米曲霉GX0011β-果糖基转移酶的性质研究

基金项目:

国家自然科学基金资助项目(29772096)；广西高校博士点建设资金资助；

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摘要: β-果糖基转移酶是酶法由蔗糖生产低聚果糖所必需的酶,本文对从米曲霉GX0011分离纯化得到的β-果糖基转移酶性质进行了研究。结果表明,该酶催化蔗糖转化成蔗果三糖的Km和Vmax分别为0.319mol/L和0.713mol/min/L,最适pH和最适温度分别为5.0～6.0和45℃。葡萄糖是该酶的竞争性抑制剂,其抑制常数Ki=0.608mol/L。经苯甲磺酸氟（PMSF）、N-溴代二酰亚胺（NBS）、1-乙基-3-（3-二甲氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐（EDC）和间硝基苯磺酸钠（TNBS）对酶进行化学修饰及底物保护实验,推测该酶活性中心可能包括丝氨酸/苏氨酸、色氨酸、天冬氨酸（谷氨酸）残基,而赖氨酸残基可能与维系酶活性中心构象有关,但不是酶活性必需基团。实验还表明,超声波能在一定程度上提高酶活力,在300W功率下作用5min可提高酶活12%左右。低浓度乙醇对酶活影响并不十分显著,乙醇浓度达20%时,酶活仅损失19%。
- 米曲霉 /
- β-果糖基转移酶 /
- 性质 /
- 化学修饰