Study on the Enrichment Ability of Organic Calcium in Mycelium of Four Edible Fungi
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摘要: 目的：从硫磺菌、茯苓、红曲和蜜环菌中筛选富钙率和钙有机化程度高的食用菌，并研究富钙高的硫磺菌液体培养时富钙对主要活性成分齿孔酸含量的影响。方法：采用生物富集方法研究无机钙的添加对四种食用菌生长的影响，采用静置浸出法分析菌丝体钙有机化程度，并用高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）分析硫磺菌主要活性成分齿孔酸的含量。结果：固态培养时，在适宜的加钙量下，硫磺菌的生长均优于茯苓、蜜环菌、红曲。液态培养在加钙量为100 mg/L时，硫磺菌的富钙率显著高于茯苓、蜜环菌和红曲。硫磺菌液态培养加钙量为100 mg/L时，可以达到93.51%的富钙率、85.85%的钙有机化程度和18.34 mg/g的齿孔酸含量，因此硫磺菌具有成为功能性新型补钙产品开发利用的潜质。Abstract: Objective: The edible fungi with high calcium enrichment rate and calcium organic degree were screened from
sulfur fungus, Poria cocos, Monascus and Armillaria, and the effect of calcium enrichment on the content of the main active ingredient, dentate acid, was studied when the sulfur fungus with high calcium enrichment were cultured in liquid. Methods: The bioaccumulation method was used to study the effect of inorganic calcium on the growth of four edible fungi. The organic degree of calcium in mycelia was analyzed by static leaching method, and the content of the main active ingredient, dentate acid, was analyzed by HPLC. Results: In solid culture, the growth of sulfur fungus was better than that of Poria cocos, Armillaria and Monascus at the right amount of calcium addition. When the calcium addition amount was 100 mg/L in liquid culture, the calcium enrichment rate of sulfur fungus was significantly higher than those of Poria cocos, Armillaria and Monascus . When the calcium concentration of sulfur fungus liquid culture was 100 mg/L, the calcium enrichment rate was 93.51%, the degree of calcium organization was 85.85%, and the content of the dentate acid was 18.34 mg/g. Therefore, sulfur fungus has the potential to become a new functional calcium supplement product. -
Keywords:
- edible fungi /
- enrichment /
- organic calcium /
- sulfur fungus /
- liquid culture /
- dentate acid
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钙是人类生命最重要的元素之一，具有十分重要的生理功能[1-3]，几乎所有的生命过程都需要钙的参与。人体长期缺钙会导致骨骼发育不良[4-5]，骨质疏松[6-7]，血凝不正常[8]，甲状腺机能减退[9-11]。食物是钙的重要来源，但目前我国居民饮食中的钙含量和利用率远远不能满足人体需要，因此人们对补钙产品的需求日益增加。研究表明食用菌对钙具有很强的生物富集作用[12]，同时，还能富集锗、锌、铁、硒等多种元素[13-14]，通过在培养基中添加钙，可以提高菌丝体内钙含量，为功能性新型补钙产品开发提供基础。
硫磺菌具有抗氧化、抗肿瘤、抗菌、增强人体免疫力等功效[15-17]；茯苓具有利水渗湿、健脾、宁心、抗肿瘤、抗炎、保肝、调节免疫等功效[18-19]；红曲具有降脂、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗糖尿病、抗抑郁、预防骨质疏松等功效[20]；蜜环菌具有抗氧化、降血糖、抗晕眩、增强免疫力等功效[21]。这四种食用菌都是极具开发潜力的食药兼用菌种，目前未见对硫磺菌、红曲、蜜环的富钙能力研究相关的文献报道。同时，目前利用食用菌富集钙的研究主要集中在富集钙和对食用菌生长的影响方面，未见同时考察菌体富钙对活性成分影响研究的文献报道。
本实验采用生物富集方法，研究硫磺菌、茯苓、红曲、蜜环菌四种食用菌固态培养富集钙能力以及液态培养中各菌体将无机态的钙转化为菌丝体内有机态钙的能力。选择富钙能力最强的食用菌即硫磺菌测定其主要活性成分齿孔酸的含量。齿孔酸是合成肾上腺皮质激素[22]和甾体药物的原料，具有抗炎、保肝、镇痛等多种作用[23-25]，对机体代谢调节和内分泌调节具有重要意义[26]。研究富钙对齿孔酸含量的影响，为硫磺菌富集钙同时保持其活性成分齿孔酸较高的含量提供依据。
1. 材料与方法
1.1 材料与仪器
硫磺菌[Laetiporus sulphureus （Fr）. Murrill]、茯苓[Poria cocos]、红曲[Monascus ruber]、蜜环菌[Armillaria mellea (Vahl) P. Kumm.]均由天然产物研究与利用湖北省重点实验室（三峡大学）提供；1000 μg/mL钙标准溶液 北京有色金属研究总院；硝酸、高氯酸 分析纯，成都市科隆化学品有限公司；钙指示剂 上海迈坤化工有限公司；蔗糖 天津市科密欧化学试剂有限公司；琼脂 北京索莱宝科技有限公司；EDTA试剂、氢氧化钠、硫酸镁、磷酸二氢钾、氯化钙 均购于国药集团。
Q/SGYM1009电子天平 奥豪斯仪器上海有限公司；MLS-3780高压蒸汽灭菌锅 杭州亚旭生物科技有限公司；ZQTY-70/ZHTY-70摇床 上海知楚仪器有限公司；SHZ-D（Ⅲ）循环水式多用真空泵 郑州科丰仪器设备有限公司；GZX-9240MBE数显鼓风干燥箱 上海博迅实业有限公司医疗设备厂；KXL-1010消煮炉 北京瑞邦兴业科技有限公司；SW-CJ-2D型实用垂直新颖双人单面净化工作台 苏州净化设备有限公司。
1.2 实验方法
1.2.1 四种食用菌的培养
1.2.1.1 培养基配制
固态种子培养基：土豆200 g、葡萄糖20 g、琼脂20 g、水1000 mL。液态种子培养基：土豆200 g、葡萄糖20 g、水1000 mL。固态培养基（20%土豆浸出液1 L）：麸皮80 g、蔗糖20 g、琼脂20 g、硫酸镁0.5 g、磷酸二氢钾0.5 g。液态培养基（20%土豆浸出液1 L）：麸皮80 g、蔗糖20 g、硫酸镁0.5 g、磷酸二氢钾0.5 g。
1.2.1.2 四种食用菌的活化
将四种食用菌的母种接入固态种子培养基，24 ℃，培养5 d。
1.2.1.3 液态种子培养
将已培养5 d的四种食用菌平板菌种，用打孔器取直径1.0 cm菌块，接种到液态种子培养基中，28 ℃，180 r/min，250 mL摇瓶装液100 mL，培养5 d。
1.2.1.4 固态培养
在分别添加了0、200、400、600、800、1000、1200 mg/L钙（按钙元素的质量计）的固态培养基上，接种1 cm活化5 d的四种食用菌，28 ℃培养7 d，定时观察菌丝的生长状态，测量菌落直径，直至第7 d菌丝长满平板。
菌丝体生长速率按下式计算：
式中：V为生长速率（mm/d）；D1为后一天菌落直径（mm）；D2为前一天菌落直径（mm）；d为培养天数（d）。
1.2.1.5 液态培养
在分别添加了0、100、200、300、400、500、600 mg/L钙（按钙元素的质量计）的250 mL摇瓶中装液100 mL，按5%的接种量接入液态种子，28 ℃、180 r/min培养10 d。测定菌丝体的干重：对锥形瓶中的发酵液进行抽滤，得到菌丝体固形物，用去离子水清洗菌丝体3次后收集，于干燥箱中60 ℃烘干，称重。
1.2.2 钙标准曲线的绘制及菌丝体富钙率的测定
本实验钙含量测定的方法为EDTA络合滴定法[27]，回归方程为y=0.6157x+4.70075×10−4（R2=0.9997）。
精确称取0.2 g干菌体，倒入消化瓶中，加入10 mL混合酸（硝酸:高氯酸=4:1），置于消化炉上，消化约30 min至透亮，冷却[28]。转移溶液至 50 mL容量瓶中，加蒸馏水定容[29]。依据标准曲线测定方法进行菌丝体内钙浓度测定。
菌丝体富钙率按下式计算[30]：
式中：Y为富钙率；R1为富钙菌丝体内钙浓度（mg/g）；R2为空白菌丝体内钙浓度（mg/g）；m1为富钙菌丝体干重（g）；m2为添加于培养基中的无机钙含量（mg）。
1.2.3 菌丝体中钙的有机化程度分析
利用无机钙易溶于水，而螯合的有机钙溶解性很差的原理[31]，运用静置浸出法测定菌丝体中有机钙的含量[29]。静置浸出法：将0.1 g富钙菌丝体粉末，加入20 mL去离子水，分别浸取6、12、18、24 h，过滤，测定菌丝体中钙的含量[30]。测定方法同1.2.2。
钙有机化程度按下式计算：
式中：W为钙有机化程度；c1为静置浸出处理后菌丝体内钙浓度（mg/g）；c2为静置浸出处理前菌丝体内钙浓度（mg/g）。
1.2.4 加钙量对硫磺菌中齿孔酸含量的影响
1.2.4.1 硫磺菌中齿孔酸的含量测定
分别取不同加钙量下的干菌体0.3 g，研磨成粉末状，精确称取0.2 g菌丝体于试管中，准确量取20 mL甲醇于试管中，60 ℃超声水浴3.0 h。然后使用抽滤装置抽滤，得到滤液置于4 ℃冰箱待检测[32]。
总齿孔酸含量按下式计算：
式中：M为齿孔酸总含量（mg）；C为齿孔酸含量（mg/g）；m为富钙菌丝体干重（g）。
1.2.4.2 齿孔酸标准曲线的绘制及液相色谱条件
本实验齿孔酸含量测定的方法为HPLC法，回归方程为y=1.46415×107x−269.89453（R2=0.9994）。
取上述样液，0.22 μm滤膜过滤。液相设置条件为色谱柱YMC-Pack AQC18，250 mm×4.6 mm，5 μm，流动相乙睛-水（90:10），流速1.0 mL/min，柱温30 ℃，检测波长203 nm，进样量10 μL。
1.3 数据处理
实验中数据均为三组平行实验的平均值，图表采用Origin Pro软件进行绘制，实验结果采用SPSS软件进行统计分析，显著性差异水平为P<0.05。
2. 结果与分析
2.1 固态培养基中加钙量对四种食用菌菌丝体生长的影响
由于四种食用菌固态培养前2 d几乎没有菌丝，而在第7 d长满平板，所以主要观察计算了四种食用菌第4、5、6和7 d固态培养菌丝的生长速率，如图1所示。
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图 1 固态培养过程中加钙量对四种食用菌菌丝生长速率的影响注：（a）茯苓；（b）蜜环菌；（c）红曲；（d）硫磺菌。Figure 1. Effect of calcium addition on mycelial growth rate of four kinds of edible fungi in solid culture如图1和图2显示，在固态培养基加入200 mg/L的无机钙时，对硫磺菌的生长有最大的促进作用；加入400 mg/L的无机钙能促进茯苓、蜜环菌、红曲的生长；但其添加量大于600 mg/L时对四种食用菌的生长均出现一定的抑制作用。在适宜的加钙量下，硫磺菌的生长均优于茯苓、蜜环菌、红曲，其中红曲在不同加钙量下的生长均较差。当加钙量高于600 mg/L时，对四种食用菌生长均有抑制作用，且浓度越大，抑制作用越明显。这可能是因为钙的正常吸收是通过菌丝细胞膜上的钙转运系统——Ca2+-ATP 酶的作用实现，随着加钙量的增加，菌丝细胞膜上的钙转运系统——Ca2+-ATP酶对钙的吸收转运速率也逐渐增大，但加钙量过高时，反而可能抑制了Ca2+-ATP酶对钙的吸收转运速率[12]。
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图 2 固态培养第7 d加钙量对四种食用菌菌丝生长速率影响的对比Figure 2. Comparison of effects of calcium addition on mycelial growth rate of four edible fungi on the seventh day in solid culture2.2 液态培养基中加钙量对四种食用菌菌丝体生长的影响
基于图2中固态富钙培养实验结果，钙在高浓度时会对食用菌产生抑制作用，所以液态培养控制加钙量小于等于600 mg/L。
由图3可知，在液态培养基中，100~600 mg/L的加钙量对硫磺菌、茯苓、蜜环菌的生长均有促进作用。这是由于在液体培养基中，所有溶解于液体中的营养物质都能与食用菌产生直接接触，利于营养的吸收与利用，利于食用菌的生长。对于硫磺菌和蜜环菌，500 mg/L的加钙量促进作用最强。对于茯苓，200 mg/L的加钙量促进作用最强，添加量大于200 mg/L时其促进作用逐渐减弱，这与有关资料报道相吻合[33]。液态培养基中加入钙对红曲的生长均有抑制作用，这可能是因为红曲是腐生真菌，生长的最适pH为3.5~5，而在加钙的培养基中pH>5，未达到其所需的值。当加钙量适宜时，液态培养生长最好的是茯苓，其次是硫磺菌、蜜环菌，最差的是红曲。
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图 3 加钙量对四种食用菌液态培养中菌丝干重的影响Figure 3. Effect of calcium addition on dry weight of mycelia of four edible fungi in liquid culture2.3 液态培养中加钙量对食用菌菌丝体内钙浓度和富钙率的影响
基于图2和图3高浓度钙对菌丝体的抑制作用，液态培养加钙量应小于等于600 mg/L，不再考虑加钙量大于600 mg/L。如图4所示，随着培养液中加钙量的增加，各食用菌菌丝体内的钙浓度也不断增大，硫磺菌、茯苓、红曲、蜜环菌菌丝体钙浓度均在加钙量为600 mg/L时达到最大。
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图 4 加钙量对四种食用菌液态培养菌丝内钙浓度的影响Figure 4. Effect of calcium addition on calcium concentration in liquid culture mycelia of four edible fungi如图5所示，从四种菌的富钙率来看，在钙含量为100 mg/L时硫磺菌的富钙率达到最大值93.51%；茯苓的富钙率在加钙量为100 mg/L时达最大值81.59%；蜜环菌的富钙率随着加钙量的增加而上升，在加钙量为500 mg/L时达最大值；红曲的富钙率在加钙量为400 mg/L时达最大值，但其富钙率最低。富钙率随加钙量的增加总体上呈现出先升后降的趋势，其原因同2.1中的分析。由上述分析可以得出，在加钙量为100 mg/L时，各菌种的富钙率从高到低依次为硫磺菌、茯苓、蜜环菌、红曲。
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图 5 加钙量对四种食用菌液态培养富钙率的影响Figure 5. Effect of calcium addition on calcium enrichment rate of four edible fungi in liquid culture2.4 钙的有机化程度分析
由上述结论，红曲在加钙液态培养基中生长会受到一定程度地抑制，虽其菌体内钙浓度较高，如图4，但其富钙率很低，未超过30%，如图5，说明红曲不适宜作为富钙菌体。因此对另外三种加钙量为100 mg/L的干菌体采用静置浸出法测定钙的有机化程度，如图6，由图可知，静置浸出时间在12~24 h时，菌丝体内钙浓度变化不明显，由此可认为此时，菌丝体内的钙为有机钙[34]，处理24 h，茯苓富集的钙中为有机钙的程度很低，仅为8.46%；硫磺菌和蜜环菌的菌丝体内钙有机化程度较高，硫磺菌为85.85%，蜜环菌为80.12%，可知硫磺菌与蜜环菌有较强的富集并转化钙元素的能力。结合上述分析可知，在加钙量为100 mg/L时，硫磺菌有最高的钙富集率和钙有机化程度。
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图 6 三种食用菌菌丝体钙有机化程度对比Figure 6. Comparison of calcium organic degree in mycelia of three edible fungi2.5 加钙量对硫磺菌中齿孔酸含量的影响
由图7，未加钙时齿孔酸含量高而当加钙量在100~500 mg/L时齿孔酸含量有所下降，此加钙量下与未加钙时硫磺菌中齿孔酸含量差异较为显著（P<0.05），主要是加钙后菌丝干重总量增加所导致，实际齿孔酸总含量变化不大。当加钙量在100~500 mg/L时，为菌体富钙的有效浓度区间。当加钙浓度高于500 mg/L时，齿孔酸浓度下降明显，主要是因为高浓度对菌体产生抑制作用影响菌丝生长，进而对硫磺菌中主要活性成分齿孔酸合成也具有一定抑制作用。结合图5和图6，在加钙量为100 mg/L的液态培养基中硫磺菌富钙和有机化程度高，因此，加钙量为100 mg/L的液态培养基可以兼顾富钙达到最大值和硫磺菌代谢产物齿孔酸较高含量。
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图 7 加钙量对硫磺菌齿孔酸含量的影响注：不同小写字母表示显著性差异（P<0.05）。Figure 7. Effect of calcium concentration on the content of dentate acid in sulfur fungus3. 结论
本实验筛选出适宜的富钙菌种为硫磺菌，并得出其在液态培养基中最佳加钙量为100 mg/L，此时硫磺菌的富钙率、钙有机化程度和活性成分齿孔酸含量均较高，分别为93.51%、85.85%和18.34 mg/g，因此可以达到补钙和预治疾病的多重需求，为硫磺菌相关产品的开发应用提供了基础。实验结果中最佳加钙量与张婷等[35]对斑玉蕈菌丝体富集钙的研究所得结果一致，但硫磺菌富钙率高于斑玉蕈，其机理有待进一步研究。硫磺菌的最佳培养条件需进一步优化，工业生产有待扩大研究，同时还需进一步研究不同钙源和加钙时间对硫磺菌钙的吸收转化能力以及对活性成分齿孔酸的影响。
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图 1 固态培养过程中加钙量对四种食用菌菌丝生长速率的影响
注：（a）茯苓；（b）蜜环菌；（c）红曲；（d）硫磺菌。
Figure 1. Effect of calcium addition on mycelial growth rate of four kinds of edible fungi in solid culture
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图 2 固态培养第7 d加钙量对四种食用菌菌丝生长速率影响的对比
Figure 2. Comparison of effects of calcium addition on mycelial growth rate of four edible fungi on the seventh day in solid culture
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图 3 加钙量对四种食用菌液态培养中菌丝干重的影响
Figure 3. Effect of calcium addition on dry weight of mycelia of four edible fungi in liquid culture
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图 4 加钙量对四种食用菌液态培养菌丝内钙浓度的影响
Figure 4. Effect of calcium addition on calcium concentration in liquid culture mycelia of four edible fungi
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图 5 加钙量对四种食用菌液态培养富钙率的影响
Figure 5. Effect of calcium addition on calcium enrichment rate of four edible fungi in liquid culture
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图 6 三种食用菌菌丝体钙有机化程度对比
Figure 6. Comparison of calcium organic degree in mycelia of three edible fungi
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[1] 顾清. 钙的生理功能及代谢的研究进展(综述)[J]. 中国食品卫生杂志,2002,14(6):29−33. [GU Qing. Research progress of physiological function and metabolism of calcium (Review)[J]. Chinese Journal of Food Hygiene,2002,14(6):29−33. doi: 10.3969/j.issn.1004-8456.2002.06.012 [2] 张爱民, 薛建平. 膳食营养要素钙的代谢及生理功能研究进展[J]. 淮北煤师院学报(自然科学版),2001,22(4):49−54. [ZHANG Aimin, XUE Jianping. Research progress in metabolism and physiological function of dietary nutrient element calcium[J]. Journal of Huaibei Coal Teachers College (Natural Science Edition),2001,22(4):49−54. [3] 潘恩霖. 钙与人体健康[J]. 福建轻纺,2002(7):22−26. [PAN Enlin. Calcium and human health[J]. Fujian Light Textile,2002(7):22−26. doi: 10.3969/j.issn.1007-550X.2002.07.007 [4] HERRERARODRIGUEZ S E, GARCIAMARQUEZ E, PADILLACAMBEROS E, et al. Evaluation of an ionic calcium fiber supplement and its impact on bone health preservation in a dietary calcium deficiency mice model[J]. Nutrients,2022,14(3):422−422. doi: 10.3390/nu14030422
[5] 李海潮, 韦开卫, 王斌, 等. 原子吸收法测定31种蔬菜水果中的微量元素含量[J]. 国外医学(医学地理分册),2013,34(3):187−190. [LI Haichao, WEI Kaiwei, WANG Bin, et al. Determination of trace elements in 31 kinds of vegetables and fruits by atomic absorption spectrometry[J]. Foreign Medical Sciences (Medical Geography),2013,34(3):187−190. doi: 10.3969/j.issn.1001-8883.2013.03.014 [6] MAYS S, BRICKLEY M. Is dietary deficiency of calcium a factor in rickets? Use of current evidence for our understanding of the disease in the past[J]. International Journal of Paleopathology,2022,36:36−44. doi: 10.1016/j.ijpp.2021.11.001
[7] BOUILLON R. Nutritional rickets: Calcium or vitamin D deficiency?[J]. The American Journal of Clinical Nutrition,2021,114(1):3−4. doi: 10.1093/ajcn/nqab121
[8] 鲍建民. 钙的生理功能及吸收利用[J]. 微量元素与健康研究,2006(4):65−66. [BAO Jianmin. Physiological function and absorption and utilization of calcium[J]. Trace Elements and Health Research,2006(4):65−66. doi: 10.3969/j.issn.1005-5320.2006.04.028 [9] 高爱民. 人体必需的营养元素——钙[J]. 微量元素与健康研究,2005,22(1):66−66. [GAO Aimin. Essential nutrient element of human body-calcium[J]. Trace Elements and Health Research,2005,22(1):66−66. doi: 10.3969/j.issn.1005-5320.2005.01.032 [10] MEGAN R B, ALEXANDER E T. Intestinal absorption and renal reabsorption of calcium throughout postnatal development[J]. Experimental Biology and Medicine,2017,242(8):840−849. doi: 10.1177/1535370217699536
[11] SUNMIN P, SUNA K, KIM D S. Severe calcium deficiency increased visceral fat accumulation, down-regulating genes associated with fat oxidation, and increased insulin resistance while elevating serum parathyroid hormone in estrogen-deficient rats[J]. Nutrition Research,2020,73(C):48−57.
[12] 卜庆梅, 王丽娟, 刘林德, 等. 3种食用菌菌丝体富钙的研究[J]. 食品科学,2009,30(21):172−174. [BU Qingmei, WANG Lijuan, LIU Linde, et al. Study on calcium enrichment in mycelium of three edible fungi[J]. Food Science,2009,30(21):172−174. doi: 10.3321/j.issn:1002-6630.2009.21.040 [13] 李慧英. 蛹虫草富铁液体深层发酵条件的优化[J]. 食品研究与开发,2017,38(7):153−159. [LI Huiying. Optimization of fermentation conditions of iron-rich Cordyceps militaris[J]. Food Research and Development,2017,38(7):153−159. doi: 10.3969/j.issn.1005-6521.2017.07.034 [14] 姜宁, 朱淑彤, 苏浩雨, 等. 猴头菌菌丝富硒特性及富硒深层发酵的研究[J]. 天然产物研究与开发,2021,33(5):810−818, 830. [JIANG Ning, ZHU Shutong, SU Haoyu, et al. Study on selenium-rich characteristics of Hericiumhericium mycelia and its deep fermentation[J]. Natural Product Research and Development,2021,33(5):810−818, 830. doi: 10.16333/j.1001-6880.2021.5.013 [15] SABA E, SONG Y M, JEON B R, et al. Acetyl eburicoic acid from Laetiporus sulphureus var. miniatus suppresses inflammation in murine macrophage RAW 264.7 cells[J]. Mycobiology,2015,43(2):131−136. doi: 10.5941/MYCO.2015.43.2.131
[16] 王娟. 硫磺菌和灰盖鬼伞发酵产物中活性成分的初步研究[D]. 杨凌: 西北农林科技大学, 2007 WANG Juan. Preliminary study on the active constituents in the fermentation products of Sulfurobacillus vulgaris and Ambrosia chinensis[D]. Yangling: Northwest A & F University, 2007.
[17] 闫梅霞, 关一鸣, 胡清秀, 等. 硫磺菌菌丝体粗多糖对小鼠Lewis肺癌的体内抑制[J]. 食用菌学报,2011,18(1):46−48. [YAN Meixia, GUAN Yiming, HU Qingxiu, et al. Antitumor activity of crude polysaccharide from Laetiporus sulphureus[J]. Journal of Edible Fungi,2011,18(1):46−48. doi: 10.3969/j.issn.1005-9873.2011.01.007 [18] 李慧君, 王天合, 尤朋涛, 等. 不同产地茯苓对肾阳虚下焦水肿大鼠的利水渗湿作用研究[J]. 中药新药与临床药理,2021,32(5):632−638. [LI Huijun, WANG Tianhe, YOU Pengtao, et al. Effects of Poria cocos from different habitats on the hydration and osmosis in rats with focal edema under kidney Yang deficiency[J]. Chinese Journal of New Drugs and Clinical Pharmacology,2021,32(5):632−638. doi: 10.19378/j.issn.1003-9783.2021.05.006 [19] 王悦, 田双双, 刘晓谦, 等. 茯苓多糖的提取、结构及药理作用研究进展[J]. 世界中医药,2021,16(17):2548−2555. [WANG Yue, TIAN Shuangshuang, LIU Xiaoqian, et al. Research progress on extraction, structure and pharmacological effects of polysaccharides from Poria cocos[J]. World Journal of Chinese Medicine,2021,16(17):2548−2555. doi: 10.3969/j.issn.1673-7202.2021.17.006 [20] 马美荣, 张坤, 李洪媛, 等. 麸皮红曲发酵工艺研究[J]. 中国调味品,2022,47(7):167−170, 181. [MA Meirong, ZHANG Kun, LI Hongyuan, et al. Study on fermentation technology of wheat bran Monascus[J]. Chinese Condiments,2022,47(7):167−170, 181. doi: 10.3969/j.issn.1000-9973.2022.07.031 [21] 胡德, 李正龙, 赵威, 等. 蜜环菌菌丝与菌索活性成分含量研究[J]. 食品安全质量检测学报,2022,13(6):1748−1754. [HU De, LI Zhenglong, ZHAO Wei, et al. Study on the content of active ingredients in mycelia and mycordia of Armillaria[J]. Chinese Journal of Food Safety and Quality,2022,13(6):1748−1754. doi: 10.3969/j.issn.2095-0381.2022.6.spaqzljcjs202206007 [22] 李金平, 何美静, 李梦雪,等. 浅谈硫磺多孔菌的研究[J]. 生物化工,2019,5(6):129−130, 134. [LI Jinping, HE Meijing, LI Mengxue, et al. Discussion on the research progress of sulfur porous bacteria[J]. Biochemical Engineering,2019,5(6):129−130, 134. doi: 10.3969/j.issn.2096-0387.2019.06.038 [23] 张琳, 汪鋆植, 余海立,等. 齿孔酸对高尿酸血症黄嘌呤氧化酶活性的影响[J]. 生物资源,2017,39(2):102−107. [ZHANG Lin, WANG Yunzhi, YU Haili, et al. Effects of eburicoic acid on xanthine oxidase activity of hyperuricemia[J]. Bioresources,2017,39(2):102−107. [24] HUANG G J, DENG J S, HUANG S S, et al. Hepatoprotective effects of eburicoic acid and dehydroeburicoic acid from Antrodia camphorata in a mouse model of acute hepatic injury[J]. Food Chemistry,2013,141(3):3020−3027. doi: 10.1016/j.foodchem.2013.03.061
[25] SUN X W, LI Q G. The main components analysis of Laetiporus sulphureu crude extract and its hepatoprotective effect on carbon tetrachloride-induced hepatic fibrosis in rats[J]. Applied Mechanics and Materials,2014,3252(568-570):1934−1939.
[26] WANG J Z, ZHANG P, HE H B, et al. Eburicoic acid from Laetiporus sulphureus (Bull.: Fr.) Murrill attenuates inflammatory responses through inhibiting LPS-induced activation of PI3K/Akt/mTOR/NF-κB pathways in RAW264.7 cells[J]. Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology,2017,390(8):845−856. doi: 10.1007/s00210-017-1382-3
[27] 李红霞, 李国江, 张俊杰,等. EDTA络合滴定钙镁指示剂的改进[J]. 河北理工学院学报,2003(4):142−150. [LI Hongxia, LI Guojiang, ZHANG Junjie, et al. Improvement of indicators in titration analysis of calcium and magnesium with EDTA[J]. Journal of Hebei Institute of Technology,2003(4):142−150. [28] 牛江梅, 沈乐琴, 孙翔. 湿法消化方法测定食品中铜、锌[J]. 中国公共卫生,2003(5):109. [NIU Jiangmei, SHEN Leqin, SUN Xiang. Determination of copper and zinc in food by wet digestion method[J]. Chinese Public Health,2003(5):109. doi: 10.11847/zgggws2003-19-05-69 [29] 张新国, 马国弟, 刘子预, 等. 有机钙转化微生物的筛选、鉴定及其富钙研究[J]. 中国食品学报,2017,17(9):251−259. [ZHANG Xinguo, MA Guodi, LIU Ziyu, et al. Screening and identification of organic calcium enriched microorganism from natural environment and it's characteristic[J]. Chinese Journal of Food Science and Technology,2017,17(9):251−259. doi: 10.16429/j.1009-7848.2017.09.032 [30] 秦义. 富锌灵芝液态发酵研究[D]. 杨凌: 西北农林科技大学, 2007 QIN Yi. Liquid fermentation of zinc-rich Ganoderma lucidum[D]. Yangling: Northwest A & F University, 2007.
[31] 孙希雯, 李奇庚. 金针菇富锌条件及锌结合形态的研究[J]. 微生物学报,1997(1):40−46. [SUN Xiwen, LI Qigeng. Study on zinc enrichment conditions and Zn-binding morphology of Flammulinavelina[J]. Acta MicrobiologicaSinica,1997(1):40−46. doi: 10.13343/j.cnki.wsxb.1997.01.007 [32] 孙文军, 汪鋆植, 张盼, 等. 硫磺菌液体培养条件的优化研究[J]. 三峡大学学报(自然科学版),2015,37(3):100−103. [SUN Wenjun, WANG Junzhi, ZHANG Pan, et al. Study of optimum culture medium of Laetiporus sulphureus liquid fermentation[J]. Journal of China Three Gorges University (Natural Science Edition),2015,37(3):100−103. [33] 王伟霞, 李福后, 陈立国. 茯苓菌丝体富集钙的研究[J]. 食用菌,2007(1):9−10. [WANG Weixia, LI Fuhou, CHEN Liguo. Study on calcium enrichment in mycelia of Poria cocos[J]. Edible Fungi,2007(1):9−10. doi: 10.3969/j.issn.1000-8357.2007.01.005 [34] 许玉灿. 有机锌的富集载体及检测方法综述[J]. 生物技术世界,2016(3):15−16. [XU Yucan. Review on enrichment carriers and detection methods of organic zinc[J]. Biotechnology World,2016(3):15−16. [35] 张婷, 钱亮亮, 王伟霞, 等. 斑玉蕈菌丝体富集钙的研究[J]. 北方园艺,2022(4):104−109. [ZHANG Ting, QIAN Liangliang, WANG Weixia, et al. Study on calcium enrichment in the mycelium of carygoides[J]. Northern Horticulture,2022(4):104−109. -
期刊类型引用(3)
1. 路晓，李文钊，徐艳朋，李玉爽，王智珍，张亚旭，刘馨阳，阮美娟. 不同预处理对六种药食同源食材加工特性及其饼干品质影响研究. 食品与发酵工业. 2024(12): 258-265 . 
百度学术
2. 邱心茹，张源，蒋远帅，高文慧，刘友雪，衣春颖，李悦，孔峰. 鸡骨粉理化性质及其对全麦饼干品质的影响. 食品科技. 2024(06): 147-152 . 百度学术
3. 傅新征，林思琦，罗培轩. 响应面法优化超声波辅助酸酶法制备荸荠抗性淀粉工艺. 湖北民族大学学报(自然科学版). 2024(04): 551-558 . 百度学术
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