Determination of 9 Strobilurin Fungicides in Vegetables by QuECHERS-Ultra-High Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry
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摘要: 本文建立了采用QuEChERS方法提取净化,超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC/MS/MS)同时测定蔬菜中的9种甲氧基丙烯酸酯(Z-苯氧菌酯、E-苯氧菌酯、嘧菌酯、肟嘧菌胺、醚菌胺、啶氧菌酯、吡唑醚菌酯、肟菌酯、嘧螨酯)杀菌剂残留量的方法。样品经乙腈提取,采用正交试验验优选N-丙基乙二胺(PSA)和C18以及石墨化炭黑(GCB)净化用量。使用0.05%甲酸水和0.05%甲酸乙腈作为流动相梯度洗脱,目标化合物经岛津Shim-PackC18色谱柱(2.1 mm×50 mm,2 μm)分离,在正离子模式下进行测定。结果表明,9种甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂在1~100 ng/mL范围内线性关系良好,决定系数在0.9942~0.9995之间,方法检出限(LOD)为0.05~0.3 μg/kg,定量限(LOQ)为0.2~0.9 μg/kg。在2、10和20 μg/kg三个添加水平下,五种蔬菜的回收率在77.26%~111.73%之间,相对标准偏差在0.46%~6.59%之间。该方法准确、快速、便捷、灵敏度高,能够满足蔬菜中9种甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的痕量检测要求。
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关键词:
- 超高效液相色谱-串联质谱(UPLC/MS/MS) /
- QuEChERS /
- 甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂 /
- 正交试验 /
- 蔬菜
Abstract: A method was established for the nine strobilurin fungicides in vegetables by using QuEChERS method. The samples were extracted with acetonitrile and purified with n-propyl-ethylenediamine (PSA), C18 and graphitized carbon black (GCB) by orthogonal test. Using 0.05% formic acid water and 0.05%formic acid acetonitrile as mobile phase gradient elution, the target compounds were separated by Shimadzu shim pack C18 column (2.1 mm×50 mm, 2 μm) and determined in positive ion mode. The linear relationship of 9 strobilurin fungicides was good in the range of 1~100 ng/mL, the coefficient of determination was between 0.9942~0.9995. The LOD was 0.05~0.3 μg/kg and the LOQ was 0.2~0.9 μg/kg. At the levels of 2, 10 and 20 μg /kg, the recovery rates of the five vegetables were 77.26%~111.73%, and the relative standard deviation was 0.46%~6.59%. The method is accurate, rapid, convenient and sensitive, which can meet the requirements of trace detection of nine strobilurin fungicides in vegetables. -
表 1 9种甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂质谱检测参数
Table 1. Mass spectrum parameters of 9 strobilurin fungicides
序号 目标物质 保留时间Tr(min) 母离子(m/z) 子离子(m/z) 去簇电压DP(V) 碰撞能量CE(eV) 1 Z-苯氧菌酯 6.84 285.1 196.3*,167.1 55 22*,49 2 E-苯氧菌酯 7.12 285.1 194.2*,196.2 90 27*,21 3 嘧菌酯 7.81 404.1 329.2*,344.0 56 40*,34 4 肟嘧菌胺 7.83 392.2 116.0*,170.0 60 38*,19 5 醚菌胺 8.36 327.1 116.2*,205.2 105 30*,12 6 啶氧菌酯 8.77 368.1 145.2*,115.2 110 32*,64 7 吡唑醚菌酯 9.04 388.2 163.3*,149.2 55 32*,43 8 肟菌酯 9.43 409.2 186.1*,206.2 74 24*,47 9 嘧螨酯 9.44 427.2 145.2*,205.3 88 32*,12 注:*定量离子。 表 2 因素与水平表
Table 2. Factors and levels table
水平 因素 A 石墨化炭黑
添加量(mg)B C18添加
量(mg)C PSA添加
量(mg)1 10 150 150 2 15 200 200 3 25 250 250 表 3 L9(34)正交试验设计与结果
Table 3. L9 (34)Design and results of orthogonal test
实验序号 A B C D(空白) 回收率(%) Z-苯氧菌酯 E-苯氧菌酯 嘧菌酯 肟醚菌胺 醚菌胺 啶氧菌酯 吡唑醚菌酯 肟菌酯 嘧螨酯 1 1 1 1 1 90.63 92.85 68.24 80.85 83.90 76.80 84.67 72.76 74.52 2 1 2 2 2 93.87 91.07 82.09 84.63 89.44 88.23 93.21 91.07 78.49 3 1 3 3 3 98.07 92.68 72.43 85.04 87.14 75.60 81.44 71.99 71.05 4 2 1 2 3 92.47 97.64 94.14 93.05 94.27 90.07 97.49 96.03 89.98 5 2 2 3 1 94.77 91.82 82.44 78.13 84.81 76.90 91.10 81.08 79.07 6 2 3 1 2 96.57 93.53 92.95 89.02 91.35 85.93 96.95 95.13 88.86 7 3 1 3 2 96.20 93.70 94.03 92.85 93.78 88.70 95.02 96.16 88.92 8 3 2 1 3 94.10 92.61 81.82 82.97 85.13 71.57 73.44 80.92 78.90 9 3 3 2 1 94.37 95.89 75.29 79.43 83.06 76.97 68.94 86.88 78.20 Z-苯氧菌酯 E-苯氧菌酯 嘧菌酯 k1 94.19 93.10 93.77 93.26 92.20 94.73 93.00 93.52 74.25 85.47 81.00 75.32 k2 94.60 94.24 93.57 95.54 94.33 91.83 94.87 92.77 89.84 82.12 83.84 89.69 k3 94.89 96.33 96.34 94.88 94.07 94.03 92.73 94.31 83.71 80.22 82.97 82.79 R 0.70 3.23 2.78 2.29 2.13 2.90 2.13 1.54 15.59 5.25 2.84 14.37 肟醚菌胺 醚菌胺 啶氧菌酯 k1 83.51 88.92 84.28 79.47 86.83 90.65 86.79 83.92 80.21 85.19 78.10 76.89 k2 86.73 81.91 85.70 88.83 90.14 86.46 88.92 91.52 84.30 78.90 85.09 87.62 k3 85.08 84.50 85.34 87.02 87.32 87.18 88.58 88.85 79.08 79.50 80.40 79.08 R 3.22 7.01 1.42 9.36 3.31 4.19 2.13 7.60 5.22 6.29 6.99 10.73 吡唑醚菌酯 肟菌酯 嘧螨酯 k1 86.44 92.39 85.02 81.57 78.61 88.32 82.94 80.24 74.69 84.48 80.76 77.26 k2 95.18 85.91 86.55 95.06 90.75 84.35 91.33 94.12 85.97 78.82 82.22 85.42 k3 79.13 82.44 89.18 84.12 87.99 84.67 83.08 82.98 82.01 79.37 79.68 79.98 R 16.05 9.95 4.17 13.49 12.14 3.97 8.39 13.88 11.28 5.66 2.54 8.16 表 4 五种蔬菜基质中目标化合物的基质效应
Table 4. Matrix effects of target compounds in five vegetable matrices
化合物 结球甘蓝(%) 芹菜(%) 土豆(%) 菠菜(%) 甜椒(%) Z-苯氧菌酯 3.57 4.75 4.72 10.32 9.64 E-苯氧菌酯 3.34 3.17 3.55 9.83 8.56 嘧菌酯 1.75 8.52 0.48 8.65 9.28 肟嘧菌胺 2.22 5.01 1.59 6.02 5.46 醚菌胺 2.32 4.35 2.14 5.48 6.15 啶氧菌酯 4.22 6.93 0.84 7.69 8.92 吡唑醚菌酯 1.68 1.06 0.64 1.98 2.56 肟菌酯 3.33 4.29 1.43 5.96 7.06 嘧螨酯 2.67 5.10 5.17 7.05 6.47 表 5 9种化合物线性方程,决定系数(R2),检出限(LOD)和定量限(LOQ)
Table 5. Linear equations, coefficient of determination (R2),LODs and LOQs of 9 compounds
目标物质 线性方程 决定系数 检出限(μg/kg) 定量限(μg/kg) Z-苯氧菌酯 y = 100,219.0501 x + 51,284.8161 0.9991 0.15 0.50 E-苯氧菌酯 y = 53,859.4119 x + 14,999.3830 0.9995 0.20 0.80 嘧菌酯 y = 41,170.2605 x + 120,443.4204 0.9944 0.10 0.40 肟嘧菌胺 y = 187,710.1702 x + 92,889.3903 0.9990 0.05 0.20 醚菌胺 y = 55,222.1053 x + 70,096.5474 0.9986 0.20 0.80 啶氧菌酯 y = 70,299.3601 x + 97,840.9736 0.9968 0.20 0.80 吡唑醚菌酯 y = 90,337.4115 x + 234,830.0023 0.9969 0.30 0.90 肟菌酯 y = 119,296.1178 x + 450,553.4013 0.9942 0.08 0.30 嘧螨酯 y = 70,929.2037 x + 180,603.8167 0.9970 0.20 0.80 表 6 平均回收率和平均相对标准偏差(n=7)
Table 6. Average recovery rates and RSDs (n=7)
目标物质 添加水平 结球甘蓝 芹菜 土豆 菠菜 甜椒 (μg/kg) 平均
回收率(%)相对标准
偏差(%)平均
回收率(%)相对标准
偏差(%)平均
回收率(%)相对标准
偏差(%)平均
回收率(%)相对标准
偏差(%)平均
回收率(%)相对标准
偏差(%)Z-苯氧菌酯 2 89.70 0.87 107.19 3.83 92.05 3.97 105.32 4.02 90.08 2.01 10 82.04 1.25 86.48 2.60 96.67 1.17 87.56 2.93 86.59 1.63 20 98.93 0.70 84.51 1.86 108.06 1.49 86.06 2.01 93.52 1.56 E-苯氧菌酯 2 84.39 2.89 111.73 3.61 82.80 1.63 106.97 5.06 84.29 2.05 10 87.63 0.46 91.69 3.64 92.29 1.33 95.21 3.59 90.64 1.32 20 97.75 1.26 88.19 1.25 93.90 2.85 90.16 1.65 86.24 1.89 嘧菌酯 2 78.66 2.75 91.83 3.37 82.61 1.75 96.19 5.43 80.08 2.56 10 88.04 2.50 93.49 1.48 90.01 2.90 93.64 2.05 86.39 3.01 20 96.23 1.91 95.20 1.47 82.95 3.18 97.49 1.83 81.23 1.07 肟嘧菌胺 2 83.92 2.45 78.81 4.95 85.42 2.48 81.03 4.36 86.56 3.02 10 96.01 3.44 104.98 1.93 86.19 2.89 93.62 2.16 80.21 2.08 20 97.93 2.08 83.98 1.75 93.99 3.25 82.36 1.26 79.99 4.01 醚菌胺 2 86.61 3.26 91.08 2.90 78.18 1.87 86.56 3.96 79.48 3.94 10 84.42 2.37 87.64 2.95 88.66 2.42 89.65 1.52 82.16 3.06 20 96.47 1.53 83.19 1.94 90.41 1.38 83.30 0.98 83.26 2.95 啶氧菌酯 2 81.93 0.86 93.61 3.39 78.92 3.81 95.21 3.89 77.26 3.87 10 89.81 2.11 83.49 2.45 80.90 1.94 86.79 2.13 79.00 2.65 20 94.69 3.88 100.64 1.77 84.82 4.73 93.12 1.63 81.45 1.47 吡唑醚菌酯 2 96.30 1.71 87.00 2.66 86.95 2.70 86.45 3.66 84.26 2.58 10 91.83 1.37 94.53 1.73 98.05 1.83 96.63 1.42 86.93 1.69 20 97.81 1.25 101.47 2.90 92.51 2.94 85.49 2.96 90.23 2.14 肟菌酯 2 85.23 2.65 87.51 3.03 80.87 2.87 89.29 6.59 85.95 2.36 10 86.57 1.62 93.11 1.62 91.99 4.10 86.53 4.21 87.49 3.94 20 97.93 0.50 95.98 3.85 81.11 1.66 86.32 3.22 84.51 4.86 嘧螨酯 2 83.28 1.29 88.44 3.32 77.76 5.40 83.21 5.32 83.12 2.73 10 82.20 1.69 83.68 2.10 84.13 0.73 81.08 2.96 86.98 0.91 20 94.29 1.25 83.94 1.50 93.73 2.65 79.56 3.67 91.47 1.82 -
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