Investigating the Effects of Camellia petelotii Chi Extract on Nonalcoholic Fatty Liver Disease Based on TLR-4/NF-κB Signaling Pathway
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摘要: 探讨金花茶提取物对非酒精性脂肪肝病（NAFLD）大鼠模型的改善作用及其机制。随机选取10只SD大鼠为空白组，剩余50只则灌服高糖高脂乳剂复制非酒精性脂肪肝模型，14 d后造模大鼠按血清中总胆固醇（TC）水平随机分为模型组、辛伐他汀组（8 mg/kg）及金花茶高、中、低剂量组（260、130、65 mg/kg）。分组后连续给药6周，于末次给药前进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）并计算血糖曲线下面积（AUC），末次给药后采集血清及肝组织，检测血脂指标总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）及游离脂肪酸（FFA），肝脂指标TC及TG，肝功能指标谷丙转氨酶（ALT）及谷草转氨酶（AST），肝脏脂质过氧化指标丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）；测定大鼠血清炎症因子指标白介素6（IL-6）、白介素8（IL-8）及肿瘤坏死因子（TNF-α）；检测血清胰岛素（FINS）并计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）；HE染色法观察肝脏病理形态学变化并进行非酒精性脂肪肝病活动度积分（NAS）评分；测定肝组织中Toll样受体4（TLR-4）和核因子κB（NF-κB）的基因及蛋白的表达。结果表明：与模型组相比，金花茶药物组AUC、HOMA-IR及血清中FINS、TG、TC、LDL-C、FFA、ALT、AST、IL-6、IL-8、TNF水平显著降低（P<0.05），HDL-C水平明显升高（P<0.05）；肝组织TG、TC、MDA中含量显著降低（P<0.05），SOD活性显著升高（P<0.05）；肝脏脂肪肝病样变减轻，肝细胞形态异常及炎症浸润明显改善，NAS评分显著下降（P<0.05）；TLR-4、NF-κB蛋白及mRNA表达降低，差异均有统计学意义（P<0.05），其中以金花茶高剂量的改善效果最佳。综上所述，金花茶提取物可通过TLR-4/NF-κB信号通路来调节糖脂代谢紊乱，降低炎症反应和减轻炎症浸润，改善NAFLD大鼠肝脏病变。
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关键词:
- 非酒精性脂肪肝病 /
- 金花茶 /
- 脂质代谢 /
- TLR-4/NF-κB信号通路
Abstract: To examine the effects and mechanisms of Camellia petelotii Chi extract on the rat model of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), a set of ten SD rats was randomly chosen as the blank group, while the remaining 50 rats were given a high-sugar, high-fat emulsion to develop the model of non-alcoholic fatty liver disease. After 14 days, the rats were separated into different groups based on their serum total cholesterol (TC) levels. These groups included the model group, the simvastatin group (8 mg/kg), and the Camellia petelotii Chi high, medium, and low dose groups (260, 130, 65 mg/kg). The medication was administered continuously for 6 weeks. Before the last administration, an oral glucose tolerance test (OGTT) was performed, and the area under the blood glucose curve (AUC) was calculated. Both serum and liver tissues were collected to examine the concentrations of total cholesterol (TC), triacylglycerol (TG), high-density lipoprotein (HDL-C), low-density lipoprotein (LDL-C), and free fatty acid (FFA). In addition, TC and TG were measured to evaluate the amount of lipids in the liver, while glutamic-pyruvic transaminase (ALT) and glutamic oxaloacetic transaminase (AST) were examined to assess liver function. The levels of malondialdehyde (MDA) was measured to evaluate the extent of lipid peroxidation in the liver, while the activity of superoxide dismutase (SOD) was also evaluated. Serum inflammatory factors interleukin 6 (IL-6), interleukin 8 (IL-8), and tumor necrosis factor (TNF-α) were determined in rats. Serum insulin (FINS) was measured and the insulin resistance index (HOMA-IR) was calculated. The HE staining technique was employed to examine the pathomorphological alterations in the liver and determine the non-alcoholic fatty liver disease activity score (NAS). The gene and protein expression of Toll-like receptor 4 (TLR-4) and nuclear factor κB (NF-κB) were determined in liver tissue. The results showed that compared with the model group, AUC, HOMA-IR and serum levels of FINS, TG, TC, LDL-C, FFA, ALT, AST, IL-6, IL-8, TNF were significantly lower (P<0.05), and HDL-C levels was significantly higher in the Camellia petelotii Chi groups (P<0.05). The content of TG, TC and MDA in liver were significantly reduced (P<0.05), and the SOD activity was significantly increased (P<0.05). There was a significant improvement in the condition of hepatic steatosis, abnormal hepatocyte shape, and inflammatory infiltration, leading to a noticeable decrease in the NAS score. The protein and mRNA levels of TLR-4 and NF-κB were exhibited a substantial decrease (P<0.05). The high dose of Camellia petelotii Chi had the best improvement effect among these groups. In conclusion, Camellia petelotii Chi extract would improve liver damage in NAFLD rats by regulating glucose and lipid metabolism, and reducing inflammatory reaction and inflammatory infiltration through the TLR-4/NF-κB signaling pathway. -
非酒精性脂肪肝病（NAFLD）是一种以肝脏脂质沉积为主要病理变化的代谢性疾病[1]。病程早期的NAFLD主要是单纯性脂肪肝（NAFL），病理特征表现为无炎症的单纯性脂肪变性，随着病情的发展，可能会转化为非酒精性脂肪性肝炎（NASH），出现肝小叶炎症、肝细胞气球样变等肝细胞损伤，NASH在终末阶段则可能演变成肝硬化（HS）和肝细胞癌（HCC）[2−4]。近年来，全球肥胖症的发生率不断上升，75%~92%的病态肥胖症将发展为NAFLD，其中10%~15%发展成肝癌[5]。Chan等[6]的研究显示全球NAFLD患病率已高达38.77%，其中欧洲地区为 55.33%，亚洲地区为36.31%，随着时间推移仍在不断上升，严重威胁人类健康。目前，NAFLD患者的治疗措施主要通过调整饮食结构、减少食物摄入和适量的有氧运动，改善胰岛素抵抗从而起到防治NAFLD的作用[7]，然而所有上述方式改善NAFLD的作用令人不甚满意，仍然缺乏公认的特效治疗方法。临床上用于治疗NAFLD的一线药物有吡格列酮、二甲双胍、利拉鲁肽，维生素E等[8]，它们已被证实可改善肝脏脂肪聚积、降低转氨酶和肝脏炎症水平，但是这些药物都具有明显的应用限制，难以广泛使用。大量研究[9−11]表明，与化学药物相比，天然产物及活性成分可在整体和多向调节防治NAFLD，不良反应小、治疗效果长期稳定，同时还具有多组分多靶点组合或协同效应的优势。因此，开发药食同源的天然活性物质既可用于防治NAFLD，又可促进天然产物的精深加工，具有良好市场前景和重要的社会意义。
金花茶（Camellia petelotii Chi）为山茶科植物，于2010年被收录为“药食同源”目录里的天然中草药茶，属于“新资源食品”[12]，富含微量元素及人体必需的氨基酸，茶多糖、多酚、皂苷、黄酮等均为金花茶的功能性组成成分[13]。因此，金花茶功能性保健品的开发应用备受关注，现已问世的以金花茶为原料的药品、食品有口服液[14]、浓缩液[15−16]、饮料[17]、速溶茶[18−19]、酒[20]、冲剂[21]、含片[22]、棒棒糖[23]、醋[24]等。现代药理研究表明金花茶提取物有抗肿瘤、抗氧化、抗炎、调血脂、降血糖等多种药理活性。多项研究[25−27]显示金花茶的叶、花和种子提取物对多种肿瘤细胞的增殖有显著的抑制作用，可升高乌拉坦所诱导的肺癌模型小鼠血清中白细胞介素-2（IL-2）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的水平，并降低肺部肿瘤发生率；韦霄等[28]通过考察金花茶对羟基自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基3种自由基的清除能力证实其具有良好的抗氧化作用。此外，众多研究者[29−31]通过急性炎症、高血脂、脂肪肝、二型糖尿病等疾病动物模型发现金花茶与炎症靶点间存在良好的结合活性，可以降低血清中总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白的水平，降低空腹血糖和升高胰岛素水平，改善胰腺结构和功能。根据上述总结可知，富含茶多酚、茶多糖和皂苷等物质的金花茶且具有良好的药理作用，开发成高端保健产品的空间非常大。
虽然目前金花茶的产品类型及药理作用研究众多，但多属于基础性探究，利用金花茶及其单体成分防治NAFLD的研究鲜有报道，其抗NAFLD的作用机制深入研究则更少。因此，本课题通过高糖高脂乳剂建立非酒精性脂肪肝大鼠模型，从血脂、肝脂、肝功能、炎症因子水平、口服葡萄糖糖耐量试验、肝组织病理切片及TLR-4/NF-κB信号通路的基因和蛋白水平表达多方面考察金花茶提取物的效用，为拓宽金花茶在防治NAFLD的应用提供理论依据，为天然植物抗NAFLD的研发供准确有力的支撑。
1. 材料与方法
1.1 材料与仪器
健康雄性SD大鼠 60只，6周龄，180~220 g，珠海百试通生物科技有限公司，生产许可证号：SCXK（粤）2020-0051。饲养环境为SPF级，恒定室温20~26 ℃，相对湿度40%~70%，实验期间所有大鼠自由饮食；金花茶原材料 采自茂名地区人工种植金花茶茶树，于12月至次年3月间采摘，经广东药科大学中药学院药用植物与中药鉴定系刘基柱老师鉴定为中东金花茶（Camellia petelotii Chi）；蔗糖 广州创奕食品有限公司；食用猪油 裕升食用油有限公司；胆固醇 上海麦克林生化科技股份有限公司；异氟烷 山东科源制药有限公司；辛伐他汀片 杭州默沙东制药有限公司；大鼠血清胰岛素（FINS）、大鼠白细胞介素6（IL-6）、大鼠白细胞介素8（IL-8）、大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）、大鼠游离脂肪酸（FFA）ELISA检测试剂盒 江苏酶免实业有限公司；丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）检测试剂盒 南京建成生物工程研究所；总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C） 桂林优利特医疗电子有限公司；总RNA提取试剂、反转录试剂盒、ECL化学发光试剂盒 、RIPA裂解液、PMSF、BCA蛋白定量检测试剂盒、磷酸化蛋白酶抑制剂 武汉赛维尔生物科技有限公司；TLR-4抗体、NF-κB p65抗体 SAB公司；GAPDH兔抗 武汉三鹰生物技术有限公司；脱脂奶粉 广州瑞舒生物科技有限公司；PVDF膜 美国Millipore公司。
101A-1E 型电热鼓风干燥箱 上海安亭科学仪器有限公司；800A志高中药粉碎机 泰安志高实业集团有限责任公司；FD-1D-50真空冷冻干燥机 上海贺帆仪器有限公司；HSIV-μ吸入式小动物麻醉机 上海瑞曼信息科技有限公司；LUKYM-1冷冻匀浆机 广州露卡测序仪器有限公司；URIT-8021A全自动生化分析仪 桂林优利特医疗电子有限公司；Epoch酶标检测仪 BioTeK公司；Tanon5200化学发光成像仪 上海天能科技有限公司；Nanodrop 2000分光光度计 赛默飞世尔科技公司；CFX Connect荧光定量PCR仪、165-8001Mini型蛋白凝胶电泳仪 美国Bio-Rad公司。
1.2 实验方法
1.2.1 药物制备
高糖高脂乳剂：称取蔗糖、猪油及胆固醇（三者比例为：4:5:2）共55 g、再加入脱氧胆酸钠2 g和丙基硫氧嘧啶1 g，量取10 mL吐温-80，加热混匀后，用蒸馏水定容至100 mL，于4 ℃冰箱保存，给药前水浴加热溶解。
金花茶提取物：选择干燥清洁金花茶茶花部分于烘箱中50 ℃烘干，粉碎机粉碎，过80目筛，加入20倍蒸馏水，煎煮2次，先煎煮1 h，收集滤液，后煎煮0.5 h，两次滤液合并混匀后于冷冻干燥机中冷冻干燥成粉末即得金花茶水提物，使用前用蒸馏水溶解。
辛伐他汀药液：将辛伐他汀片研磨粉碎后用0.5% CMC-Na溶液混悬后使用。
1.2.2 NAFLD大鼠模型制备
雄性SD大鼠60只，本实验获得广东药科大学实验动物伦理委员会批准，伦理编号：gdpulacspf2017672，适应性3 d后根据体重随机选取10只作为空白组，灌服生理盐水，剩余50只灌服自制高糖高脂乳剂，体积为10 mL/kg。第14 d后，所有动物麻醉后眼眶采血，检测血清TC水平，统计显示造模组与空白组有显著性差异（P<0.05）后以造模大鼠血清TC水平随机分组，即模型组、辛伐他汀组（8 mg/kg）及金花茶高、中、低剂量组（260、130、65 mg/kg），每组各10只。分组后，分9:00~10:00及16:00~17:00两个时段给药，上午空白组灌服生理盐水，剩余各组大鼠继续灌服造模乳剂，下午空白组和模型组灌服0.5% CMC-Na，辛伐他汀组及金花茶给药组灌服相应剂量的药物溶液，体积均为10 mL/kg，连续给药6周。
1.2.3 口服葡萄糖耐量试验（OGTT）
末次给药前，大鼠禁食不禁水12 h后，尾静脉采血测定空腹血糖。灌服葡萄糖（2 g/kg），记录3个间点的血糖值，即30、60、120 min，绘制血糖时间变化曲线，分析血糖曲线下面积（AUC）。
1.2.4 血清及组织样本的收集
药物干预6周后，大鼠禁食不禁水12 h，异氟烷麻醉，腹主动脉采血，4 ℃、3500 r/min离心15 min，吸取上层血清。颈部脱臼，摘取肝脏组织，一部分肝脏组织4%多聚甲醛固定，剩余肝脏组织液氮速冻后于−80 ℃保存。
1.2.5 血清生化指标测定
取1.2.4方法所得血清，通过全自动生化分析仪检测血清中TG、TC、HDL-C、LDL-C、FFA、AST、ALT的含量或活性；严格按相应的试剂盒说明书采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定血清中IL-6、IL-8、TNF-α、FINS指标并计算相应含量。胰岛素抵抗指数（HOMA-IR=FINS×FBG/22.5）。
1.2.6 肝组织生化指标测定
取1.2.4方法所得肝组织用生理盐水制成10%肝匀浆，4 ℃、3500 r/min离心15 min，取上清液，通过全自动生化分析仪及按照相应的试剂盒说明书测定TC、TG、MDA、SOD指标并计算相应含量。
1.2.7 肝组织病理形态学检查
取出1.2.4方法中4%多聚甲醛固定的肝组织，经常规脱水处理、石蜡包埋、切片后采用苏木精-伊红（HE）染色，显微镜下观察肝组织脂肪变、小叶炎症及气球样变，结合文献[32]评分标准，对非酒精性肝病的活动度（NAS）进行评定，NAS评分标准见表1。
表 1 非酒精性脂肪肝病活动度积分（NAS）评分标准Table 1. Activity score (NAS) scoring criteria for non-alcoholic fatty liver disease项目 评价范围标准 得分（分） 肝细胞脂肪变 <5% 0 5%~33% 1 34%~66% 2 >66% 3 小叶内炎症 无 0 <2个 1 2~4个 2 >4个 3 肝细胞气球样变 无 0 少见 1 多见 2 总分 8 1.2.8 检测肝组织TLR-4、NF-κB mRNA表达
采用总RNA提取试剂提取肝脏组织总RNA，用Nanodrop 2000检测RNA浓度及纯度（A260/A280=1.8~2.0），使其终浓度为200 ng/μL；采用反转录试剂盒反向转录制备cDNA，逆转录反应体系为20 μL；再配制反应体系：2×SYBR Green qPCR Master Mix 7.5 μL、2.5 μmoL/L基因引物（上游+下游）1.5 μL、cDNA 2.0 μL、双蒸水4 μL cDNA，用荧光定量PCR进行扩增和检测，反应条件：95 ℃，30 s预变性；95 ℃，15 s变性；60 ℃，30 s退火/延伸，共40个循环；按照相对定量方法分析，以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）为内参，用2−ΔΔCt法表示mRNA的相对表达量，实验重复3次。引物序列由武汉赛维尔生物科技有限公司设计，见表2。
表 2 RT-qPCR引物序列Table 2. Primer sequences of RT-qPCR引物名称 正向 反向 片段长度（bp） GAPDH CTGGAGAAACCTGCCAAGTATG GGTGGAAGAATGGGAGTTGCT 38 TLR-4 CCAGGTGTGAAATTGAGACAATTG AAGCTGTCCAATATGGAAACCC 191 NF-κB p65 CAGATACCACTAAGACGCACCC CTCCAGGTCTCGCTTCTTCACA 227 1.2.9 检测肝组织中TLR-4、NF-κB p65蛋白表达
取30 mg肝组织，按比例加入RIPA裂解缓、磷酸酶抑制剂和PMSF并冷冻匀浆，12000 r/min离心30 min取上清液；BCA法测定蛋白质浓度；配制蛋白上样液；SDS-PAGE凝胶电泳分离蛋白；湿法电转至PVDF膜；5%脱脂奶粉封闭膜2 h；TBST洗膜后于4 ℃下在一抗中孵育过夜，一抗TLR-4（1:1000）、NF-κB p65（1:1000）、GAPDH（1:2000）；洗膜后，二抗（1:2000）孵育1.5 h；洗膜后，ELC法对蛋白条带进行可视化；用分析软件对蛋白条带进行数据分析，并以GAPDH为内参，分析肝组织中炎性反应相关蛋白（TLR-4、NF-κB p65）的表达水平。
1.3 数据处理
结果使用平均值±标准差（±s）表示，每个实验重复10次（n=10）。所有数据采用 SPSS 19.0软件进行统计分析。符合正态分布的方差齐性采用单因素方差分析（one way ANOVA）和方差齐性采用最小显著差数（LSD）法检测组间差异比较；不符合正态分布和方差齐性采用秩和检验，以P<0.05为差异有统计学意义。图像数据处理与分析采用 Image J 和 Prism GraphPad 6.0软件。
2. 结果与分析
2.1 金花茶提取物对NAFLD大鼠血糖的影响
表3结果显示，模型组的空腹血糖、30 min、120 min血糖水平及AUC与空白组相比极显著升高（P<0.01）；辛伐他汀组及金花茶中、高剂量组30 min血糖水平较模型组相比显著下降（P<0.05，P<0.05），金花茶高剂量120 min血糖水平显著下降（P<0.05），辛伐他汀组及金花茶高剂量组AUC极显著降低（P<0.01）。经金花茶提取物灌胃后，调节了NAFLD大鼠体内各种酶的活性，对葡萄糖的摄取及利用起到很好的平衡作用，提高了其对葡萄糖的耐受能力[33]。Wang等[34]的研究中指出，金花茶醋酸乙酯/二氯甲烷提取物、正丁醇提取物和粗提物均有具有显著的降血糖效果。可见，高剂量金花茶具有调节血糖的能力，具有很好的提高葡萄糖耐受的作用。表4结果显示，与空白组比较，模型组FINS和HOMA-IR均极显著增高（P<0.01）；辛伐他汀组及金花茶中、高剂量组的FINS水平及HOMA-IR显著低于模型组（P<0.05，P<0.01），金花茶低剂量组的FINS水平有极显著降低（P<0.01）。结果表明金花茶能增加NAFLD模型大鼠的口服糖耐量，减轻胰岛素抵抗。
表 3 金花茶提取物对NAFLD大鼠血糖的影响Table 3. Effect of Camellia petelotii Chi extract on blood glucose in NAFLD rats组别 剂量（mg·kg−1） FBG（mmol·L−1） 30 min（mmol·L−1） 60 min（mmol·L−1） 120 min（mmol·L−1） AUC（mmol·min·L−1） 空白组 − 4.24±0.50 7.82±1.30 8.44±0.79 5.7±0.58 849.00±57.33 模型组 − 5.06±0.35△△ 9.55±1.60△△ 9.17±0.63 7.09±0.88△△ 988.00±77.66△△ 辛伐他汀组 8 5.00±0.49 8.14±0.66** 8.20±0.78 6.48±0.43 882.38±57.05** 金花茶高剂量组 260 4.73±0.37 8.15±0.80** 8.61±2.08 6.23±0.63* 889.69±92.06** 金花茶中剂量组 130 4.98±0.64 8.48±0.55* 8.71±0.70 6.69±0.93 921.94±34.49 金花茶低剂量组 65 5.26±0.37 8.98±0.73 8.91±0.92 6.70±0.92 949.94±69.12 注：与空白组比较：△△差异极显著P<0.01；与模型组比较：*差异显著P<0.05，**差异极显著P<0.01；表4~表10同。 表 4 金花茶提取物对NAFLD大鼠FINS水平和 HOMA-IR 指数的影响Table 4. Effect of Camellia petelotii Chi extract on FINS levels and HOMA-IR index in NAFLD rats组别 剂量（mg·kg−1） FINS（mU·L−1） HOMA-IR（%） 空白组 − 18.45±0.71 3.38±0.40 模型组 − 24.01±0.81△△ 5.34±0.48△△ 辛伐他汀组 8 19.66±0.73** 4.38±0.49** 金花茶高剂量组 260 20.78±0.84** 4.37±0.31** 金花茶中剂量组 130 21.85±0.93** 4.80±0.68* 金花茶低剂量组 65 22.87±0.39** 5.24±0.24 2.2 金花茶提取物对NAFLD大鼠血脂水平的影响
结果见表5，与空白组比较，模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C及FFA水平极显著升高（P<0.01），HDL-C水平极显著降低（P<0.01）；与模型组比较，辛伐他汀组及金花茶高剂量组TC、TG、LDL-C及FFA指标均有极显著改善（P<0.01），HDL-C指标显著升高（P<0.05）；金花茶中剂量组在TG、HDL-C、FFA水平起到显著调节作用（P<0.05，P<0.01）；金花茶低剂量组的TC、TG、LDL-C均无统计学差异（P>0.05），HDL-C水平极显著升高（P<0.01），FFA水平极显著下降（P<0.01），这是由于金花茶提取物经体内吸收后参与了NAFLD大鼠的脂代谢，使TC、TG、LDL-C及FFA水平降低，HDL-C水平提高。有研究指出[35]，经治疗后的NAFLD大鼠脂代谢水平能够得到明显改善，这与本研究中高剂量金花茶的治疗效果一致。结果表明金花茶提取物可改善NAFLD大鼠异常脂代谢，调节血脂水平紊乱。
表 5 金花茶提取物对NAFLD大鼠血脂的影响Table 5. Effect of Camellia petelotii Chi extract on blood lipids in NAFLD rats组别 剂量（mg·kg−1） TG（mmol·L−1） TC（mmol·L−1） HDL-C（mmol·L−1） LDL-C（mmol·L−1） FFA（µmol·L−1） 空白组 − 0.41±0.05 1.88±0.19 1.39±0.13 0.95±0.12 915.07±26.77 模型组 − 0.56±0.07△△ 3.07±0.18△△ 1.18±0.19△△ 1.51±0.10△△ 1209.66±28.8△△ 辛伐他汀组 8 0.40±0.06** 2.70±0.14** 1.30±0.16* 1.26±0.04** 956.94±41.30** 金花茶高剂量组 260 0.47±0.05** 2.83±0.22** 1.30±0.11* 1.28±0.11** 1017.81±31.66** 金花茶中剂量组 130 0.49±0.07* 2.97±0.16 1.44±0.10** 1.47±0.13 1077.26±44.85** 金花茶低剂量组 65 0.52±0.05 2.94±0.23 1.48±0.11** 1.47±0.11 1142.71±32.87** 2.3 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝功能的影响
如表6所示，与空白组比较，模型组血清AST、ALT极显著增高（P<0.01）；模型组的大鼠服用辛伐他汀和不同剂量金花茶提取物治疗6周后，其肝功能指标AST、ALT极显著下降（P<0.01）。结果表明金花茶提取物对高糖、高脂饮食所致NAFLD大鼠肝功能异常有明显的治疗作用。
表 6 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝功能的影响Table 6. Effect of Camellia petelotii Chi extract on liver function in NAFLD rats组别 剂量
（mg·kg−1）血清ALT
（U·L−1）血清AST
（U·L−1）空白组 − 22.67±2.15 68.75±2.22 模型组 − 88.50±5.40△△ 93.17±7.03△△ 辛伐他汀组 8 45.08±3.50** 67.00±7.08** 金花茶高剂量组 260 41.33±3.89** 72.25±4.63** 金花茶中剂量组 130 47.50±2.68** 63.58±4.36** 金花茶低剂量组 65 47.67±2.81** 65.42±7.23** 2.4 金花茶提取物对NAFLD大鼠血清炎症因子IL-6、IL-8及TNF-α水平的影响
表7所示，与空白组相比，模型组炎症因子IL-6、IL-8、TNF-α水平极显著升高（P<0.01）。辛伐他汀组及金花茶各剂量组血清中IL-6、IL-8及TNF-α水平较模型组显著下降（P<0.05，P<0.01）。结果表明金花茶提取物可明显减轻 NAFLD模型大鼠的炎症反应。Wang等[36]使用离体培养的小鼠巨噬RAW264.7细胞对金花茶分离出的化合物进行抗炎活性评估后指出金花茶提取物可以抑制RAW264.7细胞一系列炎症细胞因子的表达，具有抗炎抗菌活性，由此也印证了本研究结果。因此，金花茶提取物能够降低NAFLD大鼠的炎症反应，有助于防治非酒精性脂肪肝。
表 7 金花茶提取物对NAFLD大鼠血清炎症因子水平的影响Table 7. Effect of Camellia petelotii Chi extract on serum levels of inflammatory factors in NAFLD rats组别 剂量
（mg·kg−1）IL-6（pg·mL−1） IL-8（ng·L−1） TNF（ng·L−1） 空白组 − 111.36±5.95 466.3±21.77 349.81±15.76 模型组 − 142.41±2.76△△ 570.17±20.7△△ 461.68±14.37△△ 辛伐他汀组 8 116.20±4.09** 482.51±15.55** 372.34±20.10** 金花茶高
剂量组260 121.57±5.86** 500.45±24.15** 393.64±9.37** 金花茶中
剂量组130 126.89±7.02** 500.49±10.89** 407.39±15.21** 金花茶低
剂量组65 135.90±5.79* 531.04±23.37** 422.44±18.48** 2.5 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝脂的影响
表8所示，与空白组相比，模型组的肝组织TC、TG水平极显著增高（P<0.01）。辛伐他汀组和金花茶高、中剂量组的肝组织TC、TG水平极显著低于模型组（P<0.01）。结果表明辛伐他汀和中、高剂量的金花茶提取物可明显改善NAFLD大鼠肝组织脂质水平紊乱，缓解NAFLD大鼠肝脏脂质病变。
表 8 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝脂的影响Table 8. Effect of Camellia petelotii Chi extract on liver lipids in NAFLD rats组别 剂量
（mg·kg−1）肝TG
（mmol·L−1）肝TC
（mmol·L−1）空白组 − 2.34±0.33 1.10±0.35 模型组 − 2.72±0.42△△ 1.40±0.16△△ 辛伐他汀组 8 2.23±0.44** 0.78±0.28** 金花茶高剂量组 260 2.28±0.20** 0.48±0.10** 金花茶中剂量组 130 2.14±0.24** 0.63±0.22** 金花茶低剂量组 65 2.63±0.40 1.21±0.34 2.6 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝脏脂质过氧化水平的影响
表9反映了金花茶提取物对NAFLD大鼠氧化应激相关指标MDA及SOD的影响，与空白组相比，经过灌服高糖高脂乳剂大鼠模型组的肝组织 MDA含量升高， SOD水平极显著降低（P<0.01）；辛伐他汀组及金花茶各剂量组相较于模型组肝脏脂质过氧化水平得到显著改善（P<0.05，P<0.01）。结果表明，金花茶提取物能够通过改善机体氧化应激相关酶水平从而发挥抗NAFLD的作用。
表 9 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝脏脂质过氧化水平的影响Table 9. Effect of Camellia petelotii Chi extract on the levels of lipid peroxidation in the liver of NAFLD rats组别 剂量
（mg·kg−1）MDA含量
（nmol/mg prot）SOD
（U/mg prot）空白组 − 0.73±0.10 1134.5±37.72 模型组 − 1.04±0.12△△ 972.89±60.50△△ 辛伐他汀组 8 0.79±0.13** 1145.39±113.29** 金花茶高剂量组 260 0.73±0.11** 1265.94±122.62** 金花茶中剂量组 130 0.74±0.10** 1146.26±127.44** 金花茶低剂量组 65 0.75±0.17** 1092.35±110.86* 2.7 金花茶提取物对大鼠肝组织的病理改变的影响
如图1所示，空白组大鼠的肝组织形态大小正常、色泽红润亮滑，边缘锐利，HE染色结果显示肝细胞无脂肪沉积和炎症细胞，肝小叶结构清晰完整，肝窦（蓝色箭头所指）正常，肝索（绿色箭头所指）排列正常，细胞形态大小均无异常；模型组肝脏色泽呈土黄色，肝叶变形黏连，边缘变钝，切面油腻，HE染色结果显示肝小叶结构破坏，炎症细胞浸润（黄色箭头所指），细胞核移位，肝细胞胞质内明显可见大小不等的脂滴空泡和气球样变（红色箭头所指）；金花茶各剂量组及辛伐他汀组大鼠肝脏为暗红色，表面光滑，切面油腻感减轻，HE染色结果显示辛伐他汀组及金花茶各剂量组肝内无明显炎性细胞浸润，肝细胞排列整齐，脂肪空泡及脂肪变性明显减少。表10结果显示，与空白组比较，模型组NAFLD大鼠活动度积分中各项指标（脂肪变、小叶内炎症反应、气球样变、NAS评分）极显著增高（P<0.01）；与模型组比较，辛伐他汀及金花茶各剂量组可显著改善NAFLD大鼠脂肪变、小叶内炎性反应和气球样变（P<0.05，P<0.01），NAS评分极显降低（P<0.01），但金花茶低剂量组队脂肪变无显著性影响。综合上述结果显示肝组织病理改善效果金花茶高剂量组>金花茶中剂量组>辛伐他汀组>金花茶低剂量组。可见金花茶提取物对NAFLD大鼠的肝组织有明显的保护作用，可明显减轻脂肪空泡、脂质聚积及炎性细胞的浸润，减轻NAFLD大鼠肝脏结构的改变，病理损伤明显减轻。
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图 1 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝脏的影响（HE，200×）注：A：空白组；B：模型组；C：辛伐他汀组；D：金花茶高剂量组；E：金花茶中剂量组；F：金花茶低剂量组；肝窦（蓝色箭头所指）；肝索（绿色箭头所指）；炎症细胞浸润（黄色箭头所指）；脂滴空泡和气球样变（红色箭头所指）。Figure 1. Effect of Camellia petelotii Chi extract on the liver of NAFLD rats (HE, 200×)表 10 金花茶提取物对NAFLD大鼠活动度积分的影响Table 10. Effect of Camellia petelotii Chi extract on activity scores of NAFLD rats组别 剂量
（mg·kg−1）脂肪变 小叶内炎症 气球样变 NAS 空白组 − 0.00±0.00 0.33±0.52 0.33±0.52 0.67±0.82 模型组 − 2.17±0.41△△ 2.00±0.00△△ 2.50±0.55△△ 6.67±0.52△△ 辛伐他汀辛
伐他汀组8 1.17±0.41** 1.00±0.63** 0.83±0.41** 3.00±0.00** 金花茶高
剂量组260 1.33±0.52** 0.67±0.52** 1.00±0.00** 3.00±0.89** 金花茶中
剂量组130 1.50±0.55** 1.17±0.75** 1.17±0.75** 3.83±1.17** 金花茶低
剂量组65 1.67±0.52 1.33±0.52* 1.33±0.52** 4.33±0.52** 2.8 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝脏组织TLR-4 mRNA、NF-κB p65 mRNA表达的影响
如图2所示，与空白组比较，用自制乳剂诱导的SD大鼠模型组的肝组织TLR-4 mRNA、NF-κB p65 mRNA表达极显著上调（P<0.01）；连续灌服金花茶提取物6周后，其各剂量组的肝组织两者表达均极显著低于模型组（P<0.01）。结果表明金花茶提取物能够调控TLR-4/NF-κB信号通路相关基因的表达水平。
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图 2 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝脏组织TLR-4 mRNA及NF-κB p65 mRNA表达的影响注：与空白组比较：#P<0.05，##P<0.01；与模型组比较：*P<0.05，**P<0.01；图3同。Figure 2. Effect of Camellia petelotii Chi extract on the expression levels of TLR4 mRNA and NF-κB p65 mRNA in liver tissues of NAFLD rats2.9 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝脏组织TLR-4、NF-κB p65蛋白表达水平的影响
如图3所示，与空白组比较，模型组肝组织中TLR-4、NF-κB p65蛋白表达水平极显著升高（P<0.01）；与模型组比较，金花茶中、高剂量组肝组织中TLR-4、NF-κB p65蛋白表达水平显著降低（P<0.01，P<0.05），低剂量组TLR-4蛋白表达水平显著降低（P<0.05），NF-κB p65蛋白表达无显著性差异（P>0.05）。结果表明，金花茶提取物对TLR-4、NF-κB蛋白的表达具有调节作用。
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图 3 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝脏组织TLR-4及NF-κB p65蛋白表达的影响Figure 3. Effects of Camellia petelotii Chi extract extract on the expression of TLR-4 and NF-κB p65 proteins in liver tissues of NAFLD rats3. 讨论与结论
非酒精性脂肪肝（NAFLD）是一种由肥胖、二型糖尿病以及高脂血症所诱发的以脂质在肝脏内过渡堆积为主要临床症状的代谢综合征[37]。NAFLD的发病机制尚未明确，胰岛素抵抗（IR）、糖耐量异常和脂质代谢改变等一系列糖脂代谢紊乱被认为是NAFLD分子发病机制[38]。不管是过去的“二次打击”学说[39]或是当下公认的“多重打击”学说[40]中，胰岛素抵抗都是NAFLD病情进展中的首要环节。胰岛素抵抗既会导致脂肪过度分解，又会促进脂肪从头合成从而导致大量游离脂肪酸（FFA）转运至肝脏，使得肝脏组织中蓄积过量脂类物质[41]，二者共同使得肝脏脂质代谢紊乱，与炎症级联反应、氧化应激和脂毒性的产生都息息相关[42−44]。NAFLD大鼠体内会堆积大量游离脂肪酸（FFA）可通过激活NF-κB通路或JNK通路，募集促炎细胞因子、趋化因子等，诱导胰岛β细胞中的细胞凋亡，产生淀粉样变性和纤维化，因而发生胰岛素分泌异常，在外周组织中从全身炎症发展成胰岛素抵抗（IR）[45−46]。研究表明，NLRP3炎症小体是诱导脂肪细胞产生IR的关键调节因子，通过激活TLR-4受体可激活NLRP3炎症小体，可介导Caspase-1依赖性的IL-1β前体释放，抑制原活化蛋白激酶（AMPK）活性，从而诱发脂肪细胞IR[47−49]。因此，治疗NAFLD的首要目标就是改善胰岛素抵抗。现有研究指出金花茶提取物（花、叶、种子）或可通过以下方式改善胰岛素抵抗：直接提高胰岛素水平，从而提高胰岛素的敏感性[50]；通过抗氧化、抑制氧化应激提高胰岛β细胞数量[51]；抑制葡萄糖转运载体和相关酶的活性，进一步改善胰岛素抵抗[52]；通过强大的抗氧化能力，可以清除体内的自由基，减轻自由基对胰岛β细胞的损伤，从而改善胰岛素抵抗[53]；促进胰岛素的分泌，增强免疫力，调节血流量，防止动脉粥样硬化，从而改善胰岛素抵抗[54]；通过降低血清中的胆固醇和游离脂肪酸，调节血脂，从而改善胰岛素抵抗[55−57]。
本研究通过口服葡萄糖耐受实验和大鼠空腹胰岛素的检测结果也印证了金花茶可能是通过上述方式直接或间接地改善NAFLD模型大鼠的葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性，调节胰岛素和葡萄糖的代谢，进而改善肝组织、脂肪组织和骨骼肌内发生的胰岛素抵抗。NAFLD 往往伴随着脂代谢紊乱，主要表现为血脂升高[58]。本研究结果显示，NAFLD大鼠模型组血脂TG、TC、LDL-C和FFA水平及肝TG、TC水平、炎症因子水平明显高于空白组出现典型的脂肪肝病样变，与王静等[59]和王树根等 [60]的所制备的NAFLD大鼠模型表现一致。与模型组比较，金花茶给药组可以有效降低大鼠血清中 TC、TG、LDL-C、FFA水平，升高HDL-C水平，肝功能指标AST、ALT显著降低，且大部分指标呈现剂量依赖性。研究显示[61−63]，氧化应激损伤是NAFLD发生、发展的重要因素。本研究表明金花茶可以改善NAFLD大鼠氧化应激相关指标MDA及SOD的水平，有效治疗高脂高糖乳剂饮食引起的脂代谢紊乱、肝功能异常。大鼠肝脏HE染色亦显示金花茶可以有效地改善高脂高糖饮食引起的肝细胞结构变化，减轻炎性细胞浸润的现象，结合上述结果我们合理猜测金花茶可通过降低细胞凋亡，减轻炎症细胞浸润和斑块的形成、抑制高糖高脂饮食导致的糖脂代谢紊乱、减少肝内脂类物质的蓄积，从达到保护肝脏的作用。
TLR-4属于横跨膜模式识别受体（PRR）家族，其主要外源性配体是脂多糖（LPS）。TLR-4在肝细胞中均有表达，是参与非特异性免疫的蛋白。TLR-4可通过招募Myd88激酶，主要激活NF-κB信号通路从而诱发促炎或抗炎免疫调节[64]。TLR-4作为一个关键的模式识别受体（PRR），通过受体二聚化与下游有丝分裂MAPKs和NF-κB结合[65]。NF-κB是一种重要的转录因子，它在炎症反应中起着关键作用，激活NF-κB信号通路促进IL-1β、TNF-α等和其他促炎细胞因子的产生，增加促炎基因表达[66−67]。因此，抑制TLR-4、NF-κB蛋白表达是一个潜在的抗炎靶点，可抑制炎症反应引起的组织损伤，预防NAFLD引起的肝细胞损伤。张艳等[68]研究显示，TLR4/Myd88/NF-κB通路可通过协同且复杂的基因表达和蛋白合成引起细胞炎症反应，TLR-4通过介导巨噬细胞表达并分泌促炎细胞因子，激活MyD88依赖的信号链，从而启动炎性级联反应。与此研究结果相同，本研究发现金花茶提取物干预后NAFLD模型鼠的炎症相关因子IL-6、IL-8和TNF-α的水平明显降低，均趋向于空白组，TLR-4、NF-κB p65基因表达和蛋白表达显著下降。由此可见，金花茶提取物可通过TLR-4/NF-κB p65信号通路发挥对抗炎症的作用，从而减轻NAFLD大鼠的脂肪变性和脂质代谢紊乱。
综上所述，金花茶提取物具有改善胰岛素抵抗、减轻炎症反应和降低脂质积累等功效。同时，作为“药食同疗”的金花茶具有无毒性的天然优势，副作用较小[69]，因此这种天然植物提取物在未来可能具有广泛的发展前景，食用含有金花茶的食品可能起到预防作用，降低NAFLD的发生概率，而使用含有金花茶的天然药品有助于减缓NAFLD的进程。当下本研究虽然在NAFLD模型大鼠上对金花茶的降血脂、抗氧化应激以及其他改善NAFLD的功能进行了验证，确定了金花茶治疗NAFLD的方向及部分信号通路，但尚待确认参与该信号通路的所有分子以及与其他信号通路间的互作机制，金花茶防治NAFLD的用量、疗效、耐受性及生物利用度以及其作用单体和剂量亦需进一步确定。本研究为金花茶相关的食品、保健品、日用品的开发应用或临床治疗NAFLD提供科学依据。
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图 1 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝脏的影响（HE，200×）
注：A：空白组；B：模型组；C：辛伐他汀组；D：金花茶高剂量组；E：金花茶中剂量组；F：金花茶低剂量组；肝窦（蓝色箭头所指）；肝索（绿色箭头所指）；炎症细胞浸润（黄色箭头所指）；脂滴空泡和气球样变（红色箭头所指）。
Figure 1. Effect of Camellia petelotii Chi extract on the liver of NAFLD rats (HE, 200×)
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图 2 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝脏组织TLR-4 mRNA及NF-κB p65 mRNA表达的影响
注：与空白组比较：#P<0.05，##P<0.01；与模型组比较：*P<0.05，**P<0.01；图3同。
Figure 2. Effect of Camellia petelotii Chi extract on the expression levels of TLR4 mRNA and NF-κB p65 mRNA in liver tissues of NAFLD rats
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图 3 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝脏组织TLR-4及NF-κB p65蛋白表达的影响
Figure 3. Effects of Camellia petelotii Chi extract extract on the expression of TLR-4 and NF-κB p65 proteins in liver tissues of NAFLD rats
表 1 非酒精性脂肪肝病活动度积分（NAS）评分标准
Table 1 Activity score (NAS) scoring criteria for non-alcoholic fatty liver disease
项目 评价范围标准 得分（分） 肝细胞脂肪变 <5% 0 5%~33% 1 34%~66% 2 >66% 3 小叶内炎症 无 0 <2个 1 2~4个 2 >4个 3 肝细胞气球样变 无 0 少见 1 多见 2 总分 8 
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表 2 RT-qPCR引物序列
Table 2 Primer sequences of RT-qPCR
引物名称 正向 反向 片段长度（bp） GAPDH CTGGAGAAACCTGCCAAGTATG GGTGGAAGAATGGGAGTTGCT 38 TLR-4 CCAGGTGTGAAATTGAGACAATTG AAGCTGTCCAATATGGAAACCC 191 NF-κB p65 CAGATACCACTAAGACGCACCC CTCCAGGTCTCGCTTCTTCACA 227
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表 3 金花茶提取物对NAFLD大鼠血糖的影响
Table 3 Effect of Camellia petelotii Chi extract on blood glucose in NAFLD rats
组别 剂量（mg·kg−1） FBG（mmol·L−1） 30 min（mmol·L−1） 60 min（mmol·L−1） 120 min（mmol·L−1） AUC（mmol·min·L−1） 空白组 − 4.24±0.50 7.82±1.30 8.44±0.79 5.7±0.58 849.00±57.33 模型组 − 5.06±0.35△△ 9.55±1.60△△ 9.17±0.63 7.09±0.88△△ 988.00±77.66△△ 辛伐他汀组 8 5.00±0.49 8.14±0.66** 8.20±0.78 6.48±0.43 882.38±57.05** 金花茶高剂量组 260 4.73±0.37 8.15±0.80** 8.61±2.08 6.23±0.63* 889.69±92.06** 金花茶中剂量组 130 4.98±0.64 8.48±0.55* 8.71±0.70 6.69±0.93 921.94±34.49 金花茶低剂量组 65 5.26±0.37 8.98±0.73 8.91±0.92 6.70±0.92 949.94±69.12 注：与空白组比较：△△差异极显著P<0.01；与模型组比较：*差异显著P<0.05，**差异极显著P<0.01；表4~表10同。
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表 4 金花茶提取物对NAFLD大鼠FINS水平和 HOMA-IR 指数的影响
Table 4 Effect of Camellia petelotii Chi extract on FINS levels and HOMA-IR index in NAFLD rats
组别 剂量（mg·kg−1） FINS（mU·L−1） HOMA-IR（%） 空白组 − 18.45±0.71 3.38±0.40 模型组 − 24.01±0.81△△ 5.34±0.48△△ 辛伐他汀组 8 19.66±0.73** 4.38±0.49** 金花茶高剂量组 260 20.78±0.84** 4.37±0.31** 金花茶中剂量组 130 21.85±0.93** 4.80±0.68* 金花茶低剂量组 65 22.87±0.39** 5.24±0.24
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表 5 金花茶提取物对NAFLD大鼠血脂的影响
Table 5 Effect of Camellia petelotii Chi extract on blood lipids in NAFLD rats
组别 剂量（mg·kg−1） TG（mmol·L−1） TC（mmol·L−1） HDL-C（mmol·L−1） LDL-C（mmol·L−1） FFA（µmol·L−1） 空白组 − 0.41±0.05 1.88±0.19 1.39±0.13 0.95±0.12 915.07±26.77 模型组 − 0.56±0.07△△ 3.07±0.18△△ 1.18±0.19△△ 1.51±0.10△△ 1209.66±28.8△△ 辛伐他汀组 8 0.40±0.06** 2.70±0.14** 1.30±0.16* 1.26±0.04** 956.94±41.30** 金花茶高剂量组 260 0.47±0.05** 2.83±0.22** 1.30±0.11* 1.28±0.11** 1017.81±31.66** 金花茶中剂量组 130 0.49±0.07* 2.97±0.16 1.44±0.10** 1.47±0.13 1077.26±44.85** 金花茶低剂量组 65 0.52±0.05 2.94±0.23 1.48±0.11** 1.47±0.11 1142.71±32.87**
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表 6 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝功能的影响
Table 6 Effect of Camellia petelotii Chi extract on liver function in NAFLD rats
组别 剂量
（mg·kg−1）血清ALT
（U·L−1）血清AST
（U·L−1）空白组 − 22.67±2.15 68.75±2.22 模型组 − 88.50±5.40△△ 93.17±7.03△△ 辛伐他汀组 8 45.08±3.50** 67.00±7.08** 金花茶高剂量组 260 41.33±3.89** 72.25±4.63** 金花茶中剂量组 130 47.50±2.68** 63.58±4.36** 金花茶低剂量组 65 47.67±2.81** 65.42±7.23**
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表 7 金花茶提取物对NAFLD大鼠血清炎症因子水平的影响
Table 7 Effect of Camellia petelotii Chi extract on serum levels of inflammatory factors in NAFLD rats
组别 剂量
（mg·kg−1）IL-6（pg·mL−1） IL-8（ng·L−1） TNF（ng·L−1） 空白组 − 111.36±5.95 466.3±21.77 349.81±15.76 模型组 − 142.41±2.76△△ 570.17±20.7△△ 461.68±14.37△△ 辛伐他汀组 8 116.20±4.09** 482.51±15.55** 372.34±20.10** 金花茶高
剂量组260 121.57±5.86** 500.45±24.15** 393.64±9.37** 金花茶中
剂量组130 126.89±7.02** 500.49±10.89** 407.39±15.21** 金花茶低
剂量组65 135.90±5.79* 531.04±23.37** 422.44±18.48**
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表 8 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝脂的影响
Table 8 Effect of Camellia petelotii Chi extract on liver lipids in NAFLD rats
组别 剂量
（mg·kg−1）肝TG
（mmol·L−1）肝TC
（mmol·L−1）空白组 − 2.34±0.33 1.10±0.35 模型组 − 2.72±0.42△△ 1.40±0.16△△ 辛伐他汀组 8 2.23±0.44** 0.78±0.28** 金花茶高剂量组 260 2.28±0.20** 0.48±0.10** 金花茶中剂量组 130 2.14±0.24** 0.63±0.22** 金花茶低剂量组 65 2.63±0.40 1.21±0.34
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表 9 金花茶提取物对NAFLD大鼠肝脏脂质过氧化水平的影响
Table 9 Effect of Camellia petelotii Chi extract on the levels of lipid peroxidation in the liver of NAFLD rats
组别 剂量
（mg·kg−1）MDA含量
（nmol/mg prot）SOD
（U/mg prot）空白组 − 0.73±0.10 1134.5±37.72 模型组 − 1.04±0.12△△ 972.89±60.50△△ 辛伐他汀组 8 0.79±0.13** 1145.39±113.29** 金花茶高剂量组 260 0.73±0.11** 1265.94±122.62** 金花茶中剂量组 130 0.74±0.10** 1146.26±127.44** 金花茶低剂量组 65 0.75±0.17** 1092.35±110.86*
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表 10 金花茶提取物对NAFLD大鼠活动度积分的影响
Table 10 Effect of Camellia petelotii Chi extract on activity scores of NAFLD rats
组别 剂量
（mg·kg−1）脂肪变 小叶内炎症 气球样变 NAS 空白组 − 0.00±0.00 0.33±0.52 0.33±0.52 0.67±0.82 模型组 − 2.17±0.41△△ 2.00±0.00△△ 2.50±0.55△△ 6.67±0.52△△ 辛伐他汀辛
伐他汀组8 1.17±0.41** 1.00±0.63** 0.83±0.41** 3.00±0.00** 金花茶高
剂量组260 1.33±0.52** 0.67±0.52** 1.00±0.00** 3.00±0.89** 金花茶中
剂量组130 1.50±0.55** 1.17±0.75** 1.17±0.75** 3.83±1.17** 金花茶低
剂量组65 1.67±0.52 1.33±0.52* 1.33±0.52** 4.33±0.52**
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