磁性纳米酶显色技术在食品安全检测中的应用

李佳银; 罗磊; 熊蓥姿; 李跑; 李脉泉; 刘霞

doi:10.13386/j.issn1002-0306.2021030042

磁性纳米酶显色技术在食品安全检测中的应用

湖南农业大学食品科学技术学院，食品科学与生物技术湖南省重点实验室，湖南长沙 410128

基金项目: 湖南省自然科学基金面上项目（2020JJ4354）。

详细信息

作者简介:
李佳银（1997−），女，硕士研究生，研究方向：食品质量与安全，E-mail：770862979@qq.com

通讯作者:
刘霞（1976−），女，博士，教授，研究方向：食品质量与安全，E-mail：liuxiaspr@aliyun.com

中图分类号: TQ581；R155.5
计量
- 文章访问数: 0174
- HTML全文浏览量: 050
- PDF下载量: 020
出版历程
- 收稿日期: 2021-03-04
- 网络出版日期: 2022-01-03
- 刊出日期: 2022-02-28

Application of Magnetic Nanoenzyme Colorimetric Technology in Food Safety Detection

Hunan Province Key Laboratory of Food Science and Biotechnology, College of Food Science and Technology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China

摘要

摘要: 磁性纳米酶显色技术是指利用磁性纳米酶的类过氧化物酶性质，在显色底物的存在下，对目标物进行快速、灵敏、可视化检测的新型技术。与天然酶相比，磁性纳米酶易制备、易保存、易回收、成本低。本文简单介绍了磁性纳米酶的催化机理和活性调节，重点综述了磁性纳米酶显色技术在食品中农兽药和重金属残留、食源性致病菌及其它有害物质检测中的应用现状。目前，该技术仍存在酶活性较弱、检测应用范围较窄、选择性欠佳等问题。本文针对上述问题提出了相关建议，并对其未来发展方向进行了展望。
- 磁性纳米酶 /
- 类过氧化物酶 /
- 比色法 /
- 食品安全检测
Abstract: Magnetic nanoenzyme color development technology is a new technology, which is used to rapid, sensitive, and visual detection of targets based on the peroxidase-like properties of magnetic nanoenzyme. Compared with natural enzymes, magnetic nanoenzyme has the advantages of easy preparation, preservation, recovery and low cost. In this paper, the catalytic mechanism and activity regulation of magnetic nanoenzyme are briefly introduced, the application of magnetic nanoenzyme chromogenic technology in the detection of pesticide and ceterinary drug residues, foodborne pathogens and other harmful substances in food are introduced emphatically. At present, the technology still has problems, such as weak enzyme activity, narrow detection range, and poor selectivity. Some suggestions are given for resolving above problems, and its future development direction is prospected.
- magnetic nanoenzyme /
- peroxidase properties /
- colorimetry /
- food safety detection

HTML全文

近年来，食品安全问题时有发生，如农兽药残留超标、重金属残留等，不仅危害人类身体健康，也影响着我国的进出口贸易^[1]。发展高精准的检测方法是保障食品安全的重要技术支撑^[2]。常见的食品安全检测技术包括色谱分析技术（Chromatography）^[3]、光谱分析技术（Spectroscopic techniques）^[4]、传感器技术（Sensors）^[5]等。上述检测技术虽准确度和灵敏度高，但存在检测成本高、分析时间相对较长等不足，难以满足现代食品安全检测的需求。鉴于此，开发简单快速、准确、灵敏的食品安全检测技术尤为重要。

天然酶作为一种对底物具有高度特异性的生物催化剂，在酶抑制和酶联免疫分析等快速检测技术中扮演着重要角色^[6-7]。但天然酶提取纯化过程复杂，催化活性对环境条件敏感，易变性失活，间接导致检测成本提高和检测结果的不确定性^[8-10]。随着纳米科学的发展，越来越多的纳米材料被发现具有类似天然酶的催化活性，称之为纳米酶（Nanozyme）^[11-14]。迄今，已开发出多种具有天然酶催化活性的纳米材料，如磁性纳米颗粒（Magnetic nanoparticles，MNPs）^[15]、金纳米颗粒（Gold nanoparticles，AuNPs）^[16]、氧化石墨烯（Graphene oxide，GO）^[17]、金属有机框架（Metal-Organic framework，MOF）^[18]等。其中，由于合成简便、催化活性和稳定性较强，特别是具有磁性能，MNPs的研究和应用最为广泛，最具有代表性的是Fe₃O₄NPs。Fe₃O₄NPs自2007年提出具有类酶活性以来，备受科研工作者的关注^[19-21]。目前，基于Fe₃O₄NPs的磁性纳米酶显色技术，已应用于食品安全检测领域。本文在简单论述磁性纳米酶催化机理及活性调节的基础上，详细阐述了国内外有关磁性纳米酶显色技术在食品农兽药和重金属残留、食源性致病菌和其它有害物质检测中的研究进展，并对其发展前景进行了展望，旨在为磁性纳米酶显色技术的应用和发展提供一定的理论参考依据。

1. 磁性纳米酶催化机理及活性调节

1.1 催化机理

在不同pH条件下，Fe₃O₄NPs表现出不同的类天然酶性质。酸性条件（pH<5）下，Fe₃O₄NPs表现出类过氧化物酶（Peroxidase，POD）性质。即当溶液中含有过氧化氢（H₂O₂）时，Fe₃O₄NPs可催化H₂O₂产生羟基自由基（·OH），后者可氧化色原底物，如3,3',5,5'-四甲基联苯胺（3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine，TMB）、邻苯二胺（O-Phenylenediamine，OPD）、2,2'-二氨基偶氮苯（2,2'-Diaminoazobenzene，DAB）、2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（2,2'-Azinobis-（3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate，ABTS）等，使其变色。利用待测物对纳米酶活性的影响，进而影响反应体系中色原底物的颜色变化，通过肉眼观察，或采用分光光度计检测其吸光度值的变化，实现待测物质的定性或定量检测。该催化过程符合乒乓机制，催化机制见图1（a）。在中性或碱性条件下，Fe₃O₄NPs表现出类过氧化氢酶（Catalase，CAT）活性，催化H₂O₂产生FeOOH²⁺和氢过氧自由基（HO₂·），后者迅速被离子化为超氧阴离子（O₂⁻），产生的HO₂·和O₂⁻再与·OH反应进一步转化为H₂O和O₂，其催化机制见图1（b）^[22-26]。分子研究机理表明，引发催化反应的关键在于Fe²⁺与Fe³⁺之间的转化，其中Fe²⁺起主导作用^[22-23]。

图 1 Fe₃O₄NPs纳米酶催化机理^[26]

Figure 1. Catalytic mechanism of Fe₃O₄NPs nanoenzyme^[26]

下载: 全尺寸图片幻灯片

1.2 活性调节

基于Fe₃O₄NPs制备的磁性纳米酶，兼具超顺磁性和类POD催化活性，其催化活性与天然酶类似，易受到温度、pH、底物浓度等因素的影响^[21]。此外，磁性纳米酶的活性也可通过尺寸、形貌和表面修饰，以及与其它纳米材料组装等因素进行调节。

磁性纳米酶的尺寸和形貌结构在其活性调节方面起着关键作用^[26]。Peng等^[27]研究发现Fe₃O₄NPs的催化活性随尺寸的减小而增强，依次为11 nm>20 nm>150 nm，原因是尺寸小的纳米酶具有较高的比表面积与体积比，更有利于显色反应的进行。Liu等^[28]制备了三种形貌（团簇球状、八面体状、三角形盘状）的Fe₃O₄NPs纳米酶，并对其催化活性进行了比较研究，发现球状纳米酶的比表面积最大，催化活性最高，而三角形状、八面体状的Fe₃O₄NPs，因表面原子排列顺序差异，催化活性相对欠佳。

磁性纳米酶的催化反应主要发生在纳米材料表面，故可通过表面修饰提高纳米酶催化活性和稳定性^[29]。Fan等^[30]基于组氨酸中咪唑基团可与H₂O₂结合，提高纳米酶活性的原理，将其修饰在Fe₃O₄NPs表面，有效增强了磁性纳米酶对H₂O₂的亲和力，提高了催化效率。Ren等^[31]发现表面修饰维生素C（Vitamin C，V_C）的Fe₃O₄NPs催化活性，显著优于未经修饰的Fe₃O₄NPs，且酶促反应符合乒乓机制。Nafiseh等^[32]在Fe₃O₄NPs表面修饰2-甲基咪唑锌盐MAF-4（2-methylimidazole zinc salt，ZIF-8），显著增强了Fe₃O₄NPs的催化活性，同时兼具优异的磁性和稳定性。

磁性纳米酶还可通过与其它纳米材料的组装，提高类酶活性^[33]。Lee等^[34]利用Au与Fe₃O₄NPs之间的极化效应，合成了一种活性高于Fe₃O₄NPs的哑铃状Au-Fe₃O₄NPs，且该复合物对H₂O₂具有更高的亲和力。Huang等^[35]将CeO₂和Fe₃O₄NPs组装，制备了Fe₃O₄@CeO₂蛋黄壳纳米酶。研究发现，CeO₂和Fe₃O₄ NPs之间的协同作用，可有效提高该复合纳米酶对H₂O₂和TMB的亲和力，分别是Fe₃O₄NPs对H₂O₂和TMB亲和力的2倍和22倍。

2. 磁性纳米酶显色技术在食品安全检测中的应用

磁性纳米酶具有耐酸碱、易制备、易于修饰及活性可控、稳定性高等优势。近些年，研究者们利用Fe₃O₄NPs类POD活性，对其进行表面修饰，或结合其它检测技术，研发出各种基于Fe₃O₄NPs纳米酶的生物、荧光、比色传感技术，并将其用于检测食品中残留的农兽药、重金属、食源性致病菌，及其它有害物质，详见表1。

表 1 纳米酶在食品检测中的应用

Table 1. Application literature of nanozymes in food safety assay

目标物类别	目标物	纳米酶	检测方法	检出限	样品基质	参考文献
农药	正丙醇	Fe₃O₄NPs	化学发光法	0.1nmol/L	绿茶	[38]
	神经毒素沙林甲基对氧磷	Fe₃O₄NPs	比色法	1 nmol/L 10 nmol/L	饮用水	[39]
	有机磷农药	Fe₃O₄@ZIF-8	比色法	0.2 nmol/L	水/果汁	[32]
	四环素	Fe₃O₄NPs	比色法	45 nmol/L	——	[40]
	四环素类抗生素	Fe₃O₄NPs	比色法	0.043 µg/mL	牛奶/牛肉/蜂王浆	[41]
重金属	Hg²⁺	Fe₃O₄NPs	比色法	5 µmol/L	——	[43]
	Pb²⁺ Cd²⁺	Fe₃O₄NPs	比色法	0.117 µmol/L 0.108 µmol/L	——	[44]
	Hg²⁺	Fe₃O₄@ZIF-67	比色法	0.36 nmol/L	饮用水	[45]
食源性致病菌	鼠伤寒沙门氏菌	Fe₃O₄NPs	比色法	7.5×10⁵ CFU/mL	——	[48]
	李斯特菌	Fe₃O₄NPC	比色法	5.4×10³ CFU/mL	牛奶	[49]
	金黄色葡萄球菌	Fe₃O₄NPs/ AgNCs	比色法	4.9 CFU/mL	新鲜猪肉沫	[50]
	鼠伤寒沙门氏菌	Fe₃O₄NPs/AuNP	比色法	（1.9×10²±0.11）CFU/mL	牛奶	[51]
	鼠伤寒沙门氏菌	Fe₃O₄NPs/AuNP	比色法	1 pmol/L	牛奶	[52]
	副溶血性弧菌	Fe₃O₄NPs/AuNP	比色法	（1.10×10⁴±0.04）CFU/mL	生虾	[53]
	大肠杆菌O157:H7	Fe₃O₄NPs	比色法	12 CFU/mL 30~300 CFU/mL	肉汤牛肉糜/火鸡香肠/生菜/牛奶	[54]
其它有害物质	三聚氰胺	Fe₃O₄NPs	比色法	2.0 µmol/L	原料奶/奶粉	[56]
	邻苯二酚	Fe₃O₄NPs	比色法	0.4 µmol/L	河水	[57]
	H₂O₂	FePt-AuHNPs	比色法	12.33 µmol/L	牛奶	[59]
	黄曲霉毒素A	Au@Fe₃O₄NPs	比色法	30 pg/mL	无壳花生/玉米	[60]

下载: 导出CSV

| 显示表格

2.1 农兽药残留检测

农兽药在预防农作物病虫害和动物疾病，提高产品品质等方面发挥着重要作用。然而，因用药不当，导致食品中农兽药残留超标的现象仍时有发生^[36]。大多数农兽药难以降解，且存在一定的毒性，并且可经过食物链进入人体，引起人体中农兽药残留的蓄积、滞留，进而诱发各种慢性疾病，对人体健康造成潜在危害^[37]。

自Fe₃O₄NPs类酶性质提出以来，首先被应用于食品中农兽药残留分析。早在2012年，Zhang课题组^[38]利用Fe₃O₄NPs的类POD活性催化鲁米诺化学发光，而后加入乙醇（自由基清除剂），淬灭化学发光，再借助正丙醇与Fe₃O₄NPs的结合物抑制该淬灭作用，建立了检测正丙醇的新方法。该方法的检测限为0.1 nmol/L，检测线性范围为0.1 nmol/L~100 µmol/L，并在绿茶中进行了验证。Liang等^[39]将Fe₃O₄ NPs纳米酶与酶抑制法联用，构建了一种Fe₃O₄NPs纳米酶-乙酰胆碱酯酶（Acetyl choliesterase，AchE）-胆碱氧化酶（Cholineoxidase，CHO）的比色传感器，用于快速检测有机磷农药和神经毒素。其检测原理是有机磷农药能够抑制AchE活性，进而抑制乙酰胆碱在AchE和CHO催化下产生的H₂O₂，使得显色反应受抑制；当体系中不存在有机磷农药时，显色反应可正常进行。该比色传感器在饮用水中检测到低至1 nmol/L神经毒素沙林，10 nmol/L甲基对氧磷和5 µmol/L乙酰磷酸盐，该方法在快速筛查大多数有机磷农药和神经毒素方面具有较好的应用前景。Nafiseh等^[32]通过在Fe₃O₄NPs表面修饰ZIF-8，制备了Fe₃O₄@ZIF-8纳米酶，并结合上述酶抑制法，用于水和果汁中有机磷农药的快速检测，其检测限为0.2 nmol/L，线性范围为0.5~500 nmol/L。上述方法虽利用磁性纳米酶的类POD活性，实现了某些农药的高效比色检测，但检测方法复杂，难以满足快速检测需要。

为了实现检测方法的简单化，2016年，Li等^[40]发现Fe₃O₄NPs可与四环素（Tetracycline, TC）发生Fenton化学反应，加速催化H₂O₂介导的TMB氧化，使其显色更快。基于此，该研究团队^[32]建立了Fe₃O₄NPs-TMB-H₂O₂比色反应体系，用于TC检测。该方法通过目测，即可检测出TC，检出限为45 nmol/L，且在100~1000 nmol/L范围内显示出良好的线性关系。同理，陈祥明等研究人员^[41]利用该方法检测了牛奶、牛肉、蜂王浆中残留的TC。采用该方法在这三类样品中的加标回收率分别为92.6%~93.1%、90.9%~92.6%、89.9%~91.7%，适用于食品中TC类抗生素总量的测定。上述研究为食品中TC的检测提供了一种新思路。该类方法虽简单快速，但仅仅适用于食品中TC类抗生素总量的测定。

2.2 重金属残留检测

食品中重金属残留是危害人体健康的重要因素，食物中的重金属主要包括汞、铅、镉、铬等。重金属可通过食物链在人体内蓄积，可诱发各种疾病，严重时将会危及生命^[42]。因此，亟需研发出一种简单快速、灵敏度高的重金属检测方法。

研究发现，通过控制适配体在Fe₃O₄NPs表面的修饰数量，调控该纳米酶的催化活性。基于此，Jurng科研团队^[43]构建了Fe₃O₄NPs-H₂O₂-OPD比色传感器用于检测Hg²⁺。当溶液中不含有Hg²⁺时，Fe₃O₄NPs催化活性受表面修饰的适配体抑制，进而抑制显色反应的进行；当溶液中含有Hg²⁺时，适配体与Hg²⁺特异性结合，并脱离Fe₃O₄NPs纳米酶表面，使得纳米酶活性恢复，显色反应继续。该传感器在30 min内，即可通过肉眼识别颜色变化，其颜色变化程度与Hg²⁺浓度成正比，检出限为5 μmol/L。基于同一检测原理，杨文平等^[44]通过更换Fe₃O₄NPs表面修饰的适配体，建立了一种用于检测食品中Cd²⁺和Pb²⁺残留的比色适配体传感器，检测原理见图2。该传感器的检测时间为50min，在最优条件下，Cd²⁺和Pb²⁺的最低检测限分别为0.108 μmol/L和0.117 μmol/L。上述检测方法虽简单快速且灵敏，但磁性纳米酶的特异性较差，需引入适配体予以克服，而某些小分子适配体筛选困难，这不仅提高了检测成本，也使得此类方法的通用性受到一定限制。

图 2 基于Fe₃O₄NP纳米酶催化活性检测Cd²⁺和Pb²⁺原理图^[44]

Figure 2. Schematic illustration of the developed colorimetric sensors for Cd²⁺ and Pb²⁺ detection based on the peroxidase activity of Fe₃O₄^[44]

下载: 全尺寸图片幻灯片

为了降低检测成本，Christus等^[45]制备了一种具有POD活性的新型纳米复合材料Fe₃O₄@ZIF-67，将其与具有清除自由基能力的谷胱甘肽（Glutathione, GSH）相结合，构建了Fe₃O₄@ZIF-67-GSH-H₂O₂-TMB显色反应体系，用于Hg²⁺的检测。当反应体系中不含有Hg²⁺时，GSH抑制由Fe₃O₄@ZIF-67纳米酶催化H₂O₂引起的TMB氧化；当反应体系中含有Hg²⁺时，GSH中的硫醇基团与Hg²⁺结合，抑制GSH清除自由基的能力，使得显色反应正常进行。该方法在饮用水中得到了验证，在0~30 nmol/L的浓度范围内，溶液的吸光度值与Hg²⁺浓度成正比，检出限低至0.36 nmol/L。该比色传感方法的建立为食品中其他重金属残留的检测提供了借鉴。

2.3 食源性致病菌检测

食源性致病菌是指通过摄食，进入人体而引发食源性疾病的致病性细菌，主要包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7、沙门氏菌、李斯特菌等，因其导致的食品安全事件受到了社会的广泛关注^[46]。但受其结构和性质约束，传统检测技术难以满足快速检测需求，如平板技术、菌落计数、生物发光法等，因而研发快速、灵敏、高特异性的检测方法尤为重要^[47]。

2015年，Park等^[48]利用Fe₃O₄NPs的磁性分离特性和类POD活性，研发了一种基于Fe₃O₄NPs-适配体-H₂O₂-TMB的比色传感器，用于鼠伤寒沙门氏菌的检测。其核心机理是基于适配体在Fe₃O₄NPs表面的修饰和脱离，进而调节该纳米酶的催化活性。当溶液中存在鼠伤寒沙门氏菌时，纳米酶表面吸附的适配体与其特异性结合，脱离纳米酶表面，使其催化活性得以恢复，显色反应得以正常进行，检测原理见图3。该传感器仅需10 min即可完成分析，检出限为7.5×10⁵ CFU/mL。磁性纳米粒子团簇（Fe₃O₄ nano-particle cluster，Fe₃O₄NPC）是一类优于Fe₃O₄NP催化活性的新型纳米酶，能有效提高检测方法的灵敏度和准确性。Zhang等^[49]以表面修饰了李斯特菌适配体的Fe₃O₄NPC为比色探针，TMB为显色底物，建立了Fe₃O₄NPC-适配体-H₂O₂-TMB检测体系，用于牛奶中李斯特菌的检测。当牛奶中存在李斯特菌时，可与其结合生成夹心型复合物，进而催化H₂O₂氧化TMB。该方法在5.4×10³~10⁸ CFU/mL的范围内呈现良好的线性关系，检出限为5.4×10³ CFU/mL，有望应用于食源性致病菌的现场可视化分析中。

图 3 使用标记DNA适配体的MNP和TMB进行比色检测的示意图^[48]

Figure 3. Schematic illustration of the MNP-based colorimetric detection using label-free DNA aptamers and TMB^[48]

下载: 全尺寸图片幻灯片

目前虽有报道基于Fe₃O₄NPs纳米酶活性检测食源性致病菌的研究，但更多的是侧重于利用Fe₃O₄NPs富集分离特性与其它纳米材料的联用，如银纳米簇（Sliver nanocluster, AgNCs）、AuNP等。Li等^[50]以碳点修饰的Fe₃O₄NPs为磁性分离剂，表面修饰了金黄色葡萄球菌抗体的AgNCs为催化剂。当溶液中存在金黄色葡萄球菌，形成的AgNCs-金黄色葡萄球菌-Fe₃O₄NPs夹心型免疫复合物，经磁性分离后，该复合物表面的AgNCs，可将无色OPD氧化为黄色的OPD，检测原理见图4。该方法对新鲜猪肉沫中金黄色葡萄球菌的平均回收率为85.6%~103.7%，检测限为4.9 CFU/mL。Duan^[51]将与鼠伤寒沙门氏菌具有高亲和力的适配体，分别固定在Fe₃O₄NPs和AuNPs表面。当溶液中含有鼠伤寒沙门氏菌时，则会形成夹心型磁性纳米复合物。经外部磁场富集该复合物后，溶液由最初的红色变为淡红色，检测原理如图5所示。该方法对鼠伤寒沙门氏菌的线性范围为25~10⁵ CFU/mL，检测限为10 CFU/mL，在加标牛奶中的检出浓度为（1.9×10²±0.04）CFU/mL。受该法启示，Ma等^[52]基于碱基互补配对原则，建立了一种检测牛奶中鼠伤寒沙门氏菌的比色方法。其不同之处在于，Fe₃O₄NPs和AuNPs表面修饰的是短链ssDNA，鼠伤寒沙门氏菌表面修饰了与之互补的长链ssDNA，三者形成的复合物经磁性富集后，溶液颜色随之变浅。该方法在1~1500 pmol/L范围内表现出良好的相关性，回收率在90.7%~102.2%之间，与经典的平板计数方法结果相似，说明该方法具有良好的准确性。基于同一原理，Nongkhai科研团队^[53]检测了生虾样品中的副溶血性弧菌，检出限为（1.10×10⁴±0.04）CFU/mL，加标回收率为110.0%。

图 4 比色检测金黄色葡萄球菌的示意图^[50]

Figure 4. Schematic diagram of the proposed colorimetric assay for detection of S.aureus^[50]

下载: 全尺寸图片幻灯片

图 5 使用适体修饰的AuNP和MNPs检测鼠伤寒沙门氏菌策略示意图^[51]

Figure 5. Schematic illustration of the strategy for S.typhimurium detection using aptamer modified AuNPs and MNPs^[51]

下载: 全尺寸图片幻灯片

一次性比色生物传感器芯片的研发，为检测食源性致病菌提供了新思路。Zourob科研团队^[54]利用蛋白酶与底物肽的水解作用，研发了一种用于大肠杆菌O157:H7检测的比色生物传感器。他们利用两端分别修饰有氨基（NH₂）和半胱氨酸残基（Cysteine residue，Cys）的底物肽，将羧基化Fe₃O₄NPs固定在金膜修饰的芯片表面，使芯片表面呈现黑色，该底物肽可特异性结合大肠杆菌O157:H7。随后在芯片表面滴加含有蛋白酶的大肠杆菌O157:H7溶液，在蛋白酶对底物肽的水解和外部磁力的共同作用下，将结合了大肠杆菌O157:H7的Fe₃O₄NPs从芯片表面脱落，暴露出金色。结合仪器分析后，大肠杆菌在肉汤中的检出限为12 CFU/mL，在牛肉糜、火鸡香肠、生菜和牛奶中的检出限为30~300 CFU/mL。该芯片的开发，为实现食品中致病菌的现场检测提供了新思路，能更好地规避食用受污染食品的风险。

磁性纳米酶显色技术在食源性致病菌检测方面的创新与应用，克服了传统检测方法操作繁琐、耗时长、检测结果滞后性等缺陷，虽实现了食源性致病菌的简单快速检测，但检测灵敏度较差。

2.4 其它有害物质检测

除检测农兽药残留、重金属及食源性致病菌外，磁性纳米酶显色技术也广泛应用于检测三聚氰胺、邻苯二酚、H₂O₂、黄曲霉毒素A（Ochratoxin，OTA）以及食品中掺杂掺假等方面。

非法添加物如三聚氰胺的使用，不仅会扰乱食品中蛋白质的检测，长期摄入还将导致人体生殖、泌尿系统的损害，严重时可诱发膀胱癌^[55]。当Fe₃O₄NPs、H₂O₂与三聚氰胺共存时，H₂O₂优先与三聚氰胺发生反应，导致体系中的·OH减少，再加入显色底物时，显色不明显。基于此，Ding等^[56]建立了检测乳制品中的三聚氰胺的比色传感方法。该方法的检测时间不超过1 h，检测限为2.0 µmol/L，有望实现乳制品中三聚氰胺的现场可视化检测。邻苯二酚作为一类广泛应用的化工原料，对环境和人体都构成极大的威胁。马艳飞等^[57]基于邻苯二酚还原·OH的作用，建立了一种可视化定量检测河水中邻苯二酚的方法。该方法在1.3~11.7 µmol/L范围内具有良好的线性关系，检出限为0.4 µmol/L。在食品加工中常以H₂O₂作为防腐剂，但残留的H₂O₂会影响食品的营养价值，且对人体有一定的毒害作用^[58]。Yanan等^[59]应用具有类POD催化活性的FePt-AuHNPs，以TMB为显色底物，对牛奶中残留的H₂O₂进行检测，线性范围为20~700 µmol/L，检测限为12.33 µmol/L。

OTA是一类毒性极强的致癌物质，对人体健康构成了极大威胁。Wang等^[60]基于碱基互补配对原则，将修饰有互补DNA（Complementary DNA，cDNA）的玻璃珠与Au@Fe₃O₄NPs表面的适配体结合，从而抑制Au@Fe₃O₄NPs的催化活性，当溶液中存在OTA时，其将取代玻璃珠与适配体结合，使玻璃珠脱离Au@Fe₃O₄NPs表面，并恢复其活性，显色反应正常进行。该方法在无壳花生和玉米检测中表现了良好的特异性和灵敏性，加标回收率为92.0%~108.1%，相对标准偏差低于8.4%。这类检测方法的便捷性，极大地提高了检测效率，为食品中其它有害物质的检测提供了新的研究思路。

3. 总结与展望

本文总结了近年来磁性纳米酶显色技术在食品安全检测领域的应用。相较于天然酶，纳米酶易制备、成本低、稳定性佳、易于修饰，已应用于食品中农兽药、重金属残留、食源性致病菌以及其它有害物质等检测中，有望成为天然酶的理想替代物。但从目前的研究现状来看，仍面临许多挑战。首先，磁性纳米酶的种类有待丰富，催化活性还有待提高。其次，现有的研究大多集中在类过氧化物纳米酶的研发，对其他类型纳米酶的研究较少，未来可通过材料设计、表面修饰、形貌调控等途径，开发活性更高的新型人工模拟酶。再次，磁性纳米酶显色技术虽在食品安全检测领域取得了初步进展，但仍局限于常见危害物的检测，还有望扩展其应用范围。最后，纳米酶对待测物的选择性欠佳，往往需要借助其它物质（如抗体、适配体等）予以解决，如何实现高效催化和特异识别的有机统一将是未来的研究热点。磁性纳米酶显色技术也将朝着更加灵敏化、准确化、标准化、便携化的方向发展。

图 1 Fe₃O₄NPs纳米酶催化机理^[26]

Figure 1. Catalytic mechanism of Fe₃O₄NPs nanoenzyme^[26]

下载: 全尺寸图片幻灯片

图 2 基于Fe₃O₄NP纳米酶催化活性检测Cd²⁺和Pb²⁺原理图^[44]

Figure 2. Schematic illustration of the developed colorimetric sensors for Cd²⁺ and Pb²⁺ detection based on the peroxidase activity of Fe₃O₄^[44]

下载: 全尺寸图片幻灯片

图 3 使用标记DNA适配体的MNP和TMB进行比色检测的示意图^[48]

Figure 3. Schematic illustration of the MNP-based colorimetric detection using label-free DNA aptamers and TMB^[48]

下载: 全尺寸图片幻灯片

图 4 比色检测金黄色葡萄球菌的示意图^[50]

Figure 4. Schematic diagram of the proposed colorimetric assay for detection of S.aureus^[50]

下载: 全尺寸图片幻灯片

图 5 使用适体修饰的AuNP和MNPs检测鼠伤寒沙门氏菌策略示意图^[51]

Figure 5. Schematic illustration of the strategy for S.typhimurium detection using aptamer modified AuNPs and MNPs^[51]

下载: 全尺寸图片幻灯片

表 1 纳米酶在食品检测中的应用

Table 1 Application literature of nanozymes in food safety assay

目标物类别	目标物	纳米酶	检测方法	检出限	样品基质	参考文献
农药	正丙醇	Fe₃O₄NPs	化学发光法	0.1nmol/L	绿茶	[38]
	神经毒素沙林甲基对氧磷	Fe₃O₄NPs	比色法	1 nmol/L 10 nmol/L	饮用水	[39]
	有机磷农药	Fe₃O₄@ZIF-8	比色法	0.2 nmol/L	水/果汁	[32]
	四环素	Fe₃O₄NPs	比色法	45 nmol/L	——	[40]
	四环素类抗生素	Fe₃O₄NPs	比色法	0.043 µg/mL	牛奶/牛肉/蜂王浆	[41]
重金属	Hg²⁺	Fe₃O₄NPs	比色法	5 µmol/L	——	[43]
	Pb²⁺ Cd²⁺	Fe₃O₄NPs	比色法	0.117 µmol/L 0.108 µmol/L	——	[44]
	Hg²⁺	Fe₃O₄@ZIF-67	比色法	0.36 nmol/L	饮用水	[45]
食源性致病菌	鼠伤寒沙门氏菌	Fe₃O₄NPs	比色法	7.5×10⁵ CFU/mL	——	[48]
	李斯特菌	Fe₃O₄NPC	比色法	5.4×10³ CFU/mL	牛奶	[49]
	金黄色葡萄球菌	Fe₃O₄NPs/ AgNCs	比色法	4.9 CFU/mL	新鲜猪肉沫	[50]
	鼠伤寒沙门氏菌	Fe₃O₄NPs/AuNP	比色法	（1.9×10²±0.11）CFU/mL	牛奶	[51]
	鼠伤寒沙门氏菌	Fe₃O₄NPs/AuNP	比色法	1 pmol/L	牛奶	[52]
	副溶血性弧菌	Fe₃O₄NPs/AuNP	比色法	（1.10×10⁴±0.04）CFU/mL	生虾	[53]
	大肠杆菌O157:H7	Fe₃O₄NPs	比色法	12 CFU/mL 30~300 CFU/mL	肉汤牛肉糜/火鸡香肠/生菜/牛奶	[54]
其它有害物质	三聚氰胺	Fe₃O₄NPs	比色法	2.0 µmol/L	原料奶/奶粉	[56]
	邻苯二酚	Fe₃O₄NPs	比色法	0.4 µmol/L	河水	[57]
	H₂O₂	FePt-AuHNPs	比色法	12.33 µmol/L	牛奶	[59]
	黄曲霉毒素A	Au@Fe₃O₄NPs	比色法	30 pg/mL	无壳花生/玉米	[60]

下载: 导出CSV

参考文献(60)

[1]	李芙蓉, 向发椿, 曹丽萍, 等. 纳米酶在食品检测中的应用研究进展[J/OL]. 食品科学: 1−18 [2021-12-21]. http://kns.cnki.net/kcms/detail/11.2206.ts.20210205.1437.008.html. LI Furong, XIANG Fachun, CAO Liping, et al. Recent advances and applications of nanozymes in food assay[J/OL]. Food Science: 1−18 [2021-12-21]. http://kns.cnki.net/kcms/detail/11.2206.ts.20210205.1437.008.html.
[2]	张娟娟. 我国食品安全快速检测技术发展现状探讨[J]. 现代食品,2019(8):166−168. [ZHANG Juanjuan. Discussion on the development status of rapid food safety detection technology in China[J]. Modern Food,2019(8):166−168.
[3]	MASIA A, SUAREZ M M, PICO Y, et al. Determination of pesticides and veterinary drug residues in food by liquid chromatography-mass spectrometry: A review[J]. Analytica Chimica Acta,2016,936:40−61. doi: 10.1016/j.aca.2016.07.023
[4]	刘硕, 郭培源, 杨昆程, 等. 色谱技术、光谱分析法和生物检测技术在食品安全检测方面的应用进展[J]. 食品安全质量检测学报,2015,6(8):3217−3223. [LIU Shuo, GUO Peiyuan, YANG Kuncheng, et al. Progress in food safety detection using chromatographic techniques, spectroscopic techniques, and biological detection technology[J]. Journal of Food Safety & Quality,2015,6(8):3217−3223.
[5]	李蕾, 李文进, 杨阳, 等. 表面等离子共振传感器快速检测农药残留的研究进展[J]. 食品安全质量检测学报,2013,4(2):321−327. [LI Lei, LI Wenjin, YANG Yang, et al. Research progress on the detection of pesticide residues by surface plasmon resonance sensor[J]. Journal of Food Safety & Quality,2013,4(2):321−327.
[6]	张琳. 快速检测技术在果蔬检测中的应用分析[J]. 中国果菜,2020,40(12):29−31,35. [ZHANG Lin. Analysis on the application of rapid detection technology in the detection of fruits and vegetables[J]. China Fruit & Vegetable,2020,40(12):29−31,35.
[7]	LIN Y H, REN J S, QU X G, et al. Catalytically active nanomaterials: A promising candidate for artificial enzymes[J]. Accounts of Chemical Research,2014,47(4):1097−1105.
[8]	罗成, 李艳, 龙建纲, 等. 纳米材料模拟酶的应用研究进展[J]. 中国科学:化学,2015,45(10):1026−1041. [LUO Cheng, LI Yan, LONG Jiangang, et al. Recent advances in applications of nanoparticles as enzyme mimetics[J]. Scientia Sinica (Chimica),2015,45(10):1026−1041.
[9]	MOHSINA H, KHALILR. Potential applications of peroxidases[J]. Food Chemistry,2009,115(4):1177−1186. doi: 10.1016/j.foodchem.2009.02.035
[10]	李俊容, 沈爱国, 胡继明, 等. 纳米酶及其分析检测应用研究进展[J]. 应用化学,2016,33(11):1245−1252. [LI Junrong, SHEN Aiguo, HU Jiming, et al. Research progress of nanozymes and its application in analysis[J]. Chinese Journal of Applied Chemistry,2016,33(11):1245−1252. doi: 10.11944/j.issn.1000-0518.2016.11.160327
[11]	ZHANG X L, LI G L, WU D, et al. Recent progress in the design fabrication of metal-organic frameworks-based nanozymes and their applications to sensing and cancer therapy[J]. Biosensors and Bioelectronics,2019,137:178−198. doi: 10.1016/j.bios.2019.04.061
[12]	HE W W, WAMER W, YIN J J, et al. Enzyme-like activity of nanomaterials[J]. Journal of Environmental Science and Health Part C-environmental Carcinogenesis & Ecotoxicology Reviews,2014,32(4):186−211.
[13]	BRESLOW R, OVERMAN L E. An "artificial enzyme" combining a metal catalytic group and a hydrophobic binding cavity[J]. Journal of the American Chemical Society,1970,92(4):1075−1077. doi: 10.1021/ja00707a062
[14]	MANEA F, HOUILLON FB, PASQUATO L, et al. Nanozymes: Gold-nanoparticle-based transphosphorylation catalysts[J]. Angewandte Chemie-International Edition,2004,43(45):6165−6169. doi: 10.1002/anie.200460649
[15]	罗成, 李艳, 龙建纲, 等. 四氧化三铁纳米颗粒过氧化物酶样活性的应用[J]. 科学通报,2015,60(35):3478−3488. [LUO Cheng, LI Yan, LONG Jiangang, et al. Applications of iron oxide nanoparticles as peroxidase mimetics[J]. Chinese Science Bulletin,2015,60(35):3478−3488.
[16]	HU Y, WANG J L, WU Y G, et al. A simple and rapid chemosensor for colorimetric detection of dimethoate pesticide based on the peroxidase-mimicking catalytic activity of gold nanoparticles[J]. Analytical Methods,2019,11(41):5337−5347. doi: 10.1039/C9AY01506J
[17]	SONG Y J, QU K G, ZHAO C, et al. Graphene oxide: Intrinsic peroxidase catalytic activity and its application to glucose detection[J]. Advanced Materials,2010,22(19):2206−2210. doi: 10.1002/adma.200903783
[18]	TAN H L, LI Q, ZHOU Z C, et al. A sensitive fluorescent assay for thiamine based on metal-organic frameworks with intrinsic peroxidase-like activity[J]. Analytica Chimica Acta,2015,856:90−95.
[19]	柳晶鑫, 徐江艳, 蒋红梅, 等. 磁纳米材料在环境污染物分析与去除研究中的应用[J]. 分析试验室,2020,39(11):1241−1253. [LIU Jingxin, XU Jiangyan, JIANG Hongmei, et al. Application of magnetic nanomaterials in the analysis and removal of environmental polltants[J]. Chinese Journal of Analysis Laboratory,2020,39(11):1241−1253.
[20]	尉枫, 韩晓军, 等. 纳米酶及其在生物医学检测领域的研究进展[J]. 分析化学,2021,49(4):581−592. [WEI Feng, HAN Xiaojun. Nanozymes and their application progress in biomedical detection[J]. Chinese Journal of Analytical Chemistry,2021,49(4):581−592. doi: 10.1016/S1872-2040(21)60092-0
[21]	GAO L Z, ZHUANG J, NIE L, et al. Intrinsic peroxidase-like activity of ferromagnetic nanoparticles[J]. Nature Nanotechnology,2007,2(9):577−583. doi: 10.1038/nnano.2007.260
[22]	高利增, 阎锡蕴, 等. 纳米酶的发现与应用[J]. 生物化学与生物物理进展,2013,40(10):892−902. [GAO Lizeng, YAN Xiyun. Discovery and current application of nanozyme[J]. Progress in Biochemistry and Biophysics,2013,40(10):892−902.
[23]	马龙, 范克龙. 纳米酶和铁蛋白新特性的发现和应用[J]. 自然杂志,2020,42(1):1−11. [MA Long, FAN Kelong. The finding and application of the novel properties of nanozyme and ferritin[J]. Chinese Journal of Nature,2020,42(1):1−11. doi: 10.3969/j.issn.0253-9608.2020.01.001
[24]	PEREZ-BENITO JF. Iron(III)-hydrogen peroxide reaction: Kinetic evidence of a hydroxyl-mediated chain mechanism[J]. Journal of Physical Chemistry A,2004,108(22):4853−4858. doi: 10.1021/jp031339l
[25]	CHEN Z W, YIN J J, ZHANG Y, et al. Dualenzyme-like activities of iron oxide nanoparticles and their implication for diminishing cytotoxicity[J]. Acs Nano,2012,6(5):4001−4012. doi: 10.1021/nn300291r
[26]	王杨. 铁基纳米酶的研究进展[J]. 安徽化工,2020,46(2):4−11. [WANG Yang. Study progress of iron-based nanozymes[J]. Anhui Chemical Industry,2020,46(2):4−11. doi: 10.3969/j.issn.1008-553X.2020.02.002
[27]	PENG F, ZHANG Y, GU N, et al. Size-dependent peroxidase-like catalytic activity of Fe₃O₄ nanoparticles[J]. Chinese Chemical Letters,2008,19(6):730−733. doi: 10.1016/j.cclet.2008.03.021
[28]	LIU Y, GAO P, HUANG C, et al. Shape and size-dependent catalysis activities of ironterephthalic acid metal-organic frameworks[J]. Science China Chemistry,2015,58(10):1553−1560. doi: 10.1007/s11426-015-5406-x
[29]	LIU B, LIU J. Surface modification of nanozymes[J]. Nano Research,2017,10(4):1125−1148. doi: 10.1007/s12274-017-1426-5
[30]	FAN K, WANG H, XI J, et al. Optimization of Fe₃O₄ nanozyme activity via single amino acid modification mimicking an enzyme active site[J]. Chemical Communications,2017,53(2):424−427. doi: 10.1039/C6CC08542C
[31]	REN H, MA T, ZHAO J, et al. V_C-functionalized Fe₃O₄nanocomposites as peroxidase-like mimetics for H₂O₂ and glucose sensing[J]. Chemical Research in Chinese Universities,2018,34(2):260−268. doi: 10.1007/s40242-018-7289-9
[32]	NAFISEHB, ALIREZA K, JAVAD H, et al. Sensitive biosensing of organophosphate pesticides using enzyme mimics of magnetic ZIF-8[J]. Spectrochimica Acta Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy,2019,209:118−125. doi: 10.1016/j.saa.2018.10.039
[33]	武江洁星, 魏辉. 浅谈纳米酶的高效设计策略[J]. 化学进展,2021,33(1):42−51. [WU Jiangjiexing, WEI Hui. Efficient design strategies for nanozymes[J]. Progress in Chemistry,2021,33(1):42−51.
[34]	LEE Y, GARCIA M A, FREY H N A, et al. Synthetic tuning of the catalytic properties of Au-Fe₃O₄ nanoparticles[J]. Angewandte Chemie International Edition,2010,49(7):1271−1274. doi: 10.1002/anie.200906130
[35]	HUANG F, WANG J, CHEN W, et al. Synergistic peroxidase-like activity of CeO₂coated hollow Fe₃O₄ nanocomposites as an enzymatic mimic for low detection limit of glucose[J]. Journal of the Taiwan Institute of Chemical Engineers,2018,83:40−49. doi: 10.1016/j.jtice.2017.12.011
[36]	刘建慧, 孙鑫, 刘希光, 等. 果蔬中农药残留现状及检测技术的研究发展[J]. 食品研究与开发,2014,35(15):119−122. [LIU Jianhui, SUN Xin, LIU Xiguang, et al. The present situation of pesticide residues in vegetables and fruits and the progress of detection technique[J]. Food Research and Development,2014,35(15):119−122. doi: 10.3969/j.issn.1005-6521.2014.15.034
[37]	张珊珊, 吴远高. 农药残留对食品安全的影响及应对策略分析[J]. 现代食品,2020(20):215−217. [ZHANG Shanshan, WU Yuangao. Analysis on the influence of pesticide residue on food safety and countermeasures[J]. Modern Food,2020(20):215−217.
[38]	GUAN G J, YANG L, ZHANG Z P, et al. Chemiluminescence switching on peroxidase-like Fe₃O₄ nanoparticles for selective detection and simultaneous determination of various pesticides[J]. Analytical Chemistry,2012,84(21):9492−9497. doi: 10.1021/ac302341b
[39]	LIANG M M, FAN K L, YAN X Y, et al. Fe₃O₄ magnetic nanoparticle peroxidase mimetic-based colorimetric assay for the rapid detection of organophosphorus pesticide and nerve agent[J]. Analytical Chemistry,2013,85(1):308−312. doi: 10.1021/ac302781r
[40]	WANG Y L, SUN Y J, LI Z, et al. A colorimetric biosensor using Fe₃O₄ nanoparticles for highly sensitive and selective detection of tetracyclines[J]. Sensors and Actuators B-Chemical,2016,236:621−626. doi: 10.1016/j.snb.2016.06.029
[41]	陈祥明, 李飞, 林妍, 等. 制备Fe₃O₄纳米酶用于检测食品中四环素类抗生素的含量[J]. 食品安全质量检测学报,2019,10(2):434−439. [CHEN Xiangming, LI Fei, LIN Yan, et al. Preparation of Fe₃O₄ nanozyme for detection of tetracycline antibiotics in foods[J]. Journal of Food Safety & Quality,2019,10(2):434−439. doi: 10.3969/j.issn.2095-0381.2019.02.025
[42]	黄昭, 曹亚男, 李跑, 等. 表面等离子体共振传感器在食品安全检测中的应用[J]. 食品科学,2020,41(13):276−282. [HUANG Zhao, CAO Yanan, LI Pao, et al. Application of surface plasma resonance sensor in food safety inspection: A review[J]. Food Science,2020,41(13):276−282. doi: 10.7506/spkx1002-6630-20190630-418
[43]	KIM Y S, JURNG J. A simple colorimetric assay for the detection of metal ions based on the peroxidase-like activity of magnetic nanoparticles[J]. Sensors and Actuators B-Chemical,2013,176:253−257. doi: 10.1016/j.snb.2012.10.052
[44]	杨文平, 吴远根. 基于Fe₃O₄过氧化物酶活性的Cd²⁺和Pb²⁺比色传感器[J]. 生物技术进展,2019,9(6):611−619. [YANG Wenping, WU Yuangen. Colormetric sensors for Cd²⁺ and Pb²⁺ detection based on the peroxidase activity of Fe₃O₄[J]. Current Biotechnology,2019,9(6):611−619.
[45]	CHRISTUS AAB, PANNEERSELVAM P, RAVIKUMAR A, et al. Colorimetric determination of Hg(II) sensor based on magnetic nanocomposite (Fe₃O₄@ZIF-67) acting as peroxidase mimics[J]. Journal of Photochemistry and Photobiology A-Chemistry,2018,364:715−724. doi: 10.1016/j.jphotochem.2018.07.009
[46]	范蕊, 王文文, 卢彬, 等. 食源性致病微生物快速检测技术的发展趋势及研究进展[J]. 现代食品,2021(2):180−183. [FAN Rui, WANG Wenwen, LU Bin, et al. The development trend and research progress of food-borne pathogenic microorganisms rapid detection technology[J]. Modern Food,2021(2):180−183.
[47]	焦振泉, 郭云昌, 刘秀梅, 等. 食源性致病菌检测方法研究进展——Ⅰ. 传统检测方法[J]. 中国食品卫生杂志,2007(1):58−62. [JIAO Zhenquan, GUO Yunchang, LIU Xiumei, et al. Current progress in methods for detection of foodborne pathogens part 1: Traditional detection methods[J]. Chinese Journal of Food Hygiene,2007(1):58−62. doi: 10.3969/j.issn.1004-8456.2007.01.018
[48]	PARK J Y, JEONG H Y, PARK T J, et al. Colorimetric detection system for salmonella typhimurium based on peroxidase-like activity of magnetic nanoparticles with DNA aptamers[J]. Journal of Nanomaterials, 2015: 527126.
[49]	ZHANG Lisha, HUANG Ru, LIU Weipeng, et al. Rapid and visual detection of Listeria monocytogenes based on nanoparticle cluster catalyzed signal amplification[J]. Biosensors and Bioelectronics,2016,86:1−7. doi: 10.1016/j.bios.2016.05.100
[50]	YAO S, ZHAO C, LI J, et al. Colorimetric immunoassay for the detection of Staphylococcus aureus by using magnetic carbon dots and sliver nanoclusters as o-phenylenediamine-oxidase mimetics[J]. Food Analytical Methods,2020,13(4):833−838. doi: 10.1007/s12161-019-01683-5
[51]	DUAN N, WU S J, XU B C, et al. Magnetic nanoparticles-based aptasensor using gold nanoparticles as colorimetric probes for the detection of Salmonella typhimurium[J]. Analytical Sciences,2016,32(4):431−436. doi: 10.2116/analsci.32.431
[52]	MA X Y, SONG L J, WANG Z P, et al. A novel colorimetric detection of S-typhimurium based on Fe₃O₄ magnetic nanoparticles and gold nanoparticles[J]. Food Analytical Methods,2017,10(8):2735−2742. doi: 10.1007/s12161-017-0819-0
[53]	SADSRI V, HOVEN V P, NONGKHAI P N, et al. Simple colorimetric assay for Vibrio parahaemolyticus detection using aptamer-functionalized nanoparticles[J]. ACS Omega,2020,5(34):21437−21442. doi: 10.1021/acsomega.0c01795
[54]	SUAIFAN G, ZOUROB M. Paper-based magnetic nanoparticle-peptide probe for rapid and quantitative colorimetric detection of Escherichia coli O157: H7[J]. Biosensors & Bioelectronics,2017,92:702−708.
[55]	张威, 郭丹, 兰伟, 等. 液体乳中三聚氰胺的快速检测产品评价研究[J]. 食品安全质量检测学报,2020,11(22):8533−8539. [ZHANG Wei, GUO Dan, LAN Wei, et al. Evaluation of rapid detection products for melamine in liquid milk[J]. Journal of food safety & quality,2020,11(22):8533−8539.
[56]	DING N, YAN N, CHEN X G, et al. Colorimetric determination of melamine in dairy products by Fe₃O₄ magnetic nanoparticles-H₂O₂-ABTS detection system[J]. Analytical Chemistry,2010,82(13):5897−5899. doi: 10.1021/ac100597s
[57]	马艳飞, 俞晨飞, 陈兴国, 等. 基于Fe₃O₄磁性纳米颗粒的类过氧化氢酶性质可视化测定邻苯二酚[J]. 分析科学学报,2014,30(5):709−712. [MA Yanfei, YU Chenfei, CHEN Xingguo, et al. A novel visual determination of catechol based on Fe₃O₄magnetite nanoparticles as peroxidase mimetics[J]. Journal of Analytical Science,2014,30(5):709−712.
[58]	徐军军, 吴甜甜, 席慧婷, 等. 一种新型过氧化氢传感器的构建及其在牛奶中的应用[J]. 食品工业科技,2020,41(22):253−259. [XU Junjun, WU Tiantian, XI Huiting, et al. Construction of a novel hydrogen peroxide sensor and its application in milk[J]. Science and Technology ofFood Industry,2020,41(22):253−259.
[59]	DING Yanan, YANG Baochan, LIU Hao, et al. FePt-Au ternary metallic nanoparticles with the enhanced peroxidase-like activity for ultrafast colorimetric detection of H₂O₂[J]. Sensors and Actuators B:Chemical,2018,259:775−783. doi: 10.1016/j.snb.2017.12.115
[60]	WANG C Q, QIAN J, HUANG X Y, et al. Colorimetric aptasensing of ochratoxin a using Au@Fe₃O₄ nanoparticles as signal indicator and magnetic separator[J]. Biosensors & Bioelectronics,2016,77:1183−1191.

施引文献(6)

期刊类型引用(3)

1.	徐冯莲，许锐鹏，张沂，王子昱，李煜龙，陈贵浩，方伟蓉. 植物乳杆菌RG-034对大鼠腹泻型肠易激综合征的治疗作用. 现代药物与临床. 2024(04): 816-825 . 百度学术
2.	施丰成，李天笑，许春平，国旭丹，冀晓龙，宋光富. 粗细支卷烟烟气对小鼠肠道菌群及代谢产物的影响. 食品工业. 2024(11): 91-97 . 百度学术
3.	刘玉鑫，韩迎香，王雅菲，郝艳萍，萨仁娜，托娅. 植物乳植杆菌LP-315对DSS诱导的小鼠炎症性肠病模型免疫应答调控研究. 中国微生态学杂志. 2024(12): 1365-1373 . 百度学术