,单一和混合菌株发酵羊奶酒的pH均呈下降趋势,且混合发酵羊奶酒的pH下降速度显著高于单一发酵羊奶酒(P<0.05)。单一菌株发酵羊奶酒的pH从发酵初的6.5降至5.1。而所有混合菌株发酵羊奶酒的pH均在发酵的第1 d大幅下降(P<0.05),其中,La85发酵羊奶酒的pH下降幅度最小,从6.5降至4.3,Lc37发酵羊奶酒的pH下降幅度最大,从6.5降至3.7,说明La85在羊奶中的产酸能力较弱,Lc37在羊奶中的产酸能力较强。研究显示,羊奶酒在发酵过程中代谢产生了L-乳酸、乙酸等酸类物质。本结果与李巧艳等[16]利用乳酸菌发酵牦牛乳的pH变化趋势是相似的,乳酸菌与酿酒酵母混合发酵可以促进羊奶酒酸类化合物的生成。

    图  1  单一和混合菌株发酵羊奶酒pH(a)和可滴定酸含量(b)的变化
    Figure  1.  Changes in pH (a) and titratable acid content (b) of goat's milk wine fermented by single and mixed strains

    图1b所示,单一和混合菌株发酵羊奶酒的可滴定酸含量在发酵过程中整体呈上升趋势。单一菌株发酵羊奶酒在发酵过程中,可滴定酸含量由发酵初的1.02 g/L增加至2.80 g/L。混合菌株发酵羊奶酒中,Lc37发酵羊奶酒的可滴定酸含量增加最多,发酵结束后达6.93 g/L;La85发酵羊奶酒的可滴定酸含量增加最少,发酵结束后为3.81 g/L,这与pH的变化趋势相一致。羊奶酒pH和可滴定酸的变化主要是因为乳酸菌发酵过程中代谢产生的淀粉酶和脂肪酶等可以将糖类、脂类等物质转化成有机酸和脂肪酸,最终导致发酵体系的pH显著下降、可滴定酸含量显著提高[1718]

    单一和混合菌株发酵羊奶酒在发酵过程中的可溶性固形物含量整体呈下降趋势(图2)。单一菌株发酵羊奶酒的可溶性固形物含量由发酵前的14.20°Brix降至9.37°Brix。混合菌株发酵羊奶酒的可溶性固形物含量下降程度显著高于单一菌株发酵羊奶酒(P<0.05),其中,Lc37发酵羊奶酒在发酵结束后的可溶性固形物含量最高,为6.43°Brix,Lf39发酵羊奶酒在发酵结束后的可溶性固形物含量最低,为5.03°Brix,说明Lf39在羊奶中的代谢能力较强。混合菌株发酵羊奶酒的可溶性固形物含量在发酵第1 d的下降速度显著高于第2~5 d,说明在发酵前期,乳酸菌在羊奶中的代谢活动较为强烈。乳酸菌通过消耗糖分来完成增殖代谢活动,同时产生乳酸等酸性代谢物质,使羊奶的pH降低,酸度变高,然而,随着有机酸浓度的增高,酸性环境又反过来抑制益生菌的生长代谢活动[19],因此,在发酵的中后期羊奶酒中的可溶性固形物含量下降变缓。

    图  2  单一和混合菌株发酵羊奶酒可溶性固形物含量的变化
    Figure  2.  Changes in soluble solids content of goat's milk wine fermented by single and mixed strains

    糖的消耗与微生物的代谢相关[20]。由图3可以看出,单一和混合菌株发酵羊奶酒的总糖含量整体呈下降趋势,说明酵母菌和益生菌的生长增殖消耗糖分。其中,Lc37发酵羊奶酒发酵结束后的总糖含量最低,为168.94 g/L,较未发酵下降了64.01%;Lp90发酵羊奶酒发酵结束后的总糖含量最高,为430.12 g/L,较未发酵下降了8.38%。说明Lc37在羊奶中消耗碳源的能力最强。对于发酵后期单一和混合菌株发酵羊奶酒的总糖含量上升的现象,推测是由于发酵后期益生菌受乙醇胁迫,使细胞破裂,导致细胞内糖类物质流出,从而使总糖含量升高[21]。此外,乳酸菌在生长代谢过程中分泌出的胞外多糖也会使总糖含量升高[22]

    图  3  单一和混合菌株发酵羊奶酒总糖含量的变化
    注:相同柱形上不同小写字母表示组间有显著性差异(P<0.05),大写字母表示组内有显著性差异(P<0.05);图4~图7同。
    Figure  3.  Changes in total sugar content of goat's milk wine fermented by single and mixed strains

    图4所示,单一和混合菌株发酵羊奶酒的乙醇含量在发酵过程中显著升高(P<0.05),且在发酵前期乙醇含量增长较快,表明FC9在发酵初期增殖迅速,消耗糖分,产生乙醇。单一菌株发酵羊奶酒发酵结束后的乙醇含量达7.13%vol,混合菌株发酵羊奶酒中,Ba68发酵羊奶酒和La85发酵羊奶酒在发酵结束后的乙醇含量显著高于单一菌株发酵羊奶酒(P<0.05),分别为7.28%vol、7.23%vol。其余混合菌株发酵羊奶酒在发酵结束后的乙醇含量显著低于单一菌株发酵羊奶酒(P<0.05),其中以Lc37发酵羊奶酒最低,为6.19%vol。这可能是由于乳酸菌发酵产生的丙酮酸未被酵母菌直接利用,而是转化成L-乳酸等酸类物质,使发酵产生酒精的速度变慢,可滴定酸度升高[23]。总的来说,单一和混合菌株发酵羊奶酒的乙醇含量均小于18%vol,符合国家标准中对发酵型奶酒的酒精度要求[24]

    图  4  单一和混合菌株发酵羊奶酒乙醇含量的变化
    Figure  4.  Changes in alcohol content of goat's milk wine fermented by single and mixed strains

    单一和混合菌株发酵羊奶酒在发酵过程中颜色参数(L*a*b*)的变化及总色差(∆E)变化如表1所示。除Lc37发酵羊奶酒外,与对照组相比,乳酸菌发酵显著降低了羊奶酒的a*值与b*值(P<0.05),同时显著提高了其L*值(P<0.05),表明混菌发酵使羊奶酒的颜色变得明亮透明,红色调和黄色调变弱。有研究表明,乳酸菌发酵生成的酸类物质会促进蛋白质凝固沉降,从而使奶酒变得澄清明亮[25]。发酵结束后,La85发酵羊奶酒的∆E值最大,为97.38;Lc37发酵羊奶酒的∆E值最小,为74.00。说明La85发酵羊奶酒在发酵前后的颜色变化最大,Lc37发酵羊奶酒的颜色变化最小。

    表  1  单一和混合菌株发酵羊奶酒色值的变化
    Table  1.  Changes in color attributes of goat's milk wine fermented by single and mixed strains
    发酵时间(d) 组别 L* a* b* E
    0 对照组 2.39±0.14Fa 0.00±0.14Ba 2.70±0.18Fa
    1 对照组 61.45±0.13Ef 2.10±0.02Aa 14.48±0.05Aa 60.26±0.34Ee
    FC9+Lc37 94.63±0.03Ae −0.06±0.10Db 5.75±0.11Eb 92.29±0.17Ad
    FC9+Lp90 97.70±0.05Bd −0.85±0.01Cf 4.12±0.02Ac 95.32±0.14Bc
    FC9+Ba68 98.60±0.02Cc −0.82±0.24Df 3.92±0.02Ac 96.23±0.14Db
    FC9+La85 97.75±0.10Cd −0.39±0.05Ad 3.93±0.03Ac 95.37±0.24Bc
    FC9+Lb57 99.37±0.03Ab −0.48±0.02Ae 2.31±0.02Cd 96.99±0.17Aa
    FC9+Lf39 99.58±0.14Aa −0.26±0.17Ac 1.43±0.10Ce 97.20±0.23Aa
    2 对照组 85.62±0.08Df −0.21±0.05Cb 10.04±0.01Ba 83.55±0.13Dd
    FC9+Lc37 90.73±0.01Be 0.45±0.12Ca 8.82±0.31Db 88.56±0.17Bc
    FC9+Lp90 99.02±0.01Ad −0.50±0.07Ac 2.53±0.36Cd 96.64±0.14Ab
    FC9+Ba68 99.10±0.01Bc −0.27±0.08Ab 1.86±0.19Ee 96.72±0.13Cb
    FC9+La85 99.61±0.04ABa −0.65±0.07Bc 2.53±0.06Cd 97.23±0.14Aa
    FC9+Lb57 99.01±0.08Bd −0.54±0.11ABc 2.72±0.03Bc 96.62±0.21Bb
    FC9+Lf39 99.47±0.08Ab −0.30±0.11Ab 1.56±0.03Cf 97.09±0.14Aa
    3 对照组 86.52±0.04Cf −0.47±0.17Db 8.70±0.02Db 84.35±0.14Cd
    FC9+Lc37 74.18±0.01Dg 1.87±0.03Ba 12.74±0.04Ca 72.52±0.19De
    FC9+Lp90 98.82±0.01Ae −0.80±0.14BCe 3.88±0.18ABc 96.44±0.14Ac
    FC9+Ba68 99.47±0.01Ab −0.55±0.01Bbc 2.30±0.27Df 97.08±0.14Aab
    FC9+La85 99.70±0.03ABa −0.66±0.09Bcd 2.55±0.04Ce 97.31±0.28Aa
    FC9+Lb57 99.01±0.04Bd −0.48±0.01Ab 2.40±0.02Cf 96.63±0.16Bc
    FC9+Lf39 99.38±0.16Ac −0.70±0.06Bde 2.96±0.02ABd 96.99±0.32ABb
    4 对照组 91.26±0.06Ac −0.82±0.04Fd 7.89±0.02Eb 89.03±0.14Ad
    FC9+Lc37 71.86±0.42Ed 2.20±0.02Aa 14.04±0.02Ba 70.43±0.37Ee
    FC9+Lp90 97.25±0.54Cb −0.69±0.04Bc 3.70±0.13Bc 94.87±0.45Cc
    FC9+Ba68 99.38±0.18Aa −0.70±0.03Cc 2.79±0.02Cd 97.00±0.12ABab
    FC9+La85 99.48±0.25Ba −0.71±0.02BCc 2.82±0.06BCd 97.10±0.17Aa
    FC9+Lb57 98.97±0.18Ba −0.58±0.02ABb 2.80±0.03Bd 96.59±0.19Bb
    FC9+Lf39 99.02±0.25Ba −0.64±0.02Bc 2.85±0.05ABd 96.64±0.41Cab
    5 对照组 89.73±0.03Be −0.66±0.02Eb 9.17±0.15Cb 87.59±0.19Be
    FC9+Lc37 75.41±0.04Cf 2.16±0.02Aa 14.45±0.02Aa 74.00±0.16Cf
    FC9+Lp90 98.78±0.05Ac −0.88±0.02Cc 4.03±0.22Ac 96.40±0.28Ac
    FC9+Ba68 99.18±0.14Bb −0.72±0.01Cbc 3.16±0.17Be 96.80±0.15BCb
    FC9+La85 99.76±0.21Aa −0.78±0.01Cbc 2.90±0.01Bf 97.38±0.33Aa
    FC9+Lb57 98.45±0.14Cd −0.63±0.23Bb 3.45±0.12Ad 96.07±0.32Cd
    FC9+Lf39 99.13±0.14Bb −0.68±0.01Bb 3.09±0.04Aef 96.75±0.27BCb
    注:大写字母表示同一样品不同发酵时间具有显著性差异(P<0.05),小写字母表示同一发酵时间不同样品具有显著性差异(P<0.05)。
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    本研究通过测定ABTS+、DPPH和羟自由基清除能力来进行羊奶酒的抗氧化活性分析。羊奶中的抗氧化活性成分主要有超氧化物歧化酶(SOD)、维生素A和生物活性肽[26]。如图5图6所示,单一和混合菌株发酵羊奶酒的ABTS+和羟自由基清除能力整体呈下降趋势,这可能是由于酿酒酵母发酵过程产生的酒精抑制了SOD的活性[27]。单一和混合菌株发酵羊奶酒的ABTS+自由基清除能力在发酵的第1 d均显著下降(P<0.05)。所有混合菌株发酵羊奶酒的ABTS+自由基清除能力在发酵的第3~5 d显著上升(P<0.05)。除Lc37发酵羊奶酒外,所有混合菌株发酵羊奶酒在发酵结束后的ABTS+自由基清除能力显著高于单一菌株发酵羊奶酒(P<0.05)。单一和混合菌株发酵羊奶酒的羟自由基清除能力均在发酵的第5 d显著下降(P<0.05),且混合菌株发酵羊奶酒的羟自由基清除能力均显著高于单一菌株发酵羊奶酒(P<0.05),说明添加乳酸菌发酵有助于提高羊奶酒的ABTS+和羟自由基清除能力。有研究表明,乳酸菌在发酵动物乳时会水解其中的乳蛋白,生成抗氧化肽,从而提高羊奶酒的抗氧化活性[28]。如图7所示,单一菌株发酵羊奶酒的DPPH自由基清除能力显著高于混合菌株发酵羊奶酒(P<0.05),这与ABTS+和羟自由基清除能力的测定结果不一致,这可能是不同的抗氧化机制造成的[29]

    图  5  单一和混合菌株发酵羊奶酒ABTS+自由基清除能力的变化
    Figure  5.  Changes in ABTS+ radical scavenging activities of goat's milk wine fermented by single and mixed strains
    图  6  单一和混合菌株发酵羊奶酒羟自由基清除能力的变化
    Figure  6.  Changes in hydroxyl radical scavenging activities of goat's milk wine fermented by single and mixed strains
    图  7  单一和混合菌株发酵羊奶酒DPPH自由基清除能力的变化
    Figure  7.  Changes in DPPH radical scavenging activities of goat's milk wine fermented by single and mixed strains

    香气是消费者选择购买一款奶酒的重要特征。酵母菌与乳酸菌共同发酵不仅可以提高发酵速度,加速有益产物的积累,而且会产生丰富的风味物质[3032]。本研究在单一和混合菌株发酵羊奶酒中共鉴定出54种挥发性化合物,如表2所示,其中有醇类化合物16种、酸类化合物5种、酮类化合物12种、醛类化合物6种、酯类化合物15种。总挥发性物质含量最高的为单一菌株发酵羊奶酒,为2935.93 mg/L;最低的为Lf39发酵羊奶酒,为1341.75 mg/L。

    表  2  单一和混合菌株发酵羊奶酒中挥发性化合物的变化(mg/L)
    Table  2.  Changes in volatile compounds of goat's milk wine fermented by single and mixed strains (mg/L)
    序号 挥发性化合物 对照组 FC9+Lc37 FC9+Lp90 FC9+Ba68 FC9+La85 FC9+Lb57 FC9+Lf39
    醇类化合物
    1 (S)-环氧丙醇 ND ND ND ND ND 65.58 ND
    2 乙醇 1411.39 1654.60 1104.78 1580.00 1325.82 1160.65 1277.93
    3 3-戊醇 ND ND ND ND 52.95 35.08 ND
    4 异丁醇 95.28 ND ND ND ND ND ND
    5 叔戊醇 8.93 2.89 9.95 ND ND 24.40 5.30
    6 异戊醇 612.40 299.17 340.21 374.06 425.65 305.03 321.77
    7 2-甲基-1-丁醇 188.58 84.65 94.10 100.89 115.07 88.46 99.08
    8 2-甲基-2,4-戊二醇 ND ND ND ND ND ND 1.99
    9 2,3-丁二醇 7.94 ND ND ND ND ND ND
    10 (2R,3R)-(-)-2,3-丁二醇 ND ND 5.43 1.90 ND ND 2.98
    11 2-庚醇 2.98 ND ND ND ND ND ND
    12 糠醇 ND ND ND ND 5.09 240.97 ND
    13 2,2-二甲基丁醇 11.91 12.51 ND 12.37 ND ND ND
    14 3-甲基-3-辛醇 ND ND 2.71 ND ND ND ND
    15 β-苯乙醇 59.55 26.94 36.19 34.26 53.97 73.21 10.60
    16 1-五烯-3-醇 27.79 27.90 22.62 ND 34.62 ND 8.28
    总计 2426.76 2108.65 1616.00 2103.49 2013.17 1993.38 1727.94
    酸类化合物
    17 L-乳酸 41.69 ND ND ND ND ND ND
    18 乙酸 20.84 14.43 24.43 ND 25.82 28.83 28.83
    19 己酸 ND 4.81 3.62 ND 5.09 ND 3.31
    20 正庚酸 2.98 ND ND ND ND ND ND
    21 苯甲酸 ND ND 8.14 3.81 3.60 ND ND
    总计 65.51 19.24 36.19 3.81 34.52 28.83 32.14
    酮类化合物
    22 3-甲基-2-庚酮 1.99 1.92 1.81 1.90 ND ND 1.66
    23 羟丙酮 ND ND ND ND ND 8.08 ND
    24 环戊酮 ND ND ND ND ND 8.24 ND
    25 2-庚酮 ND 2.89 1.81 3.80 ND ND 2.32
    26 环己酮 ND ND ND ND ND 2.44 ND
    27 4-异丁氧基-2-丁酮 11.91 ND ND ND ND ND ND
    28 苯乙酮 4.96 4.81 4.52 3.81 ND ND 0.99
    29 2,5-二甲基-4-羟基-3(2H)-呋喃酮 ND ND ND ND ND 3.42 ND
    30 2-甲基-3-羟基-γ-吡喃酮 ND ND ND ND 64.15 35.99 ND
    31 2,3-二氢-3,5二羟基-6-甲基-4H-吡喃-4-酮 ND ND ND ND 38.70 42.40 ND
    32 3,4-二甲基苯乙酮 ND ND ND ND 9.16 ND ND
    33 2',5'-二羟基苯丙酮 ND ND ND ND ND 21.35 ND
    总计 18.86 9.62 8.14 9.51 112.01 121.92 4.97
    酯类化合物
    34 乙酸乙酯 197.52 238.57 189.11 167.52 235.23 172.34 127.58
    35 乙酸丙酯 ND ND ND ND ND ND 1.33
    36 乙酸异丁酯 ND ND ND ND ND 22.88 12.92
    37 乙酸丁酯 ND 10.58 5.43 5.71 ND ND ND
    38 乳酸异丁酯 ND ND ND ND ND ND 1.33
    39 丁酸乙酯 11.91 8.66 5.43 5.71 6.11 ND 5.63
    40 乳酸乙酯 ND ND ND ND ND ND 0.99
    41 乙酸异戊酯 137.96 149.11 74.20 79.00 165.98 97.61 73.90
    42 2-甲基丁基乙酸酯 18.86 21.16 9.95 10.47 20.37 15.25 9.94
    43 γ-丁内酯 ND ND ND ND 10.18 ND ND
    44 己酸乙酯 ND ND ND ND ND ND 29.49
    45 3-呋喃甲酸甲酯 ND ND ND ND ND 56.43 ND
    46 辛酸乙酯 31.76 67.34 32.57 26.65 35.64 ND 4.97
    47 乙酸苯乙酯 1.99 1.92 ND 1.90 5.09 21.35 0.66
    48 癸酸乙酯 2.98 11.54 4.52 ND ND ND ND
    总计 402.97 508.88 321.21 296.96 478.60 385.87 268.75
    醛类化合物
    49 异戊醛 ND ND ND 0.95 ND ND 3.65
    50 糠醛 ND ND ND ND ND 7.78 ND
    51 苯甲醛 ND ND ND ND ND ND 4.31
    52 3,5-二甲基苯甲醛 19.85 20.20 13.57 ND ND ND ND
    53 间苯二甲醛 1.99 ND 3.62 ND ND ND ND
    54 5-羟甲基糠醛 ND ND ND ND ND 6.95 ND
    总计 21.84 20.20 17.19 0.95 0.00 14.73 7.95
    共计 2935.93 2666.60 1998.74 2414.72 2688.30 2544.73 1341.75
    注:结果为三个独立重复的平均值;标准差均小于平均值的10%;“ND”表示未检出。
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    醇类物质是微生物通过氨基酸代谢产生的[33],在羊奶酒的挥发性成分中占比最大,约为80%。单一菌株发酵羊奶酒的醇类物质含量最高,达2426.76 mg/L;Lp90发酵羊奶酒的醇类物质含量最低,为1616.00 mg/L。其中,乙醇、异戊醇、2-甲基-1-丁醇和β-苯乙醇在单一和混合菌株发酵羊奶酒中均有检出,为其中主要的醇类化合物。乙醇的含量最高,赋予羊奶酒刺激辛辣味。异戊醇、2-甲基-1-丁醇和β-苯乙醇则为羊奶酒提供醇类特有的芳香气息。单一菌株发酵羊奶酒中的醇类物质最多,共有10种,说明添加乳酸菌发酵会减少羊奶酒中醇类物质的种类和含量。但乳酸菌的加入也会使羊奶酒中生成新的醇类物质,如Lb57发酵羊奶酒中鉴定出了(S)-环氧丙醇,为其带来了甜味;Lf39发酵羊奶酒中鉴定出了2-甲基-2,4-戊二醇,赋予其一定的甜香味;Lp90发酵羊奶酒中鉴定出了3-甲基-3-辛醇,可以为羊奶酒提供一种独特的薄荷香气。

    膻味一直是影响羊奶产业发展的一个重要因素,它主要与羊奶中的游离短中链脂肪酸,特别是支链脂肪酸的含量有关,如己酸、辛酸和癸酸[3437]。在本项研究中,单一和混合菌株发酵羊奶酒中的酸类物质较少,共鉴定出L-乳酸、乙酸、己酸、正庚酸、苯甲酸5种酸性物质。单一菌株发酵羊奶酒酸类物质的总含量为65.51 mg/L,仅占挥发性物质总含量的2%左右。混合菌株发酵羊奶酒的酸类物质含量均显著低于单一菌株发酵羊奶酒(P<0.05),其中以Ba68发酵羊奶酒的含量最低,仅为3.81 mg/L。说明在发酵过程中,乳酸菌的加入能减少羊奶酒中的酸类化合物,进而在一定程度上消除羊奶酒的膻味,改善羊奶酒整体的香气,使其能被更多消费者所接受。

    较低浓度的酮类物质就能产生比较强烈的气味[38]。在单一和混合菌株发酵羊奶酒中鉴定出的酮类化合物共有12种,但整体含量不高。La85发酵羊奶酒和Lb57发酵羊奶酒中的酮类物质含量最高,分别为112.01 mg/L和121.92 mg/L,Lf39发酵羊奶酒中所含有的酮类物质最少,为4.97 mg/L。单一菌株发酵羊奶酒的酮类物质含量为18.86 mg/L。Lb57发酵羊奶酒中共含有7种酮类化合物,其中,羟丙酮、环戊酮、环己酮、2,5-二甲基-4-羟基-3(2H)-呋喃酮(菠萝酮)和2',5'-二羟基苯丙酮为Lb57发酵羊奶酒所特有,羟丙酮可为其提供特殊甜味,环戊酮和环己酮可赋予羊奶酒薄荷香气,菠萝酮则具有复杂的烘焙烹调香和水果香气。其余羊奶酒都仅含有3种酮类物质,说明Lb57的加入可以使羊奶酒在发酵过程中产生更多种类和含量的酮类化合物,使羊奶酒的香气种类更复杂,层次更丰富。La85发酵羊奶酒中鉴定出的酮类化合物为2-甲基-3-羟基-γ-吡喃酮(麦芽酚)、2,3-二氢-3,5二羟基-6-甲基-4H-吡喃-4-酮和3,4-二甲基苯乙酮(丁香酮),其中麦芽酚和2,3-二氢-3,5二羟基-6-甲基-4H-吡喃-4-酮含量较高,分别为64.15 mg/L和38.70 mg/L,它们能为羊奶酒提供棉花糖和焦糖的甜蜜气味,以及复杂的烘焙烹调香和水果、焦糖香气。3,4-二甲基苯乙酮为La85发酵羊奶酒所特有,能为其提供奶油和丁香的香气。说明La85的加入可以使羊奶酒在发酵过程中产生更多的酮类物质,使其具有更为浓郁和复杂的独特香气。

    酯类物质对奶酒的花果香气具有积极贡献[39],单一和混合菌株发酵羊奶酒中共鉴定出15种酯类物质。单一菌株发酵羊奶酒中有7种酯类化合物,总含量达402.97 mg/L。Lf39发酵羊奶酒中的酯类化合物种类最多,达11种,但其酯类物质总含量最低,为268.75 mg/L。Lc37发酵羊奶酒中的酯类化合物含量最高,为508.88 mg/L。乙酸乙酯、乙酸异戊酯为单一和混合菌株发酵羊奶酒中的主要酯类物质,在所有羊奶酒中均有检出,且含量较高,此外在所有羊奶酒中均鉴定出2-甲基丁基乙酸酯,但含量不高,它们均能为羊奶酒提供水果香气。在Lc37发酵羊奶酒中还含有较高浓度的辛酸乙酯、癸酸乙酯、乙酸丁酯、丁酸乙酯,它们分别赋予羊奶酒白兰地的香甜味、椰子香味、水果香味以及香槟和菠萝的味道。说明在发酵过程中添加Lc37可增加羊奶酒的酯类化合物含量,使羊奶酒的香气更加浓郁剧烈。乙酸丙酯、乳酸異丁酯、乳酸乙酯和己酸乙酯为Lf39发酵羊奶酒中特有的酯类化合物,这些物质均能为羊奶酒提供水果的香味。说明Lf39的加入可以丰富羊奶酒中酯类化合物的种类,使羊奶酒的香气种类更加丰富。

    高浓度的醛类物质会带来异味[40]。单一和混合菌株发酵羊奶酒中的醛类物质共6种,在La85发酵羊奶酒中未鉴定出醛类物质,其余羊奶酒中均含有1~2种醛类物质。单一菌株发酵羊奶酒中的醛类化合物含量最高,达21.84 mg/L,为3,5-二甲基苯甲醛和间苯二甲醛,均能为羊奶酒提供特殊的香气。Lb57发酵羊奶酒中的糠醛和5-羟甲基糠醛均为其所特有,可以赋予羊奶酒特殊的芳香甜味。总的来说,乳酸菌的添加降低了羊奶酒中的醛类物质含量。

    通过层次聚类分析评估各样品的挥发性香气成分的组成。如图8所示,Lb57发酵羊奶酒为一类,香气组成与其他羊奶酒有明显差别,其中含有较为丰富的酮类物质(环丙酮、环戊酮)。Lf39发酵羊奶酒为一类,其挥发性成分含量最低,但含有最丰富的酯类物质(乳酸乙酯、己酸乙酯)。单一菌株发酵羊奶酒为一类,酒精发酵有利于酸类物质(正庚酸、L-乳酸)的富集。La85发酵羊奶酒为一类,其中含有丰富的酮类和酯类物质(3,4-二甲基苯乙酮、γ-丁内酯)。Lp90、Lc37和Ba68发酵羊奶酒中的酮类物质和酯类物质(3-甲基-2-庚酮、辛酸乙酯)的成分相近,归为同一类。

    图  8  单一和混合菌株发酵羊奶酒中挥发性化合物热图和聚类分析
    注:色标表示每个物质的比例浓度,记为d2(欧几里得度量的平方),红色表示高浓度,蓝色表示低浓度。
    Figure  8.  Heat map and hierarchical cluster of volatile compounds in goat’s milk wine fermented by single and mixed strains

    本研究探究了单一酿酒酵母发酵和酿酒酵母与乳酸菌混合发酵羊奶酒在发酵过程中各项理化指标、抗氧化活性及风味成分的变化。由结果可知,单一和混合菌株发酵羊奶酒的乙醇含量在6.19%vol~7.28%vol之间,符合国家标准中对发酵型奶酒的酒精度要求。乳酸菌和酿酒酵母混合发酵可加快羊奶酒中的糖分消耗以及酸类物质的积累,使羊奶酒的pH显著降低(P<0.05)。混合发酵使羊奶酒颜色整体变得透亮澄清。此外,乳酸菌的添加会提高羊奶酒的ABTS+自由基清除能力与羟自由基清除能力,表明接种乳酸菌对羊奶酒的抗氧化能力有积极影响。醇类物质是羊奶酒最主要的挥发性物质,主要为乙醇、异戊醇和2-甲基-1-丁醇。乳酸菌的加入会显著降低羊奶酒中的挥发性物质总量(P<0.05),但生成了29种新的挥发性化合物,表明添加乳酸菌发酵可以赋予羊奶酒新的风味,提高羊奶酒香气的复杂程度,同时在一定程度上消除了羊奶酒的膻味,使其具有独特的奶酒香气。乳酸菌和酿酒酵母混合发酵羊奶酒不仅创新了羊奶酒的酿造工艺,还为羊奶酒的脱膻处理提供了理论依据。

  • 图  1   单一和混合菌株发酵羊奶酒pH(a)和可滴定酸含量(b)的变化

    Figure  1.   Changes in pH (a) and titratable acid content (b) of goat's milk wine fermented by single and mixed strains

    图  2   单一和混合菌株发酵羊奶酒可溶性固形物含量的变化

    Figure  2.   Changes in soluble solids content of goat's milk wine fermented by single and mixed strains

    图  3   单一和混合菌株发酵羊奶酒总糖含量的变化

    注:相同柱形上不同小写字母表示组间有显著性差异(P<0.05),大写字母表示组内有显著性差异(P<0.05);图4~图7同。

    Figure  3.   Changes in total sugar content of goat's milk wine fermented by single and mixed strains

    图  4   单一和混合菌株发酵羊奶酒乙醇含量的变化

    Figure  4.   Changes in alcohol content of goat's milk wine fermented by single and mixed strains

    图  5   单一和混合菌株发酵羊奶酒ABTS+自由基清除能力的变化

    Figure  5.   Changes in ABTS+ radical scavenging activities of goat's milk wine fermented by single and mixed strains

    图  6   单一和混合菌株发酵羊奶酒羟自由基清除能力的变化

    Figure  6.   Changes in hydroxyl radical scavenging activities of goat's milk wine fermented by single and mixed strains

    图  7   单一和混合菌株发酵羊奶酒DPPH自由基清除能力的变化

    Figure  7.   Changes in DPPH radical scavenging activities of goat's milk wine fermented by single and mixed strains

    图  8   单一和混合菌株发酵羊奶酒中挥发性化合物热图和聚类分析

    注:色标表示每个物质的比例浓度,记为d2(欧几里得度量的平方),红色表示高浓度,蓝色表示低浓度。

    Figure  8.   Heat map and hierarchical cluster of volatile compounds in goat’s milk wine fermented by single and mixed strains

    表  1   单一和混合菌株发酵羊奶酒色值的变化

    Table  1   Changes in color attributes of goat's milk wine fermented by single and mixed strains

    发酵时间(d) 组别 L* a* b* E
    0 对照组 2.39±0.14Fa 0.00±0.14Ba 2.70±0.18Fa
    1 对照组 61.45±0.13Ef 2.10±0.02Aa 14.48±0.05Aa 60.26±0.34Ee
    FC9+Lc37 94.63±0.03Ae −0.06±0.10Db 5.75±0.11Eb 92.29±0.17Ad
    FC9+Lp90 97.70±0.05Bd −0.85±0.01Cf 4.12±0.02Ac 95.32±0.14Bc
    FC9+Ba68 98.60±0.02Cc −0.82±0.24Df 3.92±0.02Ac 96.23±0.14Db
    FC9+La85 97.75±0.10Cd −0.39±0.05Ad 3.93±0.03Ac 95.37±0.24Bc
    FC9+Lb57 99.37±0.03Ab −0.48±0.02Ae 2.31±0.02Cd 96.99±0.17Aa
    FC9+Lf39 99.58±0.14Aa −0.26±0.17Ac 1.43±0.10Ce 97.20±0.23Aa
    2 对照组 85.62±0.08Df −0.21±0.05Cb 10.04±0.01Ba 83.55±0.13Dd
    FC9+Lc37 90.73±0.01Be 0.45±0.12Ca 8.82±0.31Db 88.56±0.17Bc
    FC9+Lp90 99.02±0.01Ad −0.50±0.07Ac 2.53±0.36Cd 96.64±0.14Ab
    FC9+Ba68 99.10±0.01Bc −0.27±0.08Ab 1.86±0.19Ee 96.72±0.13Cb
    FC9+La85 99.61±0.04ABa −0.65±0.07Bc 2.53±0.06Cd 97.23±0.14Aa
    FC9+Lb57 99.01±0.08Bd −0.54±0.11ABc 2.72±0.03Bc 96.62±0.21Bb
    FC9+Lf39 99.47±0.08Ab −0.30±0.11Ab 1.56±0.03Cf 97.09±0.14Aa
    3 对照组 86.52±0.04Cf −0.47±0.17Db 8.70±0.02Db 84.35±0.14Cd
    FC9+Lc37 74.18±0.01Dg 1.87±0.03Ba 12.74±0.04Ca 72.52±0.19De
    FC9+Lp90 98.82±0.01Ae −0.80±0.14BCe 3.88±0.18ABc 96.44±0.14Ac
    FC9+Ba68 99.47±0.01Ab −0.55±0.01Bbc 2.30±0.27Df 97.08±0.14Aab
    FC9+La85 99.70±0.03ABa −0.66±0.09Bcd 2.55±0.04Ce 97.31±0.28Aa
    FC9+Lb57 99.01±0.04Bd −0.48±0.01Ab 2.40±0.02Cf 96.63±0.16Bc
    FC9+Lf39 99.38±0.16Ac −0.70±0.06Bde 2.96±0.02ABd 96.99±0.32ABb
    4 对照组 91.26±0.06Ac −0.82±0.04Fd 7.89±0.02Eb 89.03±0.14Ad
    FC9+Lc37 71.86±0.42Ed 2.20±0.02Aa 14.04±0.02Ba 70.43±0.37Ee
    FC9+Lp90 97.25±0.54Cb −0.69±0.04Bc 3.70±0.13Bc 94.87±0.45Cc
    FC9+Ba68 99.38±0.18Aa −0.70±0.03Cc 2.79±0.02Cd 97.00±0.12ABab
    FC9+La85 99.48±0.25Ba −0.71±0.02BCc 2.82±0.06BCd 97.10±0.17Aa
    FC9+Lb57 98.97±0.18Ba −0.58±0.02ABb 2.80±0.03Bd 96.59±0.19Bb
    FC9+Lf39 99.02±0.25Ba −0.64±0.02Bc 2.85±0.05ABd 96.64±0.41Cab
    5 对照组 89.73±0.03Be −0.66±0.02Eb 9.17±0.15Cb 87.59±0.19Be
    FC9+Lc37 75.41±0.04Cf 2.16±0.02Aa 14.45±0.02Aa 74.00±0.16Cf
    FC9+Lp90 98.78±0.05Ac −0.88±0.02Cc 4.03±0.22Ac 96.40±0.28Ac
    FC9+Ba68 99.18±0.14Bb −0.72±0.01Cbc 3.16±0.17Be 96.80±0.15BCb
    FC9+La85 99.76±0.21Aa −0.78±0.01Cbc 2.90±0.01Bf 97.38±0.33Aa
    FC9+Lb57 98.45±0.14Cd −0.63±0.23Bb 3.45±0.12Ad 96.07±0.32Cd
    FC9+Lf39 99.13±0.14Bb −0.68±0.01Bb 3.09±0.04Aef 96.75±0.27BCb
    注:大写字母表示同一样品不同发酵时间具有显著性差异(P<0.05),小写字母表示同一发酵时间不同样品具有显著性差异(P<0.05)。
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    表  2   单一和混合菌株发酵羊奶酒中挥发性化合物的变化(mg/L)

    Table  2   Changes in volatile compounds of goat's milk wine fermented by single and mixed strains (mg/L)

    序号 挥发性化合物 对照组 FC9+Lc37 FC9+Lp90 FC9+Ba68 FC9+La85 FC9+Lb57 FC9+Lf39
    醇类化合物
    1 (S)-环氧丙醇 ND ND ND ND ND 65.58 ND
    2 乙醇 1411.39 1654.60 1104.78 1580.00 1325.82 1160.65 1277.93
    3 3-戊醇 ND ND ND ND 52.95 35.08 ND
    4 异丁醇 95.28 ND ND ND ND ND ND
    5 叔戊醇 8.93 2.89 9.95 ND ND 24.40 5.30
    6 异戊醇 612.40 299.17 340.21 374.06 425.65 305.03 321.77
    7 2-甲基-1-丁醇 188.58 84.65 94.10 100.89 115.07 88.46 99.08
    8 2-甲基-2,4-戊二醇 ND ND ND ND ND ND 1.99
    9 2,3-丁二醇 7.94 ND ND ND ND ND ND
    10 (2R,3R)-(-)-2,3-丁二醇 ND ND 5.43 1.90 ND ND 2.98
    11 2-庚醇 2.98 ND ND ND ND ND ND
    12 糠醇 ND ND ND ND 5.09 240.97 ND
    13 2,2-二甲基丁醇 11.91 12.51 ND 12.37 ND ND ND
    14 3-甲基-3-辛醇 ND ND 2.71 ND ND ND ND
    15 β-苯乙醇 59.55 26.94 36.19 34.26 53.97 73.21 10.60
    16 1-五烯-3-醇 27.79 27.90 22.62 ND 34.62 ND 8.28
    总计 2426.76 2108.65 1616.00 2103.49 2013.17 1993.38 1727.94
    酸类化合物
    17 L-乳酸 41.69 ND ND ND ND ND ND
    18 乙酸 20.84 14.43 24.43 ND 25.82 28.83 28.83
    19 己酸 ND 4.81 3.62 ND 5.09 ND 3.31
    20 正庚酸 2.98 ND ND ND ND ND ND
    21 苯甲酸 ND ND 8.14 3.81 3.60 ND ND
    总计 65.51 19.24 36.19 3.81 34.52 28.83 32.14
    酮类化合物
    22 3-甲基-2-庚酮 1.99 1.92 1.81 1.90 ND ND 1.66
    23 羟丙酮 ND ND ND ND ND 8.08 ND
    24 环戊酮 ND ND ND ND ND 8.24 ND
    25 2-庚酮 ND 2.89 1.81 3.80 ND ND 2.32
    26 环己酮 ND ND ND ND ND 2.44 ND
    27 4-异丁氧基-2-丁酮 11.91 ND ND ND ND ND ND
    28 苯乙酮 4.96 4.81 4.52 3.81 ND ND 0.99
    29 2,5-二甲基-4-羟基-3(2H)-呋喃酮 ND ND ND ND ND 3.42 ND
    30 2-甲基-3-羟基-γ-吡喃酮 ND ND ND ND 64.15 35.99 ND
    31 2,3-二氢-3,5二羟基-6-甲基-4H-吡喃-4-酮 ND ND ND ND 38.70 42.40 ND
    32 3,4-二甲基苯乙酮 ND ND ND ND 9.16 ND ND
    33 2',5'-二羟基苯丙酮 ND ND ND ND ND 21.35 ND
    总计 18.86 9.62 8.14 9.51 112.01 121.92 4.97
    酯类化合物
    34 乙酸乙酯 197.52 238.57 189.11 167.52 235.23 172.34 127.58
    35 乙酸丙酯 ND ND ND ND ND ND 1.33
    36 乙酸异丁酯 ND ND ND ND ND 22.88 12.92
    37 乙酸丁酯 ND 10.58 5.43 5.71 ND ND ND
    38 乳酸异丁酯 ND ND ND ND ND ND 1.33
    39 丁酸乙酯 11.91 8.66 5.43 5.71 6.11 ND 5.63
    40 乳酸乙酯 ND ND ND ND ND ND 0.99
    41 乙酸异戊酯 137.96 149.11 74.20 79.00 165.98 97.61 73.90
    42 2-甲基丁基乙酸酯 18.86 21.16 9.95 10.47 20.37 15.25 9.94
    43 γ-丁内酯 ND ND ND ND 10.18 ND ND
    44 己酸乙酯 ND ND ND ND ND ND 29.49
    45 3-呋喃甲酸甲酯 ND ND ND ND ND 56.43 ND
    46 辛酸乙酯 31.76 67.34 32.57 26.65 35.64 ND 4.97
    47 乙酸苯乙酯 1.99 1.92 ND 1.90 5.09 21.35 0.66
    48 癸酸乙酯 2.98 11.54 4.52 ND ND ND ND
    总计 402.97 508.88 321.21 296.96 478.60 385.87 268.75
    醛类化合物
    49 异戊醛 ND ND ND 0.95 ND ND 3.65
    50 糠醛 ND ND ND ND ND 7.78 ND
    51 苯甲醛 ND ND ND ND ND ND 4.31
    52 3,5-二甲基苯甲醛 19.85 20.20 13.57 ND ND ND ND
    53 间苯二甲醛 1.99 ND 3.62 ND ND ND ND
    54 5-羟甲基糠醛 ND ND ND ND ND 6.95 ND
    总计 21.84 20.20 17.19 0.95 0.00 14.73 7.95
    共计 2935.93 2666.60 1998.74 2414.72 2688.30 2544.73 1341.75
    注:结果为三个独立重复的平均值;标准差均小于平均值的10%;“ND”表示未检出。
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出版历程
  • 收稿日期:  2024-02-26
  • 网络出版日期:  2024-09-25
  • 刊出日期:  2024-11-30

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