Effect of Lactobacillus casei Removing Patulin in Apple Juice on the Quality of Apple Juice
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摘要: 目的：本课题组前期筛选到一株可以高效清除苹果汁中展青霉素的干酪乳杆菌Lactobacillus casei YZU01。本文主要研究L. casei YZU01清除苹果汁展青霉素过程中对苹果汁品质的影响。方法：以未添加和添加展青霉素的苹果汁作为对照，分别利用高效液相色谱法、pH计检测法、紫外分光光度法、比色法检测L. casei YZU01降解苹果汁展青霉素过程中苹果汁的有机酸（柠檬酸、酒石酸、富马酸、乙酸和L-苹果酸）和糖含量（葡萄糖和半乳糖）、酸度、非酶褐变指数和透光率、色度等苹果风味和品质相关指标。结果：L. casei YZU01清除苹果汁展青霉素过程中，苹果汁柠檬酸、酒石酸、富马酸和乙酸的含量增多，L-苹果酸、葡萄糖和半乳糖的含量减少，柠檬酸含量从0.18 g/kg上升至2.11 g/kg，酒石酸含量从2.3 g/kg上升至3.4 g/kg，富马酸含量从0.12 g/kg上升至0.15 g/kg，乙酸含量从0.00 g/kg上升至0.66 g/kg，L-苹果酸含量从7.31 g/kg下降至5.26 g/kg，葡萄糖含量从38.59 g/kg下降至1.59 g/kg，半乳糖含量从67.55 g/kg下降至28.37 g/kg。尽管干酪乳杆菌处理后苹果汁糖酸含量发生变化，但苹果汁酸度变化不大。干酪乳杆菌在清除展青霉素的过程中不会引起非酶促褐变反应，不会对色泽产生不良影响，但是会引起透光率的波动。在降解72 h后，干酪乳杆菌对苹果汁色度指标L*值、b*值的影响很小，而使a*值稍稍增大，代表苹果汁绿色变浅。综上所述，干酪乳杆菌清除展青霉素的过程中对苹果汁糖和酸含量产生一定的影响，不会产生非酶褐变反应，对苹果汁色度影响较小。Abstract: Objective: Previously, our group screened a strain of Lactobacillus casei YZU01 that could efficiently remove patulin from apple juice. This article aimed to study the effect of L. casei YZU01 on the quality of apple juice during the removal of patulin from apple juice. Methods: The quality parameters of apple juice, including organic acids (citric acid, tartaric acid, fumaric acid, acetic acid and L-malic acid) and sugar content (glucose and galactose), acidity, non-enzymatic browning index, light transmittance, and color parameter, were assessed in three groups: commercial apple juice (CAJ), apple juice supplemented with patulin (CAJ-Patulin), and apple juice supplemented with patulin after degradation by L. casei YZU01 (CAJ-Patulin-L. casei YZU01). This analysis was conducted using high performance liquid chromatography (HPLC), pH meter, UV spectrophotometer, and colorimeter. Results: The content of citric acid, tartaric acid, fumaric acid and acetic acid in the group of CAJ-Patulin-L. casei YZU01 was increased from 0.18, 2.3, 0.12, and 0.00 g/kg to 2.11, 3.4, 0.15, and 0.66 g/kg, respectively. However, the content of L-malic acid, glucose and galactose in the group of CAJ-Patulin-L. casei YZU01 was decreased from 7.31, 38.59, and 67.55 g/kg to 5.26, 1.59 and 28.37 g/kg, respectively. The change of sugar and acid contents in the group of CAJ-Patulin-L. casei YZU01 had little effect on the acidity of apple juice. Furthermore, L. casei YZU01 treatment would not cause non-enzymatic browning reaction and had not adverse effects on the color of apple juice, but it would cause a fluctuation in light transmittance. In addition, after 72 hours of degradation, L. casei YZU01 had little effect on the L* and b* value of apple juice, but slightly increased the a* value, which represented that the green color of apple juice became lighter. In conclusion, the sugar and acid contents of apple juice were changed after treatment with L. casei YZU01, but no non-enzymatic browning reaction and color change was observed.
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Keywords:
- Lactobacillus casei /
- patulin /
- apple juice /
- quality
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展青霉素（Patulin，PAT）是一种主要由曲霉、青霉和丝衣霉等真菌产生的次级代谢产物，具有急性毒性、慢性毒性、细胞毒性、遗传毒性等多种生命毒性[1]。同时PAT易溶于水[2]，使其极易进入并累积在谷物、水果、蔬菜等[3]原料及其衍生品中。此外，PAT具有耐酸性和耐高温性，使其难以从产品中完全去除，严重威胁人的生命健康。目前，已有很多国家制定了水果及其制品中PAT的最高限量标准[4]。但水果及水果制品（果汁、果酱、蜜饯等）仍然有不同程度的PAT污染[5]，造成巨大经济损失的同时严重威胁消费者健康。研究食品中PAT污染的防治方法对整个食品产业和消费者健康具有重要意义。
目前，利用物理、化学和生物等方法去除食品中已存在的PAT已得到研究人员的广泛关注，其中一些方法已用于实际生产。这些方法在去除或解毒PAT方面各有优缺点[6−7]。由于具有效率高、安全性好和可靠性强等优点，生物方法被认为是最有潜力的食品PAT脱毒的方法之一[8]。Harwig等[9]发现酿酒酵母在苹果汁中发酵14 d后将PAT完全降解。Sumbu等[10]报道酿酒酵母发酵能在2周之内将苹果汁中的PAT降解到检测限以下。长期以来，乳酸菌（Lactic acid bacteria，LAB）作为益生菌，一直被视为食品行业的研究热点。这些研究不仅集中在新产品的开发上，还集中于它们在食品安全领域的应用上。鼠李糖乳杆菌L. rhamnosus 6224，短乳杆菌L. brevis 20023，嗜酸乳杆菌L. acidophilus ATCC 4356和植物乳杆菌L. plantarum ATCC 8014被连续报道[11]具有去除溶液或果汁中PAT的能力。但是在应用这些微生物清除食品中PAT污染之前，仍然需要评估微生物清除PAT对产品品质的影响。Gumus等[12]发现嗜酸乳杆菌DSM 20079会使葡萄汁的pH和粘度降低，可能会导致果汁品质降低。Wu等[13]报道添加乳酸菌后会改变糖与有机酸的比例，改善酚类化合物，从而增强葡萄汁特有的香气和风味。虽然使用微生物去除PAT污染获得了良好的效果，但是也可能会不可避免地带来产品质量下降等新问题。因此，进一步探究微生物在清除产品中PAT的过程中对产品品质的影响尤为重要，这为生物法清除霉菌毒素的实际应用提供了参考价值。
在先前的研究中，Zheng等[14−15]发现一株干酪乳杆菌YZU01可以高效降解苹果汁中的PAT，但是干酪乳杆菌YZU01在清除苹果汁PAT过程中是否对苹果汁品质产生影响，仍不可知。因此，本论文在前期研究结果的基础上，研究干酪乳杆菌YZU01清除PAT对苹果汁的主要理化指标的影响，包括有机酸含量、糖含量、非酶褐变指数、透光率、酸度和色度。研究结果可为干酪乳杆菌YZU01清除苹果汁中PAT污染的实际应用提供理论支撑。
1. 材料与方法
1.1 材料与仪器
商业化苹果汁（100%纯果汁） 杭州味全食品有限公司；菌株 本实验室筛选，已证明可降解展青霉素的干酪乳杆菌L. casei YZU01；MRS培养基；PAT标准品 青岛普瑞邦生物工程有限公司；L（+）-酒石酸、乙酸、一水合柠檬酸、富马酸、葡萄糖、半乳糖 均为分析纯，国药集团化学试剂有限公司；苹果酸（色谱纯） 上海麦克林生化科技有限公司；高氯酸（色谱纯） 阿拉丁生化试剂有限公司。
PICO 17离心机 赛默飞世尔科技公司；H/T16MM台式高速离心机 湖南赫西仪器装备有限公司；YXQ-50SII高压灭菌锅 上海博迅实业有限公司；ES-E120B精密微量天平 天津市德安特传感技术有限公司；GNP-9270BS-III隔水式恒温培养箱 上海新苗医疗器械制造有限公司；SW-CJ-1F无菌工作台 苏州净化设备有限公司；LC-20A高效液相色谱仪 日本岛津公司；Shodex KC-811色谱柱、Shodex KS-801色谱柱、Shodex KC-G 6B缓冲柱、Shodex KS-G 6B缓冲柱 昭和化工株式会社；CR-400/410 DP-400色差仪 柯盛行仪器有限公司；PHS-2F酸度计 上海仪电（集团）有限公司；TU-1810紫外可见分光光度计 北京普析通用仪器有限责任公司。
1.2 实验方法
1.2.1 苹果汁中L. casei YZU01的生长动态测定
取100 μL浓度为1×108 CFU/mL的L. casei YZU01菌液接种于MRS培养基，37 ℃下培养36 h后离心收集菌体。用生理盐水洗涤菌体，通过离心收集洗涤完的菌体后置于1 mL 0.9%生理盐水中。将1 mL上述菌体（6×108 CFU/mL）接种到5 mL苹果汁中，每12 h取样（0、12、24、36、48 h）200 μL测OD600吸光值，另取样100 μL按梯度稀释6次后，将第六次稀释完的液体取100 μL涂布到MRS固体培养基中，长出菌后，菌落计数，每组3个重复。以添加1 mL 0.9%生理盐水的苹果汁为对照组。
1.2.2 苹果汁品质相关指标检测
实验设计：取100 μL浓度为1×108 CFU/mL的L. casei YZU01菌液接种于MRS培养基，37 ℃下培养，48 h后收集L. casei YZU01菌液，离心（10000 r/min，10 min，4 ℃）。将细胞沉淀用生理盐水洗涤3次，重悬于1 mL生理盐水中。本次实验分为三组，第一组样品为商业苹果汁组（Commercial apple juice，CAJ）：仅含苹果汁；第二组样品为商业苹果汁+PAT组（CAJ-patulin）：含10.9 µg/mL PAT的苹果汁；第三组样品为商业苹果汁+PAT+干酪乳杆菌组（CAJ-patulin-L. casei YZU01）：含10.9 µg/mL PAT的苹果汁和L. casei YZU01菌体（浓度为6×108 CFU/mL）。团队前期研究结果表明，L. casei YZU01在上述生长动态测定的48 h内已将展青霉素完全降解[15]，因此可进一步研究L. casei YZU01在降解苹果汁中PAT的过程中对相关质量指标的影响。对实验组样品37 ℃恒温培养，每隔24 h（0、24、48、72 h）取一次样。离心（10000 r/min，5 min，4 ℃），取上清液于1.5 mL离心管中。（上清液:生理盐水=1:9）配制成1 mL溶液于1.5 mL离心管中，涡旋混匀后，经0.22 µm滤膜进行膜过滤，制得最后检测样品。
1.2.2.1 苹果汁中有机酸含量测定
利用高效液相色谱-紫外光谱法检测有机酸含量[16]：色谱分析柱Shodex KC-811（8.0 mm×300 mm，6 μm）、缓冲柱Shodex KC-G 6B（6.0 mm×50 mm，10 μm）；紫外检测波长210 nm；流动相为3 mmol/L的高氯酸溶液；流动相流速1.0 mL/min；柱温50 ℃；进样量10 μL；采集时间20 min，检测样品。定性方法：所测有机酸标准品的保留时间；定量方法：建立基于有机酸含量与有机酸峰面积相关性的标准曲线。
1.2.2.2 苹果汁中葡萄糖和半乳糖含量测定
样品处理如1.2.2所述。利用高效液相色谱-示差折光检测法测定葡萄糖和半乳糖含量[17]：色谱分析柱Shodex KS-801（8.0 mm×300 mm，6 μm）、缓冲柱Shodex KS-G 6B（6.0 mm×50 mm，10 μm）；流动相为超纯水；流动相流速0.7 mL/min；柱温80 ℃；进样量10 μL；采集时间20 min，检测样品。定性方法：葡萄糖和半乳糖标准品的保留时间；定量方法：建立基于葡萄糖和半乳糖含量与葡萄糖和半乳糖峰面积相关性的标准曲线。
1.2.2.3 苹果汁酸度测定
样品处理如1.2.2所述。各处理组每24 h（0、24、48、72 h）取样用pH计直接测定，每个样重复三次。
1.2.2.4 苹果汁非酶褐变指数测定
样品处理如1.2.2所述。各处理组37 ℃恒温培养，每隔24 h（0、24、48、72 h）取一次样。离心（10000 r/min，5 min，4 ℃），取上清液于1.5 mL离心管中。（上清液:生理盐水=1:9）配制成1 mL溶液于10 mL离心管中，再加入1 mL 95%乙醇溶液，涡旋，离心（7800 r/min，10 min，4 ℃），取上清液于10 mL离心管中。将紫外分管光度计调至波长420 nm，检测样品并记录。
1.2.2.5 苹果汁透光率测定
样品处理如1.2.2所述。各处理组37 ℃恒温培养，每隔24 h（0、24、48、72 h）取一次样。离心（10000 r/min，5 min，4 ℃），取上清液于1.5 mL离心管中。（上清液:生理盐水=1:9）配制成2 mL溶液于10 mL离心管中，涡旋。将紫外分管光度计调至波长650 nm，检测样品并记录。
1.2.2.6 苹果汁色度测定
样品处理参考1.2.2.5。用色差仪依次进行样品的测定，记录L*、a*、b*值。
1.3 数据处理
数据采用Origin 2018和SPSS 26.0对所得的实验数据进行统计分析，所得数据以图表和均值±标准偏差（±SD）的形式表示。
2. 结果与分析
2.1 L. casei YZU01在苹果汁中的生长动态
由图1所示，苹果汁中干酪乳杆菌OD值维持在0.7~0.9，苹果汁中菌数在108~109 CFU/mL范围内。表明L. casei YZU01在果汁中缓慢生长，具有良好的发酵性能，为之后苹果汁发酵过程中对PAT的清除提供了可能。
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图 1 L. casei YZU01在苹果汁中生长动态分析图Figure 1. Growth dynamic analysis of L. casei YZU01 in apple juice2.2 L. casei YZU01对苹果汁中有机酸含量的影响
果汁中的有机酸对果汁的感官特性、营养品质有重要影响[17]。本研究对干酪乳杆菌YZU01在清除苹果汁中PAT过程中，对苹果汁中几种有机酸（酒石酸、L-苹果酸、乙酸、富马酸、柠檬酸）的含量变化进行了研究，结果如图2所示。CAJ组和CAJ-patulin组在72 h内酒石酸（图2A）含量稳定在2.4 g/kg、富马酸（图2D）含量稳定在0.12 g/kg、柠檬酸（图2E）含量稳定在0.20 g/kg左右。而在CAJ-patulin-L. casei YZU01组中，三种酸的含量均有不同程度的上升。在72 h内，酒石酸含量上升了47.83%，柠檬酸含量呈稳定上升趋势，较初始值增加了11倍，富马酸在前24 h含量增加后保持稳定，含量在0.15 g/kg左右。可以发现的是，柠檬酸的含量在干酪乳杆菌去除PAT过程中受影响较大，而酒石酸和富马酸在干酪乳杆菌去除PAT过程中受影响较小，推测干酪乳杆菌发酵促进了柠檬酸的积累。L-苹果酸是苹果汁中最重要且含量最高的有机酸。CAJ组和CAJ-patulin组中，L-苹果酸的含量随时间变化不大，72 h时CAJ组L-苹果酸含量仅增加了1.72%，CAJ-patulin组L-苹果酸含量仅降低了1.97%。而在加入了干酪乳杆菌YZU01和PAT的苹果汁（CAJ-patulin-L. casei YZU01组）中，L-苹果酸含量出现了大幅下降，72 h时L-苹果酸含量下降了28.04%（图2B）。在CAJ组和CAJ-patulin组中，乙酸含量始终保持为0 g/kg，而在CAJ-patulin-L. casei YZU01组中，乙酸含量从0 g/kg上升为0.66 g/kg（图2C）。Herrero等[18]报道苹果酸含量在乳酸菌和酵母混合发酵过程中显著下降。Dudley等[19]研究表明，乳酸菌利用三羧酸循环产生的柠檬酸合成琥珀酸，同时还会产生其他有机酸，直接影响果汁的酸味，从而会对果汁的品质产生一定的影响。在本研究中，L. casei YZU01在降解PAT的过程中进行三羧酸循环，L-苹果酸作为三羧酸循环的中间体，参与不同的生化反应，最终被分解为其他物质而导致含量下降[20]。乙酸是干酪乳杆菌发酵的产物。在厌氧条件下，乳酸菌代谢丙酮酸而产生乙酸等产物[21]。本次实验也验证了这一点。
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图 2 L. casei YZU01对苹果汁中有机酸含量的影响注：图A、B、C、D、E分别代表酒石酸Tartaric acid（A）、L-苹果酸L-Malic acid（B）、乙酸Acetic acid（C）、富马酸Fumaric acid（D）、柠檬酸Citric acid（E）含量变化。Figure 2. Effect of L. casei YZU01 on the content of organic acids in apple juice2.3 L. casei YZU01对苹果汁中葡萄糖和半乳糖含量的影响
糖分是反映果汁甜味的最重要的物质[22]。苹果汁中的糖类物质主要有葡萄糖、果糖、半乳糖、蔗糖、阿拉伯聚糖等。本文进一步研究了L. casei YZU01在清除PAT时，对苹果汁中葡萄糖和半乳糖的影响。研究结果如图3所示。在0~72 h内，CAJ组和CAJ-patulin组的葡萄糖含量变化不大，维持在30 g/kg左右（图3A）。而在CAJ-patulin-L. casei YZU01组中，随着时间的推移葡萄糖的含量迅速下降，葡萄糖含量由38.59 g/kg下降为1.59 g/kg，这是因为当乳酸菌进行生长和代谢时，葡萄糖被大量分解。半乳糖含量的变化趋势与葡萄糖相似，在0~72 h内，CAJ组和CAJ-patulin组半乳糖的含量维持稳定。在CAJ-patulin-L. casei YZU01组中，半乳糖的含量迅速减少，含量下降了58.01%（图3B）。研究显示过多地摄入游离糖，尤其是含糖饮料的过量摄入会对身体造成严重危害，如患心脏病、糖尿病、肥胖、脂肪肝等及加速衰老。在本实验中，L. casei YZU01处理苹果汁后含糖量的减少，有益机体健康。
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图 3 L. casei YZU01对苹果汁中葡萄糖（A）和半乳糖（B）含量的影响Figure 3. Effect of L. casei YZU01 on the content of glucose (A) and galactose (B) in apple juice2.4 L. casei YZU01对苹果汁酸度的影响
进一步对干酪乳杆菌处理苹果汁后对苹果汁酸度的影响进行了研究。结果如图4所示。在0~72 h内，CAJ组与CAJ-patulin组样品的酸度变化不大，稳定在3.7左右。CAJ-patulin-L. casei YZU01组样品的pH在0~24 h呈下降趋势，pH由3.67降至3.60，在24~72 h内pH稳定在3.6左右。以上结果说明，苹果汁中加入L. casei YZU01，会引起果汁酸度增加。因为乳酸菌的生长需要消耗ATP，而乳酸菌的产能途径只有糖代谢，乳酸菌生长同时必然伴随着糖代谢产酸，有机酸是乳酸菌的主要代谢产物。果汁中有机酸的积累造成pH降低，这也论证了前文中，干酪乳杆菌在降解苹果汁中PAT时，柠檬酸、酒石酸、富马酸和乙酸含量增多会带来的影响，但总体上来看，pH仅下降了0.1左右，对果汁总酸度的影响并不大，不会损害其原口感。
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图 4 L. casei YZU01对苹果汁酸度（pH）的影响Figure 4. Effect of L. casei YZU01 on the acidity (pH) of apple juice2.5 L. casei YZU01对苹果汁非酶褐变指数的影响
色泽是影响果汁的重要品质之一[23]。果蔬汁加工过程中极易发生褐变现象[24]，而果汁加工贮藏过程中的褐变包括酶促褐变和非酶褐变两大类。酶促褐变只要热处理彻底，就不会影响果汁色泽。非酶褐变才是影响果汁品质的主要因素[25]。非酶褐变会产生类黑精色素、红色素、黄色素等，使果汁颜色加深，对品质产生不良影响。乳酸菌发酵能够保护果汁色泽、预防褐变[26]。
在本次实验中，非酶褐变指数测定结果如图5所示。CAJ-patulin组和CAJ-patulin-L. casei YZU01组在0 h时非酶褐变指数比CAJ组高，说明PAT或L. casei YZU01的加入可能引入新的参与褐变反应的基团，导致非酶褐变指数的增加。但在0~72 h之间，CAJ-patulin组和CAJ-patulin-L. casei YZU01组非酶褐变指数均逐渐下降，这可能是因为参与褐变反应的基团被失活。CAJ-patulin-L. casei YZU01组吸光度由0.6235下降至−0.1500，且在降解72 h时比CAJ组更低。以上结果说明，L. casei YZU01清除苹果汁PAT过程中不会引起苹果汁的非酶促褐变反应，不会对果汁色泽产生不良影响。结果说明L. casei YZU01处理对苹果汁非酶褐变指数无不良影响。
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图 5 L. casei YZU01对苹果汁非酶褐变指数的影响Figure 5. Effect of L. casei YZU01 on the non-enzymatic browning index of apple juice2.6 L. casei YZU01对苹果汁透光率的影响
生物混浊是由于微生物及其代谢引起的混浊现象[27]。在本研究中，干酪乳杆菌对苹果汁浊度的影响，结果如图6所示。CAJ-patulin-L. casei YZU01组的透光率变化趋势在0~24 h由42.61%上升至76.74%，而后迅速下降，在48 h为13.98%，在48~72 h，透光率稍有上升，最终为44.06%。当干酪乳杆菌生长代谢时，常产生乳酸等物质，引起液体的混浊。本研究中也发现干酪乳杆菌在降解苹果汁中PAT过程中，菌体颜色或乳酸产生等引起的生物混浊会导致透光率的大幅度波动，在一定程度上影响苹果汁的品质。
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图 6 L. casei YZU01对苹果汁透光率的影响Figure 6. Effect of L. casei YZU01 on the light transmittance of apple juice2.7 L. casei YZU01对苹果汁色度的影响
对于苹果汁色度的测定，亮度L*值，红绿值a*，黄蓝值b*代表了颜色的变化。本研究测定了样品的L*，a*，b*结果如图7所示。CAJ-patulin-L. casei YZU01组亮度L*，呈稳定趋势，且与CAJ组亮度L*接近，说明干酪乳杆菌清除毒素过程中并不会对果汁的亮度有显著的影响。红绿值a*呈负值，a*绝对值越大颜色越接近纯绿色。经过72 h培养，CAJ组红绿值a*降低，绝对值变大，绿色加深，可能是因为亚铁离子的氧化。而CAJ-patulin-L. casei YZU01组红绿值a*的绝对值变低，说明L. casei YZU01清除毒素过程中会使苹果汁绿色变浅，保持亚铁离子的还原状态。黄蓝值b*为负值，表示蓝色，黄蓝值b*绝对值越大颜色越接近纯蓝色，b*=0时为灰色。三组样品在72 h内黄蓝值b*变化不大，培养72 h后，CAJ-patulin-L. casei YZU01值接近CAJ的黄蓝值b*，说明乳酸菌降解PAT的过程中并不会很大程度影响原苹果汁的黄蓝值b*。整体来说，在L. casei YZU01降解PAT时，对于亮度L*值、黄蓝值b*的影响很小，而使红绿值a*稍稍增大，代表苹果汁绿色变浅。
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图 7 L. casei YZU01对苹果汁色度的影响注：A：L*值随时间变化图；B：a*值随时间变化图；C：b*值随时间变化图。Figure 7. Effect of L. casei YZU01 on the color of apple juice3. 结论
本文研究了具有PTA降解作用的干酪乳杆菌L. casei YZU01清除苹果汁PAT过程中对苹果汁品质的影响。研究结论如下：L. casei YZU01在苹果汁中缓慢生长，为其在苹果汁中去除PAT提供了优势。L. casei YZU01清除展青霉素过程中，苹果汁有机酸的含量呈现不同程度的变化，柠檬酸、酒石酸、富马酸和乙酸的含量增多，L-苹果酸的含量减少；葡萄糖和半乳糖的含量大幅减少；苹果汁透光率大幅度波动，苹果汁的红绿值a*增大。但L. casei YZU01对苹果汁亮度L*值、黄蓝值b*值的影响较小。并且处理过程不会引起非酶促褐变反应，不会对果汁色泽产生不良影响。以上说明，L. casei YZU01能够应用于果汁生产环节。但是干酪乳杆菌在清除过程中是否会对苹果汁其他的性质产生影响，仍需进一步探究。本研究为果汁中展青霉素的降解提供了一定的理论依据，在食品质量安全控制领域具有非常重要的意义。
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图 1 L. casei YZU01在苹果汁中生长动态分析图
Figure 1. Growth dynamic analysis of L. casei YZU01 in apple juice
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图 2 L. casei YZU01对苹果汁中有机酸含量的影响
注：图A、B、C、D、E分别代表酒石酸Tartaric acid（A）、L-苹果酸L-Malic acid（B）、乙酸Acetic acid（C）、富马酸Fumaric acid（D）、柠檬酸Citric acid（E）含量变化。
Figure 2. Effect of L. casei YZU01 on the content of organic acids in apple juice
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图 3 L. casei YZU01对苹果汁中葡萄糖（A）和半乳糖（B）含量的影响
Figure 3. Effect of L. casei YZU01 on the content of glucose (A) and galactose (B) in apple juice
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图 4 L. casei YZU01对苹果汁酸度（pH）的影响
Figure 4. Effect of L. casei YZU01 on the acidity (pH) of apple juice
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图 5 L. casei YZU01对苹果汁非酶褐变指数的影响
Figure 5. Effect of L. casei YZU01 on the non-enzymatic browning index of apple juice
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图 6 L. casei YZU01对苹果汁透光率的影响
Figure 6. Effect of L. casei YZU01 on the light transmittance of apple juice
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[1] IOI J, ZHOU T, RONG T, et al. Mitigation of patulin in fresh and processed foods and beverages[J]. Toxins,2017,9(5):157. doi: 10.3390/toxins9050157
[2] 张欣怡, 王威浩, 邓丽莉, 等. 水果及其制品中展青霉素的研究进展[J]. 食品工业科技,2017,38(11):379−384. [ZHANG X Y, WANG W H, DENG L L, et al. Advances in the study of spreading penicillin in fruits and their products[J]. Science and Technology of Food Industry,2017,38(11):379−384.] ZHANG X Y, WANG W H, DENG L L, et al . Advances in the study of spreading penicillin in fruits and their products[J]. Science and Technology of Food Industry,2017 ,38 （11 ）:379 −384 .[3] SANZANI S M, REVERBERI M, GEISEN R. Mycotoxins in harvested fruits and vegetables:Insights in producing fungi, biological role, conducive conditions, and tools to manage postharvest contamination[J]. Postharvest Biology and Technology,2016,122:95−105. doi: 10.1016/j.postharvbio.2016.07.003
[4] 乌日娜, 尚洁. 水果及其制品中棒曲霉素的残留分析进展[J]. 中国国境卫生检疫杂志,2007,30(3):188−190. [WU R N, SHANG J. Progress of residue analysis of bacitracin in fruits and their products[J]. Chinese Journal of Frontier Health and Quarantine,2007,30(3):188−190.] doi: 10.3969/j.issn.1004-9770.2007.03.019 WU R N, SHANG J . Progress of residue analysis of bacitracin in fruits and their products[J]. Chinese Journal of Frontier Health and Quarantine,2007 ,30 （3 ）:188 −190 . doi: 10.3969/j.issn.1004-9770.2007.03.019[5] ZOUAOUI N, SBAII N, BACHA H, et al. Occurrence of patulin in various fruit juice marketed in Tunisia[J]. Food Control,2015,51(51):356−360.
[6] MOAKE M M, OLGA I. PADILLA Z, WOROBO R W. Comprehensive review of patulin control methods in foods[J]. Comprehensive Reviews in Food Science & Food Safety,2010,4(1):8−21.
[7] FATIMA A M, SILVA C L M, TERESA R S B. A review on ozone-based treatments for fruit and vegetables preservation[J]. Food Engineering Reviews,2013,5(2):77−106. doi: 10.1007/s12393-013-9064-5
[8] BEN T F, KOUIDHI B, AL Q Y M A, et al. Review:Biotechnology of mycotoxins detoxification using microorganisms and enzymes[J]. Toxicon,2019,160(15):12−22.
[9] HARWIG J, SCOTTP, KENNEDY B, et al. Disappearance of patulin from apple juice fermented by Saccharomyces spp[J]. Canadian Institute of Food Science and Technology,1973,6(1):45−46. doi: 10.1016/S0315-5463(73)73965-1
[10] SUMBU Z, THONART P, BECHET J. Action of patulin on a yeast[J]. Applied and Environmental Microbiology,1983,45(1):110−115. doi: 10.1128/aem.45.1.110-115.1983
[11] HATAB S, YUE T, MOHAMAD O. Reduction of patulin in aqueous solution by lactic acid bacteria[J]. Journal of Food Science,2012,77(4):M238−M241.
[12] GUMUS S, DEMIRCI A S. Survivability of probiotic strains, Lactobacillus fermentum CECT 5716 and Lactobacillus acidophilus DSM 20079 in grape juice and physico-chemical properties of the juice during refrigerated storage[J]. Food Science and Technology,2022,42:e08122. doi: 10.1590/fst.08122
[13] WU B, LIU J, YANG W, et al. Nutritional and flavor properties of grape juice as affected by fermentation with lactic acid bacteria[J]. International Journal of Food Properties,2021,24(1):906−922. doi: 10.1080/10942912.2021.1942041
[14] ZHENG X F, WEI W N, RAO S Q, et al. Degradation of patulin in fruit juice by a lactic acid bacteria strain Lactobacillus casei YZU01[J]. Food Control,2020,112:107147. doi: 10.1016/j.foodcont.2020.107147
[15] ZHENG X F, ZHENG L L, XIA F P, et al. In vivo evaluation of the toxicity of patulin degradation products produced by Lactobacillus casei YZU01[J]. Biological Control,2022,169:104878. doi: 10.1016/j.biocontrol.2022.104878
[16] 李传威, 林寅, 苏宇, 等. 南通花露烧理化特性分析[J]. 食品工业科技,2023,44(5):308−315. [LI C W, LIN Y, SU Y, et al. Study on the physicochemical properties of nantong hualushao wine[J]. Science and Technology of Food Industry,2023,44(5):308−315.] LI C W, LIN Y, SU Y, et al . Study on the physicochemical properties of nantong hualushao wine[J]. Science and Technology of Food Industry,2023 ,44 （5 ）:308 −315 .[17] 焦文成, 陈磊, 宋永程, 等. 超声波对果蔬汁品质的影响研究进展[J]. 食品工业科技,2022,43(8):471−480. [JIAO W C, CHEN L, SONG Y C, et al. Review on the effect of ultrasound on the quality of fruit and vegetable juice[J]. Science and Technology of Food Industry,2022,43(8):471−480.] JIAO W C, CHEN L, SONG Y C, et al . Review on the effect of ultrasound on the quality of fruit and vegetable juice[J]. Science and Technology of Food Industry,2022 ,43 （8 ）:471 −480 .[18] HERRERO M, GARCIA L A, DIAZ M. Organic acids in cider with simultaneous inoculation of yeast and malolactic bacteria:Effect of fermentation temperature[J]. Journal of the Institute of Brewing,1999,105(4):229−232. doi: 10.1002/j.2050-0416.1999.tb00023.x
[19] DUDLEY E G, STEELE J L. Succinate production and citrate catabolism by Cheddar cheese nonstarter Lactobacilli[J]. Journal of Applied Microbiology,2005,98(1):14−23. doi: 10.1111/j.1365-2672.2004.02440.x
[20] 李维妮, 张宇翔, 魏建平, 等. 益生菌发酵苹果汁工艺优化及有机酸的变化[J]. 食品科学,2017,38(22):80−87. [LI W N, ZHANG Y X, WEI J P, et al. Optimization of fermentation of apple juice by probiotics and organic acids evolution during fermentation[J]. Food Science,2017,38(22):80−87.] doi: 10.7506/spkx1002-6630-201722013 LI W N, ZHANG Y X, WEI J P, et al . Optimization of fermentation of apple juice by probiotics and organic acids evolution during fermentation[J]. Food Science,2017 ,38 （22 ）:80 −87 . doi: 10.7506/spkx1002-6630-201722013[21] CHEN C, LU Y, YU H, et al. Influence of 4 lactic acid bacteria on the flavor profile of fermented apple juice[J]. Food Bioscience,2018,27:30−36.
[22] 曾祥奎, 黄斌, 于娟. 浓缩苹果汁主要技术指标控制的研究[J]. 饮料工业,2002,5(1):19−30. [ZENG X K, HUANG B, YU J. Study of control on major technological indexes in concentrated apple juice[J]. Beverage Industry,2002,5(1):19−30.] doi: 10.3969/j.issn.1007-7871.2002.01.006 ZENG X K, HUANG B, YU J . Study of control on major technological indexes in concentrated apple juice[J]. Beverage Industry,2002 ,5 （1 ）:19 −30 . doi: 10.3969/j.issn.1007-7871.2002.01.006[23] VEGARA S, MARTI N, MENA P, et al. Effect of pasteurization process and storage on color and shelf-life of pomegranate juices[J]. LWT-Food Science and Technology,2013,54(2):592−596. doi: 10.1016/j.lwt.2013.06.022
[24] 卢嘉懿, 李汴生, 阮征. 乳酸菌发酵对梨汁的护色作用[J]. 现代食品科技,2019,35(3):148−153. [LU J Y, LI B S, RUAN Z. Color protection of pear juice via lactic acid bacteria fermentation[J]. Modern Food Science and Technology,2019,35(3):148−153.] LU J Y, LI B S, RUAN Z . Color protection of pear juice via lactic acid bacteria fermentation[J]. Modern Food Science and Technology,2019 ,35 （3 ）:148 −153 .[25] 刘金豹, 翟衡, 张静. 果汁褐变及其影响因素研究进展[J]. 饮料工业,2004,7(3):1−5. [LIU J B, ZHAI H, ZHANG J. Progress in research on juice browning and factors influencing it[J]. Beverage Industry,2004,7(3):1−5.] doi: 10.3969/j.issn.1007-7871.2004.03.001 LIU J B, ZHAI H, ZHANG J . Progress in research on juice browning and factors influencing it[J]. Beverage Industry,2004 ,7 （3 ）:1 −5 . doi: 10.3969/j.issn.1007-7871.2004.03.001[26] WALKING-RIBERIRO M, NOCI F, CRONIN D A, et al. Shelf life and sensory attributes of a fruit smoothie-type beverage processed with moderate heat and pulsed electric fields[J]. LWT-Food Science and Technology,2010,43(7):1067−1073. doi: 10.1016/j.lwt.2010.02.010
[27] 舒念辉. 果汁褐变及控制研究[J]. 食品与发酵科技,2011,47(5):59−61. [SHU N H. Research on browning and controlling of fruit juice[J]. Food and Fermentation Science & Technology,2011,47(5):59−61.] doi: 10.3969/j.issn.1674-506X.2011.05.016 SHU N H . Research on browning and controlling of fruit juice[J]. Food and Fermentation Science & Technology,2011 ,47 （5 ）:59 −61 . doi: 10.3969/j.issn.1674-506X.2011.05.016 -
期刊类型引用(15)
1. 刘荣倩，杨申明，李新会，王振吉，彭润，解健翠. 百香果壳总三萜提取工艺优化及抗氧化性能评价. 饲料工业. 2025(01): 118-126 . 
百度学术
2. 景炳年，李宁洁，魏磊，谢晓阳，刘雨晴，王学方，王韬，王伟. 连翘三萜酸提取工艺优化及抗氧化活性研究. 中国食品添加剂. 2025(03): 64-74 . 百度学术
3. 黄瑜，张锡宇，赵海桃，石统帅，邱隽蒙，符群. 沙棘叶提取物的体外抗氧化及乙酰胆碱酯酶抑制能力. 精细化工. 2024(02): 391-400 . 百度学术
4. 温舒然，马占山，詹冬玲. 灵芝三萜提取工艺的优化. 吉林大学学报(理学版). 2024(02): 452-463 . 百度学术
5. 岳洪霞，胡娜，隆海燕，王洪伦，栾广祥. 响应面法优化超声辅助提取蕨麻总三萜工艺研究. 中国野生植物资源. 2024(03): 28-33+66 . 百度学术
6. 杨洪飞，卢雨菲，葛婷婷，王洁琼，陈祺，孟丽媛，要辉，闵清. 星点设计-效应面法优化超声提取桂籽中三萜化合物的工艺研究. 湖北科技学院学报(医学版). 2024(03): 214-220 . 百度学术
7. 曹柏营，杨海蛟，侯宇，王家利，乔新宇，陈英伟，刘馨阳. 蓝靛果花青素抗氧化作用及机制. 食品研究与开发. 2024(19): 53-59 . 百度学术
8. 张剑林，张亮亮，姜露熙，裴龙英，王寒博，孙博，梁睿武，房丹丹. 基于人工神经网络优化黑木耳红枣发酵乳及其抗氧化分析. 食品研究与开发. 2023(05): 141-147 . 百度学术
9. 沈柯辰，宋亚茹，高琳，张仁堂. 红枣固态发酵黑化前后苯甲酸及农药残留含量比较分析. 食品研究与开发. 2023(05): 177-183 . 百度学术
10. 刘树萍，陆家慧，张佳美，彭秀文，苏晓文，石长波. 奇亚籽胶提取工艺优化及其理化性质. 食品研究与开发. 2023(22): 53-60 . 百度学术
11. 林瑞，杜秋旻，李永春，闫美霖，何家丽，苗晶囡，徐丹，邱军强. 黄药子中黄独乙素提取工艺研究. 吉林医药学院学报. 2022(02): 91-94 . 百度学术
12. 李金金，孟琦，崔馨燕，石汝杰，吴应梅，杨玲，周浓. 响应面法优化地参三萜酸提取工艺及抗氧化活性分析. 南方农业学报. 2022(08): 2261-2271 . 百度学术
13. 刘嘉鑫，陈小梅，曾慧，王淑美，向丽敏. 响应面法优化蒲桃籽中三萜类化合物的提取工艺及其抗氧化活性分析. 食品工业科技. 2022(23): 192-199 . 本站查看
14. 周海旭，苏同超，李姝，冉军舰，李波，高晗，余梦薇，薛静丽，李婧瑜，李晓晴，李忠海. 樟叶木脂素的提取纯化及其抗氧化性、抗癌活性. 食品工业科技. 2021(13): 170-178 . 本站查看
15. 王吉宇，李成文，徐彦靖，于青，刘楠，刘东春. 响应面法优化藏红花素碱水解制备反式藏红花酸工艺. 食品工业科技. 2021(23): 176-183 . 本站查看
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