嗜酸乳杆菌JQ-1胞壁蛋白酶的提取及分离纯化
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摘要: 对嗜酸乳杆菌JQ-1胞壁蛋白酶(CEP)的提取条件进行了研究,确定了胞壁蛋白酶的最佳提取条件,并对粗酶进行了分离纯化。采用溶菌酶结合非离子表面活性剂法对胞壁蛋白酶进行提取,得出其最佳提取条件为:菌粉与裂解液比例为1∶5(g/mL),33℃下保温4.0h,离心取得的上清液即为粗酶液。通过聚乙二醇-20000浓缩,DEAE-Sephadex A-25和Sephadex G-100两步层析对粗酶液进行分离纯化,蛋白酶提纯倍数达到50.951倍,最后回收率为12.569%。且SDS-PAGE电泳检测蛋白酶为单体结构,分子量约为45ku。用纯化后的CEP水解β-酪蛋白,水解液的ACE抑制率为48%。