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摘要: 建立了利用高效液相色谱法（HPLC）分离测定双孢蘑菇核酸提取液中的四种核苷酸（胞苷酸、尿苷酸、鸟苷酸、腺苷酸）的方法。采用紫外检测器,波长为260nm;色谱柱为EclipseXDB-C18,柱温为25℃,流动相为:超纯水:甲醇:冰乙酸:四丁基氢氧化铵（TBAOH,10%）=894·5:100:5:0·5;流速为1·0mL/min;四种核苷酸标准曲线相关系数r均达到0·999。利用5′-磷酸二酯酶酶解双孢蘑菇中提取制得的核酸制品,为获得酶解的最适工艺条件,通过单因素实验,在底物浓度为2mg/mL的条件下,对其酶解条件:时间、温度、pH和酶底比进行了初步研究,研究结果表明酶解的最适工艺条件:时间为3h、温度为40℃、pH为5·8、酶底比为1300U/g核酸,在该条件下核酸酶解率为68·1%。
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