酶解中国毛虾制备清除羟自由基活性产物的研究
-
摘要: 研究以高产低值的中国毛虾为原料,通过测定酶解物对Fenton体系产生的羟自由基的清除效果,从风味酶、复合酶、中性蛋白酶、Alcalase2.4L等10种常用蛋白酶中筛选出Alcalase2.4L作为酶解中国毛虾制备清除羟自由基活性酶解物的水解酶;以羟自由基清除率为指标,利用正交实验对酶解条件进行优化,将优化酶解条件下的酶解产物进行SephadexG-15凝胶色谱分离(1.6cm×68cm),测定分子量分布并收集各吸收峰。结果表明:Alcalase2.4L在温度55℃、pH9.0、酶底物浓度比E/S为12.0AU/g、时间3h的水解条件下,酶解物对羟自由基清除率为84.6%,水解度为26.28%,平均肽链长为3.81。Alcalase2.4L酶解物凝胶色谱分离得到一个较强羟自由基清除活性的组分分子量范围是2259~869,IC50为0.385mg/mL,肽链长度在22.4~7.7之间。