Research Progress of Mulberry Leaf Comprehensive Utilization
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摘要: 桑叶(MLs)传统上用于养蚕以及用作草药和草药饮料。本文总结了桑叶对人体具有的降血糖、降血压、防癌以及通便利尿等药理作用,就桑叶在食品以及动物生产中的应用进行了归纳,针对当前桑叶研究存在的问题进行了分析,对桑叶的进一步综合利用进行了展望,旨在为桑叶精深加工技术创新和资源高效综合利用、开展资源高值化加工共性关键技术创新与产品开发提供理论参考。Abstract: Mulberry leaves (MLs) have been used traditionally to raise silkworms and as herbs and herbal drinks . This article summarizes the pharmacological effects of mulberry leaves on the human body such as lowering blood sugar, lowering blood pressure, preventing cancer and urinating. The application of mulberry leaves in food and animal production are summarized, and the current problems in mulberry leaves research are carried out. The analysis and prospects for the further comprehensive utilization of mulberry leaves are aimed at providing theoretical references for mulberry leaf deep-processing technology innovation, high-efficiency comprehensive utilization of resources, and common key technology innovation and product development for high-value processing of resources.
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Keywords:
- mulberry leaf /
- pharmacological action /
- functional food /
- animal production
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桑树为桑科(Moraceae)桑属(Morus)的多年生木本植物,在我国各地分布广泛,是我国一种重要的经济作物,桑叶为桑树的干燥叶,又名家桑、荆桑、黄桑叶,是蚕的主要食物来源,同时也是我国重要的传统中药之一[1-2]。桑叶中含有丰富的营养物质及多种活性成分,如维生素、黄酮、多酚、类生物碱、萜类化合物、类固醇等,且蛋白质和氨基酸组成较平衡,具有降血糖、降血压、降胆固醇、抗动脉粥样硬化及提高肉品质等多种作用[3-4]。
近年来国内外有关桑叶的研究逐渐增多,Wu[5]通过连续八周对小鼠注射桑叶多糖(MLP-1),得出了MLP-1可以有效抑制肾纤维化并潜在地治疗糖尿病的结论。Wen等[6]在研究中发现桑叶中的烯丙基酚具有良好的抗氧化性,可及时清除体内产生的自由基,延缓衰老。同时,吴美音等[7]也指出桑叶中的黄酮类物质具有调节糖脂代谢,减轻炎症,抑制尿酸代谢中黄嘌呤氧化酶的作用。因此,可将桑叶中的活性成分应用到实际产品中,产生经济效益。研究者发现桑叶不仅具有药理作用,还可将桑叶运用到食品中,开发功能性食品,如桑叶茶、桑叶饮料、桑叶挂面,对比传统的茶、饮料、挂面,添加桑叶的食品具有更高的营养价值以及更好的色泽和口感,比传统食品更能吸引消费者。尤其是桑叶茶的研制,雷诗涵等 [8]通过盐渍-醋蒸-发酵法制备的功能性桑叶茶有较好的风味且草酸含量低,硬度和脱氧野尻霉素(1-DNJ)含量均在合理范围内,感官评价优于同类产品,具有广阔的市场前景。除此之外,桑叶在动物生产中的应用也被不断阐明,Zhu等[9]的实验有力证明了桑叶可改变肌纤维特性,从而增强抗氧化能力和增加肌内脂肪来改善肥育猪的肉质。Pothinuch等[10]研究发现桑叶提取物对猪的基底动脉的血管有舒张作用,但要探究其具体的作用机制,还需进行更深层次的动物实验。
随着人们生活水平的提高,人们越来越关注自身健康和功能性食品,而桑叶作为既是食品又是药品的物质之一[11]。本文对近几年国内外研究人员对其具有的药理作用、在功能性食品中的应用及发酵后的应用进行总结,为后人继续对桑叶的开发利用提供理论参考,以期能研发出更好的功能性食品以及在动物生产中发挥更大的作用。
1. 桑叶的药理作用
1.1 降血糖
糖尿病是21世纪全球主要的公共卫生事件,根据2015年国际糖尿病联盟(IDF)发布的第7版糖尿病概览统计数据,全球成年人中糖尿病患病人数高达4.15亿,预计到2040年将会增至6.42亿[12]。越来越多的证据证明,许多植物都含有生理健康益处的生物活性成分,且副作用较少,因此,用专门针对糖尿病的植物提取物预防糖尿病的是较为经济有效的方法。桑叶含有多种降血糖成分,如黄酮类、生物碱和多糖等[13],体外实验和动物研究均表明[14],桑叶提取物可能具有降低人体餐后血糖的潜力。现代研究表明[15],桑叶经发酵处理后,也可抑制餐后小鼠血糖升高,原因可能是桑叶水提物可抑制麦芽糖酶和乳糖酶活性,降低小鼠对两种糖的吸收。同时季涛等[16]也认为桑叶可促进胰岛素释放、抑制a-糖苷酶的活性。目前有关桑叶降血糖的研究虽已初步证实其具有降血糖的功效,但目前的实验对象还仅局限在动物范围内,尚需临床试验进一步明确桑叶降血糖的作用机理。
1.2 降胆固醇
心脑血管疾病是严重威胁老年人身体健康的一类疾病,主要是体内胆固醇含量过高导致。胆固醇主要在肝脏中合成,受到多种酶的调控,如3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoA还原酶)是体内合成胆固醇的限速酶,当其活性较高时可促进胆固醇的合成,反之降低胆固醇的合成[17-19]。文晋等[20]将桑叶生物碱粗提液添加到胆固醇含量较高的小鼠饲料中,发现小鼠体内胆固醇含量明显降低,原因可能是桑叶生物碱粗提液抑制了HMG-CoA还原酶的活性,从而降低了胆固醇的合成速率,同时施秀等[21]在用桑叶生物碱粗提液灌胃高脂饮食金黄地鼠的实验中也得出类似结论。在目前研究中,桑叶降胆固醇的作用机理已基本明确,但要转化到实际应用中,还需将桑叶开发成易于老年人消化的食品,从而产生真正的经济效益。
1.3 抗衰老
衰老是一种复杂的生理过程,是机体随着年龄的增长而出现的各种生理器官和功能的退行性变化。衰老的原因一直是各方争论的焦点,随着现代医学和生物学的迅速发展,自由基学说成为最具可能型的机制之一:随着年龄的增大,生物体中清除自由基的抗氧化酶活性下降,自由基逐渐堆积从而加速衰老。因此,如何清除生物体内过量的自由基是抗氧化研究的切入点。黄酮类化合物能清除人体中超氧离子自由基,消除自由基毒性,是一类天然抗氧化剂[22],而桑叶中所含的黄酮类化合物在所有植物茎叶中较高,占桑叶干物质量的3%左右,是一种潜在的抗衰老成分。王灿等[23]认为桑叶可有效减缓人的神经细胞萎缩死亡,维持正常的思维能力和记忆力,原因可能是桑叶中的黄酮类物质能有效的阻碍超氧自由基的连锁反应,维持体内自由基含量的动态平衡,从而具有抗衰老的功效。同时,Wang等[24]也在研究中发现桑叶是具有保护神经的有益物质。目前桑叶抗衰老的报道较少,还存在巨大的研究潜力,因此,揭示桑叶抗衰老的具体作用机制将是今后的重点研究方向之一。
1.4 预防癌症
当前,越来越多的证据表明,肥胖会增加患癌症的风险[25]。脂肪组织具有内分泌作用,可以释放出多种生物活性物质例如PI3K/Akt/mTOR,这些物质可能参与了复杂的癌变过程,增加了患肝癌的概率。研究表明桑叶可通过调节肝脏脂质代谢,进而提高人体的抗氧化能力,降低肝癌的发生概率[26]。此外,有文献报道从桑叶黄酮中提取出的桑色素也具有防癌的作用,张齐[27]发现桑叶中的提取物桑色素能影响肿瘤细胞周期以及抑制DNA合成,进而抑制肝癌、宫颈癌、食管癌和胃癌等多种癌细胞的生长,降低癌症发生的概率。这与王春莉等[28]的研究结果有相似之处,王春莉等将桑叶制成桑叶银纳米粒后进行抗癌活性实验,结果发现桑叶银纳米粒对宫颈癌、肝癌细胞及乳腺癌细胞具有良好的增殖抑制作用,尤其是对乳腺癌细胞抑制效果显著。当前抑制癌细胞繁殖的方式还主要是通过服用药物,将桑叶提取物加工成功能性食品来抑制癌症的增殖、降低癌症的发生概率或许可为科研人员提供一种新思路。
1.5 通便利尿
现在生活节奏越来越快,极易产生便秘、排尿困难等症状,研究发现桑叶中含有不易被小肠吸收利用的糖类物质,当其进入大肠后,可使肠道内含水量增大,致使粪便软化,进而加速粪便排出。同样有文献报道桑叶中未被吸收的糖类进入大肠后,可与大肠内菌丛发生反应,产生二氧化碳和氢气,并生成丁酸、丙酸、乙酸等有机酸,能促进粪便的软化和利尿,进而可排出体内过多的水分并缓解浮肿,同时有机酸的生成使肠内环境呈现酸性,肠道内容物的酸度增大,能抑制有害细菌的增殖,起到调整肠道的作用[29]。林森等[30]将含有桑叶的饲料投喂给小鼠,发现小鼠排泄量明显增加,充分表明现桑叶在通便利尿方面有着重要作用。
1.6 抗炎
通常当细菌和真菌这些具有传染性的微生物以及病毒侵入人体,停留在特定组织中或在血液中循环时,就会发生炎症。炎症可能发生在诸如组织损伤、细胞死亡、肿瘤、局部缺血和变性等过程中[31]。自古以来,人们善于用植物或植物来源的制剂治疗炎症性及相关疾病,随着现代医药学的快速发展,桑叶的抗炎功效也逐渐被发现[32]。王祖文等[33]通过给小鼠灌胃桑叶生物碱后发现小鼠机体内的IL-6、TNF-α、COX-2炎症因子水平降低,胶原蛋白含量减少,病理切片同样观察到肝组织胶原纤维含量减少,推测桑叶生物碱可在小鼠体内发挥作用从而降低炎症水平。同样,黄思雨[34]通过体内评价和体外评价相结合的方法对桑叶的抗炎能力进行研究,结果显示,桑叶细粉可以降低溃疡性结肠炎小鼠促炎细胞细胞因子和肿瘤坏死因子的含量,同时降低MPO的活性,提高抑炎因子的含量,从而提升小鼠的抗炎能力。目前现有的报道中对桑叶的抗炎功效的研究还较少,成果不多,需加大对桑叶抗炎功效的理论研究并应用到实际生活中。
2. 桑叶在功能性食品中的应用
2.1 桑叶茶
经过采收、杀青、揉捻、干燥、包装、贮藏等流程制成的桑叶茶含有多种营养成分,主要有脂肪酸、有机酸、水溶性碳水化合物等,同时还含有20余种微量的挥发性成分,具有降血糖、降低人体胆固醇、降血压、抗氧化等防病保健的功效。桑叶茶又可细分为桑叶绿茶、桑叶红茶、桑叶乌龙茶等类型[35],也可与其他茶叶复合。吴劲轩等[36]将桑叶与普洱复合后加工成桑叶普洱茶,这种复合茶在口感上结合了桑叶茶和普洱茶的风味,形成了桑叶普洱茶特有的爽口清新的味道,由于这种复合茶中含有多种活性物质,其降血压、降血脂、延缓衰老等功效也逐渐被研究人员阐明。同样,这种由新鲜桑叶采用现代工艺制作而成的桑叶袋泡茶可使桑叶原本寒凉的本性得到较大改善,使鲜叶内的酶类催化基质发生生化转变,从而使得桑叶茶茶汤色正、口感醇厚,达到理想的桑叶茶口味。近几年,桑叶凭借其特有的清香气味以及本身具有的天然活性物质,在茶的研制和开发方面展现出了广阔的发展前景。
2.2 桑叶饮料
目前,桑叶与其他成分的混合使用是制备桑叶饮料的主要趋势,王蔚新等[37]将桑叶与金银花结合,制备出的新型饮料具有凉血、明目、清热解毒、利咽喉等功效,并且饮料中加入金银花,可以清除桑叶汁的苦味和生青味。刘万顺等[38]以桑叶、竹叶、石膏为原料制备出的新型饮料具有抗炎消毒、清热解毒的功效,并可辅助治疗牙痛、口臭、心烦等症。虽然桑叶饮料目前已有较大发展,但还停留在初级阶段,要使桑叶饮料保持较强的稳定性,应在加工时从避光、排氧、杀菌消毒等方面采取更为严格的工艺条件,这些工艺还需进一步的探索,以达到桑叶饮料最好的饮用效果。
2.3 桑叶挂面
挂面作为我国城镇居民尤其是北方人群的主要面食之一,具有需求量大、多样化、方便即食等特点。但目前市场上单纯用面粉进行加工,在口感、外观与营养上都无法满足现代人对生活品质的要求。当前,开发桑叶挂面已成为当今的研究热点之一。研究发现,桑叶具有多种矿物质元素、维生素、食物纤维、氨基酸等多种对人体有益的成分,是天然的绿色保健食品[39],将桑叶用作挂面原料,可以使得挂面具有桑叶特殊清香味和特殊的颜色,并有增强免疫力、降血糖、降胆固醇等功效,有益于人体健康。陶思洁[40]以桑叶为原料,以面粉、西兰花、圣女果、品质改良剂为辅料研制出的桑叶挂面呈现出漂亮的绿色、口感清爽滑口。杨海霞等[41]以桑叶为原料,以食盐、纯碱、海藻酸钠为辅料,研制出的桑叶挂面具有天然桑叶的清香味,无异味。现在桑叶挂面已成为其功能性食品的代表之一,适合大众消费,与传统工艺相比更受市场的欢迎。
3. 桑叶的发酵及应用
3.1 桑叶发酵后营养成分的变化
桑叶发酵是指通过桑叶经微生物生命活动后桑叶中的营养成分组成及含量改变的过程,经发酵后,大分子蛋白质被降解成小肽、可溶性蛋白质和游离氨基酸,其中非蛋白氮经微生物作用可转化为菌体蛋白,提高真蛋白含量,桑叶发酵后营养成分含量变化见表1。研究表明[42],枯草芽抱杆菌、植物乳酸杆菌和乳酸菌等生长过程中会产生淀粉酶、纤维素酶等酶类,对桑叶中的粗纤维以及抗营养因子进行降解,可以大量的消除抗营养因子,有利于动物对营养物质的吸收与利用。
表 1 桑叶发酵后营养成分含量变化Table 1. Changes of nutrient content of mulberry leaves after fermentation菌种 接种量
(%)接种比 营养成分含量的变化 参考文献 枯草芽孢杆菌、植物乳酸杆菌
Bacillus subtilis, Lactobacillus plantarum7 1:1 粗蛋白质含量增加了 23.26%,
单宁含量下降了 28.33%[43] 枯草芽孢杆菌、米曲霉、酿酒酵母、植物乳杆菌
Bacillus subtilis, Aspergillus oryzae,
Saccharomyces cerevisiae, Lactobacillus plantarum5 1:1:1:1 可溶性蛋白质含量提高了176.52% [44] 枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌
Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis5 1:4 粗纤维下降12.69%,
粗蛋白含量增加7.24%[45] 康宁木霉、产月元假丝酵母
Trichoderma koningii, Candida utilis5 1:1 粗蛋白质含量增加了31.27%,
粗脂肪含量增加了5.71%,
粗纤维含量降低了12.71%[46] 蜡状芽抱杆菌、植物乳杆菌、产月元假丝酵母、康宁木霉
Bacillus cereus, Lactobacillus plantarum,
Candida utilis, Trichoderma koningii5 2:1 粗蛋白质含量增加了4.95%,
粗纤维含量降低了 2.29%[47] 乳酸菌
Lactobacillus5 1:1 粗蛋白质含量增加了8.82%,
中性洗涤纤维含量降低了 13.91%[48] 3.2 发酵桑叶在食品中的应用
目前发酵桑叶在食品中的应用主要是发酵桑叶茶的研制,陈永丽等[49]对比了米曲霉、毛霉等不同菌种对桑叶进行发酵后研制成的发酵桑叶茶,结果发现由米曲霉研制成的发酵桑叶茶的水浸出物含量、感官评分和游离氨基酸含量均为最佳,究其原因可能是米曲霉分泌蛋白酶、纤维素酶等的能力更强,有利于可溶性物质的生成和美拉德反应,从而改善茶汤的滋味和色泽。同时,肖洪等[50]探究了不同的发酵条件对发酵桑叶茶生物活性成分含量的影响,得出了最有利发酵桑叶茶功能性质的发酵条件,但在该实验中接入菌种时是在自然状态下进行的,不能完全排除细菌等条件对发酵桑叶茶的影响,这是本实验的一个不足。从现有的文献中可以看出发酵桑叶在食品领域中的应用还较少,因此,如何将发酵桑叶更为广泛的应用到食品中应当是今后的一个热点问题。
3.3 发酵桑叶在动物生产中的应用
3.3.1 发酵桑叶在养猪生产中的应用
由于桑叶中含有丰富的营养物质以及黄酮类等多种活性成分,因而在动物饲料中添加适量的桑叶,有利于动物机体健康。张振祥等[51]发现,在20日龄断奶仔猪的日粮中添加发酵桑叶,可加强仔猪在生长初期对疾病的抵抗力。这与林标声等[52]的研究结果相似,林标声实验发现在仔猪日粮中添加桑叶发酵制剂可有效治疗宰猪腹泻问题,此外,杨刚[53]和李婉涛等[54]均证实了在饲料中添加适量桑叶可提高猪的肌内脂肪含量并改善其嫩度,但肌内脂肪含量与桑叶的添加量是否成正比还有待研究[55]。
3.3.2 发酵桑叶在肉鸡生产上的应用
桑叶中含有的多酚、多糖和生物碱等活性物质在提高肉鸡的生长性能和免疫力等方面发挥着重要作用。黄静等[56]将发酵桑叶添加到肉鸡饲料中后,发现肉鸡的生长性能明显得到改善。但也有研究表明,桑叶作为一种植物蛋白饲料在家禽饲粮中的添加比例不宜超过4%,添加5%以上的桑叶粉明显降低肉鸡的生长性能[57-60]。此外,发酵桑叶粉可促进肉鸡肠道发育,张金龙等[61]发现基础饲粮中添加的发酵桑叶粉能够显著提高罗斯308肉鸡母雏肉鸡采食量及体增重,但对料重比无显著影响,并且饲喂肉鸡42 d后发现十二指肠长度及空肠、回肠绒毛高,证明了发酵桑叶粉对肉鸡肠道的发育有积极作用。
3.3.3 发酵桑叶在水产养殖上的应用
鱼粉因具有高蛋白质、丰富氨基酸含量的特点,被广泛应用在水产饲料中。近年来随着养殖规模的不断扩大,鱼粉的价格不断上涨,寻找新的饲料蛋白质来源已经成为国内外研究热点。由于发酵桑叶粉粗蛋白质消化吸收率高、氨基酸组成丰富、价格较低等特点[62],所以在水产养殖中的应用潜力巨大。陈文燕等[63]研究了不同比例发酵桑叶粉替代鱼粉在罗非鱼生产上的应用,试验表明,在饲粮(5%鱼粉)中,发酵桑叶替代40%鱼粉对罗非鱼的生长性能无显著差异,当替代量高于40%时,不利于罗非鱼的生长。徐韬等[64]的实验表明添加高剂量发酵桑叶粉会显著降低大口黑饷终末体重和特定生长率,此外,饲喂添加高剂量发酵桑叶粉可以改善大口黑饷脂质代谢和增强机体的抗氧化能力,但发酵桑叶能否完全替代鱼粉,还需在实际生产应用中进行探索[65-66]。与此同时,近年来随着杂交鲤养殖技术的逐渐进步,人们也越来越重视杂交鲤的生长性能。李法见等[67]通过试验证明了桑叶可有效调节鱼体的脂质代谢。高胜男等[68]的研究发现饲料添加低水平发酵桑叶显著增加杂交鳢末重,并且适宜水平的发酵桑叶能够促进鱼体增重。桑叶发酵后,可以改善适口性,提高蛋白质的利用率,这就是低水平发酵桑叶能够提高鱼体增重的原因。同时,在试验中还发现随着发酵桑叶水平的增加,杂交鳢血清总胆固醇、甘油三酯及血液葡萄糖含量呈下降趋势,但发酵桑叶的最适添加量还有待进一步研究。
4. 展望
中国是桑的故乡,目前桑树的种植面积约为66.7万 hm2,每年生产超过1500万 t桑叶,资源十分丰富[61]。近年来,随着科研人员对桑叶研究的不断深入,其降血糖、降胆固醇、通便利尿等功效的作用机理逐渐被阐明,同时,桑叶茶、桑叶饮料、桑叶挂面等产品的研制为桑叶的综合利用提供了新思路。当前,桑叶发酵后得到的物质引起了研究人员的关注,并已在养猪、肉鸡生产、水产养殖中得到了应用,但发酵桑叶在食品中的应用还较少,同时其在动物体内的具体作用机理还未明确,今后应加大对发酵桑叶的研究,使其在食品领域得到更为广泛的应用并能开发出能改善动物身体性能的饲料。除此之外,桑叶的抗衰老及防癌的功效应得到研究人员足够的重视,开发适合老年人饮食的保健食品应是今后科研人员的另一个研究方向。综上所述,实现桑叶的资源高效利用产业化,开展其资源高值化加工共性关键技术创新与产品开发以增加其利用价值和经济效益,是实现桑叶综合利用的必由之路。
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表 1 桑叶发酵后营养成分含量变化
Table 1 Changes of nutrient content of mulberry leaves after fermentation
菌种 接种量
(%)接种比 营养成分含量的变化 参考文献 枯草芽孢杆菌、植物乳酸杆菌
Bacillus subtilis, Lactobacillus plantarum7 1:1 粗蛋白质含量增加了 23.26%,
单宁含量下降了 28.33%[43] 枯草芽孢杆菌、米曲霉、酿酒酵母、植物乳杆菌
Bacillus subtilis, Aspergillus oryzae,
Saccharomyces cerevisiae, Lactobacillus plantarum5 1:1:1:1 可溶性蛋白质含量提高了176.52% [44] 枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌
Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis5 1:4 粗纤维下降12.69%,
粗蛋白含量增加7.24%[45] 康宁木霉、产月元假丝酵母
Trichoderma koningii, Candida utilis5 1:1 粗蛋白质含量增加了31.27%,
粗脂肪含量增加了5.71%,
粗纤维含量降低了12.71%[46] 蜡状芽抱杆菌、植物乳杆菌、产月元假丝酵母、康宁木霉
Bacillus cereus, Lactobacillus plantarum,
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粗纤维含量降低了 2.29%[47] 乳酸菌
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中性洗涤纤维含量降低了 13.91%[48] -
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