酶法制备大豆肽的相对分子量分布及降压作用研究

王升光; 于帅; 孟凡刚; 李秉润; 宋晓光; 刘国飞; 王广录; 代龙; 高鹏

doi:10.13386/j.issn1002-0306.2018.01.009

酶法制备大豆肽的相对分子量分布及降压作用研究

1. 山东中医药大学, 山东济南 250355;
2. 安徽生物肽产业研究院有限公司, 安徽芜湖 241000;
3. 青岛大学附属医院, 山东青岛 266000

基金项目:

国家自然科学基金(81073031)。

详细信息

作者简介:
王升光(1988-),男,硕士研究生,主要从事中药新制剂、新剂型方面的研究,E-mail:wsg3815@163.com。

通讯作者:
高鹏(1978-),男,博士,副教授,主要从事中药新制剂、新剂型方面的研究,E-mail:gaopenggaopeng@126.com。

中图分类号: TS201.1
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出版历程
- 收稿日期: 2017-05-01
- 网络出版日期: 2020-12-28
- 刊出日期: 2017-12-31

Study on relative molecular weight distribution and depressor effect of soybean peptide prepared by enzymatic method

1. Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250355, China;
2. Anhui Bio-peptide Industry Research Institute Co., Ltd., Wuhu 241000, China;
3. Qingdao University Affiliated Hospital, Qingdao 266000, China

摘要

摘要: 目的:为了研究双酶复合酶解大豆分离蛋白制备大豆肽的相对分子量分布及活性片段对实验性高血压大鼠的降压效果。方法:通过单因素实验优选,采取正交实验优化复合酶的酶解工艺,以酶解液对血管紧张素转换酶(ACE)抑制率为指标优选最佳工艺;通过超滤、纳滤后得到最佳分子量片段,应用左硝基精氨酸(L-NNA)诱导大鼠高血压模型,分别给予不同剂量的活性片段进行实验。结果:双酶复合酶解的最佳条件为:在料液比为1:20 g/mL的情况下,酶解温度50℃,酶底比3.0%,酶解pH7.0条件下先用菠萝蛋白酶酶解2 h后,再以酶底比4.0%加入胰蛋白酶,控制温度为40℃、酶解pH为8.0条件下酶解4 h,大豆分离蛋白的水解度35.31%。经过高效液相对酶解液的相对分子量分布得出,大豆分离蛋白原液含有的蛋白质及多肽的相对分子质量主要区间在5000~1.0×10⁵ Da,在双酶复合酶解下,酶解液的蛋白质及多肽的相对分子质量主要区间均在500~4000 Da;通过超滤得出最佳活性片段为1000~3000 Da,药理实验表明,与模型对照组相比各组血压均有降低,且大豆肽剂量组有显著性差异(p<0.05);其中大豆肽高剂量组和卡托普利组相当。结论:双酶复合酶解制备的大豆肽相对分子量较小,活性片段对高血压大鼠模型降压作用显著。
- 大豆分离蛋白 /
- 双酶复合酶解 /
- 大豆肽 /
- 降压
Abstract: Objective:To study the double enzyme compound enzyme preparation of soybean protein isolated soy peptide segments of the relative molecular weight distribution and activity of antihypertensive effect of experimental hypertensive rats. Methods:Through the optimization of single factor experiment, orthogonal experiment was used to optimize the compound enzyme process, the enzyme solution of angiotensin converting enzyme(ACE)inhibitory rate was as the index to optimize the process by ultrafiltration and nanofiltration, the best molecular fragments left nitro arginine(L-NNA)induced hypertension model rats were given different doses of the active fragment of test. Results:The optimum conditions of double enzyme solution was:the ratio of material to liquid 1:20 g/mL, enzymolysis temperature of 50℃, the ratio of enzyme to substrate 3%, enzymatic hydrolysis under the conditions of pH7.0 by bromelain hydrolysis for 2 h, then adding 4% trypsin enzyme substrate ratio, control the temperature of 40℃ and the enzyme pH was 8.0 under the condition of enzymatic hydrolysis for 4 h, the hydrolysis degree was 35.31% to ACE soybean peptides. After HPLC enzyme molecular weight distribution of the hydrolysates of soybean protein, polypeptide and protein solution containing the separation of the relative molecular mass was mainly in the range of 5000~1.0×10⁵ Da in double enzyme solution, the relative molecular mass of the main range of protein and peptide hydrolysates were obtained by ultrafiltration in 500~4000 Da, the best active fragment was 1000~3000 Da, pharmacological experiments showed that, compared with the model control group each group had lower blood pressure, and the soybean peptide dose group had significant difference(p<0.05), when the soybean peptide in high dose group and captopril group. Conclusion:The relative molecular weight of soybean peptides prepared by double enzyme complex hydrolysis is smaller, and the active fraction has a significant hypotensive effect on hypertensive rats.
- soybean protein isolate /
- double enzyme complex enzymatic hydrolysis /
- soybean peptide /
- decompression

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参考文献(12)

[1]	刘大川.中国大豆蛋白工业现状及发展趋势[A].中国粮油学会.中国粮油学会第二届学术年会论文选集(综合卷)[C].中国粮油学会,2002:4.
[2]	张晓梅.降血压和降胆固醇大豆肽的分离纯化[D].无锡:江南大学,2006.
[3]	王莉娟,陶文沂.大豆肽体外抗氧化活性研究[J].生物加工过程,2008(4):69-73.
[4]	陈园园.大豆肽的酶解制备与抗疲劳、抗氧化功能研究[D].无锡:江南大学,2008.
[5]	高绿莎.大豆肽缓解体力疲劳活性研究与产品研制[D].长春:吉林大学,2015.
[6]	李婷,赵沙沙,阮奇珺,等.碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶对热变性大豆分离蛋白的酶解研究[J].中国油脂,2014(4):35-38.
[7]	檀志芬,生庆海,邱泉若.蛋白质水解度的测定方法[J].食品工业科技,2005(7):174-175,178.
[8]	Cushman DW,Matsui T. Spectrophotometric assay and proper ties of the angiotensin-converting enzyme of rabbitlung[J].Bi Pharm,1971,20:1673-1675.
[9]	Toshiro,Ondetti M.Inhibitionofangiotensin-convertingenzyme by Bacilluslicheni for misalkaline protease hydrolyzates derived from sardine muscle[J].Biosci Biotech Biochem,1993,67:921-924.
[10]	陈山,杨晓泉,郭祀远,蔡妙颜.大豆肽超滤分离纯化过程的研究[J].食品与发酵工业,2003(1):49-52.
[11]	陈星,李晓磊,吴琼.不同蛋白酶酶解产物活性大豆肽分子量分布状态的研究[J].西南大学学报(自然科学版),2010(7):1-7.
[12]	韩学杰,张立石,王克林,等.降血压食品功能因子对造模性高血压大鼠功效的研究[J].中国中医基础医学杂志,2003(11):24-27.

施引文献(34)

期刊类型引用(21)

1.	郁晓艺，徐巨才，伍蓥，刘万顺，郭丹，李晓敏. 基于肽组学的大豆低聚肽制备稳定性评价. 食品与机械. 2023(01): 210-214 . 百度学术
2.	林彦君，刘杨静，曲肖凤，杜媛媛，房文硕，尹艺童，李瑞. 酶解大豆乳清蛋白制备抗氧化肽及其体外抗氧化活性评价. 食品工业科技. 2023(20): 230-238 . 本站查看
3.	谭力铭，曹妍，裴海生，郝建雄，李慧颖. 酶法制备酸枣仁ACE抑制肽理化性质研究. 食品工业科技. 2022(02): 84-92 . 本站查看
4.	谭力铭，曹妍，裴海生，郝建雄，李慧颖. 酸枣仁ACE抑制肽酶解工艺优化. 食品工业科技. 2022(02): 182-194 . 本站查看
5.	龚涛，徐娇. 植物多肽的分类及其研究进展. 广东化工. 2022(07): 90-91+100 . 百度学术
6.	文雯，胡家栋，郝乾坤，胡莉娟. 浅谈小分子大豆肽的生物活性与制备工艺. 科技风. 2021(03): 183-184 . 百度学术
7.	钱珊珊，冯雪，于彤，官梦姝，李佳，刘月，徐聪，侯俊财. 大豆活性肽对肥胖小鼠降脂作用的研究. 食品工业科技. 2021(03): 310-314+319 . 本站查看
8.	张静，王慧，蒋林树，熊本海. 大豆活性肽的功能特性及其在畜禽应用中的研究进展. 动物营养学报. 2021(05): 2515-2526 . 百度学术
9.	尹乐斌，刘丹，廖聪，杨爱莲，何平. 酶解豆清液制备抗氧化肽. 食品工业. 2021(05): 177-181 . 百度学术
10.	顾正位，王升光，刘晓美，马青琳，姜珊，高鹏，郭庆梅. 中药鲜河蚌肉酶解工艺研究. 山东中医药大学学报. 2020(02): 188-192 . 百度学术
11.	吴隆坤，江连洲，范志军，王东梅，罗义. 生物解离大豆蛋白及肽的研究进展. 食品研究与开发. 2020(17): 185-191 . 百度学术
12.	王嘉佳，李晓倩，高山，牟德华，何爱民，吉洋洋. 核桃多肽复配核桃乳对小鼠抗疲劳及抗氧化作用研究. 食品与发酵工业. 2020(19): 84-91 . 百度学术
13.	师景双，袁超，李静，于艳艳，冯炜，任雪梅. 复合酶解法制备大豆肽的试验. 食品工业. 2020(10): 37-41 . 百度学术
14.	杨晶，王雅洁，许天阳，于澎. 一种新型的电磁裂解装置用于制备大豆小分子多肽. 食品研究与开发. 2019(10): 217-224 . 百度学术
15.	李雯晖，张健，应欣，王勇，张连慧，李赫，刘新旗. 大豆低聚肽对自发性高血压大鼠血压及血浆血管紧张素的影响. 食品科学. 2019(11): 152-158 . 百度学术
16.	许腾，卢聪，范海茹，王东晖，李淑英，范蓓，王艳，王凤忠. 酶解法制备豆粕水解肽工艺优化. 核农学报. 2019(09): 1783-1788 . 百度学术
17.	王祖哲，马普，王军琦，左爱华，彭聪，詹龙全，孙天利，包卫洋. 刺参低聚肽的质量评价和抗疲劳作用研究. 食品研究与开发. 2019(18): 5-11 . 百度学术
18.	宋凯强，刘鹏莉，郑振佳，乔旭光. 大蒜降压肽的制备及超滤分离. 食品工业科技. 2019(19): 73-80 . 本站查看
19.	范晋铭，巩婷婷，柯涛. 大豆肽真菌多糖口服液配方的工艺优化. 食品工业. 2019(12): 137-140 . 百度学术
20.	王常瞵，王升光，代龙，高鹏. 蚌肉酶解工艺及保肝作用研究. 食品科技. 2019(12): 146-150 . 百度学术
21.	卓长清，周兵. 蛋白食品对运动员生理功能的影响. 食品安全质量检测学报. 2018(19): 5259-5263 . 百度学术