Effect of Storage Time on Functional Ingredient and Antioxidant Activity of Ya’an Tibetan Tea
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摘要: 为研究贮藏过程中雅安藏茶中茶色素、多酚及其抗氧化活性的变化情况，对不同贮藏时间藏茶中茶色素、总多酚、总黄酮及其抗氧化活性进行比较。结果表明，随着贮藏时间从4年递增到10年的过程中，藏茶中茶褐素含量从5.95 g/100 g显著提升到8.54 g/100 g（P<0.05），而茶黄素、茶红素、总多酚、总黄酮、咖啡碱、儿茶素以及儿茶素单体（EGC、CG、ECG、EGCG、EC）含量显著降低（P<0.05）。此外，藏茶ABTS自由基清除能力从6759.54 µg/g显著减弱到4086.43 µg/g（P<0.05），而DPPH自由基清除能力同样从43.50 µg/g显著减弱到 21.02 µg/g（P<0.05），且与总多酚、总黄酮、儿茶素、咖啡碱、EGC、EC、EGCG、ECG、茶红素、茶黄素呈显著正相关（P<0.05）。而茶褐素与总多酚、总黄酮、儿茶素、咖啡碱、CG、EGC、EC、EGCG、ECG、茶黄素以及茶红素呈现显著负相关（P<0.05）。贮藏时间越长，藏茶中多酚类物质降低而茶褐素含量越高，使得陈化藏茶具有降脂减肥等保健功效。Abstract: In order to explore the effect of storage time on the tea pigment, polyphenols and antioxidant activity in Ya'an Tibetan tea, the tea pigment, total phenolic content, total flavonoids content and antioxidant activities (ABTS free radical scavenging capacity and DPPH free radical scavenging capacity) in Ya'an Tibetan tea at different storage time were compared. The results showed that the content of theabrownin (TBs) in Tibetan tea was significantly improved from 5.95 g/100 g to 8.54 g/100 g (P<0.05) with the increasing of storage time from four years to ten years, while the content of theaflavin (TFs), thearubigin (TRs), total phenolic content, total flavonoids content, caffeine, catechin and catechin monomeric ((−)-epigallocatechin (EGC), catechin gallate (CG), (−)-Epicatechin gallate (ECG), Epigallocatechin gallate (EGCG), L-Epicatechin (EC)) decreased significantly (P<0.05). Apart from this, ABTS free radical scavenging capacity significantly reduced from 6759.54 µg/g to 4086.43 µg/g (P<0.05), and DPPH free radical scavenging capacity also significantly reduced from 43.50 µg/g to 21.02 µg/g (P<0.05) in Ya'an Tibetan tea, and they were significantly (P<0.05) positively correlated with total phenolic content, total flavonoids content, catechin, caffeine, EGC, EC, EGCG, ECG, TBs, TFs and TRs. However, TBs was negatively correlated with total phenolic content, total flavonoids content, catechin, caffeine, CG, EGC, EC, EGCG, ECG, TFs and TRs (P <0.05). Considering comprehensively, when the storage time is longer, the content of TBs is higher while the content of polyphenols is lower, which makes the aging Tibetan tea also have good health care effect.
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Keywords:
- Ya’an Tibetan tea /
- storage time /
- tea pigment /
- polyphenol /
- antioxidant activity
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雅安藏茶作为典型的黑茶产品，距今已有1300多年的历史，被誉为藏族同胞的民生之茶[1]。藏茶属后发酵茶，是以一芽五叶以内的茶树新梢为原料，经过杀青、揉捻、渥堆、干燥等工序制成，在渥堆过程中多酚类化合物有大幅度的变化，以茶多酚为主的内含成分发生氧化缩合，生成更复杂的化合物如茶褐素等产物，对藏茶的品质具有重要作用[2-3]。基于藏茶中多种活性成分，研究发现藏茶具有减肥降脂、抗氧化、助消化和调理肠胃、降血糖、降尿酸等生理功能[3-4]。
由于黑茶具有耐贮藏性，其陈放过程中将继续发生以多酚类为主的一系列生化反应，从而形成陈茶的风味品质。段红星等[5]发现普洱茶随存放时间的延长，茶多酚、氨基酸和咖啡碱呈减少趋势。张春泉[6]发现安茶中儿茶素与茶黄素含量随着贮存时间延长呈现降低趋势。目前陈茶逐渐受到市场的追捧，年份较久的陈茶价格越高[7-8]。贮藏时间对雅安藏茶品质的影响十分重要。到目前为止，贮藏时间对藏茶中主要活性成分影响尚未有系统全面的解释，仅有学者对不同贮藏时间下藏茶滋味和风味成分的变化做了相关研究，发现贮藏时间越长，酯类、烯烃类及芳香类物质的含量越高[9]。
基于此，本文选取了同一厂家、不同贮藏时间的雅安藏茶，对其茶色素、总多酚、总黄酮及其抗氧化活性变化情况进行比较，以期为藏茶后期贮藏及消费提供理论参考。
1. 材料与方法
1.1 材料与仪器
藏茶样品 供试藏茶共计3个（Z1-Z3），均购自于雅州恒泰茶业有限公司，常温密封保存于湿度45%~60%的仓库中，茶箱离地离墙15 cm，样品信息如表1所示，茶叶样品经粉碎、过40目筛，得到样品粉末后密封−18 ℃保存备用；福林酚、乙醇、甲醇、盐酸、氯化钾、硝酸铝、氢氧化钠、无水乙醇、亚硝酸钠 分析纯，成都市科龙化工试剂厂；标准品：没食子酸（GA）、表没食子儿茶素（EGC）、儿茶素（C）、咖啡碱（CA）、表儿茶素（EC）、儿茶素没食子酸酯（CG）、没食子酸儿茶素没食子酸酯（GCG）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG） （纯度≥98%），北京索莱宝科技有限公司；其他试剂 均为国产分析纯。
表 1 供试样品来源信息Table 1. Sample source information编号 品种 生产日期 来源 Z1 金花藏茶 2010.09.13 雅州恒泰茶业有限公司 Z2 金花藏茶 2013.05.19 雅州恒泰茶业有限公司 Z3 金花藏茶 2016.08.19 雅州恒泰茶业有限公司 SHA-B型恒温振荡器 常州金南仪器制造有限公司；TD-4Z型台式低速离心机 四川蜀科仪器有限公司；Synergy HTX型酶标仪 美国伯腾仪器有限公司；KQ-250DB型数控超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司；Gentrifuge 5180R型冷冻干燥机 德国Eppendorf公司；UV-6100型紫外分光光度计 上海元析仪器有限公司；1260型高效液相色谱仪、DAD检测器 美国Agilent公司。
1.2 实验方法
1.2.1 茶叶提取液制备
参照Feng等[10]的方法略做修改，称取1 g茶叶粉，加入8 mL 80%甲醇（含1%甲酸）40 ℃超声提取30 min，8000 r/min离心15 min，将上清液倒出备用，残渣重复上述方法提取2次，合并3次提取液并定容至25 mL，即为茶叶提取液。
1.2.2 茶色素提取及测定
参照Huang等[11]的方法略作修改。准确称取3 g（以干基计）茶粉于125 mL沸水中提取10 min。将50 mL水提物用50 mL乙酸乙酯进行萃取并振荡5 min，得到4 mL乙酸乙酯层，用13 mL 95%乙醇定容至25 mL，得到溶液A（EA）。向25 mL乙酸乙酯层中加入25 mL 2.5% NaHCO3后振荡30 s，静止分层后，将4 mL乙酸乙酯层用95%乙醇定容至25 mL，得到溶液C（EC）。向2 mL水层中加入2 mL饱和草酸溶液和6 mL超纯水，用95%乙醇（15 mL）定容至25 mL，得到溶液D（ED）。25 mL水提物用25 mL 2.5%NaHCO3振荡3 min，2 mL水相加入2 mL饱和草酸溶液和6 mL超纯水，用15 mL 95%乙醇定容，得到溶液B（EB）。以上溶液（EA、EB、EC、ED）在380 nm下测量吸光度，并以95%乙醇作为空白对照。
(1) (2) (3) 式中：EA、EB、EC、ED为在380 nm下测量吸光度值；TFs，茶黄素，g/100 g；TBs，茶褐素，g/100 g；TRs，茶红素，g/100 g。
1.2.3 总多酚测定
参照Zhang等[12]方法略做修改，取20 μL茶叶提取液，向其加入20 μL福林酚试剂，混合均匀后静置5 min，随后加入160 μL质量分数为5% Na2CO3溶液，室温下避光反应60 min后，在765 nm下测定混合液吸光值。以没食子酸溶液质量浓度（μg/mL）为横坐标（x），吸光值为纵坐标（y），绘制标准曲线。没食子酸线性回归方程为：y=0.0058x+0.027，R2=0.999，线性范围2~175 μg/mL。
1.2.4 总黄酮测定
参照罗磊等[13]的方法略做修改，取20 μL茶叶提取液，加入80 μL蒸馏水和10 μL 25%（m/v）NaNO2反应6 min，随后加入10 μL 10% AlCl3∙6H2O反应5 min后，加入30 μL 1 mol/L NaOH和100 μL蒸馏水，于510 nm波长处测定吸光值。以儿茶素溶液浓度（μg/mL）为横坐标（x），吸光值为纵坐标（y），绘制标准曲线。儿茶素线性回归方程为：y=1.1832x+0.059，R2=0.994，线性范围0~200 μg/mL。
1.2.5 抗氧化活性测定
1.2.5.1 ABTS自由基清除能力测定
参照Cheng等[14]方法略做修改。取20 µL茶叶提取液，加入20 µL蒸馏水和160 µL ABTS溶液，混匀避光反应6 min，于734 nm处测定吸光值。以水溶性VE的质量浓度为横坐标（x），清除率为纵坐标（y），制作标准曲线，得到回归方程：y=12.895x+0.0363，R2=0.998，线性范围为0.0~19.5 µg/mL。以Trolox当量计算，测定结果以µg/g表示。
1.2.5.2 DPPH自由基清除能力测定
参照Tao等[15]方法略作修改。取40 µL 茶叶提取液，加90 µL 80%甲醇（含1%甲酸），再加入100 µL 0.2 mmol/L DPPH溶液混匀，避光反应30 min，于517 nm处测定吸光值。以质量浓度为横坐标（x），清除率为纵坐标（y），制作标准曲线，得到回归方程：y=0.9472x−2.95，R2=0.996，线性范围为5.94~95.00 µg/mL。以Trolox当量计算，测定结果以µg/g表示。
1.2.6 多酚类化合物测定
茶叶提取液中多酚类化合物分析测定采用高效液相色谱法，参照邓俊琳等[16]的方法稍作修改。将茶叶提取液经0.22 µm微孔滤膜过滤后进样分析。色谱柱：Eclipse Plus C18柱（2.1 mm×50 mm，1.8 μm）；DAD检测器；检测波长：280 nm；柱温：30 ℃；流量：0.3 mL/min；进样量1 μL；流动相：1%甲酸-水溶液（A），乙腈（B），洗脱条件：0～2 min，B：5%～10%；2～10 min，B：10%～20%，10～15 min，B：20%～40%；15～17 min，B：40%～70%；17～20 min，B：70%～95%。
标准品溶液的制备：分别取9个标准品20 mg，用甲醇溶解并定容至5 mL作为标准品母液。以二倍稀释法用甲醇将各标准品母液配制成一系列浓度梯度的标准品溶液，高效液相色谱待测。以质量浓度（µg/mL）为横坐标（x），峰面积为纵坐标（y），绘制标准曲线，得线性方程如表2所示。
表 2 多酚单体的标准曲线Table 2. The standard curve of polyphenol monomers多酚单体 线性回归方程 R2 线性范围（µg/mL） GA y=5.5752x−12.024 0.9996 1.72~440 EGC y=0.3229x+0.2376 1 15.68~784 C y=1.0759x+0.0043 1 7.84~784 CA y=5.0107x−28.005 1 4.9~784 EC y=1.5819x−6.4182 0.9993 6.8~435.55 EGCG y=2.8877x−15.209 0.9992 6.8~435.5 GCG y=2.9525x−15.285 0.9992 6.8~435.55 ECG y=3.483x−15.813 0.9993 6.8~435.55 CG y=3.266x−9.2289 0.9994 6.805~217.77 样品中多酚单体的含量计算公式如下：多酚单体含量（µg/g）=待测液中多酚单体浓度×稀释倍数×样品定容体积/提取质量。
1.3 数据处理
结果用平均值±标准差表示（n=3），采用SPSS17.0软件进行数据分析，通过单因素方差分析（ANOVA）和Duncan多重比较方法进行显著性分析，P<0.05表示差异具有显著性。
2. 结果与分析
2.1 茶色素含量比较
茶色素是发酵过程中茶多酚氧化的主要产物，包括茶褐素类、茶黄素类和茶红素类，其中茶褐素类是其主体成分。茶色素对汤色、滋味以及功能性质有重要的影响。目前对于茶色素的研究多集中在普洱茶和红茶方面[11,17-18]，而对藏茶中茶色素的研究较少。不同贮藏时间下藏茶中茶色素含量变化情况见表3。随着贮藏时间的延长，茶褐素含量持续显著增加（P<0.05），而茶黄素含量持续显著减少（P<0.05），贮藏10年后的藏茶中茶红素开始显著减少（P<0.05），这与甘甜等[9]的研究结果相一致。这可能由于后期贮藏过程中仍有部分多酚类物质、茶黄素和茶红素等进一步氧化聚合成茶褐素，使其进一步积累[19-20]。而茶黄素作为氧化聚合过程中的中间产物，一方面通过茶黄素氧化聚合进一步累积，另一方面茶红素又将继续被氧化聚合而减少[21]。因此，雅安藏茶在贮藏过程中，茶色素变化的总趋势是茶黄素和茶红素显著下降，茶褐素大量积累。张春泉[6]同样发现安茶在陈化过程中随着时间的延长，茶褐素含量呈显著的上升趋势。目前研究发现茶褐素能降低肝脏脂肪酸合酶的活性，抑制肝脏合成脂肪，促进体内甘油三酯的降解[4]，因此陈化时间延长利于藏茶中茶褐素进一步积累，增强藏茶保健功能。
表 3 不同贮藏时间藏茶中茶色素含量变化Table 3. Changes of pigment content in Tibetan tea during different storage time编号 茶黄素（TFs, g/100 g） 茶红素（TRs, g/100 g） 茶褐素（TBs, g/100 g） Z1 0.07±0.01c 1.32±0.04b 8.54±0.12a Z2 0.12±0.01b 3.06±0.13a 7.11±0.09b Z3 0.15±0.01a 3.31±0.08a 5.95±0.10c 注：同列不同小写字母代表差异显著，P<0.05；表4同。 2.2 总多酚、总黄酮及抗氧化活性比较
不同贮藏时间藏茶中总多酚、总黄酮及抗氧化活性的结果见表4。随着贮藏时间延长，藏茶中总多酚和总黄酮显著降低（P<0.05）。其含量显著降低可能有以下几个方面原因：其一，酚类物质性质极其活泼，贮藏过程极易发生氧化作用，从而继续氧化聚合生成新的化学物质；其二，贮藏过程在微生物作用下产生各种酸性物质，使儿茶素等被降解；其三，酚类物质被在酶的作用下被降解为可被微生物利用的碳源[22]。薛晨[23]对不同贮藏时间普洱茶中主要化学成分研究表明，随贮藏时间的延长，茶叶中的多酚类自动氧化加深，多酚类含量降低。而张春泉[6]研究发现不同年代的安茶中总多酚含量并无显著差异，这可能与安茶中的茶多酚类物质相互转化有关。藏茶中多酚类化合物使其表现出生物活性，本实验通过对DPPH自由基和ABTS自由基清除能力来评价不同贮藏时间下藏茶的抗氧化性，结果显示DPPH 试验和ABTS 试验的结果较一致，同时研究发现随着贮藏时间的延长，DPPH自由基清除能力显著减弱（P<0.05），而贮藏10年后ABTS自由基清除能力也显著减弱（P<0.05），本实验中抗氧化活性随着贮藏时间的变化趋势与总多酚和总黄酮的变化趋势也基本一致，这表明醇提液的抗氧化活性与总多酚和总黄酮含量有密切关联。
表 4 不同贮藏时间藏茶中总多酚、总黄酮及抗氧化活性变化Table 4. Changes of total polyphenols, total flavones and antioxidant activity in Tibetan tea during different storage time编号 总多酚（mg/g） 总黄酮（mg/g） ABTS（µg/g） DPPH（µg/g） Z1 18.63±0.39c 15.00±0.43c 4086.43±553.86b 21.02±3.09c Z2 30.31±1.22b 18.33±0.52b 6185.20±60.67a 35.50±2.82b Z3 35.63±1.50a 20.75±0.25a 6759.54±476.61a 43.50±0.35a 2.3 多酚类化合物含量比较
多酚类化合物是藏茶品质的重要活性成分，其含量变化对品质的形成具有十分重要的作用。其中C和GA是茶叶中多酚类物质的重要成分，C是茶多酚的主体成分，其含量与茶叶品质有密切关系[24]。GA是茶多酚的重要组成单元，常与儿茶素的酚羟基以酯的形式连接，形成一系列酯型儿茶素衍生物[25]。而咖啡碱是茶叶苦味的主要呈味物质[26]。不同贮藏时间下藏茶中多酚类化合物含量变化见表5，随着贮藏时间的延长，藏茶中C和儿茶素单体（EGC、CG、ECG、EGCG、EC）含量显著降低而GA含量显著增加（P<0.05）。这可能由于藏茶在长期存放过程中，多酚类化合物发生氧化聚合形成茶黄素和茶红素等成分，同时使得GA发生脱落导致其含量显著增加[22]。越陈的藏茶中CA含量虽越低（ P<0.05），但变化幅度较小，这可能与咖啡碱性质稳定、自身不容易降解和氧化有关。刘泽森等[27]同样发现不同年份的六堡茶中咖啡碱含量变化无明显趋势。
表 5 不同贮藏时间藏茶中多酚类化合物含量变化Table 5. Changes of polyphenols in Tibetan tea during different storage time多酚类化合物 Z1 Z2 Z3 没食子酸（GA, mg/g） 3.50±0.01a 1.83±0.01b 1.57±0.00c 表没食子儿茶素（EGC, mg/g） − 0.37±0.00b 0.97±0.00a 儿茶素（C, mg/g） − 0.33±0.00a 0.31±0.00a 咖啡碱（CA, mg/g） 11.06±0.01b 14.90±0.03a 14.94±0.02a 表儿茶素（EC, mg/g） − 0.26±0.00b 0.47±0.00a 表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG, mg/g） 0.24±0.00c 0.71±0.00b 1.55±0.00a 没食子酸儿茶素没食子酸酯（GCG, mg/g） 0.27±0.00b 0.20±0.00c 0.53±0.00a 表儿茶素没食子酸酯（ECG, mg/g） 0.08±0.00c 0.48±0.00b 0.56±0.00a 儿茶素没食子酸酯（CG, mg/g） 0.14±0.00c 0.17±0.01b 0.38±0.00a 注：同行不同小写字母代表不同贮藏时间藏茶中多酚类化合物含量的差异显著，P<0.05；−：未检测到。 2.4 相关性分析
2.4.1 多酚类化合物之间相关性分析
通过对不同贮藏时间藏茶中多酚类化合物的相关性分析发现，TBs与总多酚、总黄酮、C、CA、CG呈现显著负相关（P<0.05），与EGC、EC、EGCG、ECG、TFs以及TRs呈现极显著负相关（P<0.01）。研究表明TBs是多酚类物质转化的主要产物，主要由儿茶素在多酚氧化酶等酶作用下氧化形成邻醌，进一步经过氧化缩聚形成TFs和TRs，再进一步氧化聚合形成TBs[28]。这与凌萌乐等[29]发现普洱茶中茶褐素含量与茶多酚和儿茶素含量呈极显著负相关结论相一致。
2.4.2 多酚类化合物与抗氧化活性相关性分析
由表6可知，通过对多酚类化合物与抗氧化活性等相关指标进行相关性分析可证实ABTS自由基清除能力与藏茶中总多酚、总黄酮呈现极显著正相关（P<0.01），与EGC、C、CA、EC、EGCG、ECG、TFs、TRs呈显著正相关（P<0.05），与DPPH自由基清除能力也具有极显著正相关（P<0.01）（见表6）。此外，向丽敏等[22]研究发现对茶叶抗氧化活性影响最大的是总多酚含量，接下来依次为总黄酮含量、茶黄素、茶红素、茶褐素。
表 6 藏茶中总多酚、总黄酮、多酚化合物、茶色素和抗氧化活性的相关性分析Table 6. Correlation analysis of total polyphenols, total flavones, polyphenol compounds, tea pigments and antioxidant activities in Tibetan tea指标 总多酚 总黄酮 GA EGC C CA EC EGCG GCG ECG CG TFs TRs TBs ABTS DPPH 总多酚 1 0.983** −0.756 0.803 0.687 0.708 0.802 0.800 0.600 0.757 0.718 0.761 0.710 −0.832* 0.955** 0.972** 总黄酮 1 −0.780 0.786 0.721 0.739 0.801 0.779 0.545 0.777 0.681 0.756 0.730 −0.838* 0.948** 0.970** GA 1 -.859* −0.984** −0.993** −0.947** −0.844* −0.429 −0.999** −0.674 −0.955** −0.997** 0.941** −0.870* −0.888* EGC 1 0.756 0.795 0.978** 1.000** 0.831* 0.881* 0.957** 0.950** 0.852* −0.978** 0.837* 0.945** C 1 0.998** 0.876* 0.737 0.264 0.976** 0.535 0.897* 0.984** −0.868* 0.820* 0.810 CA 1 0.904* 0.777 0.323 0.987** 0.586 0.921** 0.992** −0.896* 0.837* 0.837* EC 1 0.972** 0.697 0.960** 0.876* 0.987** 0.942** −0.997** 0.872* 0.950** EGCG 1 0.846* 0.867* 0.965** 0.943** 0.837* −0.972** 0.828* 0.940** GCG 1 0.468 0.956** 0.638 0.420 −0.704 0.537 0.704 ECG 1 0.707 0.967** 0.997** −0.954** 0.867* 0.897* CG 1 0.833* 0.668 −0.879* 0.708 0.854* TFs 1 0.955** −0.979** 0.818* 0.915* TRs 1 −0.931** 0.835* 0.862* TBs 1 −0.898* −0.965** ABTS 1 0.950** DPPH 1 注：**表示相关性极显著（P<0.01）；*表示相关性显著（P<0.05）。 3. 结论
本文通过对不同贮藏时间藏茶中茶色素、总多酚、总黄酮、多酚类化合物以及抗氧化活性的分析比较，发现不同年份的藏茶中主要活性成分含量、抗氧化能力相差较大，其中陈化时间越久，藏茶中总多酚、总黄酮以及儿茶素类化合物含量越低，而茶褐素含量越高。本实验仅对三个贮藏时间段藏茶进行分析比较，未来可进一步延长贮藏时间，更加全面对陈化藏茶活性成分及抗氧化活性进行比较研究，以期为陈年藏茶的进一步开发和利用提供理论依据。
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表 1 供试样品来源信息
Table 1 Sample source information
编号 品种 生产日期 来源 Z1 金花藏茶 2010.09.13 雅州恒泰茶业有限公司 Z2 金花藏茶 2013.05.19 雅州恒泰茶业有限公司 Z3 金花藏茶 2016.08.19 雅州恒泰茶业有限公司 
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表 2 多酚单体的标准曲线
Table 2 The standard curve of polyphenol monomers
多酚单体 线性回归方程 R2 线性范围（µg/mL） GA y=5.5752x−12.024 0.9996 1.72~440 EGC y=0.3229x+0.2376 1 15.68~784 C y=1.0759x+0.0043 1 7.84~784 CA y=5.0107x−28.005 1 4.9~784 EC y=1.5819x−6.4182 0.9993 6.8~435.55 EGCG y=2.8877x−15.209 0.9992 6.8~435.5 GCG y=2.9525x−15.285 0.9992 6.8~435.55 ECG y=3.483x−15.813 0.9993 6.8~435.55 CG y=3.266x−9.2289 0.9994 6.805~217.77
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表 3 不同贮藏时间藏茶中茶色素含量变化
Table 3 Changes of pigment content in Tibetan tea during different storage time
编号 茶黄素（TFs, g/100 g） 茶红素（TRs, g/100 g） 茶褐素（TBs, g/100 g） Z1 0.07±0.01c 1.32±0.04b 8.54±0.12a Z2 0.12±0.01b 3.06±0.13a 7.11±0.09b Z3 0.15±0.01a 3.31±0.08a 5.95±0.10c 注：同列不同小写字母代表差异显著，P<0.05；表4同。
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表 4 不同贮藏时间藏茶中总多酚、总黄酮及抗氧化活性变化
Table 4 Changes of total polyphenols, total flavones and antioxidant activity in Tibetan tea during different storage time
编号 总多酚（mg/g） 总黄酮（mg/g） ABTS（µg/g） DPPH（µg/g） Z1 18.63±0.39c 15.00±0.43c 4086.43±553.86b 21.02±3.09c Z2 30.31±1.22b 18.33±0.52b 6185.20±60.67a 35.50±2.82b Z3 35.63±1.50a 20.75±0.25a 6759.54±476.61a 43.50±0.35a
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表 5 不同贮藏时间藏茶中多酚类化合物含量变化
Table 5 Changes of polyphenols in Tibetan tea during different storage time
多酚类化合物 Z1 Z2 Z3 没食子酸（GA, mg/g） 3.50±0.01a 1.83±0.01b 1.57±0.00c 表没食子儿茶素（EGC, mg/g） − 0.37±0.00b 0.97±0.00a 儿茶素（C, mg/g） − 0.33±0.00a 0.31±0.00a 咖啡碱（CA, mg/g） 11.06±0.01b 14.90±0.03a 14.94±0.02a 表儿茶素（EC, mg/g） − 0.26±0.00b 0.47±0.00a 表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG, mg/g） 0.24±0.00c 0.71±0.00b 1.55±0.00a 没食子酸儿茶素没食子酸酯（GCG, mg/g） 0.27±0.00b 0.20±0.00c 0.53±0.00a 表儿茶素没食子酸酯（ECG, mg/g） 0.08±0.00c 0.48±0.00b 0.56±0.00a 儿茶素没食子酸酯（CG, mg/g） 0.14±0.00c 0.17±0.01b 0.38±0.00a 注：同行不同小写字母代表不同贮藏时间藏茶中多酚类化合物含量的差异显著，P<0.05；−：未检测到。
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表 6 藏茶中总多酚、总黄酮、多酚化合物、茶色素和抗氧化活性的相关性分析
Table 6 Correlation analysis of total polyphenols, total flavones, polyphenol compounds, tea pigments and antioxidant activities in Tibetan tea
指标 总多酚 总黄酮 GA EGC C CA EC EGCG GCG ECG CG TFs TRs TBs ABTS DPPH 总多酚 1 0.983** −0.756 0.803 0.687 0.708 0.802 0.800 0.600 0.757 0.718 0.761 0.710 −0.832* 0.955** 0.972** 总黄酮 1 −0.780 0.786 0.721 0.739 0.801 0.779 0.545 0.777 0.681 0.756 0.730 −0.838* 0.948** 0.970** GA 1 -.859* −0.984** −0.993** −0.947** −0.844* −0.429 −0.999** −0.674 −0.955** −0.997** 0.941** −0.870* −0.888* EGC 1 0.756 0.795 0.978** 1.000** 0.831* 0.881* 0.957** 0.950** 0.852* −0.978** 0.837* 0.945** C 1 0.998** 0.876* 0.737 0.264 0.976** 0.535 0.897* 0.984** −0.868* 0.820* 0.810 CA 1 0.904* 0.777 0.323 0.987** 0.586 0.921** 0.992** −0.896* 0.837* 0.837* EC 1 0.972** 0.697 0.960** 0.876* 0.987** 0.942** −0.997** 0.872* 0.950** EGCG 1 0.846* 0.867* 0.965** 0.943** 0.837* −0.972** 0.828* 0.940** GCG 1 0.468 0.956** 0.638 0.420 −0.704 0.537 0.704 ECG 1 0.707 0.967** 0.997** −0.954** 0.867* 0.897* CG 1 0.833* 0.668 −0.879* 0.708 0.854* TFs 1 0.955** −0.979** 0.818* 0.915* TRs 1 −0.931** 0.835* 0.862* TBs 1 −0.898* −0.965** ABTS 1 0.950** DPPH 1 注：**表示相关性极显著（P<0.01）；*表示相关性显著（P<0.05）。
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