荧光PCR快速检测A、C、G群溶血性链球菌
-
摘要: 克服现有文献中PCR检测方法仅能检测兰氏A群链球菌的局限,建立适用于溶血性链球菌群全族群的荧光PCR快速检测方法,实现与国家标准GB/T4789.11-2003检测范围一致。通过文献搜索以及杆菌肽敏感实验,对国标检验范围进行界定。使用CLUSTALX软件寻找兰氏A、C、G群保守序列并设计特异性引物和探针,同时通过特异性实验、模拟污染实验以及方法比对实验验证该方法的特异性、检出限及可靠性。特异性实验结果表明,该方法能特异扩增兰氏A、C、G群链球菌;模拟污染实验表明,在增菌18h后增菌液最低初始污染菌含量分别为3、50、2CFU/mL时,兰氏A、C、G群链球菌可被检出。110份样品比对实验结果表明与国标检测方法实验结果一致。该方法可应用于食品中溶血性链球菌的快速检测,并可为快速检测溶血性链球菌国家标准的建立提供参考。