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中国精品科技期刊2020

枇杷原浆护色配方优化及贮藏期间品质变化

郑伟, 张相钊, 邓鑫峰, 马靖雯, 鲁周民

郑伟,张相钊,邓鑫峰,等. 枇杷原浆护色配方优化及贮藏期间品质变化[J]. 食品工业科技,2024,45(14):184−193. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023080271.
引用本文: 郑伟,张相钊,邓鑫峰,等. 枇杷原浆护色配方优化及贮藏期间品质变化[J]. 食品工业科技,2024,45(14):184−193. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023080271.
ZHENG Wei, ZHANG Xiangzhao, DENG Xinfeng, et al. Optimization of Loquat Puree Color Protection Formula and Quality Change During Storage[J]. Science and Technology of Food Industry, 2024, 45(14): 184−193. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023080271.
Citation: ZHENG Wei, ZHANG Xiangzhao, DENG Xinfeng, et al. Optimization of Loquat Puree Color Protection Formula and Quality Change During Storage[J]. Science and Technology of Food Industry, 2024, 45(14): 184−193. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023080271.

枇杷原浆护色配方优化及贮藏期间品质变化

基金项目: 财政部项目“西北农林科技大学推广专项”(TGZX2021-24)。
详细信息
    作者简介:

    郑伟(1998−),男,硕士研究生,研究方向:经济林果品加工利用,E-mail:1372427774@qq.com

    通讯作者:

    鲁周民(1966−),男,硕士,研究员,研究方向:经济林果品加工利用,E-mail:lzm@nwafu.edu.cn

  • 中图分类号: TS255.36

Optimization of Loquat Puree Color Protection Formula and Quality Change During Storage

  • 摘要: 为减轻枇杷鲜果打浆过程的酶促褐变,维持原浆色泽,以色差值为主要响应变量,研究了六种护色剂对枇杷鲜果打浆过程的护色效果,并选择护色效果最佳的两种护色剂进行中心复合设计(Central Composite Design,CCD)试验,在此基础上考察复合护色对枇杷原浆5 ℃贮藏28 d时色泽和营养成分的影响。结果表明,六种护色剂中抗坏血酸和植酸护色效果显著,其最佳配比为0.332%抗坏血酸和0.065%植酸。验证试验结果表明,复合护色后枇杷原浆平均ΔE为6.70,与预测值的吻合率达97.31%。贮藏试验表明,复合护色可有效减缓贮藏期间枇杷原浆L*a*b*和ΔE值的降低,同时缓解总糖、抗坏血酸和总酚的损失以及可滴定酸含量增加,维持原浆的营养品质。该研究可为枇杷的加工利用提供技术参考。
    Abstract: In order to reduce the enzymatic browning of loquat pulp during the pulping process and to maintain the original color of the pulp, the color difference value (ΔE) was used as the main response variable. The effect of six color protectors in protecting loquat pulp from pulping was investigated and the two best performers were selected for the central composite design (CCD) test. Based on this, an investigation was conducted into the effect of composite color protection on the color and the content of nutrition of loquat pulp during storage at 5 ℃ for 28 days. Out of the six color protectors, the results indicated that ascorbic acid and phytic acid had a significant impact on color protection, and the optimal ratio included 0.332% ascorbic acid, 0.065% phytic acid. The verification test showed the average ΔE of loquat pulp after composite color protection was 6.70, which closely aligned with the predicted value at 97.31% agreement. The storage test showed that the composite color protection could effectively retard the decrease in L*, a*, b* and ΔE values of loquat pulp, while reducing the loss of total sugar, ascorbic acid and total phenol, and the increased of titratable acid content, to maintain the nutrition of the pulp. This study could provide technical reference for the processing and utilization of loquat.
  • 枇杷(Eriobotrya japonica Lindl.)是我国广泛种植的常绿树种,以其多汁、酸甜可口的特性备受消费者青睐,主要作为鲜果食用,但其主产区果实成熟期集中,短期内大量上市易导致鲜果囤积、滞销。枇杷是非呼吸跃变型水果,采后生理生化特性限制其鲜果的贮藏,因此,加工枇杷果品在一定程度上可减少鲜果损失,增加产品附加值[1]。枇杷果汁、果醋等产品的加工过程一般包括原料挑选、去皮去核、打浆、酶解、离心、灭菌、装瓶等步骤[23]。其中打浆是枇杷果品生产过程的重要工序,但此过程会促使酚类物质、氧气和多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)充分接触而诱发酶促褐变[1,4],需辅以各种护色处理来预防。

    酶促褐变是指在氧气存在下,PPO或过氧化物酶催化酚类迅速氧化成邻醌,后者与其他化合物聚合形成黑色素的反应[5],参与该反应最主要的酶是PPO。酶促褐变不仅影响枇杷产品的营养、感官品质[6],还导致消费者接受度降低。有50%以上易褐变的食品因酶促褐变被浪费[5]。可采用物理或化学手段去除氧气、结合底物或酶活性位点的Cu2+来防止酶促褐变[7]。各种亚硫酸盐及其衍生物可作为PPO的不可逆抑制剂控制食品的酶促褐变[4],但可能引发如过敏并发症之类的副作用[5],因此该类物质并不被提倡使用。而半胱氨酸、抗坏血酸及其衍生物具有还原性,已被广泛应用于水果或蔬菜加工,抑制褐变和控制变质[5,8]。柠檬酸、乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)等因其良好的抗褐变效果也常被用于食品护色[8]。氯化钙(CaCl2)对鲜切木瓜的褐变也有一定的抑制作用[9]。植酸通过螯合辅酶中的金属离子来抑制PPO活性,减少酶促褐变的发生[10],常用作果蔬护色剂。颜色是食品最直观的感知属性,也是评价食品质量的重要指标,但褐变引起的色泽劣变并不能被消费者接受,这是加工者最关心的问题。然而,单一护色剂往往护色效果不稳定,且消耗量较大,复合护色可以有效弥补这些不足,发挥单一护色剂的协同增效作用。

    本研究以“大五星”枇杷为原料,在打浆过程中添加不同种类、含量的护色剂,并以ΔE为主要响应变量,选择合适的护色剂进行CCD试验以得到最优护色技术,同时考察该技术对贮藏期间枇杷原浆品质的影响,以期为枇杷加工提供高效的护色技术。

    枇杷鲜果 于2023年3月中旬购自云南蒙自,根据大小均匀度和外部颜色,选取成熟度一致且无病虫害的果实作为试验原料;抗坏血酸、半胱氨酸、植酸、EDTA-2Na、柠檬酸、氯化钙 食品级(纯度:98%~99%),汇泉生物科技有限公司;2,2’-二联吡啶 分析纯,上海凛恩科技发展有限公司;福林酚(BR) 北京索莱宝科技有限公司;正己烷 分析纯,天津市百世化工有限股份公司;丙酮 分析纯,西陇科学股份有限公司;3,5-二硝基水杨酸 分析纯,上海麦克林生化科技有限公司。

    JYL-C022E九阳料理机 九阳股份有限公司;CR-10型色差仪 日本Konica Minolta公司;350-8519 型万分之一分析天平 瑞士普利赛斯公司;MULTISKAN GO型全波长酶标仪 芬兰Thermo Fish公司。

    选取色泽一致的枇杷鲜果,用去核器去皮、去核,并以切片器切分成约1 cm的薄片,暂时浸泡在含水的烧杯中以防氧化。将果片分成5份,每份约100 g,在打浆前取出果片沥干水分,以50 g果肉质量为100%,按表1依次加入不同含量的护色剂,并以未添加护色剂的果浆为对照,打浆结束后测定枇杷原浆色泽参数。

    表  1  单因素实验设计
    Table  1.  Design of single factor tests
    实验组 抗坏血酸
    (%)
    半胱氨酸
    (%)
    植酸
    (%)
    EDTA-2Na
    (%)
    柠檬酸
    (%)
    CaCl2
    (%)
    T1 0.106 0.04 0.0264 0.04 0.077 0.10
    T2 0.176 0.10 0.066 0.10 0.129 0.20
    T3 0.352 0.16 0.132 0.16 0.258 0.30
    T4 0.528 0.20 0.198 0.20 0.576 0.40
    CK 0.000 0.00 0.000 0.00 0.000 0.00
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    基于单因素实验结果,选取两种护色效果显著的护色剂,以ΔE为响应变量进行CCD试验见表2。试验数据拟合参考Hamid等[11]的二阶多项式模型并结合响应面试验分析,确定最佳配比。

    表  2  CCD试验因素及水平
    Table  2.  Factors and levels of CCD tests
    因素 水平
    −1.682 −1 0 1 1.682
    X1 抗坏血酸 0.018 0.1056 0.3168 0.528 0.616
    X2 植酸 0.00674 0.0396 0.1188 0.198 0.23074
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    选择外观一致、无损伤的枇杷鲜果,清洗、去皮、去核、打浆、脱气、灭菌、分装。在打浆过程按最佳配比添加抗坏血酸和植酸,同时分别以单一抗坏血酸和植酸为对照。无菌条件下将枇杷原浆分装于食品级密封袋,未抽真空,并放置在(5±1) ℃、50%湿度的冰箱。原浆每周取样一次,共取四次,取样时测定原浆色泽参数,重复六次;随后原浆用液氮冷冻研磨贮藏于−80 ℃,取样结束统一测定其余指标。

    用色差仪测定枇杷原浆的L*a*b*值,并根据式(1)~式(3)分别计算ΔE、色度(C*)和色相角(H*)。

    ΔE=(L*L0)2+(a*a0)2+(b*b0)2
    (1)
    C*=(a*2+b*2)
    (2)
    H*=arctan(b*/a*)
    (3)

    式中,ΔE表示护色原浆与未护色原浆(CK)的色泽差异;L0L*a0a*b0b*值分别为CK和护色原浆的亮度、红绿度、黄蓝度;L值表示从黑色(0)到白色(100)的亮度,可指示褐变程度。L*值越低,表明食品亮度越低,褐变程度越大[8]。色度(C*)反映颜色鲜艳程度,数值越大,饱和度越高,否则越暗。色相角(H*)表示从红色(0°)到黄色(90°)色相。ΔE值表示护色组与CK组的颜色差异,值越大说明两者颜色差异越明显。根据ΔE值大小,可将其分为非常明显(ΔE>3)、明显(2<ΔE<3)和微小差异(ΔE<2)等几个级别[12]

    参考3,5-二硝基水杨酸法[13],略作调整。取0.3 g样品于5 mL纯水中,经超声提取后加入沉淀剂(乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液)各0.4 mL,过滤收集上清液。取1 mL上清液加入0.4 mL(10%)盐酸,沸水浴15 min,并添加3滴0.1%酚酞指示剂,随后用30% NaOH溶液滴定至溶液无明显红色。取上述水解液0.4 mL,依次加入0.6 mL水和2 mL DNS试剂,沸水浴6 min。流水冷却后测量520 nm处的吸光值。总糖含量以葡萄糖计,g/100 g。

    参考杨巍等[14]的方法,略作调整。取3 g样品于12 mL水中,50 ℃水浴30 min,离心(5000 r/min)5 min,取10 mL上清液加入3滴0.1%酚酞指示剂,用标定的0.025 mol/L NaOH溶液滴定至初显粉色并在30 s内不褪色。结果以苹果酸计。

    参考2,2’-二联吡啶法[15],略作调整。取0.8 g样品于4 mL 6%三氯乙酸(TCA)中,5 ℃静置15 min,离心(12000 r/min)4 min。取上清液1 mL,依此加入0.2 mol/L磷酸钾缓冲液(pH 7.4)0.7 mL,10% TCA溶液0.5 mL,42%(v/v)磷酸0.4 mL,4% 2,2’-二联吡啶0.4 mL,3%三氯化铁0.2 mL,42 ℃水浴40 min后于525 nm处测定吸光值。抗坏血酸含量根据抗坏血酸标准品制作的标准曲线计算,mg/100 g。标准曲线回归方程:y=66.708x+0.1197,R2=0.9985。

    抗坏血酸含量(mg/100 g)=100C×Vt/(Vs×M)

    式中,C是指从标曲获得的质量(mg);Vt是样品提取液总体积(mL);Vs是显色时提取液添加量(mL);M是样品质量(g)。

    参考福林酚法[16],略作调整。取0.4 g样品于4 mL 70%乙醇溶液中,超声提取0.5 h,离心(10000 r/min)10 min,收集上清液。取0.4 mL样液,依次加入0.5 mL福林酚和4.6 mL水,混匀,5 min后加入7.5%碳酸钠溶液1.5 mL,并在765 nm处测量吸光值。总酚含量以没食子酸计,mg/100 g。标准曲线回归方程:y=9.8888x+0.0422,R2=0.9994。

    总酚含量(mg/100 g)=100C×Vt/(Vs×M)

    式中,C是指从标曲获得的质量(mg);Vt是样品提取液总体积(mL);Vs是显色时提取液添加量(mL);M是样品质量(g)。

    类胡萝卜素提取参考Suo 等[17]的方法,总含量参考下式计算:

    TCC(mg/100g)=A×V×103/(E1%1 cm×m)
    (4)

    式中,A:样品在450 nm处的吸光度;V:提取物总体积(mL);m:样品质量(g);E1%1 cmβ-胡萝卜素在己烷中的消光系数(2560)。

    PPO活性参考Zhang等[6]的方法测定。取原浆3 g,加入含有1%聚乙烯聚吡咯烷酮的0.1 mol/L磷酸钠缓冲液(pH6.5)15 mL均质,4 ℃,10000×g离心10 min。收集上清液。反应混合物包括40 mmol/L儿茶酚1.5 mL和0.1 mol/L、磷酸钠缓冲液2.3 mL,置于25 ℃水浴5 min,然后加入0.2 mL粗酶,充分混合,在420 nm波长下测定3 min内吸光度变化。以每克果肉每分钟吸光值变化0.001表示1个酶活性单位,结果表示为U/g(FW)。

    数据以平均值±标准差表示,采用SPSS 26.0 进行单因素(ANOVA)方差分析,P<0.05表示差异显著,P<0.01表示差异极显著,并用Origin 2023b作图。

    抗坏血酸是一种水溶性抗氧化剂,可有效清除氧自由基,将酶促形成的醌还原为其前体酚从而抑制酶促褐变,有时也作为酸化剂使用[7]。不同浓度抗坏血酸对原浆色泽参数的影响如图1所示。T2~T4组原浆L*和ΔE值均高于CK,表明打浆过程添加适宜含量的抗坏血酸可有效抑制果肉褐变。L*a*值随抗坏血酸浓度增加而增加,并在0.352%时趋于平稳,其余色泽参数(b*H*)均呈先升后降的趋势。添加0.352%抗坏血酸(T3)时原浆各色泽参数值均较高,其中L*、ΔE值与CK组差异显著(P<0.05),表明此浓度下护色效果最佳。a*值随处理浓度增加呈上升趋势,且C*值均高于CK组,表明抗坏血酸可减少原浆红度损失,维持色泽饱和度[18]。总之,T1~T4组原浆各色泽参数均高于CK组,添加抗坏血酸可有效维持打浆过程的枇杷色泽。

    图  1  抗坏血酸浓度对原浆色泽的影响
    注:(a)L*a*b*值的变化;(b)C*H*、ΔE值的变化;不同小写字母表示不同浓度处理间有显著性差异(P<0.05);图2~图6同。
    Figure  1.  Effects of ascorbic acid concentration on the color of the puree

    半胱氨酸含有巯基,可通过与邻醌结合形成半胱氨酸加合物来抑制PPO引起的褐变[7]。半胱氨酸浓度对原浆色泽参数的影响如图2所示。各色泽参数变化随半胱氨酸浓度增加趋势不完全一致。a*值随浓度增加先升后降;而b*L*C*、ΔE值先升高后趋于平稳;H*值则呈先下降并趋于平稳。T1(0.04%半胱氨酸)组a*值显著低于CK组(P<0.05),原浆红度值损失加剧;仅在T3(0.1%半胱氨酸)组a*值显著高于CK组(P<0.05),原浆红度值被较好地维持。T1~T4组原浆b*C*值均显著高于CK组(P<0.05),半胱氨酸处理可有效维持原浆黄度值和饱和度。T1~T4组原浆L*、ΔE值显著高于CK组(P<0.05),表明适宜浓度的半胱氨酸可有效打浆过程的褐变,维持枇杷原浆色泽;但打浆结束后发现有不良气味产生,因此半胱氨酸不宜添加在枇杷原浆中。

    图  2  半胱胺酸浓度对原浆色泽的影响
    注:(a)L*a*b*值的变化;(b)C*H*、ΔE值的变化。
    Figure  2.  Effects of cysteine concentration on the color of the puree

    植酸可通过降低体系pH以及螯合Cu2+来抑制酶促褐变,其护色效果已在苹果汁、滇橄榄果脯中得到证实[1920]。植酸对枇杷原浆色泽参数的影响如图3所示。各浓度植酸处理后,原浆L*和ΔE值均显著高于CK组(P<0.05),表明打浆过程添加植酸可有效抑制褐变。随着植酸浓度增加,L*b*C*和ΔE值先升后降,其中L*值的变化与干制香蕉片表现一致[21];而a*值呈下降趋势,H*则先上升后趋于平稳,说明植酸护色可提高枇杷原浆亮度和黄度值,但不能维持红度值,这与抗坏血酸表现不一致。经植酸护色后,除a*值外其余色泽参数均高于CK组,表明原浆褐变被有效抑制,但可能使原浆色泽更趋于黄色。

    图  3  植酸浓度对原浆色泽的影响
    注:(a)L*a*b*值的变化;(b)C*H*、ΔE值的变化。
    Figure  3.  Effects of phytic acid concentrate on the color of the puree

    EDTA-2Na是一种金属螯合剂,可与PPO竞争性螯合金属离子而抑制其活性[22]。EDTA-2Na对原浆色泽参数的影响如图4所示。T1~T3组原浆L*b*C*、ΔE值显著高于CK(P<0.05),表明添加低浓度(0.04%~0.16%)的EDTA-2Na可提高原浆亮度、饱和度和黄度值,对褐变有一定的抑制效果。T1~T4组原浆各色泽参数均呈先升后降的趋势,而低浓度(T1、T2)的护色效果较高浓度(T3、T4)更好,其中T4组原浆各色泽参数与CK组无显著差异(P>0.05),护色效果不佳。这与对鞍山梨酒的研究相似[22]。贮藏期间,添加0.05%和0.1% EDTA-2Na的鞍山梨酒具有比添加0.01% EDTA-2Na更高的褐变度[22]。添加高浓度EDTA-2Na对护色并无效果。

    图  4  EDTA-2Na浓度对原浆色泽的影响
    注:(a)L*a*b*值的变化;(b)C*H*、ΔE值的变化。
    Figure  4.  Effects of EDTA-2Na concentrate on the color of the puree

    柠檬酸是天然存在的酸性物质,可使体系pH降低至酶最佳活性所需的pH以下,从而抑制PPO的活性;同时,它通过非竞争机制在酶活性位点螯合Cu2+[7,23]。柠檬酸对原浆色泽参数的影响如图5所示。柠檬酸浓度增加,各色泽参数变化不完全一致。各护色组(T1~T4)原浆L*没有显著差异(P>0.05),a*值先上升后趋于平稳,b*C*和ΔE值先上升后下降,而H*则呈下降趋势。添加低浓度(0.077%)柠檬酸,原浆L*值没有显著升高(P>0.05),而a*b*值降低,即原浆红度、黄度值变低,这似乎促进了打浆过程的酶促褐变,可能是柠檬酸使原浆pH降到了PPO的最适pH,导致褐变加剧。T2(0.129%柠檬酸)组具有最大ΔE(2.39),但和CK组ΔE(1.23)相差小于2,表明T2组原浆和CK组色泽仅存在微小差异[12],护色效果不佳。这与用0.1%~0.5%柠檬酸对滇橄榄果脯护色所得结果相似[20]。在枇杷打浆时,仅调节pH来抑制酶促褐变并不能取得理想的护色效果,酸化剂(柠檬酸)往往同其他护色剂一起使用以增强护色效果,如抗氧化剂、螯合剂[4]

    图  5  柠檬酸浓度对原浆色泽的影响
    注:(a)L*a*b*值的变化;(b)C*H*、ΔE值的变化。
    Figure  5.  Effects of citric acid concentrate on the color of the puree

    CaCl2在鲜切水果和蔬菜方面的护色效果已有报道[14,24]。CaCl2对原浆色泽参数的影响如图6所示。L*a*b*C*H*值随CaCl2浓度增加呈下降趋势,这表明CaCl2处理加剧了打浆过程的酶促褐变,导致原浆色泽暗淡,红度、黄度损失,饱和度降低,与CaCl2抑制鲜切苹果片褐变的结果不一致[14]。CaCl2主要通过维持细胞的区室化来抑制酶促褐变[14],但打浆过程使果肉粉碎化,CaCl2并不能发挥积极作用。添加0.4% CaCl2(T4),原浆L*a*b*值最低,即亮度、黄度、红度值均低于其他组;其ΔE值(3.44)较对照组(0.94)高出2.5,表明两者之间具有明显可见的色泽差异,添加CaCl2导致褐变程度加剧。氯离子被证明是苹果PPO的非竞争性抑制剂[24];然而,Ca2+在枇杷上被报道对过氧化物酶有激活作用[25],这可能促进了酶促褐变过程过氧化物酶与PPO的协同作用,从而加剧褐变。综上所述,抗坏血酸和植酸可较好地维持枇杷打浆过程的色泽,故将其作为CCD试验的主要因素,进一步考察不同组合对原浆L*和ΔE值的影响。

    图  6  CaCl2浓度对原浆色泽的影响
    注:(a) L*a*b*值的变化;(b) C*H*、ΔE值的变化。
    Figure  6.  Effects of CaCl2 concentrate on the color of the puree

    利用Design-Expert 12.0.3软件设计CCD试验,各组试验结果如表3所示。相较于对照组,不同组合均有效提高了原浆L*值;ΔE值在4.84~7.08,与对照组有非常明显(ΔE>3)的色泽差异[12],表明各复合处理均显著减轻了打浆过程的酶促褐变。添加0.3168%抗坏血酸和0.1188%植酸时原浆ΔL和ΔE最高,此组合护色效果最佳。

    表  3  响应面试验结果
    Table  3.  Results of response surface tests
    实验号 抗坏血酸(%) 植酸(%) ΔE ΔL
    1 0.3168 0.1188 6.76 4.85
    2 0.5280 0.0394 6.66 4.89
    3 0.6160 0.1188 5.71 4.54
    4 0.5280 0.1980 4.84 3.77
    5 0.3168 0.00674 6.71 5.07
    6 0.3168 0.1188 6.72 4.90
    7 0.3168 0.1188 6.98 4.93
    8 0.0180 0.1188 5.88 4.69
    9 0.1056 0.0394 6.47 5.07
    10 0.1056 0.1980 6.01 4.69
    11 0.3168 0.1188 7.08 5.05
    12 0.3168 0.23074 5.48 4.44
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    利用Design-Expert 12.0.3软件进行回归拟合分析,可得ΔE(Y)与护色剂(X1抗坏血酸和X2植酸)之间的二次多项式回归方程:Y=5.04373+9.25638X1+14.58415X2−20.32637X1X2−11.93801X21−60.97911X22。由表4可知,该回归模型显著(P<0.05);失拟项表示模型和试验的差异程度,失拟项不显著(P>0.05),表明无失拟因素存在且试验拟合效果好,因此该方程能较好地预测ΔE对两种护色剂的响应。此外,由X1X2X21X22P值可知,三者对响应值的影响均为极显著(P>0.01).

    表  4  ΔE回归模型方差分析
    Table  4.  Analysis of variance for regression models for ΔE
    方差来源 平方和 自由度 均方 F P 显著性
    模型 4.99 5 0.9981 29.98 0.0004 **
    X1 0.1862 1 0.1862 60.65 0.0559
    X2 0.1859 1 2.02 5.59 0.0002 **
    X1X2 0.4624 1 0.4624 13.89 0.0098 **
    X21 1.81 1 1.81 54.5 0.0003 **
    X22 0.9364 1 0.9364 28.12 0.0018 **
    残差 0.1998 6 0.033
    失拟项 0.1099 3 0.0366 1.22 0.4364
    纯误差 0.0899 3 0.03
    总和 5.19 11
    相关系数 R2=0.9615 R2adj=0.9294 CV%=2.91%
    注:**表示差异极显著,P<0.01;*表示差异显著,P<0.05;−表示差异不显著,P>0.05。
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    由Design-Expert 12.0.3软件根据回归方程绘制响应面和等高线图(图7),可直观地分析抗坏血酸和植酸含量变化对ΔE的影响。等高线的形状可反映出交互效应的强弱。等高线图为椭圆形,表示两因素交互效应显著;若为圆形则相反[8]。X1(抗坏血酸)和X2(植酸)的响应面陡峭,等高线图呈椭圆形,表明抗坏血酸和植酸对ΔE的交互作用显著,在打浆过程添加适宜浓度的抗坏血酸和植酸,可有效抑制酶促褐变,维持枇杷原浆色泽。由等高线图可知,最佳护色范畴时,抗坏血酸的有效浓度为0.3168%~0.4224%,植酸的有效浓度为0.0396%~0.0792%。

    图  7  X1和X2的交互作用对ΔE的影响
    Figure  7.  Effects of the interaction between X1 and X2 on ΔE

    由Design-Expert 12.0.3软件对ΔE求最大值,可得最佳护色配比为0.332%抗坏血酸+0.065%植酸,此时平均ΔE值为6.885。为检验预测值与实际值的差距,在此条件下进行3次平行试验,得平均ΔE值为6.70,试验值与预测值吻合度为97.31%,说明回归模型可有效描述抗坏血酸和植酸对枇杷原浆的护色效果。

    分别测定未护色原浆、鲜果和复合护色(0.332%抗坏血酸+0.065%植酸)原浆的PPO活性和总酚含量,以分析复合护色在打浆过程的护色机理,结果如表5所示。护色后未检测到枇杷原浆PPO活性,说明其酶活性很低,这可能归因于植酸的Cu2+螯合能力[10,20],而Cu2+是PPO的辅基,在酶促反应中必不可缺。此外,护色后原浆总酚含量没有降低,且高于鲜果,这或许与打浆导致细胞内束缚态多酚的释放有关;同时,抗坏血酸将氧化型醌还原成前体酚也避免了酶促过程的酚损失[7,23]。PPO低活性意味着枇杷鲜果不会因打浆发生剧烈的酶促褐变而导致原浆色泽恶化。

    表  5  护色对原浆PPO活性和总酚含量的影响
    Table  5.  Effects of color protection on PPO activity and total phenolic content of puree
    组别PPO(U/g FW)总酚(mg/100 g)
    未护色44.60±3.32a122.23±3.70b
    鲜果46.23±1.76a194.63±4.86a
    复合护色NDb200.30±4.46a
    注:ND表示未检测出,同列不同字母表示具有显著性,P<0.05。
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    贮藏期间枇杷原浆色泽参数变化如图8所示。三种护色处理的枇杷原浆L*a*b*C*和ΔE值随贮藏时间的延长而降低;H*则相反。D2和D3组原浆b*C*和ΔE值均显著高于D1组(P<0.05),原浆黄度和饱和度较高,色泽鲜艳。此外,贮藏期末,D2和D3组原浆L*a*b*值均高于D1组,表明添加植酸似乎较抗坏血酸有更好的护色效果。L*值表征食品亮度,值越低色泽越暗,褐变程度越大[9,19];ΔE值是贮藏时枇杷原浆和未护色原浆(对照)的总色泽差异,值越大,护色效果越好。贮藏期间,D1、D2和D3组枇杷原浆L*值分别降低2.70、2.18和1.78,ΔE分别降低3.17、2.79和2.35,其中D3组L*和ΔE值减少量最低,表明在贮藏期间,其褐变程度最低,复合处理可更好地维持枇杷原浆色泽。15 min、85 ℃热处理可有效灭活枇杷PPO,避免贮藏期间残余酶活性对原浆的负作用,但此过程似乎“漂白”了枇杷原浆,使L*a*b*值被提高。这与灭菌后的红色葡萄柚汁色泽变化相似[26]

    图  8  护色剂对贮藏期间原浆色泽的影响
    注:(a)L*a*b*值的变化;(b)C*H*、ΔE值的变化;小写字母表示同种处理不同时间的显著性差异,P<0.05;大写字母表示不同处理同一时间的显著性差异,P<0.05;D1:0.332%抗坏血酸;D2:0.065%植酸;D3:0.332%抗坏血酸+0.065%植酸;表6同。
    Figure  8.  Effects of color protectant on the color of puree during storage

    各处理贮藏期间总糖、可滴定酸、抗坏血酸、总酚和类胡萝卜素含量变化如表6所示。糖和酸是原浆重要的营养成分,直接反映枇杷产品的酸甜风味,是影响消费者口感的主要品质指标。贮藏期间,三种护色处理原浆的总糖含量呈下降趋势。与0 d相比,贮藏28 d,D2组糖损失最多,为18.05%;D1组次之,为7.34%;D3组最少,仅4.93%。单一植酸护色并不能有效缓解糖类物质的损耗,但与抗坏血酸复合使用,则有效减缓了糖类分解。抗坏血酸是酸性还原剂,常应用于食品护色。三组枇杷原浆中D1组可滴定酸含量最高,为0.37%~0.38%;D2组含量最低,为0.30%~0.31%,这可能是因为添加0.332%抗坏血酸直接影响了原浆酸含量,而植酸含量仅添加0.065%,对酸度的影响不显著。因此,添加酸性护色剂时要注意用量,避免显著增加或降低食品酸度。

    表  6  护色剂对营养成分的影响
    Table  6.  Effects of color protectant on nutrients
    处理营养指标时间(d)
    07142128
    D1总糖
    (g/100 g)
    3.95±0.10Aa3.86±0.09Aab3.78±0.07Abc3.84±0.09Aab3.66±0.08Cc
    D24.10±0.07Aa3.88±0.06Ab3.68±0.07Ac3.63±0.08Ac3.36±0.03Bd
    D34.06±0.12Aa4.00±0.08Aab3.78±0.05Ac3.85±0.14Abc3.86±0.04Abc
    D1可滴定酸(%)0.38±0.01Aa0.38±0.00Aa0.38±0.02Aa0.37±0.01Aa0.38±0.00Aa
    D20.30±0.00Cab0.30±0.00Cb0.31±0.00Ca0.30±0.00Cb0.30±0.00Cab
    D30.34±0.01Bab0.36±0.00Ba0.33±0.01Bb0.35±0.01Bab0.35±0.01Bab
    D1抗坏血酸(mg/100 g)14.55±0.30Ba14.18±0.33Aa14.92±0.29Aa12.53±1.08Bb11.84±0.53Bb
    D26.61±0.34Ca5.15±0.27Bb5.19±0.36Bb4.75±0.17Cb5.06±0.40Cb
    D316.89±0.50Aa14.92±0.79Ab14.96±0.56Ab15.57±0.97Aab15.35±0.75Ab
    D1总酚(mg/100 g)174.09±3.30Ba158.83±3.39Bb146.93±1.79Bd152.26±1.76Bc154.55±2.68Bbc
    D2138.88±1.28Ca140.03±2.59Ca135.21±0.49Cb119.62±1.67Cc120.47±1.44Cc
    D3187.21±2.44Ac199.03±1.10Aa194.76±2.28Ab193.54±2.44Ab199.10±1.51Aa
    D1类胡萝卜素(mg/100 g)1.79±0.05Ba1.78±0.05Aab1.68±0.07Abc1.68±0.04Abc1.61±0.07Ac
    D21.87±0.06ABa1.72±0.02Ab1.70±0.05Ab1.64±0.04Abc1.62±0.03Ac
    D31.91±0.06Aa1.78±0.05Ab1.69±0.05Ac1.66±0.05Ac1.66±0.01Ac
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    抗坏血酸在热处理过程容易被氧化降解,外源抗坏血酸的添加可以弥补其热损失。贮藏期间枇杷原浆抗坏血酸含量变化如表6所示,D3组抗坏血酸含量在14.92~16.89 mg/100 g,高于D1组(11.84~14.92 mg/100 g)和D2组(4.75~6.61 mg/100 g)。三组原浆抗坏血酸含量在贮藏期间均呈下降趋势。贮藏至28 d,D1、D2和D3组抗坏血酸分别损失了18.62%、23.45%、9.12%,表明添加植酸可有效抑制贮藏期间的抗坏血酸氧化[2728],减少贮藏期间抗坏血酸的损失。在长期贮藏过程中抗坏血酸氧化降解可产生5-羟甲基糠醛,后者进一步和氨基酸等物质反应导致褐变[29],影响食品色泽、风味,但植酸可抑制抗坏血酸氧化,削弱后续的褐变反应。

    在贮藏期间枇杷原浆的多酚易被氧化成醌,进而与氨基酸、蛋白质和其他多酚聚合[5,30],导致非酶褐变。如表6所示,贮藏期间,D3组枇杷原浆总酚含量无明显减少,而D1和D2组呈下降趋势,且D2组(119.62~140.03 mg/100 g)总酚含量远低于D1(146.93~174.09 mg/100 g)和D3(187.21~199.10 mg/100 g)。植酸作为酒沉淀剂,可与酚类物质发生凝结反应,减少酒体浑浊[28],这种凝结效应可直接导致总酚含量降低。抗坏血酸(0.5%)可预防酚类物质降解[23],这可能是D1组总酚含量高于D2组原因。但抗坏血酸因热损失以及贮藏期间的氧化降解,对多酚的“保护”作用减弱,使得多酚在贮藏期间因自氧化、缩合导致含量降低。然而,添加抗坏血酸似乎显著削弱了植酸对多酚的凝结反应。植酸不同于抗坏血酸,其稳定性较好,热变形温度为150 ℃[28],这保证了低温贮藏期间植酸可持续发挥还原性,抑制多酚氧化。

    类胡萝卜素是枇杷的主要呈色因素,易受食品基质、温度、氧气等的影响而氧化、异构化[31],其含量变化直接影响原浆色泽。在贮藏期间,各处理枇杷原浆类胡萝卜素的含量变化如表6所示。贮藏0 d时,枇杷原浆经热处理灭菌灭酶,D2(1.87 mg/100 g)、D3(1.91 mg/100 g)组类胡萝卜素含量高于D1组(1.79 mg/100 g),这表明植酸可较好地缓解热处理过程类胡萝卜素的热损失。在贮藏期间,D1、D2和D3组类胡萝卜素含量均呈下降趋势;贮藏28 d时,类胡萝卜素含量分别减少10.06%、13.37%和13.09%,D1组减少量最低,这表明单一抗坏血酸处理较另两组处理更能减少类胡萝卜素的损失。

    综上所述,在打浆过程,添加0.332%抗坏血酸和0.065%植酸可能发挥协同作用来抑制酶促褐变,即植酸螯合PPO活性位点的Cu2+以此抑制酶促褐变,同时抗坏血酸将氧化型酚还原,从而维持较高的酚含量。在贮藏期间,协同处理缓解了枇杷原浆色泽参数(L*a*b*和ΔE)的降低,保持了枇杷原浆的营养成分。

    通过单因素、CCD试验和验证得出,0.332%抗坏血酸和0.065%植酸为最优护色配比,可有效抑制枇杷鲜果打浆过程的酶促褐变,维持原浆色泽。此外,该护色配比可有效缓解贮藏期间原浆L*a*b*和ΔE值降低,并且减少总糖、抗坏血酸和总酚的损失以及酸增加,保证枇杷原浆良好的颜色和营养品质。复合护色(0.332%抗坏血酸+0.065%植酸)可作为枇杷打浆过程的护色参考技术。后续可考察经复合护色灭菌的枇杷原浆在贮藏期间香气成分的变化,全面分析护色剂对枇杷原浆营养品质的影响。

  • 图  1   抗坏血酸浓度对原浆色泽的影响

    注:(a)L*a*b*值的变化;(b)C*H*、ΔE值的变化;不同小写字母表示不同浓度处理间有显著性差异(P<0.05);图2~图6同。

    Figure  1.   Effects of ascorbic acid concentration on the color of the puree

    图  2   半胱胺酸浓度对原浆色泽的影响

    注:(a)L*a*b*值的变化;(b)C*H*、ΔE值的变化。

    Figure  2.   Effects of cysteine concentration on the color of the puree

    图  3   植酸浓度对原浆色泽的影响

    注:(a)L*a*b*值的变化;(b)C*H*、ΔE值的变化。

    Figure  3.   Effects of phytic acid concentrate on the color of the puree

    图  4   EDTA-2Na浓度对原浆色泽的影响

    注:(a)L*a*b*值的变化;(b)C*H*、ΔE值的变化。

    Figure  4.   Effects of EDTA-2Na concentrate on the color of the puree

    图  5   柠檬酸浓度对原浆色泽的影响

    注:(a)L*a*b*值的变化;(b)C*H*、ΔE值的变化。

    Figure  5.   Effects of citric acid concentrate on the color of the puree

    图  6   CaCl2浓度对原浆色泽的影响

    注:(a) L*a*b*值的变化;(b) C*H*、ΔE值的变化。

    Figure  6.   Effects of CaCl2 concentrate on the color of the puree

    图  7   X1和X2的交互作用对ΔE的影响

    Figure  7.   Effects of the interaction between X1 and X2 on ΔE

    图  8   护色剂对贮藏期间原浆色泽的影响

    注:(a)L*a*b*值的变化;(b)C*H*、ΔE值的变化;小写字母表示同种处理不同时间的显著性差异,P<0.05;大写字母表示不同处理同一时间的显著性差异,P<0.05;D1:0.332%抗坏血酸;D2:0.065%植酸;D3:0.332%抗坏血酸+0.065%植酸;表6同。

    Figure  8.   Effects of color protectant on the color of puree during storage

    表  1   单因素实验设计

    Table  1   Design of single factor tests

    实验组 抗坏血酸
    (%)
    半胱氨酸
    (%)
    植酸
    (%)
    EDTA-2Na
    (%)
    柠檬酸
    (%)
    CaCl2
    (%)
    T1 0.106 0.04 0.0264 0.04 0.077 0.10
    T2 0.176 0.10 0.066 0.10 0.129 0.20
    T3 0.352 0.16 0.132 0.16 0.258 0.30
    T4 0.528 0.20 0.198 0.20 0.576 0.40
    CK 0.000 0.00 0.000 0.00 0.000 0.00
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    表  2   CCD试验因素及水平

    Table  2   Factors and levels of CCD tests

    因素 水平
    −1.682 −1 0 1 1.682
    X1 抗坏血酸 0.018 0.1056 0.3168 0.528 0.616
    X2 植酸 0.00674 0.0396 0.1188 0.198 0.23074
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    表  3   响应面试验结果

    Table  3   Results of response surface tests

    实验号 抗坏血酸(%) 植酸(%) ΔE ΔL
    1 0.3168 0.1188 6.76 4.85
    2 0.5280 0.0394 6.66 4.89
    3 0.6160 0.1188 5.71 4.54
    4 0.5280 0.1980 4.84 3.77
    5 0.3168 0.00674 6.71 5.07
    6 0.3168 0.1188 6.72 4.90
    7 0.3168 0.1188 6.98 4.93
    8 0.0180 0.1188 5.88 4.69
    9 0.1056 0.0394 6.47 5.07
    10 0.1056 0.1980 6.01 4.69
    11 0.3168 0.1188 7.08 5.05
    12 0.3168 0.23074 5.48 4.44
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    表  4   ΔE回归模型方差分析

    Table  4   Analysis of variance for regression models for ΔE

    方差来源 平方和 自由度 均方 F P 显著性
    模型 4.99 5 0.9981 29.98 0.0004 **
    X1 0.1862 1 0.1862 60.65 0.0559
    X2 0.1859 1 2.02 5.59 0.0002 **
    X1X2 0.4624 1 0.4624 13.89 0.0098 **
    X21 1.81 1 1.81 54.5 0.0003 **
    X22 0.9364 1 0.9364 28.12 0.0018 **
    残差 0.1998 6 0.033
    失拟项 0.1099 3 0.0366 1.22 0.4364
    纯误差 0.0899 3 0.03
    总和 5.19 11
    相关系数 R2=0.9615 R2adj=0.9294 CV%=2.91%
    注:**表示差异极显著,P<0.01;*表示差异显著,P<0.05;−表示差异不显著,P>0.05。
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    表  5   护色对原浆PPO活性和总酚含量的影响

    Table  5   Effects of color protection on PPO activity and total phenolic content of puree

    组别PPO(U/g FW)总酚(mg/100 g)
    未护色44.60±3.32a122.23±3.70b
    鲜果46.23±1.76a194.63±4.86a
    复合护色NDb200.30±4.46a
    注:ND表示未检测出,同列不同字母表示具有显著性,P<0.05。
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    表  6   护色剂对营养成分的影响

    Table  6   Effects of color protectant on nutrients

    处理营养指标时间(d)
    07142128
    D1总糖
    (g/100 g)
    3.95±0.10Aa3.86±0.09Aab3.78±0.07Abc3.84±0.09Aab3.66±0.08Cc
    D24.10±0.07Aa3.88±0.06Ab3.68±0.07Ac3.63±0.08Ac3.36±0.03Bd
    D34.06±0.12Aa4.00±0.08Aab3.78±0.05Ac3.85±0.14Abc3.86±0.04Abc
    D1可滴定酸(%)0.38±0.01Aa0.38±0.00Aa0.38±0.02Aa0.37±0.01Aa0.38±0.00Aa
    D20.30±0.00Cab0.30±0.00Cb0.31±0.00Ca0.30±0.00Cb0.30±0.00Cab
    D30.34±0.01Bab0.36±0.00Ba0.33±0.01Bb0.35±0.01Bab0.35±0.01Bab
    D1抗坏血酸(mg/100 g)14.55±0.30Ba14.18±0.33Aa14.92±0.29Aa12.53±1.08Bb11.84±0.53Bb
    D26.61±0.34Ca5.15±0.27Bb5.19±0.36Bb4.75±0.17Cb5.06±0.40Cb
    D316.89±0.50Aa14.92±0.79Ab14.96±0.56Ab15.57±0.97Aab15.35±0.75Ab
    D1总酚(mg/100 g)174.09±3.30Ba158.83±3.39Bb146.93±1.79Bd152.26±1.76Bc154.55±2.68Bbc
    D2138.88±1.28Ca140.03±2.59Ca135.21±0.49Cb119.62±1.67Cc120.47±1.44Cc
    D3187.21±2.44Ac199.03±1.10Aa194.76±2.28Ab193.54±2.44Ab199.10±1.51Aa
    D1类胡萝卜素(mg/100 g)1.79±0.05Ba1.78±0.05Aab1.68±0.07Abc1.68±0.04Abc1.61±0.07Ac
    D21.87±0.06ABa1.72±0.02Ab1.70±0.05Ab1.64±0.04Abc1.62±0.03Ac
    D31.91±0.06Aa1.78±0.05Ab1.69±0.05Ac1.66±0.05Ac1.66±0.01Ac
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出版历程
  • 收稿日期:  2023-08-28
  • 网络出版日期:  2024-05-14
  • 刊出日期:  2024-07-14

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