羊栖菜多糖提取物对酪氨酸酶的抑制作用研究
详细信息Study on inhibition effect of Sargassum fusiforme polysaccharide extracts on activity of tyrosinase
-
摘要: 目的:研究羊栖菜多糖提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用和对结构的影响。方法:提取羊栖菜多糖并测定含量,以L-DOPA为底物,在475nm处测定吸光度,观察羊栖菜多糖提取物对酪氨酸酶二酚酶活力的影响;测定羊栖菜多糖作用下酪氨酸酶内源荧光和ANS结合的荧光的变化,以判断对酶结构的影响情况。结果:羊栖菜多糖提取物对蘑菇酪氨酸酶有明显的抑制作用,可以导致酪氨酸酶的二酚酶活力下降。羊栖菜多糖使二酚酶活力下降一半时的抑制剂浓度(IC50)为(2.16±0.37)mg/mL。羊栖菜多糖对酪氨酸酶的抑制作用是一个可逆过程,抑制类型为混合型抑制。通过动力学分析,测得羊栖菜多糖对酪氨酸酶的抑制常数(Ki)为(4.34±0.56)mg/mL。荧光测定结果表明,羊栖菜多糖的结合引起酪氨酸酶三级结构的明显改变。结论:羊栖菜多糖与酪氨酸酶的结合引起酶结构的变化,并以混合抑制的方式可逆抑制酪氨酸酶的二酚酶活性。本实验为进一步研究和设计新型酪氨酸酶抑制剂奠定科学基础。Abstract: Objective:To study the inhibitory effect of the Sargassum fusiforme polysaccharide (SFPS) extracts on the activity of tyrosinase for diphenolase.Methods:Extract SFPS and measure the content of polysaccharide.To investigate the effect of SFPS extracts on the diphenolase activity, the absorbance of the solution containing several concentrations of the SFPS extracts was measured at 475nm, using the L-DOPA as the substrate.Endogenous fluorescence and ANS-binding fluorescence of tyrosinase were tested with different concentrations of SFPS.Results:SFPS could obviously inhibit the activity of tyrosinase for diphenolsae.The inhibitory concentration leading to 50% activity lost (IC 50) was estimated to be (2.16±0.37) mg/mL.The results showed that SFPS was a reversible inhibitor of mushroom tyrosinase.Lineweaver-Burk plots indicated that SFPS was a mixed-type inhibitor, and its inhibition constant Ki were (4.34±0.56) mg/mL.Endogenous fluorescence and ANSbinding fluorescence test of tyrosinase indicated that SFPS combined with the tyrosinase caused significant changes in the structure.Conclusion:SFPS combined with the tyrosinase caused significant changes in the structure and reversible inhibited the activity of tyrosinase for diphenolsae in a mixed-type manner.Together these results provided a scientific basis for the design and development of new inhibitors in the future.
-
[1] Krner A M, Pawelek J M.Mammalian tyrosinase catalyzes three reaction in the biosynthesis of melanin[J].Science, 1982, 217, 4565:1163-1165.
[2] Sánchez-Ferrer A, Rodriguez-López J N, Garcia-Cánovas F, et al.Tyrosinase:a comprehensive review of its mechanism[J].Biochim Biophys Acta, 1995, 1247 (1) :1-11.
[3] Tripathi R K, Hearing V J, Urabe K, et al.Mutational mapping of the catalytic activities of human tyrosinase[J].J Biol Chem, 1992, 267, 33:23707-23712.
[4] Petrescu S M, Popescu C I, Petrescu A J, et al.The glycosylation of tyrosinase in melanoma cells and the effect on antigen presentation[J].Adv Exp Med Biol, 2003, 535:257-269.
[5] Zou X W, Jiang Z S.Advances in studies on botanical inhibitors of tyrosinase[J].China Tradit Herb Drug, 2004, 35 (6) :702-705.
[6] Karioti A, Protopappa A, Megoulas N, et al.Identification of tyrosinase inhibitors from Marrubium velutinum and Marrubium cylleneum[J].Bioorgan Med Chem, 2007, 15 (7) :2708-2714.
[7] 洪咏平, 戴志远.羊栖菜食品的开发和利用[J].中国水产, 2002 (1) :75-76. [8] 武晓丹, 邹翔.海洋藻类多糖的药理研究[J].哈尔滨商业大学学报:自然科学版, 2005, 21 (2) :137-138. [9] 周峙苗.羊栖莱多糖的提取和纯化研究[D].杭州:浙江工业大学, 2004. [10] 汲晨锋, 季宇彬, 王翀, 等.羊栖菜多糖含量测定及多糖组分分析[J].世界科学技术-中医药现代化, 2006, 5 (8) :49-51. [11] 张惟杰.糖复合物生化研究技术[M].杭州:浙江大学出版社, 2003, 1-348. [12] Park Y D, Kim S Y, Lyou Y J, et al.A new type of uncompetitive inhibition of tyrosinase induced by Cl-binding[J].Biochimie, 2005, 87 (11) :931-937.
[13] Han H Y, Lee J R, Xu W A, et al.Effect of Cl-on tyrosinase:complex inhibition kinetics and biochemical implication[J].J Biomol Struct Dyn, 2007, 25 (2) :165-171.
[14] Passi S, Nazzaro-Porro M, Molecular basis of substrate and inhibitory specificity of tyrosinase:phenolic compounds[J].Br J Dermatol, 1981, 104 (6) :659-665.
[15] Cabanes J, Garcia-Canovas F, Tudela J, et al.L-mimosine a slow-binding inhibitor of mushroom tyrosinase[J].Phytochemistry, 1987, 26 (4) :917-919.
[16] Klabunde T, Eicken C, Sacchettini J C, et al.Crystal structure of a plant catechol oxidase containing a dicopper center[J].Nat Struct Biol, 1998, 5 (12) :1084-1090.
[17] Pérez-Gilabert M, García-Carmona F.Dimethyl sulfide, a volatile flavor constituent, is a slow-binding inhibitor of tyrosinase[J].Biochem Biophys Res Commun, 2001, 285 (2) :257-261.
-
期刊类型引用(23)
1. 陈创业,安比芳,冯作山,刘天志,乔燕,陶永霞. 响应面法优化酶-化学法提取玫瑰花渣中可溶性膳食纤维. 粮食与油脂. 2024(03): 91-94 . 百度学术
2. 廖婷,刘运伙,傅锦凌. 树莓果酒工艺优化及其蒸馏酒香气成分分析. 武夷学院学报. 2024(06): 29-34 . 百度学术
3. 刘鑫鑫,秦怡婕,高雅,范欣瑶,付湘,常娟,尹清强,王平. 碱高压氧化改性对麦秸可溶性膳食纤维提取率的影响. 饲料研究. 2024(16): 67-71 . 百度学术
4. 温月,闫小娟,张海悦. 高粱乌米可溶性膳食纤维提取工艺优化及功能性分析. 食品工业科技. 2023(05): 213-221 . 本站查看
5. 秦怡婕,楚雨晴,刘鑫鑫,尹清强,常娟,王平,刘超齐,王利军,刘梦洁,党晓伟,卢富山. 膳食纤维改性及其在畜禽生产中的应用. 中国饲料. 2023(09): 6-12 . 百度学术
6. 邓新宇,陆思名,陈宏著,黄敏茹,田晓彬,黎攀. 美藤果粕可溶性膳食纤维提取工艺优化及其酸奶的制备. 现代食品科技. 2023(05): 175-182 . 百度学术
7. 谢建华,张桂云,李足环,颜朝勇. 柚皮不溶性膳食纤维提取工艺优化及其理化性质分析. 食品工业科技. 2023(20): 206-212 . 本站查看
8. 贺诗茹,王茜,阿依努尔·白克热,刘梦文,沈静,李文宇,肖辉. 新疆桑葚总黄酮含量与其抗氧化活性的研究. 陕西农业科学. 2023(09): 13-21+74 . 百度学术
9. 吴婧,刘祚祚,吴杰,罗秋君,姜燕. 滇橄榄果渣膳食纤维的提取及其体外吸附性能研究. 食品工业科技. 2022(02): 174-181 . 本站查看
10. 任鑫,彭飞,陈丽楠,杨越冬. 安梨果渣可溶性膳食纤维微波辅助酶法提取工艺优化及结构表征. 食品工业科技. 2022(07): 191-198 . 本站查看
11. 常相娜,陈雪峰,苏瑶. 复合酶改性苹果渣工艺的响应面法优化及其物性评价. 陕西科技大学学报. 2022(02): 46-53 . 百度学术
12. 周龙珠,王朋,董双,丁雪纯,王静,康盈阁,王金荣. 可溶性膳食纤维的制备及其在畜牧生产中的应用研究进展. 中国畜牧杂志. 2022(04): 11-15 . 百度学术
13. 张智,闫建英,冯丽荣,汤华京,宋伟,薛红洋. 响应面法优化发酵蔗渣制备膳食纤维工艺及结构特性分析. 食品工业科技. 2022(17): 176-184 . 本站查看
14. 赵新宇,赵海琳,牟藤,李其久,李辉. 黑蒜榨汁残渣中膳食纤维的提取工艺. 食品工业. 2022(08): 142-147 . 百度学术
15. 秦续缘,于寒松,程志强. 黑果腺肋花楸不溶性膳食纤维化学提取工艺及其理化特性的研究. 中国食品添加剂. 2022(09): 34-40 . 百度学术
16. 段伟伟. 纤维素酶在饲用膳食纤维制备中的应用进展. 饲料研究. 2022(17): 156-159 . 百度学术
17. 赵淼,张茂迎,刘畅,郎佳雪,李险峰,邹险峰. 豆粕不溶性膳食纤维的制备及性质研究. 中国食品添加剂. 2022(11): 77-83 . 百度学术
18. 许锡凯,辛嘉英,任佳欣,肖婧泓,胡新婷. 水溶性膳食纤维的提取方法及其在食品中的应用. 食品研究与开发. 2021(04): 203-208 . 百度学术
19. 张静,黄月. 水果中膳食纤维提取方法研究进展. 中国果菜. 2021(06): 101-104 . 百度学术
20. 李赟,徐梦祥,杨宁宁. 水果渣中膳食纤维的研究进展. 农产品加工. 2021(11): 86-88+93 . 百度学术
21. 许祯毅,李力,姜咸彪,范俐. 响应面法优化碱法提取啤酒糟中可溶性膳食纤维的工艺研究. 食品研究与开发. 2021(17): 75-80 . 百度学术
22. 武林芝,郝秀萍. 红树莓果醋的制作工艺及香气成分分析. 中国调味品. 2021(10): 129-132 . 百度学术
23. 高小娜,赵山山. 不同原料中膳食纤维提取研究进展. 保鲜与加工. 2021(12): 144-150 . 百度学术
其他类型引用(24)
计量
- 文章访问数:
- HTML全文浏览量:
- PDF下载量:
- 被引次数: 47