燕窝糖蛋白纯化及多克隆抗体的制备
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摘要: 燕窝经60℃水浴提取、醇析,得糖蛋白粗品,再经DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析、SephacrylS-200凝胶过滤层析分离纯化得到了成分均一的燕窝特征组分—燕窝糖蛋白,经SDS-PAGE凝胶电泳测定其分子量约为60k Da;通过β消去反应,表明燕窝糖蛋白中存在O型糖肽键。经一定程序免疫新西兰大白兔,获得了兔抗燕窝糖蛋白抗血清,采用Protein A-Sepharose 4B亲和层析纯化,获得抗燕窝糖蛋白抗体。本实验为进一步利用抗原抗体特异性识别的性质,建立燕窝特征糖蛋白组分的酶联免疫检测方法及燕窝的鉴伪奠定了基础。