Effects of Different Preservation Treatments on Storage Quality of Green Walnut
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摘要: 为探究不同保鲜处理对青皮核桃贮藏效果的影响，该研究以青皮核桃为试验材料，采用4种不同保鲜方法进行处理：0 ℃冷水浸泡5 min、150 mg/L ClO2浸泡20 min、100 mg/L赤霉素浸泡20 min和赤霉素（100 mg/L）+咪鲜胺（有效成分含量450 g/L）混合处理20 min，以不做处理的青皮核桃为对照，在0±0.3 ℃的低温条件下贮藏，研究其贮藏期间褐变指数、水分含量、色差、呼吸强度、硬度、叶绿素含量、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量、多酚氧化酶（polyphenol oxidase，PPO）和过氧化物酶（peroxidase，POD）活性，总酚和总黄酮含量。结果表明，在贮藏期间，处理组青皮核桃与对照组相比，处理组显著（P<0.05）延缓了其水分含量的降低和色差的变化，延缓褐变指数、呼吸强度和PPO活性的上升，抑制了硬度、叶绿素、总酚、总黄酮含量的下降，降低了贮藏期MDA的生成量，更好的保持POD活性。由试验可知，赤霉素+咪鲜胺处理的青皮核桃水分含量、硬度、叶绿素含量、总酚和总黄酮含量最高，褐变指数和色差上升最缓慢，呼吸强度最低，丙二醛含量和PPO、POD活性最低，保鲜效果最佳。Abstract: To explore the effects of different preservation treatments on the storage quality of green walnut, this study took green walnut as test material and adopted 4 different preservation. Methods: Soaked in cold water at 0 ℃ for 5 min, 150 mg/L ClO2 for 20 min, 100 mg/L gibberellin for 20 min and mixed with gibberellin (100 mg/L)+imidamine (active component content 450 g/L) for 20 min. The browning index, moisture content, color difference, respiratory intensity, hardness, chlorophyll content, malondialdehyde (MDA) content, polyphenol oxidase (PPO) and peroxidase (POD) activity, total phenol and total flavonoids content of walnut with green peel as control were studied during storage under 0±0.3 ℃.The results showed that during the storage, compared with the control group, the treatment group significantly (P<0.05) delayed the decrease of water content and the change of color difference, delayed the increase of browning index, respiratory intensity and PPO activity, inhibited the decrease of hardness, chlorophyll, total phenol and total flavonoid contents, reduced the MDA production and better maintained POD activity during the storage period. According to the experiment, the water content, hardness, chlorophyll content, total phenol and total flavone content of green walnut treated with gibberellin+imimine were the highest, the browning index and color difference increased the most slowly, the respiratory intensity was the lowest, the malondialdehyde content and the activities of PPO and POD were the lowest, and the preservation effect was the best.
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Keywords:
- green walnut /
- low-temperature storage /
- preservation treatment /
- storage effect /
- gibberellin /
- prochloraz
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核桃营养价值及活性成分丰富，口感清爽。核桃仁中含有丰富的蛋白质，碳水化合物、氨基酸、不饱和脂肪酸、维生素、矿物质、多酚和植物甾醇等，具有改善疲劳和失眠[1]、抑制脑功能衰退、调节血黏度、调节糖脂代谢[2]、降低心血管疾病风险[3]等保健功能，是一种优质的食药同源食物。消费者购买的多为干制核桃，研究发现，与干制核桃相比，鲜食核桃仁中所含氨基酸、维生素C等营养成分较高，且香味清香，风味独特[4]，鲜食核桃受到越来越多消费者的青睐，具有很好的市场前景。但鲜食核桃采后生理代谢活动旺盛，含水量高、酶活性高，极易在贮藏过程中出现青皮褐变腐烂，核仁氧化酸败、失水等现象，影响贮运感官品质和销售价值。因此，研究青皮核桃贮藏保鲜技术，延长贮藏期，对鲜食核桃产业发展具有重要生产实践意义。
目前，果蔬保鲜技术很多。冷激处理分为冰水混合物冷激处理和低温空气冷激处理。冷激处理通过低温胁迫诱发果实的生理抗性，可以减少果蔬营养的损失，抑制果蔬的后熟，从而延长贮藏期。何萍[5]采用冷激处理不同成熟度壶瓶枣，发现冷激处理可以推迟其呼吸峰，降低PPO活性保持较好的营养成分，延缓果皮褐变，对其成熟衰老有抑制作用。Zhang等[6]采用0 ℃冰水混合物的冷激处理方法，将香蕉处理1 h后在20 ℃进行贮藏，研究发现，冷激处理可以延缓香蕉果皮的转色、软化。冷激处理还可以提高黄瓜的抗氧化酶活性[7]。二氧化氯（ClO2）被世界卫生组织和世界粮农组织列为A1级高效、安全、广谱的化学消毒剂，是国际上公认的无毒、无残留的果蔬保鲜剂和杀菌剂[8]。王进等[9]研究表明ClO2可以抑制青皮核桃腐烂霉变，保持核仁品质。李广胜等[10]认为混合处理（ClO2＋1-MCP）能更好的保持青皮核桃的贮藏品质。董晓庆等[11]发现ClO2处理可以有效抑制青皮核桃的褐变和腐烂，降低水分的散失，延缓核仁的氧化变质。赤霉素（gibberellic acid，GA3）是一种内源植物激素，可以调节植物的生长发育及植物细胞内许多抗氧化酶的活性，延缓果蔬的后熟和衰老[12]。王旭等[13] 研究表明采用浓度为100 mg/L的赤霉素处理大平顶枣保鲜效果较好；焦莉等[14]采用赤霉素对生菜进行保鲜处理，其结果可以延长生菜的贮藏期，提高其贮藏品质。咪鲜胺是一种低毒广谱高效的咪唑类杀菌剂，在贮藏过程中，对于果蔬的病害和保鲜能起到显著效果，其主要通过抑制甾醇的生物合成而起作用[15]。目前，咪鲜胺在一些果实的贮藏保鲜过程中均得到良好的保鲜效果。
目前，冷水处理、赤霉素、赤霉素与咪鲜胺的复合使用在青皮核桃贮藏保鲜的研究尚未见报道。本研究以青皮核桃为试材，研究冷水处理、ClO2处理、赤霉素处理、赤霉素与咪鲜胺混合处理对青皮核桃采后贮藏保鲜效果的影响，以期为青皮核桃采后贮藏保鲜提供理论依据。
1. 材料与方法
1.1 材料与仪器
‘绿岭’青皮核桃 采自河北省临城县绿岭庄园核桃基地，采摘时挑选大小一致、无病害、无机械伤的青皮核桃，采后于国家保鲜工程中心冷库预冷24 h；0.04 mm聚乙烯（PE）薄膜保鲜袋 国家农产品保鲜工程技术研究中心（天津）提供；赤霉素 上海同瑞生物科技有限公司；二氧化氯（ClO2） 天津任能环保科技有限公司；咪鲜胺（有效成分含量450 g/L） 山东省青岛瀚生生物科技股份有限公司；丙酮、三氯乙酸、硫代巴比妥酸、愈创木酚、30% H2O2 分析纯，天津市江天统一科技有限公司。
SynergyH1多功能酶标仪 美国BioTek公司；H2500R高速冷冻离心机 德国Eppenddorf公司；CR-400色彩色差计 日本美能达公司；TA.XTPlus物性测试仪 美国Stable Micro System公司；101-3AB鼓风干燥箱 天津市斯泰特仪器有限公司；SHC-A水浴恒温振荡器 常州国宇仪器制造有限公司；HH-2数显恒温水浴锅 常州天瑞仪器有限公司。
1.2 实验方法
1.2.1 青皮核桃保鲜处理
冷水处理组：将青皮核桃浸泡于0 ℃冰水混合物5 min；ClO2处理组：将青皮核桃浸泡于150 mg/L ClO2溶液中，浸泡20 min；赤霉素处理组：将青皮核桃浸泡于100 mg/L赤霉素溶液中，浸泡20 min；赤霉素+咪鲜胺混合处理组：将青皮核桃浸泡于赤霉素（100 mg/L）和咪鲜胺（有效成分含量450 g/L）的混合溶液中，浸泡20 min；对照组（CK）：将青皮核桃不做任何处理。上述处理均晾干后装入0.04 mm PE袋中，置于冷库贮藏。贮藏库温度为0±0.3 ℃，贮藏时间70 d，每个处理6袋，每袋50个核桃，每隔两周取样一次，测定青皮核桃品质指标。
1.2.2 测定指标与方法
1.2.2.1 褐变指数的测定
参照董慧等[16]的测定方法，根据青皮核桃表面褐变面积的大小，将褐变面积共分为5级。
(1) 1.2.2.2 水分含量的测定
采用干燥恒重法，取青皮和核仁2.000 g，放入恒温干燥箱中，于105 ℃条件下干燥至恒重。
(2) 式中：m0为干燥皿的质量，g；m1为烘干前样品和称量皿的质量，g；m2为恒重后样品和称量皿的质量，g。
1.2.2.3 色差的测定
采用色差计测定核桃青皮色差，随机从每个处理中取10个青皮核桃，选取赤道上的3个不同的点，记录各个点的a*值。
1.2.2.4 呼吸强度的测定
参考Yun等[17]的方法，稍作修改。每组处理随机取青皮核桃，置于密封罐内，密闭2 h，测定密封罐内CO2的浓度。
(3) 式中：C为CO2浓度，%；V1为密封罐体积，L；V2样品体积，L；t为密封时间，h；m为样品质量，kg。
1.2.2.5 硬度的测定
参考张婷等[18]的方法，稍作修改。采用物性测定仪测定, 采用Φ2 mm柱头对青皮核桃进行测试，穿刺深度为6 mm，测试速度为2 mm/s，每个处理测定15个。
1.2.2.6 叶绿素含量的测定
参考李雪瑞等[19]方法。称取2 g青皮样品，加入20 mL丙酮:乙醇（1:1）混合液，避光静置12 h。分别在波长645 nm和663 nm处测定吸光值，按公式（4）求得青皮叶绿素含量，重复3次。
(4) 式中，V为提取液体积，mL；m为样品质量，g。
1.2.2.7 丙二醛（malonic dialdehyde，MDA）含量的测定
参照马艳萍[20]的方法，称取样品1 g，加入10%三氯乙酸5 mL，4 ℃，10000 r/min离心20 min，上清液为样品提取液，取上清液2 mL加入2 mL 0.67%硫代巴比妥酸溶液，混合后沸水浴20 min，取出后冷却，分别在450、532、600 nm波长处测定吸光值。重复三次。
1.2.2.8 多酚氧化酶（polyphenoloxidase，PPO）的测定
参照蒋柳庆[21]的方法, 称取样品5 g，加入10 mL pH6.8磷酸缓冲液，4 ℃，10000 r/min离心20 min，上清液即为酶提取液，配制反应体系，在波长420 nm测定吸光值，重复三次。
1.2.2.9 过氧化物酶（POD）的测定
参照叶妞[22]的方法, 称取样品5 g，加入10 mL pH6.8磷酸缓冲液，4 ℃，10000 r/min离心20 min，上清液即为酶提取液，配制反应体系，在波长470 nm测定吸光值，重复三次。
1.2.2.10 总酚含量的测定
参照兰文忠等[23]的方法，称取0.1 g样品，加入1.5 mL 70%乙醇溶液，4 ℃、10000 r/min离心20 min，吸取0.2 mL上清液加入4 mL 20% Na2C03，反应2 min 加入0.9 mL福林酚，在750 nm处测定吸光值。
1.2.2.11 总黄酮含量的测定
参照兰文忠[23]的方法，称取1 g青皮，加入10 mL 50%甲醇浸提2 h，取提取液1 mL加入0.5 mL 5% NaNO2，静置10 min，再加入0.5 mL Al（NO3）3，静置10 min，加入3 mL 4% NaOH，静置10 min，在波长510 nm处测定吸光值。
1.3 数据处理
试验数据采用Excel软件计算处理，采用Origin 64.0作图，使用SPSS 26.0软件统计分析，并用单因素方差分析进行差异分析，P<0.05表示差异显著。
2. 结果与分析
2.1 不同保鲜处理对青皮核桃褐变指数的影响
青皮核桃在采后贮藏期间容易发生褐变，直接影响其贮藏品质。青皮核桃表皮褐变指数直观反映了其褐变程度。由图1可知，在整个贮藏期间，所有处理组的褐变指数均呈现上升趋势，这与青皮细胞衰老和内部氧化褐变有关。第2周时出现不同程度的褐变，贮藏6~10周时，保鲜剂处理组褐变指数均低于对照组，在第10周时，赤霉素+咪鲜胺处理组褐变指数为31.9%，低于赤霉素处理组和ClO2处理组，显著低于对照组和冷水处理组（P<0.05），赤霉素可以协同调控果实采后品质，提高果实抗病性。说明赤霉素+咪鲜胺协同作用可以显著抑制青皮核桃贮藏过程中青皮的褐变。刘瑾等[24]研究结果与本研究结果相似，采前赤霉素处理可以减轻“黑宝石”李果的褐变程度，延长贮藏期，提高贮藏品质。
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图 1 不同保鲜处理对青皮核桃褐变指数的影响Figure 1. Effects of different preservation treatments on browning index of green walnut2.2 不同保鲜处理对青皮核桃水分含量的影响
水分含量是影响青皮贮藏品质的一个重要指标，其变化会影响青皮的外观和核仁的口感质地。由图2、图3可以看出，青皮和核仁的水分含量随贮藏时间的延长呈下降趋势，这与李广胜等[10]研究结果一致。贮藏4周后，青皮和核仁的水分含量下降较快，由图2可知，青皮水分含量初值为92.76%，贮藏10周时，赤霉素+咪鲜胺、赤霉素、ClO2、冷水处理组高于对照组，赤霉素+咪鲜胺处理组显著高于对照组（P<0.05）。在贮藏前期青皮核桃呼吸作用旺盛，水分会随着呼吸作用被排出，造成水分含量的下降；在贮藏后期。随着果实的衰老，细胞壁结构受损，营养物质损失，加速水分含量的下降。焦莉等[14]的研究也发现，浓度为25 mg/L的赤霉素能有效抑制生菜叶片水分含量的下降。由图3可知，贮藏初期核仁水分含量为32.79%，整个贮藏期间，CK、冷水、ClO2、赤霉素、赤霉素+咪鲜胺处理组的核仁水分含量分别下降了26.31%、25.8%、21.38%、23.24%、20.19%，可以看出，赤霉素+咪鲜胺混合处理的青皮核桃核仁水分含量下降率低于其他处理组，结果表明，赤霉素+咪鲜胺处理青皮核桃能有效抑制青皮核桃青皮和核仁水分含量的降低。这一结论与张建业等[25]研究结果一致，赤霉素和咪鲜胺的复合处理可以延缓蒜薹水分的散失。
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图 2 不同保鲜处理对青皮水分含量的影响Figure 2. Effects of different preservation treatments on water content of green peel![]()
图 3 不同保鲜处理对核仁水分含量的影响Figure 3. Effects of different preservation treatments on water content of nucleoli2.3 不同保鲜处理对青皮核桃色差的影响
色差是评价果实外观品质的重要指标，红绿度a*值越小说明绿度越高。由图4可知，在贮藏过程中，a*呈现逐渐上升趋势，贮藏第2周时，a*差异不大，从第4周开始，a*都开始明显上升，处理组始终低于对照组，混合处理组显著低于其他组（P<0.05）。赤霉素可以抑制果实叶绿素的降解，从而延缓青皮a*的上升。结果表明，赤霉素和咪鲜胺混合处理的青皮核桃色泽保持最好。这与前人研究结果一致，咪鲜胺和二氧化氯复合处理仔姜，可以保持其色泽和亮度[26]。
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图 4 不同保鲜处理对青皮核桃色差的影响Figure 4. Efficts of different preservation treatments on color difference of green walnut2.4 不同保鲜处理对青皮核桃呼吸强度的影响
在果蔬贮藏过程中，呼吸作用是一种必不可少的代谢活动，会消耗果蔬体内积累的营养物质，从而影响果蔬的贮藏品质。抑制采后青皮核桃的呼吸强度，可以延长其贮藏期。由图5可以看出，呼吸强度呈先上升后下降的趋势，青皮核桃是一种呼吸跃变型果实，在贮藏过程中，消耗自身营养物质，不断进行呼吸作用和生理代谢活动。在第2周时，出现呼吸高峰，冷水处理组达到83.94 mg CO2/（kg·h），对照组达到78.57 mg CO2/（kg·h），保鲜剂处理组均低于对照组，其中赤霉素+咪鲜胺处理组最低，为47.09 mg CO2/（kg·h），随后各处理组的呼吸强度下降，在贮藏后期，对照组和冷水处理组变化幅度较小，赤霉素+咪鲜胺处理组始终低于其他处理组，说明赤霉素和咪鲜胺复合处理可以显著抑制青皮核桃的呼吸速率（P<0.05），延缓其成熟衰老。周会玲等[27]的研究结果与本文研究结果相似，采后用不同浓度赤霉素处理番茄可有效推迟其呼吸高峰，降低呼吸峰值。在聂青玉[28]研究结果中，咪鲜胺+壳寡糖混合处理可以抑制脐橙的呼吸强度，与本文研究结果一致。
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图 5 不同保鲜处理对青皮核桃呼吸强度的影响Figure 5. Effects of different preservation treatments on respiratory intensity of green walnut2.5 不同保鲜处理对青皮核桃硬度的影响
青皮核桃在贮藏过程中随着贮藏时间延长，青皮细胞壁会发生降解，青皮软化，导致硬度降低。由图6可知，在贮藏过程中，对照组和处理组硬度均呈下降趋势，青皮核桃在贮藏过程中，随着贮藏时间延长，青皮组织中的细胞壁降解酶降解细胞壁物质，细胞壁结构被破坏，从而导致青皮软化，硬度降低[29]。对照组、冷水处理组始终低于保鲜剂处理组，贮藏第10周时，分别下降49.37%和50.19%，而赤霉素+咪鲜胺、赤霉素和ClO2处理组分别下降24.76%、25.72%和27.21%，与对照组差异显著，其中，赤霉素+咪鲜胺处理组下降缓慢。由此可见，赤霉素+咪鲜胺、赤霉素和ClO2能有效延缓青皮核桃硬度的下降速度，延缓组织结构衰老，其中赤霉素+咪鲜胺处理效果最佳。赤霉素可以抑制细胞水解酶的活性和果胶酶的降解，从而延缓果实硬度的下降[30]。赤霉素能够抑制乙烯的合成，同时可以清除过多的自由基对细胞膜造成的伤害，使果实维持较高的硬度[31]。类似结果在任邦来等[32]研究结果中得到验证，赤霉素对油桃的硬度有较好的维持效果；谢冬娣等[33]研究发现，带泥+咪鲜胺处理能更好维持荸荠硬度。
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图 6 不同保鲜处理对青皮核桃硬度的影响Figure 6. Effects of different preservation treatments on the hardness of green walnut2.6 不同保鲜处理对青皮核桃叶绿素含量的影响
青皮核桃在贮藏过程中色泽的变化与叶绿素含量密切相关[34]。由图7可知，青皮叶绿素随贮藏时间延长而下降。对照组叶绿素含量在整个贮藏期间始终低于其他处理组，说明保鲜处理可以延缓青皮叶绿素含量的下降。在贮藏前期，赤霉素+咪鲜胺与赤霉素处理的青皮核桃叶绿素含量无显著性差异（P>0.05），而显著高于对照组（P<0.05），贮藏到第10周时，赤霉素+咪鲜胺处理组的叶绿素含量为0.34 mg/g，高于CK组183.3%，显著高于其他处理组（P<0.05），赤霉素处理可降低叶绿素酶活性，抑制果实叶绿素降解，降低类黄酮物质合成，从而延缓果实衰老腐烂，延长贮藏期[35]。张建业等[25]用赤霉酸和咪鲜胺对蒜薹进行保鲜处理，同样可以抑制蒜薹叶绿素的损失，与本文结果一致。由此可得赤霉素+咪鲜胺复合处理可有效抑制叶绿素的降解，延缓青皮的黄化，维持青皮核桃的颜色品质。
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图 7 不同保鲜处理对青皮核桃叶绿素含量的影响Figure 7. Effects of different preservation treatments on chlorophyll content of walnut2.7 不同保鲜处理对青皮核桃核仁丙二醛的含量的影响
丙二醛（MDA）含量可以反映细胞膜脂质过氧化程度，MDA含量增加，细胞组织的破坏加剧[36]。由图8可以看出，MDA含量在贮藏期总体呈上升趋势。CK组上升速率高于处理组，在第6~10周时，赤霉素+咪鲜胺处理组始终低于其他处理组。在贮藏第10周时，赤霉素+咪鲜胺和赤霉素处理组MDA含量分别为5.99、6.69 mmol/g，冷水与ClO2处理组MDA含量分别为7.57、7.06 mmol/g，CK组含量为8.34 mmol/g，赤霉素+咪鲜胺处理组显著低于其他各组（P<0.05）。这是因为赤霉素可以保持果实细胞膜完整性，延缓MDA含量的上升。刘瑾等[24]对李果进行采前赤霉素处理，可以降低果实MDA的含量，提高果实抗低温胁迫的能力。巴良杰等[37]的研究发现，咪鲜胺可以抑制火龙果MDA的增加，延缓衰老。由此可见，赤霉素+咪鲜胺复合处理可以抑制青皮核桃脂质过氧化程度，维持细胞结构完整性。
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图 8 不同保鲜处理对青皮核桃核仁丙二醛含量的影响Figure 8. Effects of different preservation treatments on the content of malondialdehyde in walnut kernel2.8 不同保鲜处理对青皮核桃PPO活性的影响
PPO是引起果实褐变的主要酶类。由图9可以看出，PPO活性总体呈现先上升后下降的趋势。在贮藏前期，CK、冷水、ClO2处理组的PPO活性迅速上升，当果蔬细胞遭到破坏时，PPO与酚类物质在氧作用下生成醌类，醌类物质进一步生成褐色物质，引起果实褐变，导致PPO活性上升[38]。赤霉素、赤霉素＋咪鲜胺处理组的PPO活性降低，可能是青皮核桃受低温胁迫的影响，PPO活性变大，赤霉素和咪鲜胺可以抑制PPO活性。在贮藏10周时，对照组PPO活性为1.61 U/g，各处理组的PPO活性均低于对照组，其中赤霉素+咪鲜胺处理青皮核桃的PPO活性最低，为0.87 U/g，显著低于对照组（P<0.05）。赤霉素可降低PPO的生物合成，以延缓果实褐变[39]。此类研究结果在崔志宽等[40]的研究中得到验证，赤霉素+水杨酸处理可以抑制水蜜桃PPO活性。因此赤霉素+咪鲜胺能够有效降低采后青皮核桃PPO活性，减少酚类物质的氧化。
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图 9 不同保鲜处理对青皮核桃PPO活性的影响Figure 9. Effects of different preservation treatments on PPO activity of green walnut2.9 不同保鲜处理对青皮核桃POD活性的影响
POD是一种氧化还原酶，可以清除自由基，延缓果蔬的衰老。由图10可以看出，各组的青皮核桃POD活性均呈先上升后降低的趋势，贮藏前期POD可以清除自由基，延缓果实成熟衰老，贮藏后期过氧化氢积累，POD参与酚类物质代谢造成果实衰老[41]。在整个贮藏过程中，对照组POD活性始终高于其他保鲜剂处理组。贮藏第10周时，对照组的POD活性为0.63 U/g，显著高于其他处理组（P<0.05），冷水与ClO2处理组分别为0.6和0.57 U/g，赤霉素处理组为0.49 U/g，赤霉素+咪鲜胺处理组为0.38 U/g，保鲜剂处理组均能抑制POD活性，其中赤霉素+咪鲜胺处理组最低，显著低于对照组（P<0.05）。POD可以降低因过氧化氢积累造成的果实损伤。赤霉素可以调节果蔬细胞内多种酶的活性[42]。咪鲜胺可以维持细胞膜的完整性，提高抗氧化能力，因此赤霉素+咪鲜胺复合处理保鲜效果最好。与吕芳[43]研究结论一致，赤霉素可以抑制香蕉POD活性上升，延缓香蕉的成熟衰老。
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图 10 不同保鲜处理对青皮核桃POD活性的影响Figure 10. Effects of different preservation treatments on POD activity of green walnut2.10 不同保鲜处理对核桃青皮总酚含量的影响
核桃青皮中总酚具有较强的抗氧化性，与果实的抗病性和褐变有密切关系[44]。由图11可知，各处理组的青皮核桃总酚含量整体呈现下降趋势。在贮藏前期处理组和对照组总酚含量呈下降趋势，这可能是青皮核桃挥发性物质损耗，导致总酚含量下降，贮藏第4周时，果实受到生理状态的改变，酚类物质的转化机能被激发，促使组织内酚类物质的合成。在第6周时，总酚含量呈上升趋势出现峰值，赤霉素+咪鲜胺、ClO2和赤霉素处理的青皮核桃总酚含量显著高于对照组（P<0.05）。在贮藏后期，呈现下降趋势，原因是酚类物质随贮藏时间的延长逐渐降解，含量降低。贮藏至10周时，赤霉素+咪鲜胺、赤霉素和ClO2的总酚含量降到4.54、3.93和3.57 mg/g，显著高于对照组（P<0.05），说明赤霉素+咪鲜胺、赤霉素和ClO2能延缓总酚含量的下降，其中赤霉素+咪鲜胺复合处理效果最佳。程晨[45]的研究结果表明，咪鲜胺与松属素的的复配处理对柑橘具有良好的防腐保鲜效果。
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图 11 不同保鲜处理对青皮核桃总酚含量的影响Figure 11. Effects of different preservation treatments on total phenol content of walnut2.11 不同保鲜处理对核桃青皮总黄酮含量的影响
核桃青皮中的总黄酮具有抗氧化活性[46]。由图12可知，总黄酮含量总体呈现下降-上升-下降的趋势，这与陈柏等[47]研究趋势相一致。青皮核桃在遭遇胁迫时，可以积累类黄酮，类黄酮具有清除活性氧的功能，可以提高青皮核桃的抗逆性。在贮藏结束时，各处理组的总黄酮含量为7.98、7.19、6.69、6.02和5.27 mg/g，赤霉素+咪鲜胺和对照组分别下降了22.82%和49%，差异显著（P<0.05），说明赤霉素+咪鲜胺处理可以延缓青皮核桃总黄酮含量的下降。这与前人研究类似，咪鲜胺+松属素、咪鲜胺+高良姜素复配处理均能提高柑橘果皮中黄酮含量[45]。
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图 12 不同保鲜方法对青皮核桃总黄酮含量的影响Figure 12. Effects of different preservation methods on total flavonoids content in walnut3. 结论
本研究采用冷水、ClO2、赤霉素和赤霉素+咪鲜胺对青皮核桃进行保鲜处理，对贮藏过程中各组青皮核桃的生理指标进行分析。结果表明，冷水、ClO2、赤霉素和赤霉素+咪鲜胺处理都能一定程度地提高青皮核桃的耐贮性，保持青皮核桃的品质。其中，赤霉素+咪鲜胺的复合处理保鲜效果最佳，可以显著降低青皮核桃的褐变指数和呼吸强度，降低呼吸峰的峰值，有效的减少水分含量的下降，显著抑制青皮核桃MDA、PPO和POD活性的上升，延缓青皮色差、硬度和叶绿素含量的降低，抑制总酚、总黄酮的消耗，有效延缓果实衰老，维持较高的贮藏品质。该研究为青皮核桃的贮藏保鲜提供一定的理论基础和依据。虽然赤霉素+咪鲜胺的复合处理可以提高青皮核桃的贮藏品质，但对于赤霉素和咪鲜胺对青皮核桃保鲜的协同机理尚不明确，且浓度需进一步优化，以期降低生产成本。
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图 1 不同保鲜处理对青皮核桃褐变指数的影响
Figure 1. Effects of different preservation treatments on browning index of green walnut
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图 2 不同保鲜处理对青皮水分含量的影响
Figure 2. Effects of different preservation treatments on water content of green peel
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图 3 不同保鲜处理对核仁水分含量的影响
Figure 3. Effects of different preservation treatments on water content of nucleoli
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图 4 不同保鲜处理对青皮核桃色差的影响
Figure 4. Efficts of different preservation treatments on color difference of green walnut
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图 5 不同保鲜处理对青皮核桃呼吸强度的影响
Figure 5. Effects of different preservation treatments on respiratory intensity of green walnut
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图 6 不同保鲜处理对青皮核桃硬度的影响
Figure 6. Effects of different preservation treatments on the hardness of green walnut
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图 7 不同保鲜处理对青皮核桃叶绿素含量的影响
Figure 7. Effects of different preservation treatments on chlorophyll content of walnut
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图 8 不同保鲜处理对青皮核桃核仁丙二醛含量的影响
Figure 8. Effects of different preservation treatments on the content of malondialdehyde in walnut kernel
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图 9 不同保鲜处理对青皮核桃PPO活性的影响
Figure 9. Effects of different preservation treatments on PPO activity of green walnut
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图 10 不同保鲜处理对青皮核桃POD活性的影响
Figure 10. Effects of different preservation treatments on POD activity of green walnut
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图 11 不同保鲜处理对青皮核桃总酚含量的影响
Figure 11. Effects of different preservation treatments on total phenol content of walnut
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