LC FT-ICR MS精确分析卵清蛋白在真空干燥过程中的糖基化修饰
-
摘要: 研究了卵清蛋白与葡萄糖混合物在真空干燥的过程中,卵清蛋白的糖基化修饰情况。首次采用胃蛋白酶和液相-傅立叶变换离子回旋共振(LC-FT-ICR)精确质谱分析技术对卵清蛋白的糖基化修饰位点进行研究,其蛋白质覆盖率可以达到100%,研究发现在真空干燥过程中,卵清蛋白中的赖氨酸会与还原糖发生美拉德初级反应,形成糖基化修饰,主要发生在卵清蛋白的K47,56,62,182,190,323和370的赖氨酸氨基上,而卵清蛋白中的精氨酸和氮末端氨基未发现被糖基化修饰;同时,采用离子碰撞诱导解离三级质谱CID-MS3验证m/z7863+的离子峰为m/z7323+的离子峰上添加一个162Da。本论文的研究为精确分析蛋白质修饰的一级结构变化提供了重要的研究方法,为真空干燥在实验分析中的应用提供重要参考。