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中国精品科技期刊2020

凝结魏茨曼氏菌BC99应急能量棒研制及抗疲劳效应研究

郭毫单, 吴影, 韦玉琼, 曹力, 白周亚, 樊秋霞, 彭楠, 古绍彬

郭毫单,吴影,韦玉琼,等. 凝结魏茨曼氏菌BC99应急能量棒研制及抗疲劳效应研究[J]. 食品工业科技,2025,46(1):218−230. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2024010361.
引用本文: 郭毫单,吴影,韦玉琼,等. 凝结魏茨曼氏菌BC99应急能量棒研制及抗疲劳效应研究[J]. 食品工业科技,2025,46(1):218−230. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2024010361.
GUO Haodan, WU Ying, WEI Yuqiong, et al. Preparation and Anti-fatigue Function of Weizmannia coagulans BC99 Emergency Energy Bar[J]. Science and Technology of Food Industry, 2025, 46(1): 218−230. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2024010361.
Citation: GUO Haodan, WU Ying, WEI Yuqiong, et al. Preparation and Anti-fatigue Function of Weizmannia coagulans BC99 Emergency Energy Bar[J]. Science and Technology of Food Industry, 2025, 46(1): 218−230. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2024010361.

凝结魏茨曼氏菌BC99应急能量棒研制及抗疲劳效应研究

基金项目: 国家自然基金青年基金项目(32302172);河南省重大科技专项项目(231100310200);河南省重点研发项目(221111111400)。
详细信息
    作者简介:

    郭毫单(1999−)(ORCID:0009−0007−7189−8515),女,硕士,研究方向:功能食品开发,E-mail:1720143650@qq.com

    通讯作者:

    古绍彬(1975−)(ORCID:0000−0002−2283−0318),男,博士,教授,研究方向:食品生物技术,食品营养与健康,E-mail:shaobingu@haust.edu.cnshaobingu@126.com

  • 中图分类号: TS201.3

Preparation and Anti-fatigue Function of Weizmannia coagulans BC99 Emergency Energy Bar

  • 摘要: 目的:本研究旨在开发一种具有高营养、高能量、抗疲劳的益生菌应急能量棒。方法:以感官评分为响应值,采用 Box-Behnken 设计试验对能量棒夹心工艺进行优化,测定产品的蛋白质、脂肪、碳水化合物、水分、灰分、粗纤维含量、氨基酸组成、脂肪酸组成。通过连续3周游泳训练构建疲劳小鼠模型,检测小鼠游泳力竭时间、糖原含量及血清中疲劳因子含量、炎症因子含量、氧化应激因子含量,研究益生菌能量棒的抗疲劳功能。结果:益生菌能量棒夹心最优制作条件为:坚果添加量35 g,燕麦片添加量45 g,奇亚籽添加量15 g,糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖)2.0,加工时间为9.0 min。在此条件下,凝结魏茨曼氏菌BC99(Weizmannia coagulans BC99)能量棒夹心的感官评分为93分;包衣涂层中含凝结魏茨曼氏菌BC99活菌数1.43×108 CFU/g,营养成分测定表明,能量棒必需氨基酸和不饱和脂肪酸含量丰富。益生菌能量棒干预结果显示,该产品能显著提高机体肝糖原、肌糖原含量(P<0.05),显著提高葡萄糖代谢关键酶己糖激酶水平(P<0.05),显著降低血清中疲劳因子乳酸、尿素氮水平(P<0.05),改善炎症因子白细胞介素-4、白细胞介素-1β水平,显著增加过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽含量(P<0.05),显著降低丙二醛含量(P<0.05)。结论:凝结魏茨曼氏菌BC99应急能量棒能够缓解机体疲劳感,改善炎症水平,降低运动引起的氧化应激损伤,本研究可为益生菌能量棒应急食品的开发提供技术和理论支撑。
    Abstract: Objective: This study aimed to design and fabricate a probiotic Weizmannia coagulans BC99 (W. coagulans BC99) emergency energy bar with high nutrition, high energy, and anti-fatigue properties. Methods: Taking sensory evaluation as the response value, the formulation of energy bar sandwich was optimized by a Box-Behnken design experiment. The contents of protein, fat, carbohydrate, moisture, ash, dietary fiber, and the composition of amino acid and fatty acid were analyzed. Subsequently, a fatigue mice model was established through three weeks of swimming training to evaluate the anti-fatigue function of the probiotic energy bar. The corresponding exhaustion time, glycogen content, and contents of fatigue factors, inflammatory cytokines, and oxidative stress factors in serum were measured. Results: The optimal conditions of the probiotic energy bar sandwich were as follows: 35 g of nuts, 45 g of oats, 15 g of chia seeds, syrup composite ratio (Wmaltose:Wwhite granulated sugar) of 2.0, and stirring time of 9.0 minutes. Under these conditions, the sensory evaluation of the energy bar sandwich containing W. coagulans BC99 probiotics was 93 score. The coating of the energy bar contained a count of W. coagulans BC99 of 1.43×108 CFU/g, and the nutritional analysis showed abundant essential amino acids and unsaturated fatty acids. The intervention with the W. coagulans BC99 energy bar resulted in significantly increased levels of liver glycogen and muscle glycogen (P<0.05), significantly enhanced glucose metabolism key enzyme hexokinase (P<0.05), significant reduction in fatigue factors lactate and urea nitrogen in serum (P<0.05), regulated levels of inflammatory cytokines interleukin-4 and interleukin-1β, significantly increased levels of catalase, superoxide dismutase, and glutathione (P<0.05), and significantly decreased levels of malondialdehyde (P<0.05). Conclusion: The W. coagulans BC99 probiotic emergency energy bar could alleviate fatigue, balanced the levels of inflammatory cytokines, and relieved exercise-induced oxidative stress damage. It is expected to provide technical and theoretical support for the development of probiotic-rich emergency food through this study.
  • 地震、海啸、台风、洪涝、疫情等自然灾害和突发事件的发生都会导致停水断电、食物短缺、物流中断等处境,有时突发状况还会持续数周甚至数月[1]。这些灾害的不断侵袭和重大疫情的多次暴发,使应急食品成为防灾防疫物资的重要组成部分。应急食品是指在发生自然灾害或突发事件时,用于保障人体基本生存所需的一类食品[2]。能量棒作为一种应急食品,营养均衡、食用方便、口感较好、便于运输储存、保存期长、能快速满足食用者对热量、营养物质等的需求。对身处防灾防疫一线处于高应激状态的工作人员而言,能够及时提供安全、营养全面、抗疲劳的应急食品尤为重要。然而,目前我国可以给一线应急人员提供的食品不仅种类少,且难以满足他们对能量、营养的要求,甚至出现一些不良副作用,如压缩饼干容易造成营养不良和便秘,严重时甚至导致结石发生等[3]。因此,在应急食品中补充适宜的食品功能因子至关重要。

    益生菌经常被添加在食品中增加其功能性。例如,将乳酸菌应用于糖尿病患者特医食品中制作益生菌杂粮面包,具有调节肠道菌群、促进胰岛素分泌、增强血糖调节等功效[4]。凝结魏茨曼氏菌(Weizmannia coagulans)作为我国可用于食品名单目录的芽孢杆菌[5],除具有一般益生菌的功能外,还具有耐高温、耐酸、耐胆盐等特点,其代谢过程中产生的多种酶可提升机体消化水平,具有改善人体胃肠道微生态[6]、提高机体免疫力[7]、降低血糖和胆固醇[8]功能,可应用在不同食品中。有研究发现,凝结魏茨曼氏菌B.C-39及其复合微生态制剂可有效改善小鼠便秘[9];凝结魏茨曼氏菌CGMCC 9951通过增强疲劳小鼠体内糖代谢水平,提升运动耐力,发挥抗疲劳的功效[10]。凝结魏茨曼氏菌BC99是从健康婴儿粪便中筛选的优良菌株[11],但关于其抗疲劳效果还有待进一步研究。

    因此,本研究基于对能量棒的能量、营养及抗疲劳等要求,拟在能量棒中加入凝结魏茨曼氏菌BC99增加其功能性。以蛋白质含量丰富的坚果、粗纤维含量丰富的燕麦片、不饱和脂肪酸含量较高的奇亚籽为主要原料,在单因素实验基础上,以感官评分为响应值,通过响应面优化试验确定凝结魏茨曼氏菌应急能量棒最佳工艺条件,通过动物实验模拟应急环境下,小鼠服用益生菌能量棒后机体供能和抗疲劳的变化。以期开发出一种在应急条件下使用的营养齐全、食用方便、具有抗疲劳效应的益生菌能量棒,为应急食品的开发提供有益的借鉴。

    凝结魏茨曼氏菌BC99菌粉 微康益生菌股份有限公司;混合坚果(14%核桃仁、10%巴旦木、6%榛子仁、7%腰果、15%南瓜籽、15%绿葡萄干、11%蔓越莓干、13%玫瑰红葡萄糖干、9%黑加仑葡萄干) 安徽省憨豆熊电子商务有限公司;燕麦片 石家庄保元食品有限公司;奇亚籽 北京市金禾绿源农业科技有限公司;麦芽糖 芜湖市同力食品有限公司;白砂糖 洛阳市大张超市;可可液块、可可脂 安徽巧缘食品有限公司;大豆卵磷脂 河南颐美客生物科技有限公司;蜂蜜 上海冠生园食品有限公司;水解氨基酸标品 色谱纯,德国曼默博尔公司;37种脂肪酸甲酯混标 色谱纯,美国Supelco公司;60只6周龄KM雄鼠(33±2 g) 郑州大学动物实验中心,实验动物许可证号:SCXK(京)2019-0010);大小鼠维持饲料 北京科澳协力饲料有限公司;乳酸(lactic acid,LD)检测试剂盒、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测试剂盒、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)检测试剂盒、己糖激酶(hexokinase,HK)检测试剂盒、糖原检测试剂盒、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)检测试剂盒、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)检测试剂盒 南京建成生物工程研究所;超氧化物歧化酶检测试剂盒(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)检测试剂盒、谷胱甘肽(glutathione,GSH)检测试剂盒、丙二醛(malondialdehyde,MDA)检测试剂盒 上海生工生物工程股份有限公司。

    L13-Y21破壁机 九阳(Joyoung)股份有限公司;MYP2011-100大功率电动搅拌器 上海梅颖浦仪器制造有限公司;YXO-LS-50SⅡ高压蒸汽灭菌锅 上海博迅实业有限公司医疗设备厂;电磁炉 格力电器股份有限公司;NP-59巧克力浇注机 广州新动力设备制造有限公司;HH-2恒温水浴锅 力辰仪器科技有限公司;GHP600恒温培养箱 上海天由仪器科技有限公司;A300氨基酸自动分析仪 德国曼默博尔公司;TSQ900气相色谱-质谱联用仪、Multiskan FC 酶标仪 美国Thermo Fisher公司;D3024R 高速冷冻离心机 美国赛洛捷克公司。

    复配糖浆→糖浆熬煮→预混原料→加热搅拌→能量棒夹心→初次冷却→制备包衣→添加凝结魏茨曼氏菌BC99→敷外皮→冷却→成品。

    操作要点:

    复配糖浆及糖浆熬煮:固定麦芽糖和白砂糖总量为30 g,以麦芽糖20 g和白砂糖10 g溶于50 mL蒸馏水,于电磁炉300 W熬煮9 min,制成复合糖浆,此时糖浆复合比W麦芽糖:W白砂糖=2.0。

    加热搅拌:取坚果35 g、燕麦片45 g、奇亚籽10 g粉碎加入30 mL糖浆中,电动搅拌器100 r/min加工搅拌9 min,倒入模具中冷却至室温。

    包衣:以能量棒夹心质量为100%,取40%可可液块、20%可可脂、35%蜂蜜、5%大豆卵磷脂50~55 ℃下水浴加热熔化,冷却至37 ℃添加2%凝结魏茨曼氏菌BC99菌粉(1011 CFU/g),电动搅拌器100 r/min继续搅拌,浇注机均匀地浇注在能量棒表面制成涂层,0 ℃冷却至凝固,脱模。

    固定坚果添加量为35 g,奇亚籽添加量10 g,糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖)2.0,加工时间9.0 min,设定燕麦片添加量25、35、45、55、65 g;固定坚果添加量为35 g,燕麦片添加量45 g,糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖)2.0,加工时间9.0 min,设定奇亚籽添加量5、10、15、20、25 g;固定坚果添加量为35 g,燕麦片添加量45 g,奇亚籽添加量10 g、加工时间9.0 min,设定糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖)0.5、1.0、1.5、2.0、2.5;固定坚果添加量为35 g,燕麦片添加量45 g,奇亚籽添加量10 g,糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖)2.0,设定加工时间8.0、8.5、9.0、9.5、10.0 min,探究燕麦片添加量、奇亚籽添加量、糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖)、加工时间对益生菌能量棒感官评分的影响。

    根据单因素实验结果,响应面因素与水平设计见表1,以感官评分为响应值,采用响应面法进行 Box-Behnken设计试验。

    表  1  Box-Behnken设计试验因素水平
    Table  1.  Factors and levels in the Box-Behnken design
    因素 水平
    −1 0 1
    A燕麦片添加量(g) 35 45 55
    B奇亚籽添加量(g) 10 15 20
    C糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖 1.5 2.0 2.5
    D加工时间(min) 8.5 9.0 9.5
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    由20名食品相关专业研究人员组成评定小组(男女比例1:1),根据表2 益生菌能量棒的感官评价表[12]进行评定打分。开始评定的前60 min内,不沾烟酒等刺激性强的食品。样品之间吃适当的苏打饼干,并以清水漱口,间隔5 min。

    表  2  益生菌能量棒的感官评价表
    Table  2.  Sensory evaluation table of probiotic energy bars
    指标评价标准得分(分)
    形态
    (30分)
    外观完整、有规则,厚薄统一21~30
    外观较规则,少数厚薄有细微差别11~20
    外观不规则,表面无纹路,厚薄不一0~10
    色泽
    (15分)
    色泽均匀,表面有光泽且呈棕黄色或金黄色11~15
    色泽有变化,表面呈焦黄色,或出现过焦、
    过白的现象
    0~10
    组织
    (15分)
    剖面具有层次状,内部无气孔且大小均一11~15
    剖面层次状较不明显,内部有气孔,出现裂缝0~10
    口感
    (30分)
    口感酥脆,不粘牙,软硬适中,酸甜适中16~30
    口感粗糙,轻微粘牙,硬度偏大,偏甜或者偏酸11~15
    口感绵软,粘牙,硬度过大,甜度过大0~10
    香味
    (10分)
    有淡淡的焦糖的香气7~10
    香气不浓郁4~6
    无香味,或出现焦糊味1~3
    下载: 导出CSV 
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    具体工艺请参考1.2.1.1,固定原料添加量,搅拌时间为4 min时,考察凝结魏茨曼氏菌BC99的添加温度(35、37、39、41、43 ℃)对益生菌活菌数的影响;固定原料添加量,凝结魏茨曼氏菌BC99添加温度为37 ℃时,考察搅拌时间(4.0、4.5、5.0、5.5、6.0 min)对益生菌活菌数的影响。能量棒粉碎加无菌生理盐水制成匀浆(10% w/v),于37 ℃下,30 min,振荡均匀进行平板计数[13]

    益生菌能量棒营养成分组成按国标进行测定。蛋白质含量按GB 5009.5-2016《食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》第一法:凯氏定氮法测定;脂肪含量按GB 5009.6-2016《食品中脂肪含量的测定》第一法:索氏抽提法测定;碳水化合物含量、能量值按QB/T 2833-2006《运动营养食品 能量控制食品》测定;粗纤维含量按GB/T 5009.10-2003《植物类食品中粗纤维的测定》测定;水分含量按GB 5009.3-2016《食品安全国家标准 食品中水分的测定》第一法:直接干燥法测定;灰分含量按GB 5009.4-2016《食品中灰分的测定》第一法:食品中总灰分的测定;脂肪酸的测定按照GB 5009.168-2016《食品国家安全标准 食品中脂肪酸的测定》第二法:外标法测定。参考张涛等[14]的方法制备水解氨基酸,采用A300全自动氨基酸分析仪对能量棒样品的水解氨基酸组成和含量进行测定:选择锂盐体系,进样量:20 μL,流速:180 μL/min,柱温:40 ℃,反应器:70 ℃。

    60只6周龄SPF级KM小鼠随机分为对照组CON、模型组CSM、能量棒组BAR(不含菌)、低剂量益生菌能量棒组ML(1×105 CFU/g)、中剂量益生菌能量棒组MM(1×106 CFU/g)、高剂量益生菌能量棒组MH(1×107 CFU/g),每组10只。能量棒成品重新粉碎塑形至常规饲料形状,制作成益生菌含量不同的特殊饲料,对照组、模型组饲喂普通大小鼠维持饲料,能量棒试验组饲喂不同益生菌含量的特殊饲料,实验期间各组小鼠均自由进食饮水。

    除对照组外,其它组小鼠每天早上8:00在长60 cm、宽50 cm、高44 cm的自制游泳池进行15 min日常无负重游泳训练,维持3周,泳池水温25±1 ℃。该研究内容和过程遵循国际及国家颁布的有关生物医学研究所制订的伦理学标准(SYXK-(豫)2018-0010)。

    实验干预结束后,各组小鼠尾部负重10%的铅皮,记录小鼠力竭游泳时间,小鼠鼻尖浸没在水下6 s左右不上浮视为力竭。

    所有小鼠采用10%水合氯醛腹腔注射麻醉,注射量为0.1 mL/10 g,小鼠麻醉完全后,摘取小鼠眼球,用无菌离心管收集小鼠全血,以备后续实验使用。采用脱颈法处死小鼠,75%酒精消毒后置于超净工作台中,解剖分离小鼠肝脏组织和后腿骨骼肌组织,严格按照糖原试剂盒要求检测肝糖原和肌糖原含量。

    小鼠全血4 ℃,4000 r/min离心20 min,取小鼠血清按照试剂盒操作测定LD、LDH、BUN、HK、IL-4、IL-1β、GSH、SOD、MDA、CAT含量。

    实验重复3~6次,以平均值±标准差表示实验结果。使用Origin 2021软件作图,SPSS 25.0软件进行统计和方差分析,Design-Expert 8.0.6软件进行响应面分析。

    图1可知,随着燕麦片添加量增多,能量棒夹心感官评分出现先上升后下降的趋势。燕麦片中膳食纤维含量丰富,膳食纤维具有良好的粘性和膨胀性,可以在加工过程中形成紧密的质地,使能量棒在成型后不易破碎或变形[15]。当燕麦片含量低于45 g时,能量棒夹心中膳食纤维含量较低,在加工过程中与其他成分结合较弱,能量棒夹心形态软糯不粘稠,组织松散,口感下降导致感官评分逐渐下降。当燕麦片添加量45 g时,能量棒夹心稳定性和紧密度最佳,外观形态完整,组织均一,口感酥脆,因此感官评分最佳,达到87.50分。当能量棒夹心在燕麦片添加量为55、65 g时,能量棒夹心内部组织过于紧密导致咀嚼难度增大,口感下降,感官评分降低。因此,选择35、45、55 g作为后续响应面研究水平。

    图  1  燕麦片添加量对能量棒夹心感官品质的影响
    Figure  1.  Effect of the amount of oatmeal added on the sensory quality of energy bar sandwich

    奇亚籽中水溶性膳食纤维含量在5%~10%。奇亚籽吸水后会膨胀形成凝胶颗粒,不仅可以增强能量棒夹心内部成分的凝聚力,还可以使其结构更加稳定[16]。由图2可知,当奇亚籽添加量低于15 g时,随着奇亚籽添加量的增加,奇亚籽凝胶含量逐渐增加使得能量棒夹心成分结合更加紧密,凝胶颗粒填补能量棒夹心内部空隙,使能量棒夹心的组织、形态、色泽评分逐渐增加,能量棒夹心感官评分逐渐升高。当奇亚籽添加量达到15 g时,感官评分最佳,达到90.10分。当奇亚籽添加量超过15 g时,能量棒夹心中奇亚籽凝胶含量过高,掩盖了其他原料的风味,咀嚼后粘附在口腔和牙齿中,造成能量棒夹心感官评分下降。因此,选取10、15、20 g作为后续响应面研究水平。

    图  2  奇亚籽添加量对能量棒夹心感官品质的影响
    Figure  2.  Effect of the chia seed added on the sensory quality of energy bar sandwich

    能量棒夹心糖浆由麦芽糖和白砂糖组成,麦芽糖具有较高的结晶倾向,而白砂糖结晶度相对较低,当麦芽糖比例较高时,糖浆在冷却过程中可能形成较大的结晶体,影响能量棒夹心的形态稳定性[17]。由图3可知,不同复合比糖浆结晶程度不同,对能量棒夹心的形态、组织、口感、香气有较大影响。当糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖)低于2.0时,麦芽糖含量较低,糖浆的流动性较大,能量棒夹心中主要组成成分结合疏松,能量棒夹心口感粘牙致感官评分逐渐降低。当糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖)为2.0时,能量棒夹心形态稳定,组织结构紧实,甜度适中,麦芽糖焦香味散发出来,呈现出独特的风味,感官评分最佳,达到90.40分。当糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖)为2.5时,能量棒夹心复合糖浆在冷却过程中出现结晶情况,组织过于紧密,能量棒夹心表面不平整,口感黏腻,影响了能量棒夹心食用的舒适度,感官评分下降。因此,选取1.5、2.0、2.5作为后续响应面研究水平。

    图  3  糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖)对能量棒夹心感官品质的影响
    Figure  3.  Effect of the syrup compound ratio on the sensory quality of energy bar sandwich

    加工时间对能量棒夹心成品感官评分的影响结果见图4。随着加工时间的增加,原料中水分蒸发,糖浆中碳水化合物分子排列更加紧密,分子间相互作用增强,燕麦、坚果、奇亚籽等原料组织更加均匀紧密,使得能量棒夹心形态稳定,且加工过程中能够激发原料中的醛类、酮类等香味物质,碳水化合物在加工过程中发生焦糖化反应[18],使能量棒夹心色泽加深。当加工时间为9.0 min时,能量棒夹心外观完整,厚薄统一,表面呈现金黄色,组织紧密无气孔,有淡淡焦糖的香味,感官评分达到最佳为94.30分。当加工时间超过9.0 min时,成品组织过于紧密,失去原有的疏松感,碳水化合物进一步发生聚合反应,颜色变为褐色,出现焦糊味导致感官评分下降。因此,选取8.5、9.0、9.5 min作为后续响应面研究水平。

    图  4  加工时间对能量棒夹心感官品质的影响
    Figure  4.  Effect of the process time on the sensory quality of energy bar sandwich

    表3数据模型进行多元回归拟合,得到能量棒夹心感官评分(Y)的二次方程模型:Y= 93.75+3.28A+1.28B+1.90C+0.39D−2.89AB−0.87AC+4.22AD−2.60BC−3.89BD−2.35CD−8.42A2−7.91B2−5.71C2−6.37D2

    表  3  能量棒夹心感官评分模型响应面方案及结果
    Table  3.  Response surface scheme and results of energy bar sandwich sensory scoring model
    试验号 A燕麦
    添加量(g)
    B奇亚籽
    添加量(g)
    C糖浆复合比
    (W麦芽糖:W白砂糖
    D加工时间
    (min)
    感官评分
    (分)
    1 35 10 2.0 9.0 70.95±1.23
    2 55 10 2.0 9.0 82.26±1.76
    3 35 20 2.0 9.0 71.62±2.35
    4 55 20 2.0 9.0 70.37±1.89
    5 45 15 1.5 8.5 70.31±2.12
    6 45 15 2.5 8.5 83.91±1.67
    7 45 15 1.5 9.5 83.39±2.98
    8 45 15 2.5 9.5 82.11±1.45
    9 35 15 2.0 8.5 79.13±2.56
    10 55 15 2.0 8.5 82.54±1.23
    11 35 15 2.0 9.5 70.11±2.89
    12 55 15 2.0 9.5 86.46±1.77
    13 45 10 1.5 9.0 74.28±2.01
    14 45 20 1.5 9.0 85.64±1.90
    15 45 10 2.5 9.0 82.67±2.43
    16 45 20 2.5 9.0 80.00±1.32
    17 35 15 1.5 9.0 76.64±2.21
    18 55 15 1.5 9.0 81.95±1.10
    19 35 15 2.5 9.0 80.53±2.65
    20 55 15 2.5 9.0 85.01±1.09
    21 45 10 2.0 8.5 72.65±2.11
    22 45 20 2.0 8.5 86.24±1.66
    23 45 10 2.0 9.5 82.00±2.34
    24 45 20 2.0 9.5 83.21±1.87
    25 45 15 2.0 9.0 93.36±2.01
    26 45 15 2.0 9.0 94.21±1.22
    27 45 15 2.0 9.0 90.62±2.95
    28 45 15 2.0 9.0 92.34±1.42
    29 45 15 2.0 9.0 95.20±1.21
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    回归模型方差分析表见表4。由表4可得能量棒夹心感官评分的回归模型显著性检验P<0.0001,说明模型极显著,表明二次回归模型与实际试验拟合性充分,感官评分回归模型失拟性检验P=0.2406(P>0.05),模型失拟不显著,表明此模型可用于试验拟合,实验误差小。回归诊断显示,决定系数R2=0.9783,信噪比Adeq precisior=23.1988,表明模型的拟合度和可信度均较高。Y的变异系数C.V.值为1.74%,说明感官评分准确度和可信度较高。综上所述,此模型拟合程度良好,试验误差小,适合用来对能量棒夹心感官评分进行分析和预测。回归系数显著性表明,在所取因素水平范围内,各因素对感官评分的影响顺序为:奇亚籽添加量<加工时间<糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖)<燕麦添加量。

    表  4  能量棒夹心响应面回归模型方差分析
    Table  4.  Analysis of variance of regression model of energy bar sandwich sensory scoring model
    方差来源 平方 自由度 均方差 F P 显著性
    模型 1284.80 14 91.77 45.18 <0.0001 **
    A 128.77 1 128.77 63.40 <0.0001 **
    B 1.86 1 1.86 0.92 0.3543 不显著
    C 43.40 1 43.40 21.37 0.0004 **
    D 19.76 1 19.76 9.73 0.0075 **
    AB 33.41 1 33.41 16.45 0.0012 **
    AC 3.03 1 3.03 1.49 0.2423 不显著
    AD 71.32 1 71.32 35.11 <0.0001 **
    BC 26.99 1 26.99 13.29 0.0026 **
    BD 60.61 1 60.61 29.84 <0.0001 **
    CD 22.04 1 22.04 10.85 0.0053 **
    459.88 1 459.88 226.42 <0.0001 **
    405.73 1 405.73 199.76 <0.0001 **
    211.58 1 211.58 104.17 <0.0001 **
    262.80 1 262.80 129.39 <0.0001 **
    残差 28.44 14 2.03
    失拟项 23.96 10 2.40 2.14 0.2406 不显著
    纯误差 4.47 4 1.12
    总离差 1313.23 28
    R2=0.9783 R2Adj=0.9567
    注:*表示差异显著(P<0.05),**表示差异极显著(P<0.01),P>0.05为不显著。
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    两两因素交互作用对能量棒夹心感官评分影响的响应面优化图见图5,交互项AB、AD、BC、BD、CD的曲面倾斜度较大,坡度较陡,说明其影响显著(P<0.05),AC影响不显著,各因素间交互作用对能量棒的感官评分的影响大小依次为AD>BD>AB>BC>CD>AC。

    图  5  交互作用对能量棒夹心感官评分影响的响应面优化图
    Figure  5.  Response surface optimization plot of the effect of interaction on sensory score of energy bar sandwich

    用回归模型预测的能量棒夹心最佳工艺条件为燕麦片添加量45.06 g、奇亚籽添加量15.02 g、糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖)2.07、加工时间9.04 min。考虑实际操作情况与设备参数状况,确定能量棒夹心的工艺条件:燕麦片添加量45 g、奇亚籽添加量15 g、糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖)2.0、加工时间9 min,此时感官得分为93.00±1.14分,与预测值94.23相差范围在5%内。综上所述,该工艺的最佳条件试验结果可靠,具有一定的实际应用价值。

    为保证益生菌能量棒涂层包衣中益生菌的活菌数量,对凝结魏茨曼氏菌BC99的添加温度、添加后搅拌时间进行优化。结果如图6所示。随着添加温度升高,包被后BC99活菌数呈现先升高后下降的趋势。涂层中含有丰富的可可脂成分,可在菌体周围形成保护层,进而对外界胁迫环境起到缓冲作用[19]。巧克力浆在不同的温度下会形成不同的网状晶体结构从而影响益生菌的包埋效果[20]。在凝结魏茨曼氏菌BC99添加温度为37 ℃时,可能是因为凝结魏茨曼氏菌与可可脂Ⅵ晶体形成稳定性结构,能量棒中活菌数最高,达到了1.33×108 CFU/g。因此,选取37 ℃作为最佳添加温度。

    图  6  添加温度和搅拌时间对活菌数的影响
    注:图中字母不同表示差异显著(P<0.05)。
    Figure  6.  Effects of adding temperature and stirring time on the number of viable bacteria

    此外,还研究了在37 ℃添加BC99时,搅拌时间对活菌数的影响,结果表明在搅拌时间为5 min时,能量棒中活菌数达到了最高为1.43×108 CFU/g。初始搅拌时间有助于益生菌的分散和包埋且增加了涂层与氧气的接触,因此活菌数升高,随着搅拌时间的继续增加,体系中活菌数和氧含量达到了最大,继续搅拌产生机械损伤导致菌体破裂和损伤,活菌数下降。当搅拌时间为5 min时,体系中的活菌数最高,因此,选取5 min作为最佳搅拌时间。在此条件下制成的最终能量棒成品外观完整,色泽均匀,口感酥脆,软硬适中,并且含有凝结魏茨曼氏菌BC99 1.43×108 CFU/g(图7)。

    图  7  凝结魏茨曼氏菌BC99应急能量棒成品图
    Figure  7.  Final product drawing of Weizmannia coagulans BC99 emergency energy bar

    益生菌应急能量棒营养成分组成结果见表5。碳水化合物是人体处于应激及饥饿状态时首要的可快速补充能量的营养素,可通过糖原分解、氧化代谢等途径在应急环境下迅速为机体提供ATP[21]。能量棒中碳水化合物含量为41.83±1.24 g/100 g,每100 g能量棒可提供2101.62±6.57 kJ能量,给予机体足够的能量及营养素供给。

    表  5  能量棒营养成分组成结果
    Table  5.  Results of the nutritional composition of energy bars
    成分含量
    蛋白质(g/100 g)14.66±0.14
    脂肪(g/100 g)29.77±0.69
    碳水化合物(g/100 g)41.83±1.24
    粗纤维(g/100 g)5.28±0.03
    水分(g/100 g)5.69±0.49
    灰分(g/100 g)2.68±0.06
    能量(kJ/100 g)2101.62±6.57
    益生菌(CFU/g)1.43×108
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    常见的应急食品中碳水化合物的主要来源是葡萄糖、白砂糖等,不利于长时间的维持血糖水平稳定及能量供应,脂肪是能量受限时的主要能量来源,饥饿时的能量代谢逐步转化为以脂肪的分解代谢为主[22]。能量棒中脂肪含量为29.77±0.69 g/100 g,其中不饱和脂肪酸占脂肪总量的80.65%±0.69%,高于市面上大多数澳洲坚果类食品的不饱和脂肪酸含量30.41%~63.69%[23],能够在应急环境下为机体提供所需营养物质。脂肪酸中油酸含量占41.00%±0.25%(表6),研究显示,油酸通过诱导骨骼肌细胞AMPK活性增加,缓解饱和脂肪酸诱导的骨骼肌细胞内质网应激、炎症反应和胰岛素抵抗[24],并且通过增强线粒体内膜中的电子传递链Ⅰ,提高细胞中ATP浓度,激活线粒体能量代谢[25]。亚油酸能够调节肠道微生物群及肠道微环境,改善人体肠道环境失调[26],能量棒中亚油酸占脂肪酸含量的33.72%±0.70%,乳酸菌、丁酸菌、瘤胃菌等细菌可以通过体内的共轭亚油酸水合酶、羟基脂肪酸脱氢酶和共轭亚油酸乙酰乙酸脱羧酶组成的亚油酸异构酶系将亚油酸转化为共轭亚油酸[2728],从而对机体的能量代谢及抗疲劳能力产生影响[2930]

    表  6  能量棒脂肪酸主要组成成分分析
    Table  6.  Analysis of main components of fatty acids in energy bar
    成分脂肪酸相对脂肪酸含量
    (%)
    含量
    (g/100 g)
    饱和脂肪酸SFA棕榈酸C16:019.35±0.695.75±0.21
    硬脂酸C18:03.67±0.301.10±0.09
    单不饱和脂肪酸MUFA油酸C18:141.00±0.2512.22±0.08
    多不饱和脂肪酸PUFA亚油酸C18:233.72±0.7010.06±0.21
    亚麻酸C18:33.20±0.040.95±0.01
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    能量棒中粗纤维含量为5.28±0.03 g/100 g,主要来源于燕麦片、奇亚籽等原料,具有调节血糖血脂、增加饱腹感的功效[3132]。以上结果表明凝结魏茨曼氏菌BC99能量棒可有效地给人体提供膳食中所需营养物质,调节机体能量代谢,缓解应急环境下的饥饿现象。

    当饥饿状态下糖原储备减少、脂肪分解不足,难以满足机体生存能量需求时,蛋白质开始转向作为能量来源,在消化过程中被分解为氨基酸,氨基酸通过糖异生途径转化为葡萄糖[33]。应急能量棒中水解氨基酸的组成及含量见表7,应急能量棒中含有12种氨基酸组分,氨基酸总量达到了11.52±0.40 g/100 g,必需氨基酸占水解氨基酸总量的60.68%左右。其中蛋氨酸和缬氨酸含量最高,蛋氨酸又称甲硫氨酸,在细胞中易被氧化产生S-腺苷甲硫氨酸,作为信号分子通过mTOR信号通路抑制线粒体的增殖和自噬[34]。缬氨酸作为支链氨基酸之一,可调节脂肪β氧化代谢调控相关基因LPLAcox1PPARα促进白色脂肪的合成与代谢,通过三羧酸循环参与体内蛋白质、脂肪、碳水化合物三大物质的相互转化,促进机体ATP的产生[35]

    表  7  能量棒水解氨基酸组成
    Table  7.  Hydrolyzed amino acid composition of energy bar
    氨基酸种类氨基酸名称总含量(g/100 g)
    必需氨基酸(g/100 g)蛋氨酸Met1.56±0.05
    赖氨酸Lys0.53±0.10
    异亮氨酸Ile0.81±0.05
    缬氨酸Val1.55±0.10
    亮氨酸Leu1.20±0.07
    苏氨酸Thr0.85±0.11
    苯丙氨酸Phe0.48±0.08
    半必需氨基酸(g/100 g)精氨酸Arg0.53±0.09
    非必需氨基酸(g/100 g)酪氨酸Tyr1.20±0.05
    甘氨酸Gly0.87±0.03
    丙氨酸Ala0.57±0.05
    脯氨酸Pro1.37±0.04
    必需氨基酸总量(g/100 g)6.99±0.45
    氨基酸总量(g/100 g)11.52±0.40
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    游泳力竭实验是抗疲劳研究中常用的方式之一,通过负重迫使小鼠游泳,考察益生菌应急能量棒对小鼠抗疲劳功能的影响。图8结果表明,与对照组相比,模型组小鼠力竭时间显著提高,说明游泳训练可以增加小鼠运动耐力,与模型组相比,能量棒组小鼠力竭时间显著提高了27.81%(P<0.05),说明饲喂能量棒能够显著提高疲劳小鼠的运动能力。而饲喂添加凝结魏茨曼氏菌BC99能量棒的小鼠,其运动提升能力更为显著,与模型组相比,中剂量的益生菌能量棒组小鼠力竭时间显著提高了60%(P<0.05),该结果表明BC99协助提升小鼠运动能力,在缓解小鼠疲劳程度方面发挥着重要作用。

    图  8  不同组小鼠游泳力竭时间
    注:组别间字母不同表示差异显著(P<0.05),图9~图12同。
    Figure  8.  Exhaustion time in swimming in different groups of mice

    肝糖原可在机体血糖不足时,直接分解生成葡萄糖,给细胞供能;肌糖原在机体运动时,通过糖酵解途径分解生成乳酸和ATP,肝糖原、肌糖原是机体运动时重要的能量来源[36]。结果如图9所示,与对照组相比,模型组小鼠肝糖原、肌糖原含量均显著性增加(P<0.05),说明运动训练通过提升肝糖原、肌糖原水平提升运动耐力,能量棒组小鼠肝糖原、肌糖原含量显著高于模型组(P<0.05),与能量棒组相比,各剂量益生菌能量棒组小鼠其体内肝糖原、肌糖的水平得到了进一步提高,均达到显著水平(P<0.05)。该结果表明,凝结魏茨曼氏菌BC99可通过提高肝脏中肝糖原含量及肌肉中肌糖原水平,从而显著提升小鼠运动抗疲劳能力。高翔等[37]研究发现地衣芽孢杆菌可以通过提升肝糖原、肌糖原含量发挥抗疲劳作用。温欣等[38]研究发现植物乳杆菌CCFF1280可以通过减少运动性疲劳代谢产物积累、增加糖原储备达到抗疲劳的功效。

    图  9  不同组小鼠糖原含量
    Figure  9.  Content of glycogen in different groups of mice

    在应急环境下长期超强度工作势必会导致乳酸的过度堆积,进而诱发严重的肌肉酸痛疲劳[39]。本研究分析了在强度运动条件下益生菌应急能量棒对机体乳酸积累的影响,结果如图10A所示,与模型组相比,饲喂添加了凝结魏茨曼氏菌BC99的能量棒的各组小鼠,机体中因代谢积累的乳酸得到了显著降低(P<0.05),且监测的乳酸脱氢酶活性也间接证实上述结果(图10B)。结果表明,凝结魏茨曼氏菌BC99可通过促进葡萄糖有氧代谢途径,进而减少乳酸积累,帮助机体缓解疲劳感。

    图  10  不同组小鼠血清疲劳因子含量
    注:A-乳酸(LD),B-乳酸脱氢酶(LHD),C-尿素(BUN),D-己糖激酶(HK)。
    Figure  10.  Content of fatigue factors in different groups of mouse serum

    尿素氮是蛋白质在有氧代谢中的产物,血清尿素氮含量过高会影响机体能量代谢效率,加重机体运动负荷[40]。由图10C可知,能量棒组血清中尿素氮含量显著低于模型组(P<0.05),说明能量棒可降低机体血清中尿素氮含量,缓解机体疲劳;中剂量益生菌能量棒组降低血清中尿素氮含量效果最好(P<0.05)。己糖激酶是糖酵解途径中的第一个限速酶,其含量与机体中ATP的利用密切相关[41]。由图10D可知,能量棒组己糖激酶含量显著高于模型组(P<0.05),中剂量、高剂量益生菌能量棒组己糖激酶含量均显著高于能量棒组(P<0.05),说明能量棒和添加凝结魏茨曼氏菌BC99的益生菌能量棒均能促进机体ATP的合成,且添加益生菌的效果更好。严中汉等[42]研究发现通过植物乳杆菌73L1干预亦可缓解高强度运动小鼠乳酸堆积和肌肉损伤。

    长时间高强度的运动导致疲劳发生,免疫系统异常激活,炎症因子水平紊乱,加重机体疲劳感[43]。IL-4主要由活化的T细胞、单核细胞、肥大细胞等合成分泌,可广泛抑制其他促炎因子及炎症介质的表达,促进抗炎因子分泌,有利于纠正炎症因子失衡[44]。IL-1β是一种高效的促炎细胞因子,与受体结合时会激活炎症细胞释放炎症介质,如前列腺素、白细胞介素6等,加重机体炎症水平[45]。有研究结果显示复合益生菌(嗜酸乳杆菌:干酪乳杆菌=1:1)干预可以明显促进肠粘膜细胞产生IL-4,降低血清中IL-1β水平,增强肠道屏障,发挥抗疲劳功效[46]

    图11可知,与对照组相比,模型组IL-4水平显著性升高(P<0.05),IL-1β水平也显著性升高(P<0.05),说明运动性疲劳触发了机体的炎症反应。与模型组相比,能量棒组可降低机体血清内促炎因子IL-1β水平,但结果差异不显著(P>0.05);益生菌能量棒中、高剂量组能显著降低血清中促炎因子IL-1β水平(P<0.05),显著提升抗炎因子IL-4含量(P<0.05)。这可能与凝结魏茨曼氏菌BC99改善肠道内容物,进而抑制炎症小体NLRP3的表达有关[47],表明凝结魏茨曼氏菌BC99可能通过减轻机体炎症水平,进而缓解机体疲劳,达到抗疲劳功效。JGER等[48]研究发现,链球菌和双歧杆菌复合可以降低机体血清中IL-6水平,缓解运动员运动后肌肉疲劳损伤。

    图  11  不同组小鼠血清炎症因子含量
    注:A-白细胞介素-4(IL-4),B-白细胞介素-1β(IL-1β)。
    Figure  11.  Content of inflammatory factor in different groups of mouse serum

    运动性疲劳的产生机制中,自由基理论被广泛研究。高强度高负荷的运动,导致机体氧化与抗氧化屏障受损,有害代谢物(ROS、MDA)积累,破坏细胞线粒体和细胞膜 [49]。SOD、CAT可催化ROS产生过氧化氢和氧气,缓解机体氧化应激损伤程度,GSH是谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的前体物质,GSH-Px可通过阻断机体的脂质过氧化保护细胞膜结构和细胞供能完整[50]

    图12可知,与对照组相比,模型组小鼠体内抗氧化代谢相关酶(CAT、SOD)显著升高(P<0.05),GSH含量显著升高(P<0.05),有害代谢物MDA积累显著增加(P<0.05),说明模型处理对小鼠机体造成了损伤,导致小鼠产生疲劳;与模型组相比,能量棒组、益生菌能量棒组MDA含量显著性降低(P<0.05),GSH、CAT、SOD含量显著性升高(P<0.05),说明能量棒能够给机体补充能量,缓解疲劳小鼠氧化应激受损程度;益生菌能量棒组比能量棒组MDA含量更低,且中剂量益生菌能量棒组效果更好,说明中剂量的凝结魏茨曼氏菌BC99能够更有效地缓解氧化应激损伤,达到抗疲劳的功效。JIANG等[51]研究发现植物乳杆菌SHY21-2也可以通过维持肠道屏障完整性抑制炎症反应和机体氧化应激水平。CUI等[52]利用芽孢杆菌、乳酸杆菌、汉逊酵母为菌种,接种发酵大豆,具有较强的抗氧化和抗疲劳活性。

    图  12  不同组小鼠血清氧化应激相关酶含量
    注:A-超氧化物歧化酶(SOD),B-过氧化氢酶(CAT),C-谷胱甘肽(GSH),D-丙二醛(MDA)。
    Figure  12.  Content of oxidative stress-related enzyme in different groups of mouse serum

    本试验以燕麦片、奇亚籽、坚果为原料,添加凝结魏茨曼氏菌包衣涂层,研制一种益生菌能量棒应急食品。采用响应面优化方法得到能量棒生产加工最佳工艺条件:燕麦片添加量45 g,奇亚籽添加量15 g,糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖)2.0,加工时间9.0 min,最终能量棒中凝结魏茨曼氏菌BC99活菌数达到1.43×108 CFU/g。小鼠实验表明益生菌能量棒能通过降低机体中疲劳因子(LD、LDH、BUN),提升糖原、已糖激酶含量缓解疲劳,调节机体炎症水平,缓解运动导致的氧化应激损伤。本研究可为凝结魏茨曼氏菌BC99能量棒的开发及功能性评价提供依据。

  • 图  1   燕麦片添加量对能量棒夹心感官品质的影响

    Figure  1.   Effect of the amount of oatmeal added on the sensory quality of energy bar sandwich

    图  2   奇亚籽添加量对能量棒夹心感官品质的影响

    Figure  2.   Effect of the chia seed added on the sensory quality of energy bar sandwich

    图  3   糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖)对能量棒夹心感官品质的影响

    Figure  3.   Effect of the syrup compound ratio on the sensory quality of energy bar sandwich

    图  4   加工时间对能量棒夹心感官品质的影响

    Figure  4.   Effect of the process time on the sensory quality of energy bar sandwich

    图  5   交互作用对能量棒夹心感官评分影响的响应面优化图

    Figure  5.   Response surface optimization plot of the effect of interaction on sensory score of energy bar sandwich

    图  6   添加温度和搅拌时间对活菌数的影响

    注:图中字母不同表示差异显著(P<0.05)。

    Figure  6.   Effects of adding temperature and stirring time on the number of viable bacteria

    图  7   凝结魏茨曼氏菌BC99应急能量棒成品图

    Figure  7.   Final product drawing of Weizmannia coagulans BC99 emergency energy bar

    图  8   不同组小鼠游泳力竭时间

    注:组别间字母不同表示差异显著(P<0.05),图9~图12同。

    Figure  8.   Exhaustion time in swimming in different groups of mice

    图  9   不同组小鼠糖原含量

    Figure  9.   Content of glycogen in different groups of mice

    图  10   不同组小鼠血清疲劳因子含量

    注:A-乳酸(LD),B-乳酸脱氢酶(LHD),C-尿素(BUN),D-己糖激酶(HK)。

    Figure  10.   Content of fatigue factors in different groups of mouse serum

    图  11   不同组小鼠血清炎症因子含量

    注:A-白细胞介素-4(IL-4),B-白细胞介素-1β(IL-1β)。

    Figure  11.   Content of inflammatory factor in different groups of mouse serum

    图  12   不同组小鼠血清氧化应激相关酶含量

    注:A-超氧化物歧化酶(SOD),B-过氧化氢酶(CAT),C-谷胱甘肽(GSH),D-丙二醛(MDA)。

    Figure  12.   Content of oxidative stress-related enzyme in different groups of mouse serum

    表  1   Box-Behnken设计试验因素水平

    Table  1   Factors and levels in the Box-Behnken design

    因素 水平
    −1 0 1
    A燕麦片添加量(g) 35 45 55
    B奇亚籽添加量(g) 10 15 20
    C糖浆复合比(W麦芽糖:W白砂糖 1.5 2.0 2.5
    D加工时间(min) 8.5 9.0 9.5
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    表  2   益生菌能量棒的感官评价表

    Table  2   Sensory evaluation table of probiotic energy bars

    指标评价标准得分(分)
    形态
    (30分)
    外观完整、有规则,厚薄统一21~30
    外观较规则,少数厚薄有细微差别11~20
    外观不规则,表面无纹路,厚薄不一0~10
    色泽
    (15分)
    色泽均匀,表面有光泽且呈棕黄色或金黄色11~15
    色泽有变化,表面呈焦黄色,或出现过焦、
    过白的现象
    0~10
    组织
    (15分)
    剖面具有层次状,内部无气孔且大小均一11~15
    剖面层次状较不明显,内部有气孔,出现裂缝0~10
    口感
    (30分)
    口感酥脆,不粘牙,软硬适中,酸甜适中16~30
    口感粗糙,轻微粘牙,硬度偏大,偏甜或者偏酸11~15
    口感绵软,粘牙,硬度过大,甜度过大0~10
    香味
    (10分)
    有淡淡的焦糖的香气7~10
    香气不浓郁4~6
    无香味,或出现焦糊味1~3
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    表  3   能量棒夹心感官评分模型响应面方案及结果

    Table  3   Response surface scheme and results of energy bar sandwich sensory scoring model

    试验号 A燕麦
    添加量(g)
    B奇亚籽
    添加量(g)
    C糖浆复合比
    (W麦芽糖:W白砂糖
    D加工时间
    (min)
    感官评分
    (分)
    1 35 10 2.0 9.0 70.95±1.23
    2 55 10 2.0 9.0 82.26±1.76
    3 35 20 2.0 9.0 71.62±2.35
    4 55 20 2.0 9.0 70.37±1.89
    5 45 15 1.5 8.5 70.31±2.12
    6 45 15 2.5 8.5 83.91±1.67
    7 45 15 1.5 9.5 83.39±2.98
    8 45 15 2.5 9.5 82.11±1.45
    9 35 15 2.0 8.5 79.13±2.56
    10 55 15 2.0 8.5 82.54±1.23
    11 35 15 2.0 9.5 70.11±2.89
    12 55 15 2.0 9.5 86.46±1.77
    13 45 10 1.5 9.0 74.28±2.01
    14 45 20 1.5 9.0 85.64±1.90
    15 45 10 2.5 9.0 82.67±2.43
    16 45 20 2.5 9.0 80.00±1.32
    17 35 15 1.5 9.0 76.64±2.21
    18 55 15 1.5 9.0 81.95±1.10
    19 35 15 2.5 9.0 80.53±2.65
    20 55 15 2.5 9.0 85.01±1.09
    21 45 10 2.0 8.5 72.65±2.11
    22 45 20 2.0 8.5 86.24±1.66
    23 45 10 2.0 9.5 82.00±2.34
    24 45 20 2.0 9.5 83.21±1.87
    25 45 15 2.0 9.0 93.36±2.01
    26 45 15 2.0 9.0 94.21±1.22
    27 45 15 2.0 9.0 90.62±2.95
    28 45 15 2.0 9.0 92.34±1.42
    29 45 15 2.0 9.0 95.20±1.21
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    表  4   能量棒夹心响应面回归模型方差分析

    Table  4   Analysis of variance of regression model of energy bar sandwich sensory scoring model

    方差来源 平方 自由度 均方差 F P 显著性
    模型 1284.80 14 91.77 45.18 <0.0001 **
    A 128.77 1 128.77 63.40 <0.0001 **
    B 1.86 1 1.86 0.92 0.3543 不显著
    C 43.40 1 43.40 21.37 0.0004 **
    D 19.76 1 19.76 9.73 0.0075 **
    AB 33.41 1 33.41 16.45 0.0012 **
    AC 3.03 1 3.03 1.49 0.2423 不显著
    AD 71.32 1 71.32 35.11 <0.0001 **
    BC 26.99 1 26.99 13.29 0.0026 **
    BD 60.61 1 60.61 29.84 <0.0001 **
    CD 22.04 1 22.04 10.85 0.0053 **
    459.88 1 459.88 226.42 <0.0001 **
    405.73 1 405.73 199.76 <0.0001 **
    211.58 1 211.58 104.17 <0.0001 **
    262.80 1 262.80 129.39 <0.0001 **
    残差 28.44 14 2.03
    失拟项 23.96 10 2.40 2.14 0.2406 不显著
    纯误差 4.47 4 1.12
    总离差 1313.23 28
    R2=0.9783 R2Adj=0.9567
    注:*表示差异显著(P<0.05),**表示差异极显著(P<0.01),P>0.05为不显著。
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    表  5   能量棒营养成分组成结果

    Table  5   Results of the nutritional composition of energy bars

    成分含量
    蛋白质(g/100 g)14.66±0.14
    脂肪(g/100 g)29.77±0.69
    碳水化合物(g/100 g)41.83±1.24
    粗纤维(g/100 g)5.28±0.03
    水分(g/100 g)5.69±0.49
    灰分(g/100 g)2.68±0.06
    能量(kJ/100 g)2101.62±6.57
    益生菌(CFU/g)1.43×108
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    表  6   能量棒脂肪酸主要组成成分分析

    Table  6   Analysis of main components of fatty acids in energy bar

    成分脂肪酸相对脂肪酸含量
    (%)
    含量
    (g/100 g)
    饱和脂肪酸SFA棕榈酸C16:019.35±0.695.75±0.21
    硬脂酸C18:03.67±0.301.10±0.09
    单不饱和脂肪酸MUFA油酸C18:141.00±0.2512.22±0.08
    多不饱和脂肪酸PUFA亚油酸C18:233.72±0.7010.06±0.21
    亚麻酸C18:33.20±0.040.95±0.01
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    表  7   能量棒水解氨基酸组成

    Table  7   Hydrolyzed amino acid composition of energy bar

    氨基酸种类氨基酸名称总含量(g/100 g)
    必需氨基酸(g/100 g)蛋氨酸Met1.56±0.05
    赖氨酸Lys0.53±0.10
    异亮氨酸Ile0.81±0.05
    缬氨酸Val1.55±0.10
    亮氨酸Leu1.20±0.07
    苏氨酸Thr0.85±0.11
    苯丙氨酸Phe0.48±0.08
    半必需氨基酸(g/100 g)精氨酸Arg0.53±0.09
    非必需氨基酸(g/100 g)酪氨酸Tyr1.20±0.05
    甘氨酸Gly0.87±0.03
    丙氨酸Ala0.57±0.05
    脯氨酸Pro1.37±0.04
    必需氨基酸总量(g/100 g)6.99±0.45
    氨基酸总量(g/100 g)11.52±0.40
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出版历程
  • 收稿日期:  2024-01-31
  • 网络出版日期:  2024-10-30
  • 刊出日期:  2024-12-31

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