辐照富硒木耳多糖对1型糖尿病小鼠的降血糖作用研究

刘爽; 曲孟; 齐欣; 及长城; 崔承弼

doi:10.13386/j.issn1002-0306.2024030421

辐照富硒木耳多糖对1型糖尿病小鼠的降血糖作用研究

刘爽^1,,
曲孟¹,
齐欣¹,
及长城²,
崔承弼^1, ,

1.
延边大学农学院，吉林延吉 133002
2.
长城菌业科技开发有限公司，吉林珲春 133300

基金项目: 吉林省科技发展计划项目（20220202041NC）。

详细信息

作者简介:
刘爽（2000−），女，硕士研究生，研究方向：食品营养，E-mail：symmka@163.com

通讯作者:
崔承弼（1968−），男，博士，教授，研究方向：食品营养，E-mail：cuichengbi@ybu.edu.cn。

中图分类号: TS201.4
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出版历程
- 收稿日期: 2024-03-27
- 网络出版日期: 2024-07-19
- 刊出日期: 2024-09-14

Hypoglycemic Effect of Irradiation Se-enriched A.auricularia Polysaccharide on Type 1 Diabetes Mice

1.
College of Agricultural, Yanbian University, Yanji 133002, China
2.
Hunchun Changcheng Mushroom Technology Development Co., Ltd., Hunchun 133300, China

摘要

摘要: 本研究旨在探讨不同辐照剂量的富硒木耳多糖（Se-enriched A.Auricularia polysaccharide，SAAP）对1型糖尿病（Type 1 diabetes mellitus，T1DM）小鼠的保护作用。本实验对富硒木耳进行⁶⁰Co-γ射线辐照处理，随后进行多糖的提取，采用响应面法对SAAP的最佳提取条件进行优化，通过比较SAAP在不同辐照剂量下的降血糖作用，并进行体内降血糖研究。通过注射链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）建立C57BL/6 T1DM小鼠模型，评价其空腹血糖值（Fasting blood glucose，FBG）、口服葡萄糖耐量（Oral glucose test，OGTT）以及SAAP对T1DM小鼠糖脂代谢和氧化应激的调节作用。结果表明，经响应面优化，结合实际条件最优参数为：液料比38:1 mL/g，提取温度98 ℃，提取时间3.5 h，得到SAAP浓度为0.73 mg/mL。SAAP可以改善T1DM小鼠多饮多食以及体重减轻的症状（P<0.05）；SAAP能够调节T1DM小鼠的血糖水平，表现为FBG和OGTT降低；SAAP能够显著降低T1DM小鼠的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量以及丙二醛（MDA）含量（P<0.05），增加超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）以及过氧化氢酶（CAT）水平；SAAP可以减轻T1DM所带来的炎症反应，即β干扰素（IFN-β）、白细胞介素18（IL-18）、白细胞介素6受体（IL-6R）和肿瘤坏死因子（TNF-γ）水平降低，并与其辐照剂量成正比；SAAP通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路从而对T1DM小鼠起到保护作用，且辐照剂量为10 kGy时抑制效果最佳。本研究为SAAP在治疗T1DM引起的炎症反应和氧化应激的应用提供理论依据和技术参考。
- 富硒木耳 /
- 多糖 /
- 辐照 /
- PI3K/AKT/mTOR信号通路 /
- 降血糖
Abstract: To investigate different irradiation doses of Se-enriched A.Auricularia polysaccharide (SAAP) in type 1 diabetes mellitus (T1DM) mice. In this study, extraction of polysaccharides from selenium-enriched fungus was carried out after ⁶⁰Co-γ-ray irradiation treatment. The optimal extraction conditions of SAAP were optimized by response surface methodology. The optimal irradiation dose was selected for the study of in vivo hypoglycemia by comparing the hypoglycemic effect of SAAP under different irradiation doses. C57BL/6 T1DM mice model was established by injecting streptozotocin (STZ) to evaluate the effects of fasting blood glucose (FBG), oral glucose tolerance (OGTT), and SAAP on the glucolipid metabolism and the regulation of oxidative stress in T1DM mice. The results showed that after response surface optimization, the optimal extraction conditions for SAAP: Material-liquid ratio of 37.98:1 mL/g, extraction temperature of 97.94 ℃, extraction time of 3.42 h. The optimal parameters were as follows: liquid-material ratio of 38:1 mL/g, extraction temperature 98 ℃, extraction time of 3.5 h, and SAAP concentration of 0.73 mg/mL. SAAP could improve the symptoms of polydipsia, polyphagia and weight loss in T1DM mice (P<0.05). SAAP was able to regulate blood glucose levels in T1DM mice, as evidenced by a decrease in FBG and OGTT. SAAP was able to significantly reduce total cholesterol (TC), triglyceride (TG) content, and malondialdehyde (MDA) content (P<0.05), as well as increased the levels of superoxide dismutase (SOD), glutathione (GSH), and catalase (CAT) in T1DM mice. SAAP was able to attenuate the inflammatory response to T1DM, the levels of interferon β (IFN-β), interleukin 18 (IL-18), interleukin 6 receptor (IL-6R), and tumor necrosis factor (TNF-γ) were reduced in direct proportion to the irradiation. The protective effect of SAAP on T1DM mice was achieved by inhibiting the PI3K/AKT/mTOR signaling pathway, and the inhibitory effect was best at an irradiation dose of 10 kGy. This study provides a theoretical basis and technical reference for the application of SAAP in the treatment of T1DM-induced inflammation and oxidative stress.
- Se-enriched A.auricularia /
- polysaccharide /
- irradiation /
- PI3K/AKT/mTOR signaling pathway /
- hypoglycemic

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糖尿病（Diabetes，DM）是一种以高血糖为特征的代谢性疾病，其临床表现为多食、多饮、体重减轻等^[1]。糖尿病的发生和发展主要与遗传、自身免疫和环境因素有关^[2]。发病机制可概括为β胰岛素缺乏或外周组织胰岛素利用不足，导致蛋白质和脂肪代谢紊乱^[3]。根据国际糖尿病联合会（IDF）的预测，到2045年，全球20~79岁糖尿病患者将达到7亿，其中四分之三是工作年龄人群^[4]。根据病因和发病机制的不同，糖尿病可分为1型糖尿病（Type 1 diabetes mellitus，T1DM）和2型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus，T2DM）^[5]，T1DM是由免疫系统攻击胰腺中分泌胰岛素的胰岛β细胞引起的自身免疫性疾病，导致细胞分泌胰岛素的能力丧失^[6]。其临床表现为胰岛素产生绝对不足，导致糖代谢异常和高血糖等症状，需要终身依赖胰岛素治疗。尽管糖尿病的治疗计划和管理理念一直在不断发展，但对于血糖调节受损的个体来说，最好的选择仍然是通过药物干预来预防或延缓糖尿病的发展。

近年来，中药和天然产物的药食同源产品在糖尿病中的保护作用备受关注，因为它们的功能符合现代营养免疫学理念，具有广泛的靶点和作用，与西药相比，它们的毒性或副作用较低。木耳是世界上三大栽培食用菌之一^[7]，作为一种具有多用途的食用菌和药用菌，由于其广泛的药理特性^[8]，被公认为“食用菌之王”^[9]。近些年来，木耳多糖降血糖领域备受学者关注，研究方向大多都集中于木耳降血糖的有效成分及肠道菌群方面的研究，张廷婷等^[10]提到木耳多糖可以调节高脂饮食大鼠的肠道菌群，改善小鼠的消化系统并降低血脂；Liu等^[11]通过代谢组学研究发现木耳多糖能有效恢复糖尿病小鼠的氨基酸代谢、脂质代谢、胆汁酸合成以及甘油磷脂通路，显著改善胰岛素抵抗。骆嘉原等^[12]通过复合酶解法对木耳多糖进行生物转化，改善木耳多糖的生物活性，从而发挥降血糖性能。Xiang等^[13]提出木耳多糖可以缓解链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）诱导的氧化应激以及糖尿病病理过程。由于食品工业技术的发展以及人们对食品安全系数的提升，辐照技术（包括γ辐照和电子束辐照）已广泛应用于食品加工技术领域。γ辐照是由Cs₁₃₇或Co₆₀产生^[14]，电离和激发物质产生的活化分子与原子，并发生一系列物理、化学与生物化学变化，使物质发生聚合、交联、降解并发生改性^[15]。但辐照技术应用于糖尿病领域中的研究却屈指可数，因此，本文对辐照处理后的硒化木耳多糖是否可以提高对胰岛素的敏感性，恢复葡萄糖代谢，改善糖尿病的症状进行了研究。

基于上述信息，本试验利用⁶⁰Co-γ射线研究不同辐照处理的富硒木耳，探讨其对T1DM模型小鼠的保护作用及其可能机制，研究结果揭示了天然产物的药食同源产品对糖尿病治疗相关研究的新见解，为T1DM的治疗打开了新的窗口，在推动药食同源产品的发展具有现实意义。

1. 材料与方法

1.1 材料与仪器

干燥富硒木耳（硒含量5.67 mg/kg）　延边自然菌业有限公司提供；C57BL/6雄性小鼠　SPF级，18~20 g，8周龄，42只，购自延边大学实验动物中心（中国延吉），所有动物均按照《美国国家卫生研究院实验室动物护理与使用指南》（第8版）的要求进行饲养，延边大学伦理委员会批准了所有动物实验（许可证号：2020-0009），在研究期间，动物们被放置在标准笼中，可自由获取食物和水，饲养环境保持在22~25 ℃和40%~60%的湿度下，遵循每天12 h的光照与黑暗循环；盐酸二甲双胍片　重庆科瑞制药有限公司；葡萄糖、柠檬酸钠、柠檬酸　天津市科密欧化学试剂有限公司；链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）　纯度≥98%，美国SIGMA公司；总胆固醇（Total cholesterol，TC）、甘油三酯（Triglyceride，TG）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）、谷胱甘肽（Glutathione，GSH）、过氧化氢酶（Catalyst，CAT）试剂盒　南京建成生物工程研究所；白细胞介素6受体（Interleukin-6 receptor，IL-6R）、肿瘤坏死因子γ（Tumor necrosis factor γ，TNF-γ）、β干扰素（β interferon，IFN-β）、白细胞介素18（Interleukin 18，IL-18）酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒　上海源桔生物科技中心；磷脂酰肌醇3-激酶（Phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）、蛋白激酶B（protein kinase B，AKT）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（Mammalian rapamycin target protein，mTOR）、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶（Phosphorylated phosphatidylinositol 3 kinase，p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（Phosphorylated protein kinase B，p-AKT）、磷酸化雷帕霉素靶蛋白（Phosphorylated rapamycin target protein，p-mTOR）抗体、β-肌动蛋白（Beat actin，β-actin）抗体　美国CST公司。

BK-EL10C型酶联免疫分析仪　山东博科生物产业有限公司；JJ-BC型电子分析天平　生工生物工程股份有限公司；LyoQuest-85型试验型冷冻干燥机　西班牙Telstar集团；OSB-2100-CE型水浴锅　东京理化器械株式会社；AG-607型血糖测试仪　天津九安医疗电子股份有限公司；TDZS-WS型医用离心机　湖南湘仪试验室仪器开发有限公司；IKA MS3型微型漩涡仪　赛默飞世尔科技有限公司；Bio Spectrum510型凝胶成像系统　美国UVP公司；SK-O180-E型水平摇床　大龙兴创试验仪器有限公司。

1.2 实验方法

1.2.1 辐照处理

将富硒木耳送于四川省原子能研究院进行辐照，以⁶⁰Co-γ射线作为辐射源，辐照剂量分别为0、2.5、5、7.5、10 kGy，辐照后室温下保存。

1.2.2 SAAP的提取

将辐照后的富硒木耳粉碎并过60目筛，水提醇沉法提取多糖^[16]，按一定液料比、提取温度和提取时间进行水浴浸提，重复3次，3000 r/min离心10 min后合并上清液，旋蒸至1/5体积，加入75%乙醇醇沉24 h，将沉淀加入5倍蒸馏水复溶，60 kHz超声30 min后，3000 r/min离心10 min，取上清液进行抽滤，旋蒸后冻干，得到SAAP粉末。

1.2.3 多糖浓度的测定

参考Chen等^[17]的方法，并稍作修改。取不同浓度（0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL）葡萄糖溶液于试管中并定容至2.0 mL。分别加入5%苯酚溶液1.0 mL和H₂SO₄溶液5.0 ml，摇匀，避光静置15 min，于490 nm测定OD值，得到标准曲线方程：y=1.343x+0.145（R²=0.998）。根据苯酚-硫酸法测定SAAP浓度。从上清液中取2.0 mL于试管中，按上述方法配制溶液，根据标准曲线计算多糖浓度。

1.2.4 单因素实验

在富硒木耳提取过程中，按不同液料比（20:1、30:1、40:1、50:1、60:1 mL/g）、提取温度（60、70、80、90、100 ℃）和提取时间（1.5、2、2.5、3、3.5 h）进行单因素实验^[18]，测定不同条件下SAAP浓度。

1.2.5 响应面试验

根据单因素实验结果，采用Design-Expert.V8.0.6.1软件进行响应面试验^[19]。进行三因素三水平的Box-Behnken中心组合试验设计，对SAAP的提取工艺进行优化。表1为试验因子水平设计表。

表 1 Box-Behnken试验因子水平设计

Table 1. Box-Behnken experimental factor level design

因素	水平
因素	−1	0	1
A液料比（mL/g）	20:1	30:1	40:1
B提取时间（h）	2.5	3	3.5
C提取温度（℃）	80	90	100

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1.2.6 T1DM小鼠模型建立

小鼠适应性喂养一周，称量体重并记录，禁食不禁水12 h后测定空腹血糖值（Fasting blood glucose，FBG）。隔天禁食不禁水12 h后开始建立模型，根据体重连续4 d小剂量（50 mg/kg·BW）腹腔注射STZ，第5 d大剂量（100 mg/kg·BW）腹腔注射STZ，注射1 h后恢复进食。建模1 w后，FBG≥11.1 mmol/L即T1DM模型建立成功^[20]。

1.2.7 小鼠分组

将建模成功的小鼠随机分为8组（n=8），通过灌胃的方式进行给药：正常对照组（NC）和模型组（BC）均灌胃生理盐水；0、2.5、5、7.5、10 kGy组和阳性对照组（PC，盐酸二甲双胍）均灌胃200 mg/kg·BW对应的药物，所有试验操作遵循SPF级动物饲养房的饲养规则，每天早上8点灌胃给药一次，正常进食进水，为期28 d。

1.2.8 小鼠基础指标的测定

确定小鼠的初始体重。灌胃期间每天早上8点测量各组小鼠的体重、摄食量及摄水量，试验结束处死小鼠前确定最终体重。从眼球中提取的血清储存在−20 ℃备用。脱颈处死并解剖，取心脏、肝、脾、肾并称重，于−80 ℃保存。

1.2.9 小鼠空腹血糖值和葡萄糖耐量的测定

建模前禁食12 h，而后对各组小鼠进行尾部取血，测定给药前后的FBG，小鼠处死前进行最后一次FBG的测定，随后进行葡萄糖溶液灌胃，在30、60、90、120 min后分别测定其OGTT^[21]，血糖-时间曲线下面积（AUC）公式如下：

$\rm AUC = \left(\frac{A}{2}+B+C+D+\frac{E}{2}\right)/2$

式中：A、B、C、D、E分别为0、30、60、90、120 min时的血糖值。

1.2.10 小鼠脂质代谢及氧化应激指标的测定

取肝组织样品0.5 g，按肝脏重量（g）：匀浆介质（mL）为1:9的比例在冰水浴条件下进行手工匀浆处理，3000 r/min离心10 min，收集上清液。根据试剂盒说明，对TC、TG和SOD、MDA、GSH、CAT水平进行测定。

1.2.11 小鼠炎症因子指标的测定

根据ELISA试剂盒说明，对小鼠肝脏内IFN-β、IL-18、IL-6R及TNF-γ水平进行测定。

1.2.12 蛋白免疫印迹分析

提取小鼠肝脏组织蛋白后，使用BCA蛋白质浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，将蛋白变性后，制备8%分离胶和5%浓缩胶，而后将待测样品加入到凝胶孔道中，电泳过程中确保蛋白质有效分离，将凝胶上的蛋白转移到PVDF膜上，以便进行后续的抗体孵育和检测。随后在4 ℃下过夜孵育一抗（AKT、p-AKT、PI3K、p-PI3K、mTOR、p-mTOR），洗涤后，室温下2 h二抗孵育，最后通过显影和凝胶成像系统进行成像^[22]。

1.3 数据处理

通过GraphPad Prism 5.0和Design Expert 8.0.6软件绘图，使用SPSS 22.0和Image J进行统计分析。数据表示采用平均值±SD来表示，通过ANOVA判定不同组之间的显著性差异，P<0.05表示差异显著，P<0.01表示差异极显著，P>0.05表示差异不显著。

2. 结果与分析

2.1 单因素实验结果

由图1可知，当液料比为30:1 mL/g时，多糖浓度达到峰值，液料比达到饱和，溶解平衡，继续增加溶剂会导致SAAP浓度降低，原因可能是饱和后进一步增加溶剂会导致其它杂质的析出从而抑制多糖产生，当溶剂过多时，会导致提取液中的溶质浓度降低，即出现溶剂稀释效应，会使多糖浓度下降^[23]；当提取温度为100 ℃时，多糖浓度达到峰值，因为提取过程中温度越高，反应越剧烈，析出的多糖越多，在试验范围内未出现转折点可能是由于高温能加快分子间的热运动，使多糖分子在溶剂中的扩散速率增加，在试验范围内，温度的变化正处于一个有利于多糖溶出的范围内。因此，随着提取温度的升高，多糖浓度持续上升^[24]；当提取时间在2~2.5 h时，增长相对缓慢，可能是由于随着提取时间的延长，试样的内部结构逐渐发生变化，部分溶解的试样开始以沉淀的形式重新析出到提取液中，这一过程可能阻碍了多糖进一步向提取液中扩散，同时也可能因为沉淀物的形成而减少了提取液与试样中剩余有效物质的接触面积^[25]，当提取时间为3 h时，多糖浓度达到峰值，然后逐渐降低，原因是当溶剂中的多糖浓度达到一定程度时，会达到溶解平衡状态，此时多糖的溶解速率与析出速率相等，导致多糖浓度不再显著增加^[26]。因此，根据结果显示，分别选择液料比为20:1、30:1、40:1 mL/g；提取温度为80、90、100 ℃；提取时间为2.5、3.0、3.5 h进行后续响应面试验。

图 1 液料比（A）、提取温度（B）和提取时间（C）对SAAP浓度的影响

注：不同字母表示差异显著（P<0.05），图2~图6同。

Figure 1. Effects of liquid-material ratio (A), extraction temperature (B), and extraction time (C) on SAAP concentration

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2.2 响应面试验结果

2.2.1 试验设计与结果

采用Box-Behnken中心组合设计，研究了液料比（A）、提取时间（B）和提取温度（C）对SAAP浓度的影响。Box-Behnken试验设计及结果如表2所示。在完全相同的实验条件下结果误差较大，原因可能是实验过程中的湿度以及光照等环境因素对实验结果产生了影响。

表 2 Box-Behnken试验设计与结果

Table 2. Design and results of Box-Behnken

实验号	A液料比	B提取时间	C提取温度	Y多糖浓度（mg/mL）
1	1	0	−1	0.47±0.02
2	−1	0	1	0.37±0.02
3	1	−1	0	0.28±0.04
4	−1	1	0	0.25±0.02
5	1	0	1	0.63±0.02
6	0	1	1	0.72±0.02
7	1	1	0	0.55±0.03
8	0	0	0	0.26±0.02
9	0	1	−1	0.43±0.02
10	0	0	0	0.23±0.01
11	−1	−1	0	0.28±0.02
12	0	0	0	0.36±0.03
13	0	0	0	0.36±0.03
14	0	−1	1	0.30±0.01
15	0	0	0	0.41±0.03
16	0	−1	−1	0.46±0.02
17	−1	0	−1	0.45±0.02

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使用Design-Expert. V 8.0.6软件对数据进行响应面回归拟合，得到SAAP浓度响应值（Y）与各因素（A、B、C）之间的二次回归模型为：Y=0.32+0.073A+0.079B+0.026C+0.075AB+0.060AC+0.11BC+0.00925A²+0.00675B²+0.15C²。响应面方差分析如表3所示，F值为8.27，表明模型差异显著（P<0.05）。失拟项P=0.9016>0.05，表明模型与试验数据拟合良好。决定拟合系数R²=0.9141，说明模型可以解释响应值变化的91.41%。各试验因素的显著性分析显示，B、BC和C²的P值均小于0.01，表明它们对SAAP浓度有极显著的影响。综上所述，SAAP浓度与提取条件之间的关系并非简单的线性关系，该模型可用于预测SAAP浓度。各因素对SAAP浓度的影响顺序为：提取时间>液料比>提取温度。

表 3 响应面方差分析

Table 3. ANOVA for response surface quadratic model

方差来源	平方和	自由度	均方	F值	P值
模型	0.28	9	0.031	8.27	0.0054^**
A	0.042	1	0.042	11.28	0.0121^*
B	0.05	1	0.05	13.31	0.0082^**
C	0.005512	1	0.005512	1.48	0.2634
AB	0.022	1	0.022	6.04	0.0437^*
AC	0.014	1	0.014	3.86	0.0901
BC	0.051	1	0.051	13.58	0.0078^**
A²	0.0003603	1	0.0003603	0.097	0.765
B²	0.0001918	1	0.0001918	0.051	0.827
C²	0.091	1	0.091	24.32	0.0017^**
残差	0.026	7	0.003728
失拟项	0.003175	3	0.001058	0.18	0.9016
纯误差	0.023	4	0.00573
总和	0.3	16
注：表示差异显著（P<0.05），*表示差异极显著（P<0.01）。

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2.2.2 验证实验

经统计分析，得到SAAP最优的提取条件为液料比37.98:1 mL/g，提取温度97.94 ℃，提取时间3.42 h，结合实际条件调整最优参数为：液料比38:1 mL/g，提取温度98 ℃，提取时间3.5 h，此时多糖浓度为0.73 mg/mL。在此最优条件下进行三次平行验证试验，结果为0.76±0.02 mg/mL，与模型预测值接近，表明模型可靠且具有良好的预测性。

2.3 SAAP对T1DM小鼠基础指标的影响

试验结束后，对各组小鼠的体重、饮水量和摄食量数据进行分析（表4~表6）。在1 week时除正常组外，其它组均出现多饮、多食与体重减轻的症状。表4可知，从第2 week开始，与正常组相比，模型组小鼠体重显著降低（P<0.05），与模型组相比，SAAP组体重下降缓慢，且在4 week时7.5、10 kGy组体重有上升趋势；表5可知，与正常组相比，模型组摄食量在第1 week时明显升高，在第4 week时，各辐照剂量组显著低于模型组（P<0.05），且10 kGy组摄食量与阳性组最为接近；表6可知，与正常组相比，模型组饮水量显著升高（P<0.05），与模型组相比，SAAP组在第2 week时饮水量均持续降低，但降低较缓慢，在第4 week时，各辐照剂量组显著低于模型组（P<0.05），且辐照组低于未辐照组（0 kGy），其中10 kGy组饮水量降低最为显著（P<0.01）。图2可以看出，模型组体重增量显著低于正常组（P<0.05），且0 kGy组的体重增量显著低于其它辐照剂量组（P<0.05），表明SAAP能提高糖尿病小鼠的体重增量，且辐照后的效果与未辐照的相比改善情况更好；与正常组相比，模型组小鼠的食物效价显著降低（P<0.05），SAAP组的食物效价均高于模型组（0.03%±0.03%），且10 kGy组食物效价显著高于其它各辐照剂量组（P<0.05）。表明SAAP能够提高T1DM小鼠的食物效价，使小鼠体重升高，改善糖尿病小鼠“三多一少”症状与饮食状态，且辐照后的SAAP效果与未辐照的相比来说效果较好。

表 4 SAAP对T1DM小鼠体重的影响

Table 4. Effects of SAAP on weight in T1DM mice

组别	0 week	1 week	2 week	3 week	4 week
正常组	20.86±0.16^a	21.13±0.36^a	21.76±0.37^a	22.87±0.33^a	24.36±0.56^a
模型组	21.11±0.61^a	17.39±0.39^de	14.97±0.19^f	14.51±0.29^f	14.16±0.24^g
0 kGy组	20.44±1.01^a	18.78±0.59^bc	17.02±0.34^c	15.85±0.22^cd	15.00±0.10^f
2.5 kGy组	20.41±0.58^a	18.58±0.74^bc	16.06±0.41^de	15.61±0.41^cde	15.21±0.08^ef
5 kGy组	20.06±0.23^a	18.01±0.92^cd	16.32±0.40^d	16.06±0.17^c	15.69±0.18^de
7.5 kGy组	20.41±0.65^a	18.12±0.40^cd	15.88±0.20^de	15.17±0.43^e	16.10±0.26^d
10 kGy组	20.32±0.51^a	16.65±0.19^e	15.49±0.49^ef	15.46±0.44^de	16.63±0.46^c
阳性组	20.51±0.18^a	19.34±0.54^b	17.80±0.52^b	17.38±0.49^b	17.79±0.31^b
注：同列不同字母表示差异显著（P<0.05），表5~表9同。

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表 6 SAAP对T1DM小鼠饮水量的影响

Table 6. Effects of SAAP on water intake in T1DM mice

组别	0 week	1 week	2 week	3 week	4 week
正常组	31.70±1.47^a	31.52±0.70^f	34.84±0.25^g	36.20±0.14^g	39.25±0.46^g
模型组	33.10±1.05^a	137.52±5.29^a	175.49±3.94^a	184.68±5.29^a	177.28±4.36^a
0 kGy组	32.00±0.50^a	122.48±4.98^bc	165.90±4.01^b	164.32±4.23^b	130.86±3.27^b
2.5 kGy组	32.37±0.64^a	92.72±3.22^e	130.91±3.80^d	119.32±4.43^c	112.02±4.00^c
5 kGy组	32.53±0.45^a	116.22±3.06^c	115.78±3.12^e	106.83±3.12^e	104.25±4.38^d
7.5 kGy组	33.07±0.51^a	104.73±3.56^d	108.91±5.63^f	112.23±3.46^de	100.31±6,12^d
10 kGy组	32.40±0.26^a	127.43±5.30^b	138.10±4.57^c	117.66±4.44^cd	90.05±4.18^e
阳性组	31.97±1.00^a	126.17±4.01^b	113.12±3.68^ef	93.36±4.59^f	70.67±3.38^f

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表 5 SAAP对T1DM小鼠摄食量的影响

Table 5. Effects of SAAP on weight in T1DM mice

组别	0 week	1 week	2 week	3 week	4 week
正常组	18.63±0.38^b	19.61±0.74^e	21.15±0.84^e	22.10±0.49^e	22.12±0.19^f
模型组	19.55±0.68^ab	34.69±1.05^a	39.67±1.27^a	37.74±1.30^a	35.50±1.45^a
0 kGy组	18.92±1.08^ab	30.81±1.19^bc	37.07±0.95^b	32.83±1.17^b	32.18±1.05^b
2.5 kGy组	18.81±0.33^ab	31.40±0.93^bc	32.27±1.49^c	30.35±1.16^c	30.49±1.38^bc
5 kGy组	19.44±0.53^ab	32.37±1.51^b	32.20±0.77^c	30.39±1.67^c	29.66±0.63^c
7.5 kGy组	20.53±1.43^a	30.52±1.10^c	30.77±1.12^c	30.47±1.30^c	29.59±1.39^c
10 kGy组	19.56±0.53^ab	31.46±1.18^bc	32.25±1.01^c	31.31±1.27^bc	27.48±1.14^d
阳性组	19.83±0.79^ab	28.37±1.03^d	26.92±0.87^d	27.11±1.03^d	25.02±0.81^e

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图 2 SAAP对T1DM小鼠体重和食物效价的影响（n=8）

Figure 2. Effects of SAAP on body weight and food potency in T1DM mice (n=8)

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SAAP对小鼠脏器系数的影响如表7所示。每组的心脏和脾脏系数无显著性差异（P>0.05），说明给药治疗前后T1DM小鼠的心脏和脾脏变化不大；与正常组相比，模型组的肝脏和肾脏系数显著升高（P<0.05），与模型组相比，SAAP组的肝脏和肾脏系数明显降低（P<0.05），表明模型组小鼠因患有糖尿病肝脏和肾脏已出现肿大的现象，在SAAP治疗后这两组系数显著降低（P<0.05），并且与未辐照组相比，辐照组的肝脏和肾脏系数下降明显（P<0.05），且10 kGy剂量组下降最为显著（P<0.01），与阳性组相似。说明SAAP治疗可以使肝脏和肾脏肿胀现象消失，脏器状态改善，且10 kGy组效果最佳。

表 7 SAAP对T1DM小鼠脏器系数的影响

Table 7. Effects of SAAP on the organ coefficient of T1DM mice

组别	心脏	肝脏	脾脏	肾脏
正常组	0.73±0.03^a	5.68±0.01^f	0.26±0.04^a	1.70±0.07^e
模型组	0.65±0.02^b	7.41±0.09^a	0.25±0.03^a	2.46±0.07^a
0 kGy组	0.71±0.01^ab	7.22±0.11^ab	0.23±0.03^a	2.33±0.09^ab
2.5 kGy组	0.70±0.01^ab	7.02±0.16^b	0.23±0.03^a	2.28±0.05^ab
5 kGy组	0.72±0.01^ab	6.75±0.04^c	0.25±0.03^a	2.19±0.13^bc
7.5 kGy组	0.72±0.01^ab	6.23±0.11^d	0.23±0.03^a	2.05±0.04^cd
10 kGy组	0.72±0.01^ab	5.97±0.10^e	0.25±0.03^a	1.98±0.03^d
阳性组	0.73±0.01^ab	5.82±0.05^ef	0.23±0.03^a	1.90±0.04^d

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2.4 SAAP对T1DM小鼠空腹血糖值和葡萄糖耐量的影响

FBG和OGTT是评估葡萄糖代谢状况的常用指标。在T1DM小鼠模型中通常代表对葡萄糖代谢的调控能力。因此，对小鼠FBG及OGTT数据进行了分析（表8~表9）。在适应性喂养阶段（0 week），各组FBG水平无显著差异（P>0.05）。开始灌胃后，与正常组相比，模型组的FBG水平显著升高（P<0.05），经SAAP治疗后，FBG水平显著低于模型组（P<0.05），且10 kGy组与阳性组相似（表8）。与模型组相比，SAAP组小鼠的OGTT水平显著降低（P<0.05）（表9），同时曲线下面积AUC也具有相同趋势（图3），整体来看，7.5 kGy和10 kGy组曲线下面积AUC仅次于阳性组。表明SAAP能调节T1DM小鼠的葡萄糖代谢。

表 8 SAAP对T1DM小鼠空腹血糖值的影响

Table 8. Effects of SAAP on FBG in T1DM mice

组别	0 week	1 week	2 week	3 week	4 week
正常组	6.83±0.55^a	7.30±0.53^c	7.43±1.16^c	6.63±0.81^e	6.27±0.50^h
模型组	6.83±1.14^a	24.63±1.25^a	24.83±0.75^a	23.73±0.55^a	25.13±0.74^a
0 kGy组	7.27±0.25^a	22.60±1.14^b	21.07±1.27^b	20.47±1.04^b	19.43±0.21^b
2.5 kGy组	6.70±1.14^a	21.33±0.92^b	19.57±2.14^bc	18.27±0.15^c	17.73±0.35^c
5 kGy组	7.40±0.70^a	21.03±0.90^b	19.50±0.53^bc	18.07±1.11^c	16.83±0.32^d
7.5 kGy组	7.10±0.26^a	21.50±2.04^b	18.47±0.59^c	16.63±0.50^d	15.90±0.60^e
10 kGy组	7.43±0.91^a	21.75±0.56^b	18.23±0.91^c	16.47±0.91^d	14.73±0.25^f
阳性组	6.63±0.38^a	22.37±0.62^b	19.37±0.87^bc	16.18±0.88^d	12.93±0.25^g

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表 9 SAAP对T1DM小鼠糖耐量的影响

Table 9. Effects of SAAP on OGTT in T1DM mice

组别	0 min	30 min	60 min	90 min	120 min
正常组	6.27±0.50^h	16.07±0.78^f	13.07±0.78^f	9.57±0.78^g	6.57±0.78^g
模型组	24.37±1.05^a	31.77±0.35^a	27.67±1.05^a	26.37±1.05^a	25.37±1.05^a
0 kGy组	19.10±0.56^b	31.07±0.23^ab	25.90±0.56^b	23.73±0.46^b	22.77±0.67^b
2.5 kGy组	17.73±0.35^c	30.77±0.59^b	21.83±0.32^c	20.80±0.56^c	19.50±0.30^c
5 kGy组	16.83±0.32^d	28.80±0.62^c	22.67±0.51^c	19.13±0.60^d	18.33±0.32^d
7.5 kGy组	15.90±0.60^e	27.87±0.40^d	20.13±0.25^de	18.00±0.60^e	17.57±0.38^d
10 kGy组	14.73±0.25^f	26.93±0.38^e	20.80±0.60^d	17.13±0.25^e	15.47±0.40^e
阳性组	12.93±0.25^g	26.43±0.31^e	19.23±0.25^e	15.93±0.25^f	13.73±0.25^f

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图 3 SAAP对T1DM小鼠OGTT曲线下的面积AUC的影响（n=8）

Figure 3. Effects of SAAP on area AUC under the OGTT curve of T1DM mice (n=8)

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2.5 SAAP对T1DM小鼠脂质代谢和氧化应激的影响

高水平的总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）是T1DM并发症的主要风险因素^[27]。与正常组相比，模型组显著提升了TC、TG水平（P<0.05）；与模型组相比，SAAP显著降低了TC和TG水平（P<0.05），且随着辐照剂量的增加逐渐降低（图4A~图4B）。其中，10 kGy组效果最好，并且与阳性组无显著差异（P>0.05）。表明SAAP能够改善T1DM小鼠异常的脂质代谢，缓解糖尿病症状。

图 4 SAAP对T1DM小鼠脂质代谢和氧化应激的影响（n=8）

Figure 4. Effects of SAAP on lipid metabolism and oxidative stress in T1DM mice (n=8)

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高血糖水平会增加糖化终产物和自由基的产生，促进脂质过氧化，增加氧化损伤产物的生成^[28]。由图4C可知，模型组SOD活性显著低于正常组（P<0.05），说明使小鼠肝脏受到了一定的氧化损伤；与模型组相比，各辐照剂量组提高了SOD活性，且10 kGy组缓解效果显著（P<0.05）；图4D可知，与正常组相比，模型组MDA含量显著提高（P<0.05），SAAP治疗后各组MDA含量均显著低于模型组（P<0.05），且10 kGy组的MDA含量在各辐照剂量组中最低，仅次于阳性组；图4E~图4F可知，与正常组相比，模型组显著降低了SOD、GSH和CAT水平（P<0.05）；与模型组相比，各辐照剂量组均显著提升了GSH和CAT水平（P<0.05），降低了TC、TG水平以及MDA含量，其中，10 kGy组效果最佳。表明SAAP能够缓解T1DM在体内造成的氧化损伤，从而增强机体的抗氧化能力。

2.6 SAAP对T1DM小鼠炎症因子的影响

肝脏中促炎因子的异常表达是T1DM并发肝损伤的主要风险因素^[29]。与正常组相比，模型组IFN-β、IL-18、IL-6R和TNF-γ的表达水平显著升高（P<0.05）；与模型组相比，SAAP组中IFN-β、IL-18、IL-6R和TNF-γ的表达水平随着辐照剂量的增加逐渐降低（图5A~图5D），其中10 kGy组效果最佳，与阳性组无显著差异（P>0.05）。这些结果证实，SAAP能够通过降低肝脏中炎症因子的分泌，调节T1DM小鼠肝脏的炎症反应。

图 5 SAAP对T1DM小鼠炎症因子的影响（n=8）

注：A. IFN-β；B. IL-18；C. IL-6R；D. TNF-γ。

Figure 5. Effect of SAAP on inflammatory factors in T1DM mice (n=8)

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2.7 SAAP对T1DM小鼠肝脏PI3K/AKT/mTOR蛋白表达的影响

为了探讨SAAP对T1DM保护作用的潜在分子机制，本研究测定了肝脏组织中与PI3K/AKT/mTOR信号通路相关的蛋白表达水平^[30]。如图6所示，与BC组相比，NC组中AKT、PI3K和mTOR蛋白表达差异不显著（P>0.05），但p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白表达显著升高（P<0.05），经SAAP治疗后，p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白的表达显著降低（P<0.05），所有辐照剂量组均显著下调了p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR蛋白的表达量（P<0.05），其中10 kGy组的效果最显著。

图 6 SAAP对T1DM小鼠肝脏PI3K/AKT/mTOR蛋白表达的影响（n=8）

Figure 6. Effects of SAAP on PI3K/AKT/mTOR protein in liver of T1DM mice (n=8)

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3. 结论

本研究探讨了不同辐照剂量下SAAP在T1MD状态下的氧化应激与炎症反应。通过响应面法优化提取工艺，得到最佳提取条件为液料比38:1 mL/g，提取温度98 ℃，提取时间3.5 h，此条件下SAAP浓度为0.73 mg/mL；动物结果表明，辐照后的SAAP可以改善T1DM小鼠多饮多食症状；调节脂质代谢和氧化应激水平，降低炎性因子水平；并可以通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路从而对T1DM小鼠起到保护作用，且辐照剂量为10 kGy时效果最佳。本研究为T1MD的治疗与预防提供了新的思路，同时也为SAAP等功能性食品的开发与应用提供理论基础和技术参考。在未来研究中可进一步探讨硒化与非硒化木耳多糖的生物活性和药理作用，以及在分子水平上对T1DM小鼠的保护作用机制。

图 1 液料比（A）、提取温度（B）和提取时间（C）对SAAP浓度的影响

注：不同字母表示差异显著（P<0.05），图2~图6同。

Figure 1. Effects of liquid-material ratio (A), extraction temperature (B), and extraction time (C) on SAAP concentration

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图 2 SAAP对T1DM小鼠体重和食物效价的影响（n=8）

Figure 2. Effects of SAAP on body weight and food potency in T1DM mice (n=8)

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图 3 SAAP对T1DM小鼠OGTT曲线下的面积AUC的影响（n=8）

Figure 3. Effects of SAAP on area AUC under the OGTT curve of T1DM mice (n=8)

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图 4 SAAP对T1DM小鼠脂质代谢和氧化应激的影响（n=8）

Figure 4. Effects of SAAP on lipid metabolism and oxidative stress in T1DM mice (n=8)

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图 5 SAAP对T1DM小鼠炎症因子的影响（n=8）

注：A. IFN-β；B. IL-18；C. IL-6R；D. TNF-γ。

Figure 5. Effect of SAAP on inflammatory factors in T1DM mice (n=8)

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图 6 SAAP对T1DM小鼠肝脏PI3K/AKT/mTOR蛋白表达的影响（n=8）

Figure 6. Effects of SAAP on PI3K/AKT/mTOR protein in liver of T1DM mice (n=8)

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表 1 Box-Behnken试验因子水平设计

Table 1 Box-Behnken experimental factor level design

因素	水平
因素	−1	0	1
A液料比（mL/g）	20:1	30:1	40:1
B提取时间（h）	2.5	3	3.5
C提取温度（℃）	80	90	100

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表 2 Box-Behnken试验设计与结果

Table 2 Design and results of Box-Behnken

实验号	A液料比	B提取时间	C提取温度	Y多糖浓度（mg/mL）
1	1	0	−1	0.47±0.02
2	−1	0	1	0.37±0.02
3	1	−1	0	0.28±0.04
4	−1	1	0	0.25±0.02
5	1	0	1	0.63±0.02
6	0	1	1	0.72±0.02
7	1	1	0	0.55±0.03
8	0	0	0	0.26±0.02
9	0	1	−1	0.43±0.02
10	0	0	0	0.23±0.01
11	−1	−1	0	0.28±0.02
12	0	0	0	0.36±0.03
13	0	0	0	0.36±0.03
14	0	−1	1	0.30±0.01
15	0	0	0	0.41±0.03
16	0	−1	−1	0.46±0.02
17	−1	0	−1	0.45±0.02

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表 3 响应面方差分析

Table 3 ANOVA for response surface quadratic model

方差来源	平方和	自由度	均方	F值	P值
模型	0.28	9	0.031	8.27	0.0054^**
A	0.042	1	0.042	11.28	0.0121^*
B	0.05	1	0.05	13.31	0.0082^**
C	0.005512	1	0.005512	1.48	0.2634
AB	0.022	1	0.022	6.04	0.0437^*
AC	0.014	1	0.014	3.86	0.0901
BC	0.051	1	0.051	13.58	0.0078^**
A²	0.0003603	1	0.0003603	0.097	0.765
B²	0.0001918	1	0.0001918	0.051	0.827
C²	0.091	1	0.091	24.32	0.0017^**
残差	0.026	7	0.003728
失拟项	0.003175	3	0.001058	0.18	0.9016
纯误差	0.023	4	0.00573
总和	0.3	16
注：表示差异显著（P<0.05），*表示差异极显著（P<0.01）。

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表 4 SAAP对T1DM小鼠体重的影响

Table 4 Effects of SAAP on weight in T1DM mice

组别	0 week	1 week	2 week	3 week	4 week
正常组	20.86±0.16^a	21.13±0.36^a	21.76±0.37^a	22.87±0.33^a	24.36±0.56^a
模型组	21.11±0.61^a	17.39±0.39^de	14.97±0.19^f	14.51±0.29^f	14.16±0.24^g
0 kGy组	20.44±1.01^a	18.78±0.59^bc	17.02±0.34^c	15.85±0.22^cd	15.00±0.10^f
2.5 kGy组	20.41±0.58^a	18.58±0.74^bc	16.06±0.41^de	15.61±0.41^cde	15.21±0.08^ef
5 kGy组	20.06±0.23^a	18.01±0.92^cd	16.32±0.40^d	16.06±0.17^c	15.69±0.18^de
7.5 kGy组	20.41±0.65^a	18.12±0.40^cd	15.88±0.20^de	15.17±0.43^e	16.10±0.26^d
10 kGy组	20.32±0.51^a	16.65±0.19^e	15.49±0.49^ef	15.46±0.44^de	16.63±0.46^c
阳性组	20.51±0.18^a	19.34±0.54^b	17.80±0.52^b	17.38±0.49^b	17.79±0.31^b
注：同列不同字母表示差异显著（P<0.05），表5~表9同。

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表 6 SAAP对T1DM小鼠饮水量的影响

Table 6 Effects of SAAP on water intake in T1DM mice

组别	0 week	1 week	2 week	3 week	4 week
正常组	31.70±1.47^a	31.52±0.70^f	34.84±0.25^g	36.20±0.14^g	39.25±0.46^g
模型组	33.10±1.05^a	137.52±5.29^a	175.49±3.94^a	184.68±5.29^a	177.28±4.36^a
0 kGy组	32.00±0.50^a	122.48±4.98^bc	165.90±4.01^b	164.32±4.23^b	130.86±3.27^b
2.5 kGy组	32.37±0.64^a	92.72±3.22^e	130.91±3.80^d	119.32±4.43^c	112.02±4.00^c
5 kGy组	32.53±0.45^a	116.22±3.06^c	115.78±3.12^e	106.83±3.12^e	104.25±4.38^d
7.5 kGy组	33.07±0.51^a	104.73±3.56^d	108.91±5.63^f	112.23±3.46^de	100.31±6,12^d
10 kGy组	32.40±0.26^a	127.43±5.30^b	138.10±4.57^c	117.66±4.44^cd	90.05±4.18^e
阳性组	31.97±1.00^a	126.17±4.01^b	113.12±3.68^ef	93.36±4.59^f	70.67±3.38^f

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表 5 SAAP对T1DM小鼠摄食量的影响

Table 5 Effects of SAAP on weight in T1DM mice

组别	0 week	1 week	2 week	3 week	4 week
正常组	18.63±0.38^b	19.61±0.74^e	21.15±0.84^e	22.10±0.49^e	22.12±0.19^f
模型组	19.55±0.68^ab	34.69±1.05^a	39.67±1.27^a	37.74±1.30^a	35.50±1.45^a
0 kGy组	18.92±1.08^ab	30.81±1.19^bc	37.07±0.95^b	32.83±1.17^b	32.18±1.05^b
2.5 kGy组	18.81±0.33^ab	31.40±0.93^bc	32.27±1.49^c	30.35±1.16^c	30.49±1.38^bc
5 kGy组	19.44±0.53^ab	32.37±1.51^b	32.20±0.77^c	30.39±1.67^c	29.66±0.63^c
7.5 kGy组	20.53±1.43^a	30.52±1.10^c	30.77±1.12^c	30.47±1.30^c	29.59±1.39^c
10 kGy组	19.56±0.53^ab	31.46±1.18^bc	32.25±1.01^c	31.31±1.27^bc	27.48±1.14^d
阳性组	19.83±0.79^ab	28.37±1.03^d	26.92±0.87^d	27.11±1.03^d	25.02±0.81^e

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表 7 SAAP对T1DM小鼠脏器系数的影响

Table 7 Effects of SAAP on the organ coefficient of T1DM mice

组别	心脏	肝脏	脾脏	肾脏
正常组	0.73±0.03^a	5.68±0.01^f	0.26±0.04^a	1.70±0.07^e
模型组	0.65±0.02^b	7.41±0.09^a	0.25±0.03^a	2.46±0.07^a
0 kGy组	0.71±0.01^ab	7.22±0.11^ab	0.23±0.03^a	2.33±0.09^ab
2.5 kGy组	0.70±0.01^ab	7.02±0.16^b	0.23±0.03^a	2.28±0.05^ab
5 kGy组	0.72±0.01^ab	6.75±0.04^c	0.25±0.03^a	2.19±0.13^bc
7.5 kGy组	0.72±0.01^ab	6.23±0.11^d	0.23±0.03^a	2.05±0.04^cd
10 kGy组	0.72±0.01^ab	5.97±0.10^e	0.25±0.03^a	1.98±0.03^d
阳性组	0.73±0.01^ab	5.82±0.05^ef	0.23±0.03^a	1.90±0.04^d

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表 8 SAAP对T1DM小鼠空腹血糖值的影响

Table 8 Effects of SAAP on FBG in T1DM mice

组别	0 week	1 week	2 week	3 week	4 week
正常组	6.83±0.55^a	7.30±0.53^c	7.43±1.16^c	6.63±0.81^e	6.27±0.50^h
模型组	6.83±1.14^a	24.63±1.25^a	24.83±0.75^a	23.73±0.55^a	25.13±0.74^a
0 kGy组	7.27±0.25^a	22.60±1.14^b	21.07±1.27^b	20.47±1.04^b	19.43±0.21^b
2.5 kGy组	6.70±1.14^a	21.33±0.92^b	19.57±2.14^bc	18.27±0.15^c	17.73±0.35^c
5 kGy组	7.40±0.70^a	21.03±0.90^b	19.50±0.53^bc	18.07±1.11^c	16.83±0.32^d
7.5 kGy组	7.10±0.26^a	21.50±2.04^b	18.47±0.59^c	16.63±0.50^d	15.90±0.60^e
10 kGy组	7.43±0.91^a	21.75±0.56^b	18.23±0.91^c	16.47±0.91^d	14.73±0.25^f
阳性组	6.63±0.38^a	22.37±0.62^b	19.37±0.87^bc	16.18±0.88^d	12.93±0.25^g

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表 9 SAAP对T1DM小鼠糖耐量的影响

Table 9 Effects of SAAP on OGTT in T1DM mice

组别	0 min	30 min	60 min	90 min	120 min
正常组	6.27±0.50^h	16.07±0.78^f	13.07±0.78^f	9.57±0.78^g	6.57±0.78^g
模型组	24.37±1.05^a	31.77±0.35^a	27.67±1.05^a	26.37±1.05^a	25.37±1.05^a
0 kGy组	19.10±0.56^b	31.07±0.23^ab	25.90±0.56^b	23.73±0.46^b	22.77±0.67^b
2.5 kGy组	17.73±0.35^c	30.77±0.59^b	21.83±0.32^c	20.80±0.56^c	19.50±0.30^c
5 kGy组	16.83±0.32^d	28.80±0.62^c	22.67±0.51^c	19.13±0.60^d	18.33±0.32^d
7.5 kGy组	15.90±0.60^e	27.87±0.40^d	20.13±0.25^de	18.00±0.60^e	17.57±0.38^d
10 kGy组	14.73±0.25^f	26.93±0.38^e	20.80±0.60^d	17.13±0.25^e	15.47±0.40^e
阳性组	12.93±0.25^g	26.43±0.31^e	19.23±0.25^e	15.93±0.25^f	13.73±0.25^f

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参考文献(30)

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施引文献(1)

期刊类型引用(1)

余厚美，林立铭，王琴飞，姚庆群，杜培旭，张金泉，张振文. 不同酶解工艺对鲜木薯块根粗多糖得率的影响. 热带作物学报. 2025(02): 407-419 .

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1. 材料与方法
1.1 材料与仪器
1.2 实验方法
1.2.1 辐照处理
1.2.2 SAAP的提取
1.2.3 多糖浓度的测定
1.2.4 单因素实验
1.2.5 响应面试验
1.2.6 T1DM小鼠模型建立
1.2.7 小鼠分组
1.2.8 小鼠基础指标的测定
1.2.9 小鼠空腹血糖值和葡萄糖耐量的测定
1.2.10 小鼠脂质代谢及氧化应激指标的测定
1.2.11 小鼠炎症因子指标的测定
1.2.12 蛋白免疫印迹分析
1.3 数据处理
2. 结果与分析
2.1 单因素实验结果
2.2 响应面试验结果
2.2.1 试验设计与结果
2.2.2 验证实验
2.3 SAAP对T1DM小鼠基础指标的影响
2.4 SAAP对T1DM小鼠空腹血糖值和葡萄糖耐量的影响
2.5 SAAP对T1DM小鼠脂质代谢和氧化应激的影响
2.6 SAAP对T1DM小鼠炎症因子的影响
2.7 SAAP对T1DM小鼠肝脏PI3K/AKT/mTOR蛋白表达的影响
3. 结论

1. 材料与方法
1.1 材料与仪器
1.2 实验方法
1.2.1 辐照处理
1.2.2 SAAP的提取
1.2.3 多糖浓度的测定
1.2.4 单因素实验
1.2.5 响应面试验
1.2.6 T1DM小鼠模型建立
1.2.7 小鼠分组
1.2.8 小鼠基础指标的测定
1.2.9 小鼠空腹血糖值和葡萄糖耐量的测定
1.2.10 小鼠脂质代谢及氧化应激指标的测定
1.2.11 小鼠炎症因子指标的测定
1.2.12 蛋白免疫印迹分析
1.3 数据处理
2. 结果与分析
2.1 单因素实验结果
2.2 响应面试验结果
2.2.1 试验设计与结果
2.2.2 验证实验
2.3 SAAP对T1DM小鼠基础指标的影响
2.4 SAAP对T1DM小鼠空腹血糖值和葡萄糖耐量的影响
2.5 SAAP对T1DM小鼠脂质代谢和氧化应激的影响
2.6 SAAP对T1DM小鼠炎症因子的影响
2.7 SAAP对T1DM小鼠肝脏PI3K/AKT/mTOR蛋白表达的影响
3. 结论

参考文献(30)

施引文献

资源附件(1)

辐照富硒木耳多糖对1型糖尿病小鼠的降血糖作用研究

作者简介: 刘爽（2000−），女，硕士研究生，研究方向：食品营养，E-mail：symmka@163.com

通讯作者: 崔承弼（1968−），男，博士，教授，研究方向：食品营养，E-mail：cuichengbi@ybu.edu.cn。

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出版历程

Hypoglycemic Effect of Irradiation Se-enriched A.auricularia Polysaccharide on Type 1 Diabetes Mice

1. 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.2 实验方法

1.2.1 辐照处理

1.2.2 SAAP的提取

1.2.3 多糖浓度的测定

1.2.4 单因素实验

1.2.5 响应面试验

1.2.6 T1DM小鼠模型建立

1.2.7 小鼠分组

1.2.8 小鼠基础指标的测定

1.2.9 小鼠空腹血糖值和葡萄糖耐量的测定

1.2.10 小鼠脂质代谢及氧化应激指标的测定

1.2.11 小鼠炎症因子指标的测定

1.2.12 蛋白免疫印迹分析

1.3 数据处理

2. 结果与分析

2.1 单因素实验结果

2.2 响应面试验结果

2.2.1 试验设计与结果

2.2.2 验证实验

2.3 SAAP对T1DM小鼠基础指标的影响

2.4 SAAP对T1DM小鼠空腹血糖值和葡萄糖耐量的影响

2.5 SAAP对T1DM小鼠脂质代谢和氧化应激的影响

2.6 SAAP对T1DM小鼠炎症因子的影响

2.7 SAAP对T1DM小鼠肝脏PI3K/AKT/mTOR蛋白表达的影响

3. 结论

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出版历程

目录

1. 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.2 实验方法

1.2.1 辐照处理

1.2.2 SAAP的提取

1.2.3 多糖浓度的测定

1.2.4 单因素实验

1.2.5 响应面试验

1.2.6 T1DM小鼠模型建立

1.2.7 小鼠分组

1.2.8 小鼠基础指标的测定

1.2.9 小鼠空腹血糖值和葡萄糖耐量的测定

1.2.10 小鼠脂质代谢及氧化应激指标的测定

1.2.11 小鼠炎症因子指标的测定

1.2.12 蛋白免疫印迹分析

1.3 数据处理

2. 结果与分析

2.1 单因素实验结果

2.2 响应面试验结果

2.2.1 试验设计与结果

2.2.2 验证实验

2.3 SAAP对T1DM小鼠基础指标的影响

2.4 SAAP对T1DM小鼠空腹血糖值和葡萄糖耐量的影响

2.5 SAAP对T1DM小鼠脂质代谢和氧化应激的影响

2.6 SAAP对T1DM小鼠炎症因子的影响

2.7 SAAP对T1DM小鼠肝脏PI3K/AKT/mTOR蛋白表达的影响

3. 结论

作者简介:
刘爽（2000−），女，硕士研究生，研究方向：食品营养，E-mail：symmka@163.com

通讯作者:
崔承弼（1968−），男，博士，教授，研究方向：食品营养，E-mail：cuichengbi@ybu.edu.cn。